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成纤维细胞介导的IL-3基因疗法的体内IL-3水平及其增加外周血细胞数量的动态观察 被引量:4
1
作者 曹雪涛 章卫平 +3 位作者 蔡荣 王全兴 叶天星 杨如俊 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第1期16-20,共5页
为了更好地使IL-3在体内发挥其造血促进作用和免疫增强作用,于本实验中建立了IL-3基因疗法的小鼠模型;并动态观察了其外周血细胞数量的变化.通过基因转染、G418抗性筛选、有限稀释及IL-3活性测定,从16株NIH3T3成纤维细胞克隆中选出一株... 为了更好地使IL-3在体内发挥其造血促进作用和免疫增强作用,于本实验中建立了IL-3基因疗法的小鼠模型;并动态观察了其外周血细胞数量的变化.通过基因转染、G418抗性筛选、有限稀释及IL-3活性测定,从16株NIH3T3成纤维细胞克隆中选出一株分泌IL-3高达2416U/ml的克隆株.将其移植入小鼠腹腔后,实验小鼠血清可检测出一定水平的IL-3并维持至半个月之久.实验小鼠外周血白细胞,特别是中性粒细胞数量显著增加,血小板也有不同程度的升高.该实验结果表明成纤维细胞途径能将IL-3基因携至体内进行有效表达并发挥显著的生物学作用. 展开更多
关键词 IL-3 体内 成纤维细胞 动态观察 外周血细胞 基因疗法 实验小鼠 抗性筛选 活性测定 分泌
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重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗Ⅱ度烧伤的临床疗效 被引量:5
2
作者 郭立君 李校堃 +1 位作者 许华 姚成灿 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期310-312,共3页
目的 观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对烧伤创面愈合的治疗作用。方法 选择浅Ⅱ度和深Ⅱ度烧伤病例共920例,分别用bFGF治疗其烧伤创面,用药剂量为144U/cm2观察伤后8d(浅Ⅱ度)和15d(深Ⅱ度)创面愈合率,以及创面完全愈合... 目的 观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对烧伤创面愈合的治疗作用。方法 选择浅Ⅱ度和深Ⅱ度烧伤病例共920例,分别用bFGF治疗其烧伤创面,用药剂量为144U/cm2观察伤后8d(浅Ⅱ度)和15d(深Ⅱ度)创面愈合率,以及创面完全愈合时间。结集8d愈合率总体治疗组为77.6%±24.4%,对照组为51.7%±26.4%;完全愈合时间总体治疗组为9.6±2.4d,对照组为12.6±2.9d。15d愈合率总体治疗组为75.2%±26.3%,对照组为53.3%±25.4%;完全愈合时间总体治疗组为17.5 ±4.5d,对照组为21.9±5.5d。结论 bFGF具有明显的促进Ⅱ度烧伤创面愈合的作用。 展开更多
关键词 重组牛碱性成纤维细胞生长因子 治疗 Ⅱ度烧伤 临床疗效
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CCK-8检测法研究槲皮素对人Tenon囊成纤维细胞的抑制作用 被引量:8
3
作者 王涛 李冰晴 +1 位作者 王津津 王桂云 《眼科新进展》 CAS 2007年第8期576-580,共5页
目的观察槲皮素(quercetin,QU)对体外培养的(human Tenon’s capsule fibro-blasts,HTCF)增殖的抑制作用。方法体外培养HTCF。配制QU溶液,其浓度依次为20μmol·L-1、40μmol·L-1、60μmol.L-1、80μmol·L-1、100μmol... 目的观察槲皮素(quercetin,QU)对体外培养的(human Tenon’s capsule fibro-blasts,HTCF)增殖的抑制作用。方法体外培养HTCF。配制QU溶液,其浓度依次为20μmol·L-1、40μmol·L-1、60μmol.L-1、80μmol·L-1、100μmol·L-1,采用活细胞计数试剂盒CCK-8检测不同浓度QU作用下HTCF的增殖,并在光学显微镜下观察细胞的形态变化。结果不同药物浓度HTCF形态学检测显示:50μmol·L-1QU作用48h后,细胞收缩,胞核固缩,聚集在核膜边缘;100μmol·L-1QU作用48h后,细胞未见增殖,出现凋亡小体,细胞的增殖几乎完全被抑制。细胞生长抑制实验的结果显示:QU在各浓度组对体外培养的HTCF均有抑制作用,抑制效应呈剂量时间依赖关系。结论QU能抑制体外培养的HTCF的增殖,且该作用呈剂量和时间依赖性。 展开更多
关键词 槲皮素 人Tenon囊成纤维细胞 青光眼
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氟染毒对大鼠皮肤成纤维细胞中SOST及DKK1蛋白表达的影响 被引量:2
4
