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Achillea fragrantissima,rich in flavonoids and tannins,potentiates the activity of diminazine aceturate against Trypanosoma evansi in rats
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作者 Ibrahim M.El-Ashmawy Naser A.Al-Wabel Aida E.Bayad 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2016年第3期223-229,共7页
Objective:To evaluate activity of methanol extract of Achillea fragrantissima(meth)(A.fragrantissima) alone or in combination with diminazine aceturate(DA) against Trypanosoma evansi in experimentally infected rats.Me... Objective:To evaluate activity of methanol extract of Achillea fragrantissima(meth)(A.fragrantissima) alone or in combination with diminazine aceturate(DA) against Trypanosoma evansi in experimentally infected rats.Methods:Sixty adult male Wister albino rats were divided equally into 6 groups(A-F).Rats in groups A-E were experimentally infected with T.evansi and those in group F were uninfected.The groups were treated respectively as follows:group A- with 3.5 mg/kg DA;group B- with 1 000 mg/kg meth,A.fragrantissima;group C-3.5mg/kg DA plus 500 mg/kg meth A.fragrantissima;group D-3.5 mg/kg DA plus 1 000 mg/kg meth A.fragrantissima.Group E was left untreated.Parasitaemia,survivability,packed cell volume,hemoglobin concentration,total leucocytes count,lymphocyte count,and serum malondialdehyde and reduced glutathione(GSH) levels were estimated.Phytochemical screening of meth A.fragrantissima was also performed.Results:The phytochemical analysis of the meth A.fragrantissima indicated a higher content from polyphenols tannins and non tannins and flavonoids.The efficacy percentage against trypanosomiasis in groups A to E was respectively as follows 80,40,90.100,0.The administration of meth-A.fragrantissima(1000)mg/kg b.wt.) produced a moderate efficacy against trypanosomiasis.Untreated rats in group E died between 25 and 30 d post infection.The rats given DA and meth A.fragrantissima combinations(C and D) showed faster and higher recovery rates than the uninfected control and groups A and B.The initial reduction in packed cell volume,hemoglobin,total leucocytes count,increases in serum malondialdehyde and decreases in GSH levels were reversed by the treatments.C onclusions:The administration of the methanol extracts of A.fragrantissima and DA combination therapy was more effective than each product alone in the treatment of rats infected with Trypanosoma evansi and further studies are required to isolate more active ingredients. 展开更多
关键词 ACHILLEA fragrantissima TRYPANOSOMA evansi FLAVONOIDS MALONDIALDEHYDE Reduced GLUTATHIONE RATS
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Hematological and serum biochemical aspects associated with a camel(Camelus dromedarius)naturally infected by Trypanosoma evansi with severe parasitemia in Semnan,Iran
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作者 Mahmood Ahmadi-hamedani Khosro Ghazvinian Mohammad Mehdi Darvishi 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2014年第9期743-745,共3页
Objective:To determine the presence of Trypanosoma eransi(T.evansi) and the effect of trypanosomosis on hemato-biochemical profile of dromedary camels in Semnan,Iran,which has not been reported yet.Methods:To perform ... Objective:To determine the presence of Trypanosoma eransi(T.evansi) and the effect of trypanosomosis on hemato-biochemical profile of dromedary camels in Semnan,Iran,which has not been reported yet.Methods:To perform this project,blood samples were collected by venipuncture into plain and EDTA-K2-containing vacutainer tubes from 21 dromedary camels(12 males and 9 females) aged3—18 years,from 4 different regions of Semnan.Results:Microscopic examination of stained thin blood smears revealed the presence of T.evansi in one of the samples.However,it should be noted that this sample showed a very high parasitemia(more than 5 trypomastigote were visible per microscopic field with MGG,1000×.This heavy parasitemia was associated with an 18-year-old female camel that showed symptoms of corneal opacity,intense emaciation and pale mucous membranes.Comparison of hematological and serum biochemical profiles between the camel infected by T.eransi and uninfected camels indicated anemia,leukocytosis,hyperproteinemia.hypoalbuminemia,hyperglobulinemia,reduction A/G ratio,increased a,,p and globulins and decreased of a,globulins and increased the concentration of gumma-glutamyl transferase enzyme.Conclusions:Results of the present study revealed that trypanosomosis was present in dromedary camels of Semnan,Iran(infection rate is 4.76%) and hemato-biochemical parameters were markedly affected by camel trypanosomosis. 展开更多
关键词 Biochemistry CAMEL HEMATOLOGY Scmnan TRYPANOSOMA evansi
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<i>Trypanosoma evansi</i>: A Qualitative and Quantitative Ultrastructural Analysis of the Spleen during Experimental Murine Infections
