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向日葵EPF基因家族鉴定及参与花发育的功能分析 被引量：1
1
作者 陈静 葛敏茜 +4 位作者 陈彦灼 曾银萍 邹建 杨军 刘金平 《东北农业大学学报》 北大核心 2025年第1期1-11,共11页
植物表皮模式因子EPF是一类广泛参与植物生长发育调节的分泌肽,其家族成员在向日葵(Helianthus annuus L.)花发育调控中的功能尚不清楚。基于基因组和转录组数据库,在向日葵中鉴定得到10个EPF家族基因,分属于4个亚家族。结果表明:其中,H... 植物表皮模式因子EPF是一类广泛参与植物生长发育调节的分泌肽,其家族成员在向日葵(Helianthus annuus L.)花发育调控中的功能尚不清楚。基于基因组和转录组数据库,在向日葵中鉴定得到10个EPF家族基因,分属于4个亚家族。结果表明:其中,HaEPF1、HaEPF3、HaEPF4、HaEPF7、HaEPF9在向日葵花发育早期(St2、St3、St4)特异性高表达,而HaEPF5、HaEPF8、HaEPF10在花发育中后期(St5、St6、St7)特异性高表达。进一步分析发现,HaEPF1、HaEPF4、HaEPF7在野生型向日葵(WT)花分生组织转变和花器官发生(St2)过程中高表达,并随着花器官发育其表达水平逐渐降低。然而,10个EPF家族基因在向日葵花分生组织转变与花器官分化缺陷突变体Crazy Broccoli 1(cb1)中类花序结构发育过程中始终维持较为稳定的高表达水平,并与WT分生组织转变与花器官发生时期的表达水平相似。结果表明:HaEPF1、HaEPF4、HaEPF7可能在向日葵花分生组织转变和花器官发生过程中发挥作用;启动子顺式作用元件分析发现,HaEPF1、HaEPF4、HaEPF7在调控向日葵花分生组织转变和花器官发生过程中可能依赖于生长素、赤霉素、脱落酸信号。HaEPF1、HaEPF4、HaEPF7表达水平的精确调节对于向日葵花器官发生至关重要,持续异常地高表达,可能是导致cb1突变体出现花器官发育缺陷的重要原因之一。 展开更多
关键词 向日葵 epf基因 表达水平 CB1 花分生组织转变 花器官发生
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EPF/EPFL家族基因调控植物生长发育和非生物胁迫响应的研究进展 被引量：1
2
作者 聂天巡 国钰环 +1 位作者 彭正松 杨在君 《生命科学》 CSCD 2024年第8期1012-1019,共8页
表皮模式建成因子EPF/EPFL(EPIDERMAL PATTERNING FACTOR/EPF-LIKE)家族是植物中特有的富含半胱氨酸的一类小分泌肽。EPF/EPFL家族通常作为配体与特定受体结合,激活下游信号途径,从而参与植物的生长发育及非生物胁迫响应等重要的生理过... 表皮模式建成因子EPF/EPFL(EPIDERMAL PATTERNING FACTOR/EPF-LIKE)家族是植物中特有的富含半胱氨酸的一类小分泌肽。EPF/EPFL家族通常作为配体与特定受体结合,激活下游信号途径,从而参与植物的生长发育及非生物胁迫响应等重要的生理过程。本文综述了EPF/EPFL家族成员的进化、结构特征,重点介绍了其对植物生长发育以及非生物胁迫响应的调控作用,讨论了相关研究的重要性并对有待解决的问题进行了展望,旨在为进一步研究EPF/EPFL家族基因的功能提供一定的参考。 展开更多
关键词 小分泌肽 epf/epfL 生长发育 非生物胁迫
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应用猪Ea花环抑制试验测定山羊和牛EPF活性 被引量：5
3
作者 张慧茹 王爱华 +3 位作者 马勇江 靳亚平 袁万哲 王勇胜 《西北农业学报》 CAS CSCD 2002年第1期6-9,共4页
应用猪淋巴细胞 Ea花环抑制试验 ,建立了山羊和牛 EPF测定的方法 ,并用该法检测了山羊和牛妊娠早期血清中 EPF的活性。试验结果表明 ,猪淋巴细胞 Ea花环抑制试验可应用于二者 EPF活性的测定 ;妊娠早期 (1～ 2 1 d)山羊血清中存在 EPF活... 应用猪淋巴细胞 Ea花环抑制试验 ,建立了山羊和牛 EPF测定的方法 ,并用该法检测了山羊和牛妊娠早期血清中 EPF的活性。试验结果表明 ,猪淋巴细胞 Ea花环抑制试验可应用于二者 EPF活性的测定 ;妊娠早期 (1～ 2 1 d)山羊血清中存在 EPF活性 ,其 RIT值平均为 1 6.9± 1 .8,第 1天和第 8天出现活性峰值(RIT值分别为 1 8.8± 1 .1 ,2 1 .2± 1 .8) ,其余时期 EPF活性相对稳定 ,呈现一定的规律性变化 ;奶牛在妊娠第 1 5天可检测到高活性的 EPF(1 0 .86± l.0 7) ,与空怀奶牛 (4 .0 7± 0 .89)相比 ,差异极显著 (P<0 .0 1 )。 展开更多