作者 刘晓利 刘芳盈 +4 位作者 孟超 李平 张殿平 宋菁 刘克俭 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期914-917,共4页
[目的]观察氟染毒对体外培养新生大鼠皮肤成纤维细胞硬骨素(sclerostin,SOST)和Dickkopf-1(DKK1)蛋白表达的影响。[方法]采用原代培养方法,将大鼠皮肤成纤维细胞分为对照组(0 mg/L)和7个染氟剂量组(0.000 1、0.001、0.01、0.1、1、10、2... [目的]观察氟染毒对体外培养新生大鼠皮肤成纤维细胞硬骨素(sclerostin,SOST)和Dickkopf-1(DKK1)蛋白表达的影响。[方法]采用原代培养方法,将大鼠皮肤成纤维细胞分为对照组(0 mg/L)和7个染氟剂量组(0.000 1、0.001、0.01、0.1、1、10、20 mg/L),分别在4个染氟时间段(24、48、72、96 h)收集细胞培养上清液,应用ELISA法测定SOST和DKK1蛋白表达水平。[结果]与染氟0 mg/L组相比,SOST表达量在染氟48 h的0.000 1、0.001、0.01 mg/L组,染氟72 h的1、10 mg/L组及染氟96 h的0.001、0.01、0.1、1 mg/L组均明显下降(P<0.05)。与染氟24 h组相比,SOST表达量在染氟48 h的0.01 mg/L组,染氟96 h的0.001、0.01、0.1、1、10 mg/L组均明显下降(P<0.05)。与染氟0 mg/L组相比,DKK1表达量在染氟48 h的0.001 mg/L组,染氟72 h的0.01、0.1、1、10、20 mg/L组及染氟96 h的0.01、0.1、1、10、20 mg/L组均明显下降(P<0.05)。与染氟24 h组相比,DKK1表达量在染氟48 h的0.000 1、0.001、0.01 mg/L组,染氟72 h的0.001、0.01、1、10、20 mg/L及染氟96 h的0.01、0.1、1、20 mg/L组均明显下降(P<0.05)。[结论]氟可导致大鼠皮肤成纤维细胞SOST和DKK1蛋白表达下调。 展开更多
关键词 硬骨素 DKK1 成纤维细胞
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口腔癌相关成纤维细胞的体外生物学行为研究 被引量:4
5
作者 李强 江宏兵 +2 位作者 邢树忠 张群 张红闯 《口腔医学》 CAS 2009年第3期122-125,共4页
目的探讨口腔鳞癌中癌相关成纤维细胞(carcinoma associated fibroblasts,CAFs)的体外生物学行为。方法组织块贴壁法培养CAFs及牙龈正常成纤维细胞(normal fibrolasts,NFs);通过形态观察,免疫组化染色,细胞增殖活性、贴壁率、迁移能力... 目的探讨口腔鳞癌中癌相关成纤维细胞(carcinoma associated fibroblasts,CAFs)的体外生物学行为。方法组织块贴壁法培养CAFs及牙龈正常成纤维细胞(normal fibrolasts,NFs);通过形态观察,免疫组化染色,细胞增殖活性、贴壁率、迁移能力等测定,比较两种细胞的生物学行为差异。结果与NFs相比,CAFs特征性表达成纤维激活蛋白(fibroblast activation protein,FAP)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloprotease-2,MMP-2),具有更高的增殖活性、贴壁率及迁移能力(P<0.05)。结论口腔癌CAFs特征性表达相关蛋白,体外增殖、粘附、迁移能力均高于NFs。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 癌相关成纤维细胞 成纤维细胞激活蛋白 体外培养
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TGF-β_2刺激人Tenon囊成纤维细胞增殖,表达CTGF和合成Fn 被引量:5
6
作者 王育红 胡义珍 曹阳 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第4期796-798,共3页
目的:研究转化生长因子(TGF-β2)和结缔组织生长因子(CTGF)在滤过泡瘢痕化中的作用。方法:用不同浓度的TGF-β2刺激HTF,然后用RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测CTGF和Fn的表达,用MTT法检测细胞的增殖。结果:TGF-β22μg/L到5μg/L范围有... 目的:研究转化生长因子(TGF-β2)和结缔组织生长因子(CTGF)在滤过泡瘢痕化中的作用。方法:用不同浓度的TGF-β2刺激HTF,然后用RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测CTGF和Fn的表达,用MTT法检测细胞的增殖。结果:TGF-β22μg/L到5μg/L范围有剂量依赖性地促进HTF的细胞增殖,CTGF的表达和Fn的合成的趋势(P<0.01),但0.5μg/L,1μg/L与正常对照组对细胞的增殖作用差别无显著性,5μg/L与10μg/L增强细胞的增殖作用也无显著性差异(P>0.05)。结论:TGF-β2能够明显地促进HTF细胞增殖,并增强其下游介质(CTGF)的表达和合成细胞外基质-纤维连接蛋白(fibronetin,Fn)。 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 转化生长因子-Β2 纤维连接蛋白 TENON囊成纤维细胞 青光眼滤过术