3
作者 Lucia Proietti d’Empaire Félix Tejero +2 位作者 Hector J. Finol Pedro M. Aso Antonio Roschman-Gonzalez 《Microscopy Research》 2020年第3期31-42,共12页
A murine model is used to study qualitatively and quantitatively the splenic ultrastructural changes induced by two <i>Trypanosoma</i><i> </i><i>evansi</i><i> </i>strain... A murine model is used to study qualitatively and quantitatively the splenic ultrastructural changes induced by two <i>Trypanosoma</i><i> </i><i>evansi</i><i> </i>strains derived from naturally infected local equine hosts (<i>Equusasinus</i> and <i>E. caballus</i>);<i>T. evansi</i> causes ultrastructural modifications in the spleen of the infected mice. The modifications include tissular disorganization, fibrosis, mitochondrial swelling, apoptosis and necrosis. The initial phases of the infection are quite similar, whereas the final phases differ qualitatively depending on the strain’s source. The ultrastructural quantitative changes were studied in the reticular splenocytes covering alterations in the area of the cytoplasm and nucleus. Analysis of the results shows the induction of various splenic alterations caused by local <i>T. evansi</i> strains. Also, it was documented that discriminative time modulation, as well as progressive tissular, cellular and subcellular changes, are more associated with derived infections from <i>E. caballus</i> strain. 展开更多
关键词 Trypanosoma evansi SPLEEN ULTRASTRUCTURE Mouse
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Therapeutic Activity of Partially Purified Fractions of Emblica officinalis (Syn, Phyllanthus embfica) Dried Fruits against Trypanosoma evansi
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作者 Shaba Peter Sahab Dey +2 位作者 Bhanuprakash Veerakyathappa Singh Raj Kumar Chaudary Paulad 《Journal of Pharmacy and Pharmacology》 2016年第10期546-558,共13页
Emblica officinalis (E. oJficinalis) dried fruits were evaluated for its antitrypanosomal activity and cytotoxic effects. Vero cell line maintained in DMEM (Dubecco's Modified Eagle Medium) and incubated with Try... Emblica officinalis (E. oJficinalis) dried fruits were evaluated for its antitrypanosomal activity and cytotoxic effects. Vero cell line maintained in DMEM (Dubecco's Modified Eagle Medium) and incubated with Trypanosoma evansi for more than 12 h. MPE was added to the Vero cell culture medium at different concentrations (250-1,000 μg/mL) with trypanosomes concentration (1 × 106 trypanosomes/mL in each ELISA plate well) and incubated at appropriate conditions for 72 h. In-vitro cytotoxieity of MPE of E. officinalis was determined on Vero cells at concentrations ((1.56-100 ~tg/mL). Acute toxicity and in-vivo infectivity tests were done in mice. Obtained MPE ofE. officinalis underwent process of purification via column chromatography, preparative chromatography and HPLC (higher performance liquid chromatography) with bioassay at different strata on Alsever's medium. In-vivo assay for trypanocidal activity, MPE and PPFs (partially purified fractions) of E. officinalis with two sets of mice, each mouse was inoculated with 1 × 104/mL oftrypanosomes and treated (48 h post inoculation) at concentrations (12.5, 25, 50, 100 and 200 mg/kg body weight) were administered at dose rate of 100 [tL per mouse via intraperitoneal route (in treating parassitemic mice) to different groups of mice, 6 mice per concentration. HPLC of partially purified fractions ofE. officinalis was carried out with mobile phase ofacetonitdle: water (40:60) in gradient mode. In vitro, MPE induced immobilization and killing of the parasites in concentration-time dependent manner. Significant reduction of trypanosomes counts from concentration of 250μg/mL and complete killing of trypanosomes at 5th hour of observation, which was statistically equivalent to 4th hour of Diminazine Aceturate (Berenil), standard reference drug used. HPLC of the partially purified fractions revealed two major prominent peaks at retention time of 1-4 min. In vivo, both MPE and PPFs of test material did prolong lives of mice by 6-9 days but could not cure them. At concentration of 2,000 kg/kg body weight of MPE in acute test, all mice survived. For in-vivo infectivity test, mice injected with immobilized trypanosomes developed parasitemia and died while, the other group survived. MPE, PPFs and Diminazine Aceturate were toxic to Vero cells at all concentrations exception of 1.56, 1.56-3.13 and 1.56-6.25 μg/mL, respectively. From this report, PPFs ofE. officinalis dried fruits demonstrated potential pathway for a new development oftrypanocide in near future if additional investigations are put in place. 展开更多
关键词 Emblica officinalis dried fruits in vitro and in vivo partially purified fractions trypanocidal activity Trypanosoma evansi in vitro cytotoxicity.
