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基于PERK/eIF2α/ATF4信号通路探讨黄芪桂枝五物汤对2型糖尿病周围神经病变小鼠的作用及机制
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作者 肖凡 周聪 +7 位作者 曹淼 向琴 刘秀 苏丽清 徐一琳 叶茂林 刘滨玮 喻嵘 《中药新药与临床药理》 北大核心 2026年第1期139-147,共9页
目的基于蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2α(eIF2α)/激活转录因子4(ATF4)信号通路探讨黄芪桂枝五物汤对2型糖尿病周围神经病变小鼠的作用及机制。方法采用高脂饲料联合冰上活动刺激骨骼肌胰岛素样生长因子1及胰岛素双受体... 目的基于蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2α(eIF2α)/激活转录因子4(ATF4)信号通路探讨黄芪桂枝五物汤对2型糖尿病周围神经病变小鼠的作用及机制。方法采用高脂饲料联合冰上活动刺激骨骼肌胰岛素样生长因子1及胰岛素双受体功能缺失(MKR)小鼠,复制糖尿病周围神经病变(DPN)小鼠模型。将DPN小鼠随机分为4组:模型组、黄芪桂枝五物汤低剂量组(6.25 g·kg^(-1)·d^(-1))、黄芪桂枝五物汤高剂量组(30 g·kg^(-1)·d^(-1))、甲钴胺组(0.17 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组8只。另取8只同龄FVB小鼠作为正常组。按照上述剂量灌胃给药(10 mL·kg^(-1)),每日1次,连续28 d。给药结束后测量各组小鼠体质量、空腹血糖值(FBG);通过检测小鼠足底热痛觉敏感性及坐骨神经传导速度评估周围神经功能情况;采用HE、Masson染色法观察坐骨神经病理变化;透射电镜观察坐骨神经组织超微结构;TUNEL染色法检测坐骨神经细胞凋亡率;Western Blot法检测坐骨神经组织内质网应激及凋亡相关蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠体质量及FBG水平均显著升高(P<0.01);舔(缩)足间隔时间显著缩短(P<0.01),坐骨神经传导速度显著降低(P<0.01);坐骨神经纤维排列混乱,形态不规则,部分轴索纤细萎缩,甚至消失,髓鞘肿胀,结构松散,部分呈空泡样改变,有较多的蓝色胶原纤维沉积,胶原纤维阳性面积占比显著升高(P<0.01);坐骨神经髓鞘变形扭曲,施旺细胞结构破坏,胞质水肿,髓鞘板层松散,可见虫蚀样改变,厚度不均匀,轴索皱缩;坐骨神经细胞凋亡率显著升高(P<0.01);坐骨神经组织PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、Caspase-3、Bax蛋白表达显著上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠的FBG水平均显著降低(P<0.05,P<0.01);舔(缩)足间隔时间显著延长(P<0.05,P<0.01),坐骨神经传导速度显著提高(P<0.01);坐骨神经纤维排列较为有序,形态趋于规则,轴索结构较为完整,髓鞘形态较为清晰完整,脱髓鞘程度减轻,胶原纤维沉积减少;坐骨神经髓鞘形态较规则;坐骨神经组织eIF2α、ATF4、CHOP、Caspase-3(34 kDa)、Bax蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,黄芪桂枝五物汤高剂量组、甲钴胺组小鼠的体质量明显降低(P<0.05);坐骨神经胶原纤维阳性面积占比显著降低(P<0.05,P<0.01);坐骨神经髓鞘板层结构较为致密,虫蚀样空洞减少,神经纤维层分离状态减轻;坐骨神经细胞凋亡率明显降低(P<0.05);坐骨神经组织PERK蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01);坐骨神经组织Caspase-3(17 kDa)蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论黄芪桂枝五物汤能够改善DPN小鼠的坐骨神经功能,减轻神经组织病理损伤,可能与抑制PERK/eIF2α/ATF4信号通路活性,下调促凋亡蛋白表达,上调抑凋亡蛋白表达,降低坐骨神经细胞凋亡率有关。 展开更多