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转化生长因子-β1对人Tenon囊成纤维细胞表型转化的作用 被引量:5
7
作者 谢冰 叶纹 沈玺 《眼科新进展》 CAS 2006年第5期344-347,共4页
目的探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人Tenon囊成纤维细胞(human subconjunctival Tenon’s capsule fibroblast,HTCF)表型转化的作用。方法人白内障手术中取结膜下Tenon囊组织块培养成纤维细胞... 目的探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人Tenon囊成纤维细胞(human subconjunctival Tenon’s capsule fibroblast,HTCF)表型转化的作用。方法人白内障手术中取结膜下Tenon囊组织块培养成纤维细胞。用第5~9代细胞,以不同浓度TGF-β1(0μg·L^-1,2μg·L^-1,5μg·L^-1。,10μg·L^-1,20μg·L^-1)、不同时间(24h、48h、72h)诱导成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞。用蛋白质印迹免疫检测技术和免疫细胞化学技术鉴定细胞表型。结果体外用TGF-β1诱导HTCF,在0~10μg·L^-1,TGF-β1呈剂量依赖性增加平滑肌肌动蛋白在蛋白水平的表达,至20μg·L^-1时表达迅速下降;10μg·L^-1 TGF-β1诱导48h后其平滑肌肌动蛋白的表达与24h、72h相比,差异有显著性(P〈0.01,n=6)。结论一定浓度和剂量的TGF-β1能显著诱导HTCF表型转化为肌成纤维细胞,在人Tenon囊组织局部组织损伤修复及瘢痕形成中具有重要作用。 展开更多
关键词 人Tenon囊成纤维细胞 肌成纤维细胞 转化生长因子-Β1 表型转化 平滑肌肌动蛋白
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黄芩素对人眼球筋膜囊成纤维细胞增生的影响 被引量:2
8
作者 陈雯 张明昌 +1 位作者 彭云 胡义珍 《眼科新进展》 CAS 2007年第6期436-439,共4页
目的探讨黄芩素对人眼球筋膜囊成纤维细胞(human Tenon's capsule fibro-blasts,HTCFs)增生的抑制作用。方法采用MTT法检测黄芩素对体外培养的HTCFs增生的影响,并计算细胞生长抑制率为50%时黄芩素的药物浓度,用免疫组织化学法分析... 目的探讨黄芩素对人眼球筋膜囊成纤维细胞(human Tenon's capsule fibro-blasts,HTCFs)增生的抑制作用。方法采用MTT法检测黄芩素对体外培养的HTCFs增生的影响,并计算细胞生长抑制率为50%时黄芩素的药物浓度,用免疫组织化学法分析观察黄芩素对HTCFs增殖细胞核抗原表达的影响,流式细胞仪检测黄芩素对HTCFs细胞周期的影响。结果黄芩素可以抑制体外培养的HTCFs增生,且抑制能力与药物剂量成正比。50%细胞生长抑制率时的药物浓度为23.70μmol·L-1。当黄芩素浓度≥30μmol·L-1时能剂量依赖性地抑制细胞对增殖细胞核抗原的表达(P<0.01)。流式细胞仪检测黄芩素可以将HTCFs的细胞周期阻滞在G0/G1期,以作用后48h最为显著。黄芩素还可以诱导HTCFs凋亡,以作用后12h的凋亡峰值最高(10.6%),且坏死细胞碎片较对照组显著增多。结论黄芩素既可以抑制HTCFs的增生,又可以诱导它的凋亡。黄芩素有望成为翼状胬肉和青光眼术后抗增生药物。 展开更多
关键词 成纤维细胞 细胞培养 黄芩素 流式细胞术
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地塞米松对大鼠晶状体上皮细胞成纤维细胞生长因子受体表达的影响 被引量:3
9
作者 王柏川 叶剑 《眼科新进展》 CAS 2007年第10期750-753,共4页