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Detection of Kinetoplast DNA From Trypanosoma evansi by PCR
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作者 伦照荣 卢力心 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1994年第15期1310-1314,共5页
Trypanosoma evansi, an economically important haemoflagellate, infects many domestic and wild animals such as horses, camels, buffalo and deer, causing the trypanosomiasis called surra in these animals. This parasite ... Trypanosoma evansi, an economically important haemoflagellate, infects many domestic and wild animals such as horses, camels, buffalo and deer, causing the trypanosomiasis called surra in these animals. This parasite has an extremely wide geographical distribution in the continents of Asia, Africa and South America. Surra is also one of the most important endemic diseases of animals in China, especially 展开更多
关键词 TRYPANOSOMA evansi KINETOPLAST DNA POLYMERASE CHAIN reaction.
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伊氏锥虫ISG 65基因表达、生物信息学分析及多克隆抗体制备
6
作者 金敏 王美玲 +7 位作者 刘燕 周娜 赵雪晴 党文盈 古丽博斯坦 阿布都卡迪尔 巴依娜 巴音查汗·盖力克 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第11期5359-5370,共12页
【目的】表达伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)不变表面糖蛋白65(invariant surface glycoprotein 65,ISG 65),分析其生物学特性及反应原性,并制备伊氏锥虫ISG 65蛋白多克隆抗体,为该类病原体检测方法的建立奠定基础。【方法】PCR扩增伊氏... 【目的】表达伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)不变表面糖蛋白65(invariant surface glycoprotein 65,ISG 65),分析其生物学特性及反应原性,并制备伊氏锥虫ISG 65蛋白多克隆抗体,为该类病原体检测方法的建立奠定基础。【方法】PCR扩增伊氏锥虫新疆株ISG 65基因,对测序列进行相似性比对及系统进化树构建,运用生物信息学工具对ISG 65基因编码蛋白的理化特性、亲/疏水性、跨膜区、信号肽、磷酸化位点及亚细胞定位进行预测分析。通过同源重组方法将ISG 65基因片段转染大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达重组ISG 65蛋白(rISG 65),镍柱亲和层析法纯化rISG 65蛋白;利用SDS-PAGE和Western blotting验证ISG 65蛋白纯化效果。将纯化后的rISG 65蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定多克隆抗体效价及重组蛋白反应原性。【结果】伊氏锥虫新疆株ISG 65基因PCR扩增产物大小为657 bp,与冈比亚布氏锥虫(登录号:XM_011773430.1、XM_011773437.1)相似性最高,为99.06%,与冈比亚布氏锥虫(登录号:XM_011773430.1)亲缘关系最近并聚为一支。生物信息学分析显示,ISG 65蛋白属于亲水性蛋白,含有436个氨基酸,理论等电点为8.02。预测ISG 65蛋白存在35个磷酸化位点;二级结构中α-螺旋、无规则卷曲、β-转角、延伸链占比分别为53.21%、33.03%、2.98%和10.78%;ISG 65蛋白有14个B细胞抗原表位,具有较好的免疫原性。本试验成功构建pET-28a-ISG 65重组质粒;SDS-PAGE结果显示,重组菌pET-28a-ISG 65-BL21在37℃8 h、1.0 mmol/L IPTG中高效表达,纯化后得到的蛋白大小约24 ku。