关键词 猪Ea花环抑制试验 测定 山羊 牛 epf活性 早孕 免疫抑制蛋白
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改进权值计算的EPF算法及在目标跟踪中的应用 被引量：4
4
作者 王秋平 周原 +1 位作者 康顺 左玲 《电光与控制》 北大核心 2011年第4期10-12,25,共4页
扩展卡尔曼粒子滤波(EPF)在预测阶段通过EKF选取重要性函数而优化了粒子选取,但是传统EPF算法中粒子权值一般是通过正态分布的概率密度函数计算的。此方法没有突出不同噪声粒子的权值差别,在计算中引入了较大的相对误差。通过在更新阶... 扩展卡尔曼粒子滤波(EPF)在预测阶段通过EKF选取重要性函数而优化了粒子选取,但是传统EPF算法中粒子权值一般是通过正态分布的概率密度函数计算的。此方法没有突出不同噪声粒子的权值差别,在计算中引入了较大的相对误差。通过在更新阶段对权值计算所依赖的概率密度函数做出改进,得到改进的EPF算法。同时采用实际目标跟踪数据进行仿真对比实验,结果验证了此方法有效可行,并且减小了预测误差。 展开更多
关键词 目标跟踪 粒子滤波(PF) epf 概率密度函数 权值计算 正态分布 反比例函数
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共聚聚丙烯EPF30R作汽车保险杠专用料研究 被引量：10
5
作者 李荣勋 涂劲松 +3 位作者 李艳霞 杨智明 冯少华 刘光烨 《现代塑料加工应用》 CAS 2001年第3期23-26,共4页
在共聚聚丙烯新产品EPF30R中加入少量的EPS30R为基体树脂,用POE(辛烯-乙烯共聚物)为增韧剂、PP-g-MAH为相容剂、滑石粉为填料制得性能符合要求的汽车保险杠专用料,并研究了增韧剂、相容剂、无机填料的含量对共混材料性能的影响。结果表... 在共聚聚丙烯新产品EPF30R中加入少量的EPS30R为基体树脂,用POE(辛烯-乙烯共聚物)为增韧剂、PP-g-MAH为相容剂、滑石粉为填料制得性能符合要求的汽车保险杠专用料,并研究了增韧剂、相容剂、无机填料的含量对共混材料性能的影响。结果表明:EPF30R/EPS30R质量比为85/15,POE用量为15份,相容剂用量10份,无机填料为12份时,专用料的性能达到国内外同类产品的指标。 展开更多
关键词 聚丙烯共聚物 增韧 汽车保险杠 专用料 epf30R
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共聚聚丙烯EPF30R的结构性能表征及应用研究 被引量：2
6
作者 涂劲松 李忠杰 +4 位作者 王洪涛 李荣勋 李艳霞 刘波 刘光烨 《合成树脂及塑料》 CAS 2001年第4期33-36,共4页
准气相共聚聚丙烯新产品EPF30R具有良好的力学性能和加工流动性,以其为基础树脂通过改性可制得多种性能符合要求的注塑产品。
关键词 聚丙烯 共聚产品 性能 epf30R 结构 表征 流动性
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重组早孕因子(EPF)的表达、纯化及鉴定 被引量：4
7
作者 练玉银 王家骥 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2012年第3期156-160,共5页