目的探讨地塞米松对大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)受体表达的影响及意义。方法选取1月鼠龄SD大鼠,予地塞米松眼膏涂双眼结膜囊,分别于用药1个月、3个月及6个月后摘取... 目的探讨地塞米松对大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)受体表达的影响及意义。方法选取1月鼠龄SD大鼠,予地塞米松眼膏涂双眼结膜囊,分别于用药1个月、3个月及6个月后摘取晶状体作为实验材料;采用晶状体前囊膜铺片方式,应用荧光免疫组化技术进行FGFR1荧光免疫组化染色,检测其蛋白水平表达的变化;采用剥取晶状体囊膜组织方法,应用RT-PCR技术检测FGFR1在转录水平表达的变化。取相同数量的正常同龄大鼠作为对照组进行相同的检测。结果荧光免疫组化结果可见FGFR1呈绿色阳性表达,应用地塞米松1个月、3个月、6个月后,实验组FGFR1阳性表达分别为131663±15818、98058±7222和47342±3135,同龄对照组阳性表达分别为191579±14807、159016±10399和84543±6485,组间及组内差异均显著(P<0.05);RT-PCR结果可见,用药1个月、3个月、6个月后,实验组FGFR1mRNA表达水平分别为0.68±0.06、0.54±0.05和0.23±0.03,同龄对照组的mRNA表达水平分别为1.07±0.19、0.79±0.11和0.44±0.05,组间及组内差异均显著(P<0.05);提示在蛋白及转录水平,正常大鼠LEC中FGFR1的表达随年龄增长逐渐降低,应用地塞米松可降低FGFR1的表达,并且随着地塞米松用药时间延长,FGFR1的表达进一步降低。结论地塞米松可以降低大鼠LEC中FGFR1的表达,并随着用药时间的延长,其表达进一步降低,可能对白内障的形成有一定的影响。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子 成纤维细胞生长因子受体 晶状体上皮细胞 地塞米松
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亚毒性剂量UVB照射和过表达p53对皮肤细胞光致癌相关基因表达的影响 被引量:1
10
作者 陈文琦 毕志刚 许惠娟 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期870-872,共3页
目的探讨亚毒性剂量的中波紫外线(UVB)照射和过表达p53对人皮肤成纤维细胞(HSF)在光致癌相关基因表达的影响。方法以反复多次的亚毒性剂量UVB照射正常HSF细胞株和已构建成功的p53稳定过表达HSF细胞株,定制实时定量PCR芯片,检测光致癌发... 目的探讨亚毒性剂量的中波紫外线(UVB)照射和过表达p53对人皮肤成纤维细胞(HSF)在光致癌相关基因表达的影响。方法以反复多次的亚毒性剂量UVB照射正常HSF细胞株和已构建成功的p53稳定过表达HSF细胞株,定制实时定量PCR芯片,检测光致癌发生相关基因的表达。结果 UVB照射和过表达p53在促进衰老基因表达方面,UVB照射的作用更为显著;过表达p53使抑凋亡基因bcl-2下调,促凋亡基因bax上调,UVB照射则可加强过表达p53的诱导凋亡作用;过表达p53可下调癌基因HIF-1α,VEGF和hdm2的表达,UVB照射可促进p53的肿瘤抑制作用。结论过表达p53可使p53依赖的细胞凋亡和抑制肿瘤作用明显增强,亚毒性剂量的UVB还可加强这种作用,从而有助于抑制皮肤肿瘤发生。在UVB作用下,过表达p53可能更倾向于诱导凋亡,而非衰老。 展开更多
关键词 P53 UVB 光致癌 人皮肤成纤维细胞
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碱性成纤维细胞生长因子和骨保护素的生物学作用研究进展 被引量:2
11
作者 李雯 曹寅 陈乔尔 《医学综述》 2011年第24期3681-3684,共4页
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)能够促进成骨细胞增殖,而骨保护素(OPG)是一种破骨细胞抑制因子,两者对于骨的再生与修复具有重要作用。近年来很多研究表明bFGF与OPG不仅在人体各组织器官中有大量表达,而且在口腔牙周组织也同样有所表达,... 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)能够促进成骨细胞增殖,而骨保护素(OPG)是一种破骨细胞抑制因子,两者对于骨的再生与修复具有重要作用。近年来很多研究表明bFGF与OPG不仅在人体各组织器官中有大量表达,而且在口腔牙周组织也同样有所表达,并且有实验结果表明,OPG和bFGF的联合应用可促进犬牙槽骨缺损修复。现就bFGF和OPG的生物学特性及其作用予以综述。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 骨保护素 生物学特性 牙周组织
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Anti-senescence effect and molecular mechanism of the major royal jelly proteins on human embryonic lung fibroblast(HFL-I) cell line 被引量:7
12