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,均获得与预期大小一致的24 ku条带。间接ELISA检测结果显示,获得的ISG 65鼠源多克隆抗体效价为1∶1638400。【结论】经原核表达的重组ISG 65蛋白具有良好的免疫原性,能与伊氏锥虫阳性血清发生特异性结合反应,并具有良好的生物学特性。本研究可为后续伊氏锥虫ISG 65蛋白的生物学特性研究,以及ELISA诊断方法的建立提供重要参考数据和理论支撑。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 ISG 65蛋白 原核表达 多克隆抗体
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北疆部分马场虻传伊氏锥虫的DNA检测及遗传进化分析
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作者 金敏 巴依娜 +4 位作者 党文盈 高胜红 周娜 赵雪晴 巴音查汗·盖力克 《动物医学进展》 北大核心 2025年第11期68-73,共6页
为了解北疆部分马场马虻的优势分布种及伊氏锥虫病的流行情况,为虻害及伊氏锥虫病的防治提供参考数据,采集北疆地区和静县某马场马体表吸血虻(n=650)和马血液样本(n=276);通过ISG 65基因检测伊氏锥虫感染情况,通过扩增COI基因确定虻的... 为了解北疆部分马场马虻的优势分布种及伊氏锥虫病的流行情况,为虻害及伊氏锥虫病的防治提供参考数据,采集北疆地区和静县某马场马体表吸血虻(n=650)和马血液样本(n=276);通过ISG 65基因检测伊氏锥虫感染情况,通过扩增COI基因确定虻的具体种类。PCR结果显示,马虻伊氏锥虫的携带率为24.2%(157/650);阳性产物测序结果显示与冈比亚布氏锥虫(登录号:XM_011773429.1)同源性为98.63%;经COI鉴定,采集的马虻为突额瘤虻;进化树结果显示,突额瘤虻与已发表的芬兰株(MZ626174.1)同源性为98.56%。血源性伊氏锥虫的感染率分别为塔城市11.3%(6/53)、阿勒泰清河县3.6%(4/111)、伊犁44.4%(16/36)、乌市周边8%(6/76)。试验结果表明媒介虻的伊氏锥虫携带率较高,以上地区马匹存在感染锥虫的风险,应加强对该病的综合防控措施。 展开更多
关键词 突额瘤虻 COI/ISG基因 伊氏锥虫
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伊氏锥虫病的诊断及防控研究现状 被引量:2
8
作者 陈永艳 杜承 王晓钧 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1571-1578,共8页
伊氏锥虫病是由锥虫属的伊氏锥虫(Trypanosoma evansi,T.evansi)感染哺乳动物引起的一种血液原虫病,也称“苏拉”,广泛分布于全球。我国农业农村部将伊氏锥虫病归为多种动物共患的三类动物疫病,其可造成马属动物、骆驼、水牛等的贫血、... 伊氏锥虫病是由锥虫属的伊氏锥虫(Trypanosoma evansi,T.evansi)感染哺乳动物引起的一种血液原虫病,也称“苏拉”,广泛分布于全球。我国农业农村部将伊氏锥虫病归为多种动物共患的三类动物疫病,其可造成马属动物、骆驼、水牛等的贫血、消瘦、甚至死亡,对畜牧业造成了巨大的经济损失。此外,T.evansi可能还具有人畜共患的潜力,因此对其进行准确诊断至关重要。但由于锥虫亚属间亲缘关系密切,并且存在抗原变异和免疫逃逸,导致T.evansi的鉴别诊断十分困难。本文对伊氏锥虫病的病原学、免疫机制、鉴别诊断和防控现状等方面进行综述,旨在为其鉴别诊断和防治提供科学的参考依据。 展开更多
关键词 T.evansi 免疫逃逸 检测技术 分离培养 疫苗进展
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伊氏锥虫体外培养株的建立及其HGPRT活性测定 被引量:6
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作者 王祥生 孙恩贵 +4 位作者 刘小芳 杨发青 谢超 董文其 顾为望 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期39-44,共6页
用带虫培养法和带虫传代法建立了伊氏锥虫体外培养株,无论有、无饲养细胞,虫体均能快速增殖。培养70d以上,虫体仍保持原有生物学特性,对小鼠有感染性,活力旺盛,在体外能连续培养传代。虫数最高达2.48×106/mL,... 用带虫培养法和带虫传代法建立了伊氏锥虫体外培养株,无论有、无饲养细胞,虫体均能快速增殖。培养70d以上,虫体仍保持原有生物学特性,对小鼠有感染性,活力旺盛,在体外能连续培养传代。虫数最高达2.48×106/mL,群体增倍时间为8.86~10.8h。液氮保存、复苏后的虫体可在饲养细胞上立即增殖。培养中发现由巨噬细胞转化的巨核母细胞对虫体生长有促进作用,经胰酶消化能与虫体一道连续传代。通过HAT选择性培养液测定,伊氏锥虫对氨基喋呤不敏感,试验组虫体与对照一样生长良好,证明伊氏锥虫具有次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT) 展开更多