目的:获取大量具有良好生物活性的早孕因子(EPF)重组蛋白。方法:从HeLa细胞中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增EPF cDNA,将该cDNA插入载体pGEX-5X-1,获得重组表达质粒pGEX-5X-1/EPF,将重组表达质粒pGEX-5X-1/EPF转化大肠杆菌BL21后通过I... 目的:获取大量具有良好生物活性的早孕因子(EPF)重组蛋白。方法:从HeLa细胞中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增EPF cDNA,将该cDNA插入载体pGEX-5X-1,获得重组表达质粒pGEX-5X-1/EPF,将重组表达质粒pGEX-5X-1/EPF转化大肠杆菌BL21后通过IPTG进行诱导表达,然后用谷胱甘肽-琼脂糖球珠亲和层析方法,分离纯化得到纯重组GST-EPF融合蛋白(rEPF)。再用Xa酶切GST,得到纯化的EPF重组蛋白。用SDS-PAGE鉴定其纯度,用Western blotting鉴定其特异性,用玫瑰花环抑制试验(RIT)检测其生物学活性。结果:HeLa细胞总RNA中有效扩增出EPF cDNA。EPF cDNA以正确的阅读框架插入表达载体pGEX-5X-1,经IPTG诱导后高效表达EPF重组蛋白。Western blotting表明其与抗EPF抗体有特异性结合,RIT检测结果显示目的蛋白具有良好的EPF生物学特性。结论:成功构建了EPF的原核表达载体,并纯化获得了具有生物学特性的重组蛋白,为进一步开展EPF蛋白的相关研究奠定了基础。 展开更多
关键词 早孕因子(epf) 表达 纯化 特性鉴定
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玫瑰花环抑制实验检测肉牛早孕因子(EPF)活性 被引量：4
8
作者 贺加双 马卫明 +4 位作者 邓立新 宋移福 刘莲莲 曹永芝 谢冰 《中国牛业科学》 2011年第3期11-13,共3页
[目的]为了根据早孕因子活性的检测作为依据来判断肉牛妊娠状态。[方法]本实验采集不同孕期的肉牛的血样,同时进行了妊娠诊断,通过玫瑰花环抑制实验检测活性。[结果]实验表明,未怀孕牛和怀孕牛花环抑制滴度差异显著(P<0.05),不同孕... [目的]为了根据早孕因子活性的检测作为依据来判断肉牛妊娠状态。[方法]本实验采集不同孕期的肉牛的血样,同时进行了妊娠诊断,通过玫瑰花环抑制实验检测活性。[结果]实验表明,未怀孕牛和怀孕牛花环抑制滴度差异显著(P<0.05),不同孕期的早孕因子活性差异不显著。[结论]玫瑰花环抑制滴度高于8可以确认牛怀孕,低于4为未怀孕。 展开更多
关键词 肉牛 早孕因子 玫瑰花环抑制 epf
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猪链球菌2型epf基因的原核表达及其蛋白纯化 被引量：1
9
作者 葛长城 王海丽 徐公义 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第15期6916-6917,6967,共3页
为了克隆、表达SS2菌株epf基因片段,分析蛋白活性,根据GenBank SS2epf基因序列设计引物,克隆epf基因片段并进行序列分析,构建原核表达质粒pGEX4T-2-epf,在大肠杆菌中诱导带有GST标签的融合蛋白rEF-GST的表达;亲和层析法纯化融合蛋白rEF-... 为了克隆、表达SS2菌株epf基因片段,分析蛋白活性,根据GenBank SS2epf基因序列设计引物,克隆epf基因片段并进行序列分析,构建原核表达质粒pGEX4T-2-epf,在大肠杆菌中诱导带有GST标签的融合蛋白rEF-GST的表达;亲和层析法纯化融合蛋白rEF-GST,用凝血酶切除重组蛋白中的GST,获得纯化的EF抗原。经Western blot鉴定,EF可与SS2多克隆抗血清发生特异性反应。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 epf基因 胞外因子 原核表达 蛋白纯化
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应用Ea玫瑰花环抑制试验检测奶牛血清EPF活性 被引量：6
10
作者 权凯 张改平 《中国奶牛》 2008年第6期29-31,共3页
应用人淋巴细胞玫瑰花环抑制试验,对河南省奶牛育种中心20头奶牛进行了EPF活性检测。结果表明,18～30月龄初配妊娠母牛血清RIT值为12.84±0.59(n=6),31月龄～5岁经产妊娠母牛RIT值为13.01±0.36(n=8),两者差异显著(P<0.05);... 应用人淋巴细胞玫瑰花环抑制试验,对河南省奶牛育种中心20头奶牛进行了EPF活性检测。结果表明,18～30月龄初配妊娠母牛血清RIT值为12.84±0.59(n=6),31月龄～5岁经产妊娠母牛RIT值为13.01±0.36(n=8),两者差异显著(P<0.05);母牛在妊娠6～28d的RIT值为12.58±0.26(n=6),妊娠1～2个月的RIT值为13.13±0.34(n=6),妊娠3～4个月,RIT值为13.60(n=2),三者相互之间均差异显著(P<0.05)。妊娠与空怀奶牛的RIT值分别为12.96±0.46(n=14)和8.48±0.29(n=6),两者差异极显著(P<0.01)。经产牛血清EPF活性高于初配妊娠母牛;在6～28d、1～2个月、3～4个月3个妊娠期,母牛血清中EPF活性增加;未妊娠奶牛血清中不存在EPF活性,妊娠母牛的RIT>12。说明应用人淋巴细胞玫瑰花环抑制试验进行奶牛的早期或超早期妊娠诊断是一种有效可行的方法。 展开更多