作者 Chen-min JIANG Xin LIU +4 位作者 Chun-xue LI Hao-cheng QIAN Di CHEN Chao-qiang LAI Li-rong SHEN 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2018年第12期960-972,共13页
Royal jelly (R J)from honeybee has been widely used as a health promotion supplement.The major royal jelly proteins (MRJPs)have been identified as the functional component of RJ.However,the question of whether MRJPs h... Royal jelly (R J)from honeybee has been widely used as a health promotion supplement.The major royal jelly proteins (MRJPs)have been identified as the functional component of RJ.However,the question of whether MRJPs have anti-senescence activity for human cells remains.Human embryonic lung fibroblast (HFL-I)cells were cultured in media containing no MRJPs (A),MRJPs at 0.1mg/ml (B),0.2mg/ml (C),or 0.3mg/ml (D),or bovine serum albumin (BSA)at 0.2mg/ml (E).The mean population doubling levels of cells in media B,C,D,and E were increased by 12.4%,31.2%,24.0%,and 10.4%,respectively,compared with that in medium A.The cells in medium C also exhibited the highest relative proliferation activity,the lowest senescence,and the longest telomeres.Moreover, MRJPs up-regulated the expression of superoxide dismutase-1(SOD1)and down-regulated the expression of mammalian target of rapamycin (MTOR),catenin beta like-1(CTNNB1),and tumor protein p53(TP53).Raman spectra analysis showed that there were two unique bands related to DNA synthesis materials,amide carbonyl group vibrations and aromatic hydrogens.These results suggest that MRJPs possess anti-senescence activity for the HFL-I cell line,and provide new knowledge illustrating the molecular mechanism of MRJPs as anti-senescence factors. 展开更多
关键词 Major royal jelly protein Human embryonic lung flbroblast (HFL-I)cell line Anti-senescence Relative proliferation activity Telomere length Molecular mechanism
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伊那普利拉对新生鼠心肌成纤维细胞增殖及作用机制的研究 被引量:1
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作者 孙红霞 李红 杨世杰 《中国地方病防治》 CAS 北大核心 2007年第4期243-245,共3页