关键词 伊氏锥虫 体外培养 巨核母细胞 HGPRT
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伊氏锥虫单一或混合抗原免疫小鼠保护性试验 被引量:4
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作者 王云飞 周勇志 +2 位作者 钟淑梅 周金林 沈杰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期557-559,共3页
采用广东克隆(广东水牛伊氏锥虫单虫克隆)、安徽克隆1(安徽水牛伊氏锥虫单虫克隆)、安徽克隆2、新疆克隆(新疆骆驼伊氏锥虫单虫克隆)作单一抗原或混合抗原免疫小鼠试验。用安徽克隆1和新疆克隆单一抗原免疫小鼠,再用相应同株... 采用广东克隆(广东水牛伊氏锥虫单虫克隆)、安徽克隆1(安徽水牛伊氏锥虫单虫克隆)、安徽克隆2、新疆克隆(新疆骆驼伊氏锥虫单虫克隆)作单一抗原或混合抗原免疫小鼠试验。用安徽克隆1和新疆克隆单一抗原免疫小鼠,再用相应同株克隆攻击,其保护率在80%以上,而用异株克隆攻击(安徽克隆1、新疆克隆或广东克隆),保护率低于17%,表明安徽、新疆和广东伊氏锥虫各株间免疫原性存在差异。用新疆克隆抗原和安徽克隆2抗原混合免疫,再用新疆克隆和安徽克隆2攻击,保护率在80%以上,用新疆克隆抗原和广东克隆抗原混合免疫,再用新疆克隆和广东克隆攻击,保护率亦在80%以上,且在免疫后1~2个月仍有效。对新疆克隆抗原和广东克隆抗原混合免疫小鼠脾细胞作体外增殖试验,用不同抗原按500mg/L和125mg/L高低2种剂量刺激,均产生明显增殖,表明各锥虫抗原存在免疫交叉,但在高剂量组,用同株克隆的刺激增殖效果(SI)高于异株克隆。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 保护性抗原 免疫 小鼠 家畜
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水牛伊氏锥虫病免疫胶体金试纸条的研制及初步应用 被引量:6
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作者 孟盟 曹池 +4 位作者 陈汉忠 刘明如 王华俊 奉彬 陈国宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期988-993,共6页
为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病诊断方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上包被纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔抗小鼠IgG,作为检... 为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病诊断方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上包被纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔抗小鼠IgG,作为检测带和质控带,然后优化条件,研制成检测伊氏锥虫病的免疫胶体金试纸条。通过交叉试验表明该试纸条与衣原体、弓形虫、旋毛虫、巴贝斯焦虫和大片吸虫无交叉反应。该试纸条最低可以检出1∶3 200倍稀释的伊氏锥虫VSG抗原(浓度为3.11mg.mL-1)。应用该试纸条对230份水牛血清样本进行初步检测,同时用ELISA做平行试验,阳性符合率为88.2%。结果证明该试纸条是一种快速、灵敏、特异的水牛伊氏锥虫病的检测方法,为水牛伊氏锥虫病的现场检测诊断和预控提供了有效的方法。 展开更多
关键词 伊氏锥虫病 单克隆抗体 胶体金 试纸条
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伊氏锥虫在兔和豚鼠体内抗原变异研究 被引量:7
12
作者 周金林 沈杰 +2 位作者 周勇志 石滨海 王云飞 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1999年第1期6-11,共6页