关键词 奶牛 早孕因子(epf) 妊娠诊断 玫瑰花环抑制试验
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EPF方案治疗晚期胃癌临床观察 被引量：2
11
作者 王宁菊 金向明 王程 《宁夏医学院学报》 1999年第3期184-185,共2页
胃癌是我国常见恶性肿瘤之一。临床上大多数患者就诊时已属中晚期，手术切除率低，预后差，死亡率居各种恶性肿瘤之首。因此探讨有效、低毒的化疗方案，一直是胃癌化学治疗的方向。我科自１９９５～１９９８年使用ＥＰＦ方案治疗晚期胃... 胃癌是我国常见恶性肿瘤之一。临床上大多数患者就诊时已属中晚期，手术切除率低，预后差，死亡率居各种恶性肿瘤之首。因此探讨有效、低毒的化疗方案，一直是胃癌化学治疗的方向。我科自１９９５～１９９８年使用ＥＰＦ方案治疗晚期胃癌４６例，现报告如下。１资料与方法... 展开更多
关键词 胃肿瘤 药物疗法 epf方案 疗效
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泛素结合酶E2-EPF高表达质粒的构建及对绒癌细胞JEG-3生长功能的初步探讨 被引量：1
12
作者 梁静 卞美璐 《中日友好医院学报》 2011年第3期156-159,共4页
目的:构建泛素结合酶E2-EPF高表达质粒,初步探讨E2-EPF在绒癌细胞增殖中的作用。方法:基因克隆技术构建pcDNA(3.1+)-E2-EPF高表达质粒,通过瞬时转染将质粒导入绒癌细胞JEG-3中,使E2-EPF高表达;流式细胞仪检测及细胞增殖实验初步研究E2-... 目的:构建泛素结合酶E2-EPF高表达质粒,初步探讨E2-EPF在绒癌细胞增殖中的作用。方法:基因克隆技术构建pcDNA(3.1+)-E2-EPF高表达质粒,通过瞬时转染将质粒导入绒癌细胞JEG-3中,使E2-EPF高表达;流式细胞仪检测及细胞增殖实验初步研究E2-EPF高表达对绒癌细胞生长速率的影响。结果:E2-EPF高表达质粒构建成功,瞬时转染后细胞E2-EPFmRNA升高约8.4倍,JEG-3细胞的生长速率显著高于对照组(P<0.05),处于G2-M期和S期细胞显著增加。结论:E2-EPF参与细胞的生长调控,促进E2-EPF表达可以加速绒癌细胞JEG-3的生长速率。 展开更多
关键词 泛素结合酶E2-epf 质粒 绒癌细胞JEG-3 细胞增殖
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AP和EPF方案治疗晚期胃癌的对比观察 被引量：1
13
作者 尹清云 王宁菊 《宁夏医学院学报》 1999年第1期32-33,共2页
联合化疗治疗晚期胃癌是当今治疗胃癌的重要手段之一。为寻找安全、有效的化疗方案，近来我们选用ＥＡＰ、ＥＰＦ方案治疗晚期胃癌患者４０例，本文对其疗效及毒副作用进行了对比，现报告如下。１资料和方法１１一般资料选取１９９４... 联合化疗治疗晚期胃癌是当今治疗胃癌的重要手段之一。为寻找安全、有效的化疗方案，近来我们选用ＥＡＰ、ＥＰＦ方案治疗晚期胃癌患者４０例，本文对其疗效及毒副作用进行了对比，现报告如下。１资料和方法１１一般资料选取１９９４～１９９７年收治的晚期胃癌病人４０... 展开更多
关键词 胃肿瘤 药物疗法 联合疗法 EAP epf
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应用EPM7128SLC84-15配置EPF10K10LC84-84电路的设计
14
作者 雷雪梅 郭改枝 《内蒙古师范大学学报（自然科学汉文版）》 CAS 2009年第6期681-684,共4页
根据可编程器件EPF10K10LC84-84的特征和"在系统配置"方式PPS原理,以MAXPLUSⅡ为软件平台,以EPM7128SLC84-15为主控制部件,以Intel 2816A为存储器,实现了配置EPF10K10LC84-84的功能.
