为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得...为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得的fiber-2蛋白制备疫苗,并以7日龄无特定病原(specific pathogen free,SPF)鸡为免疫对象,采用琼脂凝胶免疫扩散试验(agar gel precipitation,AGP)测定抗体效价,并开展攻毒保护试验。结果显示:重组表达载体pET-30a-fiber-2构建成功,fiber-2蛋白为部分可溶性表达;免疫后,SPF鸡体内产生的抗体效价为1∶2~1∶16,且保护效率达到100%。结果表明,该研究成功利用原核表达系统高效表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,为禽腺病毒相关亚单位疫苗的研发提供新的思路。展开更多
为评价Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2重组蛋白亚单位疫苗的免疫保护效果,本研究利用FAV-HN株Fiber-2基因构建pET-30a-Fiber-2重组质粒,转化至BL21感受态诱导表达Fiber-2重组蛋白;Fiber-2蛋白纯化后制备不同抗原含量的亚单位疫苗,免疫SPF鸡...为评价Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2重组蛋白亚单位疫苗的免疫保护效果,本研究利用FAV-HN株Fiber-2基因构建pET-30a-Fiber-2重组质粒,转化至BL21感受态诱导表达Fiber-2重组蛋白;Fiber-2蛋白纯化后制备不同抗原含量的亚单位疫苗,免疫SPF鸡进行免疫效力评价。结果表明,Fiber-2蛋白部分为可溶性表达,纯化后纯度约90%,AGP效价达1∶64。亚单位疫苗抗原含量AGP效价不低于1∶2时,SPF鸡免疫后第21 d AGP抗体10/10阳性,可抵抗Ⅰ群禽腺病毒(4型)强毒株的攻击,提供100%的免疫攻毒保护。展开更多
【目的】碳捕集、利用与封存(Carbon Capture,Utilization and Storage,CCUS)是目前中国实现“双碳”战略目标的关键技术,CO_(2)管输则是实现规模化CCUS的重要环节。CO_(2)管道本身存在各类缺陷,受CO_(2)特殊的减压特性及管道内压的影响...【目的】碳捕集、利用与封存(Carbon Capture,Utilization and Storage,CCUS)是目前中国实现“双碳”战略目标的关键技术,CO_(2)管输则是实现规模化CCUS的重要环节。CO_(2)管道本身存在各类缺陷,受CO_(2)特殊的减压特性及管道内压的影响,管道缺陷发展成初始裂纹并产生延性扩展的风险大大增加,严重威胁管道运输安全。【方法】为使CO_(2)管道实现有效止裂,采用有限元软件ANSYS建立玻璃纤维复合材料外部止裂结构模型,基于EPRI(Electric Power Research Institute)的J积分理论公式与应力分布理论计算公式对所建模型进行可靠性验证,分析外部止裂结构铺设角度、铺设厚度、铺设长度、管道径厚比以及裂纹尺寸等因素对其止裂性能的影响,最后结合延长油田400×10^(4) t/a超临界CO_(2)输送方案的L21管道对外部止裂结构模型进行评估。【结果】玻璃纤维复合材料外部止裂结构可以有效转移并承担管道所受应力,降低管道发生延性断裂的风险;止裂结构铺设厚度、铺设长度、管道径厚比及裂纹尺寸均与止裂性能正相关,而铺设角度则存在最优值。止裂结构的止裂性能由各影响因素共同决定,其中铺设厚度的影响最大,而铺设角度的影响最小。止裂结构的最佳性能尺寸为:铺设厚度与管道壁厚相等、铺设长度为0.8倍管道外径、铺设角度为60°。【结论】铺设厚度为12 mm、长度为326 mm的外部止裂结构可有效阻止L21管道的延性断裂,研究结果可为外部止裂结构的设计提供理论基础与参考范例。展开更多
文摘为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得的fiber-2蛋白制备疫苗,并以7日龄无特定病原(specific pathogen free,SPF)鸡为免疫对象,采用琼脂凝胶免疫扩散试验(agar gel precipitation,AGP)测定抗体效价,并开展攻毒保护试验。结果显示:重组表达载体pET-30a-fiber-2构建成功,fiber-2蛋白为部分可溶性表达;免疫后,SPF鸡体内产生的抗体效价为1∶2~1∶16,且保护效率达到100%。结果表明,该研究成功利用原核表达系统高效表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,为禽腺病毒相关亚单位疫苗的研发提供新的思路。
文摘为评价Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2重组蛋白亚单位疫苗的免疫保护效果,本研究利用FAV-HN株Fiber-2基因构建pET-30a-Fiber-2重组质粒,转化至BL21感受态诱导表达Fiber-2重组蛋白;Fiber-2蛋白纯化后制备不同抗原含量的亚单位疫苗,免疫SPF鸡进行免疫效力评价。结果表明,Fiber-2蛋白部分为可溶性表达,纯化后纯度约90%,AGP效价达1∶64。亚单位疫苗抗原含量AGP效价不低于1∶2时,SPF鸡免疫后第21 d AGP抗体10/10阳性,可抵抗Ⅰ群禽腺病毒(4型)强毒株的攻击,提供100%的免疫攻毒保护。
文摘【目的】碳捕集、利用与封存(Carbon Capture,Utilization and Storage,CCUS)是目前中国实现“双碳”战略目标的关键技术,CO_(2)管输则是实现规模化CCUS的重要环节。CO_(2)管道本身存在各类缺陷,受CO_(2)特殊的减压特性及管道内压的影响,管道缺陷发展成初始裂纹并产生延性扩展的风险大大增加,严重威胁管道运输安全。【方法】为使CO_(2)管道实现有效止裂,采用有限元软件ANSYS建立玻璃纤维复合材料外部止裂结构模型,基于EPRI(Electric Power Research Institute)的J积分理论公式与应力分布理论计算公式对所建模型进行可靠性验证,分析外部止裂结构铺设角度、铺设厚度、铺设长度、管道径厚比以及裂纹尺寸等因素对其止裂性能的影响,最后结合延长油田400×10^(4) t/a超临界CO_(2)输送方案的L21管道对外部止裂结构模型进行评估。【结果】玻璃纤维复合材料外部止裂结构可以有效转移并承担管道所受应力,降低管道发生延性断裂的风险;止裂结构铺设厚度、铺设长度、管道径厚比及裂纹尺寸均与止裂性能正相关,而铺设角度则存在最优值。止裂结构的止裂性能由各影响因素共同决定,其中铺设厚度的影响最大,而铺设角度的影响最小。止裂结构的最佳性能尺寸为:铺设厚度与管道壁厚相等、铺设长度为0.8倍管道外径、铺设角度为60°。【结论】铺设厚度为12 mm、长度为326 mm的外部止裂结构可有效阻止L21管道的延性断裂,研究结果可为外部止裂结构的设计提供理论基础与参考范例。