目的观察血管紧张素I转换酶抑制剂(angiotensin I converting enzyme inhibitor,ACEI)伊那普利拉(enal-aprilat,Ena)抗血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFb)增殖及其对细胞周期蛋白的影响,探讨Ena抗CFb增殖及机... 目的观察血管紧张素I转换酶抑制剂(angiotensin I converting enzyme inhibitor,ACEI)伊那普利拉(enal-aprilat,Ena)抗血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFb)增殖及其对细胞周期蛋白的影响,探讨Ena抗CFb增殖及机制。方法以培养的新生wistar大鼠乳鼠CFb为实验模型,实验分为对照组,AngII组,用药组3个剂量,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测CFb增殖;羟脯氨酸法测定胶原量;流式细胞仪测定细胞周期和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1(Cyclin dependent kinase inhibitor,CKI)表达。结果Ena能够抑制AngⅡ诱导的CFb增殖(P<0.01,P<0.05),降低羟脯氨酸含量(P<0.01,P<0.05),增加细胞周期中G0/G1期百分率,降低S期百分率,提高p27kip1表达(P<0.01,P<0.05)。结论Ena抑制AngII诱导的CFb增殖与提高p27kip1表达有关。 展开更多
关键词 依那普利拉 血管紧张素Ⅱ 心肌成纤维细胞 细胞周期抑制蛋白p^27kip1
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成年大鼠心脏成纤维细胞的分离培养 被引量:14
14
作者 严俊 高钰琪 谢增柱 《中国局解手术学杂志》 2001年第4期370-373,共4页
目的 建立成年大鼠心脏成纤维细胞的离体培养模型。方法 以组织块消化法分离细胞,以差数贴壁法去除其它细胞,常规培养、传代,免疫组化染色进行细胞鉴定并绘制生长曲线观察细胞传代后成纤维细胞的基本特征及生长特性的变化。结果 第2~4... 目的 建立成年大鼠心脏成纤维细胞的离体培养模型。方法 以组织块消化法分离细胞,以差数贴壁法去除其它细胞,常规培养、传代,免疫组化染色进行细胞鉴定并绘制生长曲线观察细胞传代后成纤维细胞的基本特征及生长特性的变化。结果 第2~4代细胞生长良好、稳定,波形蛋白染色阳性,Ⅷ因子相关抗原及肌动蛋白染色阴性。结论 组织块消化法是一种适用于成年大鼠心脏成纤维细胞分离培养的简便方法,第2~4代细胞适于实验。 展开更多
关键词 心脏成纤维细胞 细胞培养 大鼠
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青光眼结膜成纤维细胞增生与TGF-β的表达 被引量:1
15
作者 张佳莹 冷非 彭绍民 《眼科新进展》 CAS 2007年第6期432-435,共4页
目的探讨接受药物治疗的原发性开角型青光眼患者结膜成纤维细胞(humanTenon's fibroblast,HTF)的增殖能力以及与转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达的关系。方法药物治疗的原发性开角型青光眼患者,在抗青光... 目的探讨接受药物治疗的原发性开角型青光眼患者结膜成纤维细胞(humanTenon's fibroblast,HTF)的增殖能力以及与转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达的关系。方法药物治疗的原发性开角型青光眼患者,在抗青光眼手术中取结膜Tenon囊组织并在体外培养到含有不同浓度胎牛血清(FBS)培养基中,检测HTF的增殖情况,用RT-PCR方法检测TGF-β3种异形体的mRNA表达水平,并与对照组进行对照。结果实验组的HTF细胞增生明显高于对照组(P=0.0013)。3种TGF-β异形体在mRNA水平均被HTF表达,且实验组的TGF-β2和TGF-β3在mRNA水平的表达显著高于对照组。结论实验组HTF中增高的TGF-β可能促进细胞增殖,而二者也可能与本研究中至少1a的抗青光眼滴眼液的持续使用有关。且细胞增生与TGF-β表达提高都促进了抗青光眼滤过术后的切口愈合,从而对手术效果起到负面影响。 展开更多
关键词 结膜成纤维细胞 细胞增殖 转化生长因子Β 抗青光眼药物 原发性开角型青光眼
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人骨髓成纤维样细胞克隆亚系(HFCL-1)分泌因子的初步提纯对白血病细胞系HL60的抑制作用
16
作者 姜学英 蔡辉国 +4 位作者 马月霞 何一公 张丽艳 马双 宋增璇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1993年第1期31-34,共4页
人骨髓基质成纤维细胞系及其亚克隆细胞系分泌抑制HL60细胞生长的物质。其条件培养液中的抑制物通过离子交换层析、凝胶过滤层析被部分纯化。纯化物分子量约为30000,这些物质对HL60细胞生长显示特异性抑制,而对正常骨髓中的粒系祖细胞... 人骨髓基质成纤维细胞系及其亚克隆细胞系分泌抑制HL60细胞生长的物质。其条件培养液中的抑制物通过离子交换层析、凝胶过滤层析被部分纯化。纯化物分子量约为30000,这些物质对HL60细胞生长显示特异性抑制,而对正常骨髓中的粒系祖细胞的生长只出现轻度抑制。 展开更多