关键词 epf10K10LC84-84 PPS EPM7128SLC84-15 Intel2816A 配置电路 配置时序
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基于EPF技术的混凝土简支梁桥加固试验研究
15
作者 王廷臣 《长沙交通学院学报》 2005年第3期21-24,共4页
介绍了EPF(体外预应力)加固技术的特点,并模拟实际工程中受弯构件的工作状况,对EPF布筋方式及转向器等对试验梁的影响进行了分析,为EPF加固桥梁提供了参考依据。
关键词 epf 试验 研究 转向器
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小麦EPF/EPFL基因家族的全基因组鉴定及TaEPF1-2B与气孔性状的关系分析 被引量：3
16
作者 魏迪 常平 +4 位作者 刘佳熠 杨阳 张璇 陈亮 胡银岗 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1317-1329,共13页
表皮模式因子EPF/EPFL基因家族编码一类植物中特有的分泌类蛋白,在植物生长发育特别是形态建成过程中发挥着重要作用。为挖掘和利用小麦EPF/EPFL家族基因,对小麦该家族基因进行了系统鉴定,并利用生物信息学技术对其基因结构、蛋白质结... 表皮模式因子EPF/EPFL基因家族编码一类植物中特有的分泌类蛋白,在植物生长发育特别是形态建成过程中发挥着重要作用。为挖掘和利用小麦EPF/EPFL家族基因,对小麦该家族基因进行了系统鉴定,并利用生物信息学技术对其基因结构、蛋白质结构域、系统进化及表达特性进行分析。结果表明,在小麦全基因组水平共鉴定到35个TaEPF/EPFL基因家族成员,含有1~4个外显子,分布在除1A、5B外的19条染色体上,全基因组复制事件是导致该基因家族扩张的主要原因。蛋白结构分析显示,其编码蛋白的C端包含6个相对保守的半胱氨酸残基,N端存在信号肽剪切位点,且亚细胞定位在胞外基质中,属于一类胞外分泌蛋白。系统进化分析发现,TaEPF/EPFL基因在单子叶和双子叶植物分化之前就已形成。表达模式分析发现,大多数TaEPF/EPFL基因在小麦幼嫩组织和穗部表达量较高,部分TaEPF/EPFL基因响应干旱、高温等非生物胁迫。进一步分析TaEPF1-2B不同单倍型与气孔性状的相关性,发现TaEPF1-2B不同单倍型的气孔密度、气孔长度、气孔宽度和气孔面积均存在极显著差异,净光合速率存在显著差异,其中单倍型Hap A具有较低的气孔密度和较高的光合速率,是优势单倍型。本研究结果为进一步改良小麦的抗旱性和光合效率提供了候选基因。 展开更多
关键词 小麦 气孔发育 epf/epfL家族 表达分析 单倍型
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老年宫颈癌E2-EPF表达与肿瘤深肌层浸润及盆腔淋巴结转移关系的研究 被引量：5
17
作者 胡鸿飞 汪峰 +3 位作者 夏世金 骞军平 郑绮明 胡艳 《成都医学院学报》 CAS 2012年第3期371-374,共4页
目的了解老年宫颈癌E2-EPF表达水平与肿瘤深肌层浸润及盆腔淋巴结转移发生的关系,为老年宫颈癌转移的早期防治提供依据。方法选择2010年1月至2012年1月住院老年宫颈癌患者36例,手术切除获取癌组织标本,用实时荧光定量PCR检测癌组织中E2-... 目的了解老年宫颈癌E2-EPF表达水平与肿瘤深肌层浸润及盆腔淋巴结转移发生的关系,为老年宫颈癌转移的早期防治提供依据。方法选择2010年1月至2012年1月住院老年宫颈癌患者36例,手术切除获取癌组织标本,用实时荧光定量PCR检测癌组织中E2-EPF mRNA的表达水平,探讨E2-EPF表达水平与肿瘤深肌层浸润及盆腔淋巴结转移发生的关系。结果 36例病例中发现肿瘤深肌层浸润19例,占52.8%,盆腔淋巴结转移10例,占27.8%。深肌层浸润组E2-EPF mRNA平均表达水平为无深肌层浸润组的2.14倍,盆腔淋巴结转移组E2-EPF mRNA平均表达水平为无盆腔淋巴结转移组的1.72倍,均具有统计学差异(P<0.05)。结论 E2-EPF在发生转移的老年宫颈癌组织中高表达,E2-EPF信号通路可望成为宫颈癌防治的新靶点。 展开更多