为了解伊氏锥虫在动物体内抗原变异情况,用伊氏锥虫安徽株单虫克隆ShTatl分别感染兔和豚鼠。在兔体30d中,每三天分离兔血中锥虫并克隆,获得10个克隆锥虫,经间接免疫荧光试验和生物素抗生物素酶标试验鉴定,为9个抗原性... 为了解伊氏锥虫在动物体内抗原变异情况,用伊氏锥虫安徽株单虫克隆ShTatl分别感染兔和豚鼠。在兔体30d中,每三天分离兔血中锥虫并克隆,获得10个克隆锥虫,经间接免疫荧光试验和生物素抗生物素酶标试验鉴定,为9个抗原性互不相同的抗原变异体ShTat1.1~1.9。同种方法在4只兔体内30d获得同样9个变异体,并且出现顺序一致。该克隆在豚鼠体内15d所获得的5个变异体,经鉴定均在兔体出现过,但变异顺序不同,显示克隆锥虫在兔和豚鼠体内均发生抗原变异。在感染早期,同种不同个体宿主体内,抗原变异体出现顺序一致,而不同种宿主体内变异体出现顺序不同。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 克隆 抗原变异 变异顺序
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直接PCR法检测血液中伊氏锥虫感染 被引量:5
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作者 陆绍红 陈睿 +2 位作者 楼涤 张乐 张雪娟 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2006年第4期204-207,共4页
为建立伊氏锥虫动基体DNA(KinetoplastDNA,kDNA)的PCR扩增技术,血液直接PCR法检测伊氏锥虫的感染,本文以伊氏锥虫kDNA片段为靶扩增DNA设计引物,确定最适PCR反应条件,建立kDNA片段的PCR扩增技术,应用直接扩增缓冲液(Ampdirect)从感染小... 为建立伊氏锥虫动基体DNA(KinetoplastDNA,kDNA)的PCR扩增技术,血液直接PCR法检测伊氏锥虫的感染,本文以伊氏锥虫kDNA片段为靶扩增DNA设计引物,确定最适PCR反应条件,建立kDNA片段的PCR扩增技术,应用直接扩增缓冲液(Ampdirect)从感染小鼠的滤纸血标本直接PCR检测伊氏锥虫。结果发现,PCR扩增伊氏锥虫kDNA片段分子量为364bp,能检测的最小DNA量是0·06pg,与布氏锥虫、活动锥虫没有交叉反应。应用直接扩增缓冲液不需进行样本的DNA抽提,直接PCR能检测感染小鼠的早期滤纸血样本,敏感性高于镜检法。本实验建立的直接PCR法检测伊氏锥虫具有较高的敏感性和特异性,方法快捷,可进一步应用于伊氏锥虫病的早期诊断以及现场调查。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 直接PCR 动基体DNA(kDNA) 血液
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体外培养伊氏锥虫变异抗原型的鉴定 被引量:6
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作者 李国清 汪志楷 沈永林 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期86-90,共5页
用云南株伊氏锥虫克隆后体外培养,培养后于第18~60d之间,每间隔一周通过免疫抑制鼠(CY鼠)克隆,建立了7个克隆群体(代号为018,025,032,039,046,053,060),并将其分别与7种克隆特异性抗血清... 用云南株伊氏锥虫克隆后体外培养,培养后于第18~60d之间,每间隔一周通过免疫抑制鼠(CY鼠)克隆,建立了7个克隆群体(代号为018,025,032,039,046,053,060),并将其分别与7种克隆特异性抗血清(AS018~060)进行免疫溶解和中和试验。结果如下:①018和025能被AS018和AS025所溶解或中和;②032,039,046,053能被AS032,AS039,AS046,AS053所溶解或中和;③060只能被AS060所溶解或中和。根据上述结果,将7个克隆群体鉴定为3种变异抗原型(VAT),按国际VAT命名法,分别命名为YuTat1·1,YuTat1·2和YuTat1·3。又以针对3个VAT的抗血清AS025,AS039和AS060与超低温保存的、培养不同天数的克隆前群体进行免疫溶解试验,结果表明;体外培养的伊氏锥虫由混合的VAT所组成,随着培养时间的不同,不同VAT的比例发生改变。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 变异抗原型 体外培养 克隆 鉴定
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伊氏锥虫抗原变异型及其优势代表变异体的分离鉴定 被引量:4
15
作者 何木荣 王祥生 +3 位作者 陈汉忠 曾小飞 李晓栩 张居作 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期186-190,共5页
以连续克隆分离的方法,从1株水牛伊氏锥虫中分离到40个克隆群体,从中分离鉴定出18个抗原变异型。经间接免疫荧光试验检测,发现其中2个抗原变异型(即HbTat1.18和HbTat1.15)分别能与约80%和60%克隆群体的血清发生较强的阳性反应,初步确定... 以连续克隆分离的方法,从1株水牛伊氏锥虫中分离到40个克隆群体,从中分离鉴定出18个抗原变异型。经间接免疫荧光试验检测,发现其中2个抗原变异型(即HbTat1.18和HbTat1.15)分别能与约80%和60%克隆群体的血清发生较强的阳性反应,初步确定这2个抗原变异型为该虫株的优势代表变异体。这为伊氏锥虫免疫预防、免疫诊断、分子诊断以及遗传进化等的研究奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 抗原 变异型 优势代表变异体