关键词 成纤维细胞亚系 抑制物 HL60细胞系
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亚硒酸钠、硫酸镁对石英致细胞因子释放和羟脯氨酸合成影响的体外研究
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作者 陈国银 谈伟君 +2 位作者 殷海荣 何整 孙艳 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2007年第3期293-295,299,共4页
[目的]观察亚硒酸钠(Na2SeO3)、硫酸镁(MgSO4)对二氧化硅(石英)致巨噬细胞(RAW264.7)释放肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1(IL-1)的单独拮抗作用以及对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平变化的单独以及联合拮抗作用... [目的]观察亚硒酸钠(Na2SeO3)、硫酸镁(MgSO4)对二氧化硅(石英)致巨噬细胞(RAW264.7)释放肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1(IL-1)的单独拮抗作用以及对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平变化的单独以及联合拮抗作用。[方法]对数生长期的RAW264.7细胞,调整浓度为2×10^5个/ml。在染200mg/L石英同时单独加入不同浓度Na2SeO3、MgSO4溶液,24h后测定培养液中TNF和IL-1水平,并取培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,48h后测定人胚肺成纤维细胞培养液中Hyp含量。另外,在染石英同时联合加入不同浓度的Na2SeO3和MgSO4溶液,培养24h后取培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,48h后测定其中的Hyp含量。[结果]①与石英组比,Na2SeO3对RAW264.7细胞释放TNF-α无明显影响,MgSO4可以显著降低TNF-α的活性(P〈0.05),其中以1.0μmol/L MgSO4的效果更为明显。(爹与石英组比,一定剂量的Na2SeO3、MgSO4可以降低IL-1的活性,其中以0.5μmol/L Na2SeO3和2.0μmol/L MgSO4的效果最好(P〈0.05)。③与石英组比,一定剂量的Na2SeO3、MgSO4可以显著降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平(P〈0.05),其中以2.0μmol/L Na2SeO3和2.0μmol/L MgSO4的效果最明显。④与石英组比,一定剂量的Na2SeO3与MgSO4联合可以降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平,其中以2.0μmol/L Na2SeO3和2.0μmol/L MgSO4联合作用效果最明显(P〈0.05)。[结论]一定剂量的MgSO4对石英致巨噬细胞释放TNF-α具有拮抗作用;一定剂量的Na2SeO3和MgSO4对石英致巨噬细胞释放IL-1具有单独拮抗作用,对人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平具有单独及联合拮抗作用。 展开更多
关键词 亚硒酸钠 硫酸镁 石英 巨噬细胞 人胚肺成纤维细胞 肿瘤坏死因子 白介素-1 羟脯氨酸
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改性聚乙二醇水凝胶封装生长因子和内皮祖细胞及其可控性缓释
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作者 韩艳久 刘国辉 欧阳柳 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第30期4851-4856,共6页
背景:大量研究表明,为了实现聚合物材料的内皮细胞化,向材料表面负载生物活性因子是一种重要的手段,并且在聚合物材料表面引入人体血管内皮细胞将有助于提高材料的生物相容性。目的:合成封装碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子... 背景:大量研究表明,为了实现聚合物材料的内皮细胞化,向材料表面负载生物活性因子是一种重要的手段,并且在聚合物材料表面引入人体血管内皮细胞将有助于提高材料的生物相容性。目的:合成封装碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子和内皮祖细胞的水凝胶,观察生长因子的缓释效果,以及内皮祖细胞在水凝胶中的培养状态。