关键词 老年 宫颈癌 E2-epf泛素结合酶 淋巴结转移
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基于EPF10K30的ISA接口设计 被引量：2
18
作者 王友权 《现代电子技术》 2004年第24期64-65,68,共3页
随着计算机技术日新月异的发展 ,计算机控制已经深入到了各个领域 ,特别是在工业控制领域 ,计算机通过ISA总线与接口电路进行通信 ,然后由接口电路去控制被控设备 ,从而完成预期的控制工作。
关键词 ISA总线 FPGA VHDL epf10K30芯片
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丙烯抗冲共聚产品EPF30R的开发 被引量：1
19
作者 王廷信 古平 《塑料》 CAS CSCD 2003年第6期46-49,共4页
介绍了聚丙烯抗冲共聚产品EPF30R的工艺生产特点,并详细阐述了EPF30R重要物理性能与相关工艺控制参数的关系。通过调整TEAL/DONOR比、液相和气相聚合中的氢气浓度、气相组份和乙烯含量,使多相共聚物EPF30R具有良好的高刚性、流动性和冲... 介绍了聚丙烯抗冲共聚产品EPF30R的工艺生产特点,并详细阐述了EPF30R重要物理性能与相关工艺控制参数的关系。通过调整TEAL/DONOR比、液相和气相聚合中的氢气浓度、气相组份和乙烯含量,使多相共聚物EPF30R具有良好的高刚性、流动性和冲击性能。 展开更多
关键词 聚丙烯 抗冲共聚产品 epf30R 生产工业 物理性能 气相组份 乙烯 冲击强度
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牦牛EPF的原核表达及多克隆抗体制备 被引量：3
20
作者 曹艳桃 樊江峰 +5 位作者 余四九 周应聪 杜培岩 李一娟 马进彪 赵生贤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期470-480,共11页
本试验旨在制备牦牛早孕因子(early pregnancy factor,EPF)多克隆抗体,为牦牛妊娠早期高效快速诊断技术研究奠定基础。采用RT-PCR方法,从牦牛胎盘和卵巢组织中提取RNA,反转录为模板后进行EPF基因扩增,并将其克隆到改造后的载体pET28-His... 本试验旨在制备牦牛早孕因子(early pregnancy factor,EPF)多克隆抗体,为牦牛妊娠早期高效快速诊断技术研究奠定基础。采用RT-PCR方法,从牦牛胎盘和卵巢组织中提取RNA,反转录为模板后进行EPF基因扩增,并将其克隆到改造后的载体pET28-His10-Sumo上,构建pET28-His10-Sumo-EPF重组质粒,经PCR和测序鉴定后将阳性重组质粒转化至感受态大肠杆菌BL21(DE3)中。用IPTG诱导表达并优化表达条件,使用His标签镍柱纯化重组EPF蛋白并免疫小鼠制备抗体。结果显示,经PCR扩增的牦牛EPF基因在300 bp左右,符合预期结果,并通过测序验证获得重组阳性质粒。pET28-His10-Sumo-EPF重组质粒转化后经IPTG的诱导,表达分子质量大小为29 ku的蛋白(其中包括早孕因子目标蛋白和SUMO标签蛋白),且在37℃、IPTG浓度为300 nmol·L^(-1)、诱导6 h时获得最高表达量。Western blot结果显示,蛋白在上清和包涵体中均有表达,免疫后的小鼠抗血清能够与纯化后的重组蛋白发生免疫反应。本试验通过原核表达系统成功表达了重组牦牛EPF蛋白,制备了免疫原性较好的鼠抗EPF多克隆抗体。 展开更多
关键词 牦牛 早孕因子(epf) 原核表达 多克隆抗体
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