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伊氏锥虫同工酶、蛋白质和抗原组分的比较研究 被引量:5
16
作者 王云飞 沈杰 郑韧坚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期463-468,共6页
本文采用生化技术对八个中国伊氏锥虫株及一个布氏锥虫株的同工酶、蛋白质和抗原组分进行比较研究。根据同工酶电泳结果,可将伊氏锥虫和与其形态上不能区分的布氏锥虫区别开来,亦可将伊氏锥虫分为两个酶株群(Z1、Z2)。根据SDS-聚丙烯酰... 本文采用生化技术对八个中国伊氏锥虫株及一个布氏锥虫株的同工酶、蛋白质和抗原组分进行比较研究。根据同工酶电泳结果,可将伊氏锥虫和与其形态上不能区分的布氏锥虫区别开来,亦可将伊氏锥虫分为两个酶株群(Z1、Z2)。根据SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳和免疫印迹试验的结果,可将酶株群Z1分成五个不同多肽群(株)。本研究结果表明,中国伊氏锥虫遗传变异程度较低,是一个相对稳定的种群。 展开更多
关键词 同功酶 伊氏锥虫 蛋白 抗原
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重组牛白细胞介素-2增强小鼠对伊氏锥虫可溶性抗原免疫应答的研究 被引量:5
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作者 李祥瑞 谢晋 +5 位作者 孙梅 刘杰 潘红杰 沈永林 汪志楷 金红 《畜牧与兽医》 北大核心 1998年第6期245-247,共3页
使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠,研究了同时注射重组牛白细胞介素-2(rBIL-2)对NK细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响。试验鼠随机分为4组:Ag组,rBIL-2组,Ag+rBIL-2组和PBS对照组。以LDH释放... 使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠,研究了同时注射重组牛白细胞介素-2(rBIL-2)对NK细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响。试验鼠随机分为4组:Ag组,rBIL-2组,Ag+rBIL-2组和PBS对照组。以LDH释放法和间接ELISA法分别检测脾NK细胞杀伤活性及抗体水平。结果表明,首次免疫后24d,Ag组NK细胞杀伤活性为31.6%,rBIL-2组为99.66%,Ag+rBIL-2组为98.98%,对照组为19.73%;抗体效价Ag组为24,Ag+rBIL-2组为26。说明rBIL-2可显著提高NK细胞杀伤活性及促进抗体生成,提高宿主免疫力。 展开更多
关键词 rBIL-2 NK细胞 抗体 小鼠 伊氏锥虫
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伊氏锥虫HGPRT缺陷株驯化及生物学特性观察 被引量:2
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作者 王祥生 刘小芳 +4 位作者 刘俊华 赵文忠 刘全 董文其 曲利芝 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期156-160,共5页
为了获得伊氏锥虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)缺陷株,用不同浓度的8-氮鸟嘌呤(8-AG)和8-AG加紫外线照射的方法,对伊氏锥虫体外培养株进行了为期60~101d诱导驯化。结果,以每毫升含8-AG40μ... 为了获得伊氏锥虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)缺陷株,用不同浓度的8-氮鸟嘌呤(8-AG)和8-AG加紫外线照射的方法,对伊氏锥虫体外培养株进行了为期60~101d诱导驯化。结果,以每毫升含8-AG40μg的培养液培养驯化,再配合紫外线照射,以及以每毫升含8-AG60μg的培养液培养驯化,均获得了伊氏锥虫HGPRT缺陷株。试验表明,培养虫体经过2~3个死亡期后逐步进入适应期,虫数升高到(1.5~2.5)×106/mL,饲养细胞通常于2~5d变黑、崩解,应适时更换。培养驯化的13株克隆虫株,经6-巯基鸟嘌呤(6-TG)抗性测定,10株存活。克隆株在3倍量氨基喋呤的HAT选择性培养液中死亡。生物学试验表明,HGPRT缺陷株在无HT的培养液中生长良好,对小鼠致病力有下隆的趋势,虫血症和小鼠死亡时间比对照组延长1倍多。抗体凝集试验表明,HGPRT缺陷株未发生抗原变异现象。超微结构显示,HGPRT缺陷株的动基体、核和核仁比对照组明显增大,核膜电子密度区也明显增宽。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 HGPRT缺陷株 驯化 生物学特性