方法:合成含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽段的聚乙二醇水凝胶,先后加入大鼠内皮祖细胞、碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子溶液、基质金属蛋白酶反应底物肽段溶液。将上述水凝胶浸泡于PBS中,每12 h用ELISA法检测上清液中生长因子的水平;72 h后在水凝胶PBS溶液中再分别加入不同质量的基质金属蛋白酶2(100,1 000 ng)、基质金属蛋白酶9(100,1 000 ng),每12 h用ELISA法检测上清液中生长因子的水平。将封装内皮祖细胞的聚乙二醇水凝胶置于培养基中培养5 d,消化后用流式细胞仪检测存活细胞数。结果与结论:12-72 h内,碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子的释放百分比一直维持在41%左右,72 h后分别加入不同质量的基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9,发现两种细胞因子的释放百分比呈稳步上升,72 h后已达95%以上,且基质金属蛋白酶质量越大两种因子的检测释放百分比越高。培养5 d后,在聚乙二醇水凝胶中仍有88.17%的内皮祖细胞存活。表明自组装聚乙二醇水凝胶既可以实现碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子的可控性释放,又可以支持内皮祖细胞的增殖生长。 展开更多
关键词 生物材料 缓释材料 聚乙二醇 生长因子 可控性释放 内皮祖细胞 细胞增殖 国家自然科学基金
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逆转录病毒介导人VEGF在兔皮肤成纤维细胞中的表达
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作者 何天源 施娅雪 陈诗书 《实验生物学报》 CSCD 2000年第2期101-107,共7页
本文以人VEGF cDNA为目的基因,构建成逆转录病毒质粒载体,并进一步包装成重组缺陷型逆转录病毒,以此感染原代兔皮肤成纤维细胞,经G418筛选,获得了具有分泌VEGF能力的抗性细胞克隆,经Southern、PCR、Northern、RT-PCR等检测,证实了外源... 本文以人VEGF cDNA为目的基因,构建成逆转录病毒质粒载体,并进一步包装成重组缺陷型逆转录病毒,以此感染原代兔皮肤成纤维细胞,经G418筛选,获得了具有分泌VEGF能力的抗性细胞克隆,经Southern、PCR、Northern、RT-PCR等检测,证实了外源基因已整合至原代兔皮肤成纤维细胞基因组中,无重排和产生野生型病毒之患。整合的VEGF可在修饰细胞中转录,经内皮细胞增殖实验和血管通透性实验证实其表达产物具有强大的生物活性。为进一步研究VEGF的生物学功能和生理效应提供有用的工具。 展开更多
关键词 VEGF 逆转录病毒 皮肤成纤维细胞 血管生成
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基质金属蛋白酶-2在实验性近视眼鸡巩膜成纤维细胞的表达
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作者 蒋莉 刘双珍 王剑锋 《眼科新进展》 CAS 2005年第6期516-518,共3页
目的研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)在形觉剥夺性近视眼(formdeprivation myopia,FDM)鸡巩膜成纤维细胞的表达。方法20只1d龄来亨雏鸡以半透明眼罩遮盖右眼14d制备FDM动物模型,随机取10只FDM眼去除遮盖7d作... 目的研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)在形觉剥夺性近视眼(formdeprivation myopia,FDM)鸡巩膜成纤维细胞的表达。方法20只1d龄来亨雏鸡以半透明眼罩遮盖右眼14d制备FDM动物模型,随机取10只FDM眼去除遮盖7d作为恢复组,均以对侧未遮盖眼作为对照组。将各组小鸡眼后极部巩膜成纤维细胞作体外培养并传2代,行光镜与透射电镜形态学观察,并采用SABC免疫细胞化学染色法检测MMP-2的表达,进行计算机图像分析及统计学检验。结果培养的正常鸡巩膜成纤维细胞胞浆表达MMP-2,阳性灰度值为192·2319±1·2521。FDM组细胞MMP-2染色阳性灰度值为168·1730±5·0039,较对照组MMP-2表达明显增高(P<0·01)。恢复组阳性灰度值为180·4001±2·3522,其MMP-2表达较FDM组有所回降(P<0·01),但与对照组相比仍有升高,差异有显著性(P<0·01)。结论MMP-2参与形觉剥夺性近视眼的发生发展与恢复的过程,在近视发生机制中起重要作用。 展开更多
关键词 形觉剥夺性近视眼 成纤维细胞 基质金属蛋白酶-2
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