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二重PCR快速检测牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的研究 被引量:5
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作者 石云良 黄维义 +4 位作者 张为宇 韦家周 张诗新 韦志坚 张宇 《广西农业科学》 CAS CSCD 2010年第2期163-166,共4页
根据伊氏锥虫ITS序列(FJ416612)和GenBank报道的牛巴贝斯虫棒状结合蛋白1序列(FJ588013),设计合成2对特异性诊断引物,建立了牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的二重PCR诊断方法。结果表明,建立的二重PCR诊断方法可扩增出牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫... 根据伊氏锥虫ITS序列(FJ416612)和GenBank报道的牛巴贝斯虫棒状结合蛋白1序列(FJ588013),设计合成2对特异性诊断引物,建立了牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的二重PCR诊断方法。结果表明,建立的二重PCR诊断方法可扩增出牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的特异性条带,大小分别为213bp和360bp,最低检出量分别为4.00pg和0.38pg。但对牛双芽巴贝斯虫、分歧巴贝斯虫、环形泰勒虫、附红细胞体、巴氏杆菌不敏感。用该二重PCR方法对95份水牛样品和134份奶牛样品进行检测,结果发现,水牛伊氏锥虫的感染率为13.7%(13/95)、牛巴贝斯虫的感染率为7.4%(7/95),无混合感染;奶牛伊氏锥虫的感染率为3.7%(5/134)、牛巴贝斯虫的感染率为0(0/134)。说明该二重PCR方法具有敏感、快速、特异的特点,适用于牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的流行病学调查。 展开更多
关键词 二重PCR 牛伊氏锥虫 牛巴贝斯虫 快速检测
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牛羊四种寄生虫病联合诊治技术的研究与应用 被引量:5
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作者 张雪娟 孙仁寅 +6 位作者 刘恩勇 毛光琼 冯尚连 朱家新 阳爱国 宋灿明 彭又新 《浙江农业学报》 CSCD 2000年第4期183-186,共4页
首次建立的酶标SPADot ELISA联检牛羊血矛线虫、血吸虫、伊氏锥虫和肝片吸虫病技术(简称四联 ) ,已在浙江、湖北、四川、安徽等省 6 2个县市试用 56万余头 ,据 50个县市对其中 194 90头份与酶标SPADot ELISA检测牛羊血吸虫、伊氏锥虫和... 首次建立的酶标SPADot ELISA联检牛羊血矛线虫、血吸虫、伊氏锥虫和肝片吸虫病技术(简称四联 ) ,已在浙江、湖北、四川、安徽等省 6 2个县市试用 56万余头 ,据 50个县市对其中 194 90头份与酶标SPADot ELISA检测牛羊血吸虫、伊氏锥虫和肝片吸虫病技术 (简称三联 )进行比较结果表明 ,四联与三联法 ,其血吸虫病、伊氏锥虫病和肝片吸虫病阳性符合率依次达 99.13% ,99.0 5%和 99.2 1%。同时 ,对四联法血清学阳性的 4 6 6 0头份与查病原体法进行比较结果 ,血矛线虫病、血吸虫病、伊氏锥虫病和肝片吸虫病阳性符合率分别为 97.59% ,99.2 8% ,95.17%和 98.10 %。对查出血清学阳性的牛羊用研配的广谱、高效、系列抗虫剂进行防治。据不完全统计 ,牛羊经防治 ,其血矛线虫病、血吸虫病、伊氏锥虫病和肝片吸虫病阳性率分别由 1998年的 13.5%~ 37.9% ,0 .3%~ 34.0 % ,9.4 %~ 55.2 %和 17.2 %~ 6 9.6 % ,依次降至 1999年的 0 .9%~ 6 .7% ,0 %~ 6 .1% ,3 0 %~ 10 .7%和 4 .3%~ 13.1% ,分别下降 12 .6~ 31.2个 ,0 .3~ 2 7.9个 ,6 .4~ 4 4 .5个和 13.0~ 56 .5个百分点 ; 展开更多
关键词 寄生虫病 血吸虫病 联合诊断 联合防治
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