关键词 黄芪桂枝五物汤 2型糖尿病 周围神经病变 内质网应激 PERK/eif2α/ATF4信号通路 凋亡蛋白 MKR小鼠
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乳腺癌并发抑郁症中PERK/eIF2α轴与小胶质细胞极化的相关性研究
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作者 范洪桥 樊英怡 裴晓华 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期81-87,共7页
目的:探究乳腺癌并发抑郁症中PERK/eIF2α轴与小胶质细胞极化的相关性。方法:采用4T1细胞联合皮质酮(30 mg/kg)制备乳腺癌抑郁症小鼠模型,随机分为4T1组、Model组、CCT020312组(PERK/eIF2α轴激动剂,2 mg/kg)、ISRIB组(PERK/eIF2α轴抑... 目的:探究乳腺癌并发抑郁症中PERK/eIF2α轴与小胶质细胞极化的相关性。方法:采用4T1细胞联合皮质酮(30 mg/kg)制备乳腺癌抑郁症小鼠模型,随机分为4T1组、Model组、CCT020312组(PERK/eIF2α轴激动剂,2 mg/kg)、ISRIB组(PERK/eIF2α轴抑制剂,2.5 mg/kg),另取6只正常小鼠为Control组(空白对照组)。糖水偏好、强迫游泳试验评估小鼠抑郁样行为;Nissl法检测海马CA3区神经元内尼氏体变化;免疫组化法检测肿瘤组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Toll样受体4(TLR4)蛋白表达;qRT-PCR检测海马组织M1型(IL-6、TNF-α)、M2型(Arg-1、IL-10)和PERK/eIF2α轴关键因子mRNA表达。结果:与Model组相比,CCT020312组肿瘤体积增加,糖水偏好降低,静止时间延长,CA3区神经元内尼氏体数目变少,颜色变淡,HMGB1和TLR4蛋白表达升高(P<0.05),IL-6、TNF-α、PERK、eIF2α、ATF4和CHOP mRNA水平上升,Arg-1、IL-10 mRNA水平下降(P<0.05);ISRIB可逆转CCT020312对乳腺癌并发抑郁症小鼠上述指标的升高作用(P<0.05)。结论:乳腺癌并发抑郁症中PERK/eIF2α轴与小胶质细胞极化相关,抑制PERK/eIF2α轴活性可重塑小胶质细胞极化,改善海马神经元炎症,达到改善抑郁症状和抗乳腺癌的目的。 展开更多
关键词 乳腺癌并发抑郁症 PERK/eif2α轴 小胶质细胞极化
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Bna-miR1040-EIF3A模块调控油菜开花时间的功能研究
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作者 马毅娜 吴晓明玉 +7 位作者 李藕琪 王圆 陈丽 张盈川 赵伦 文静 傅廷栋 沈金雄 《作物学报》 北大核心 2026年第2期349-362,共14页
开花时间是作物重要发育性状,对作物产量有显著影响。miRNA是一类由生物体内源MIR基因转录后加工而形成的小分子RNA,可通过切割靶基因影响靶基因的表达。前期研究基础上在甘蓝型油菜中发现一个未知生物学功能的新的小分子RNA,novel-Bna-... 开花时间是作物重要发育性状,对作物产量有显著影响。miRNA是一类由生物体内源MIR基因转录后加工而形成的小分子RNA,可通过切割靶基因影响靶基因的表达。前期研究基础上在甘蓝型油菜中发现一个未知生物学功能的新的小分子RNA,novel-Bna-miR1040,本研究过表达Bna-miR1040的甘蓝型油菜较野生型花期延迟。降解组测序表明BnaEIF3A是Bna-miR1040的潜在靶基因,5'RACE和烟草瞬时转化试验表明,Bna-miR1040可以切割BnaEIF3A,使BnaEIF3A的表达量降低;进化分析结果表明,BnaEIF3A在不同物种中具有保守性;亚细胞定位结果显示BnaEIF3A定位在细胞核上;通过CRISPR/Cas9创建BnaEIF3A的功能缺失突变体,突变体较野生型也表现为花期延迟。本研究结果为甘蓝型油菜miRNA调控开花时间提供了数据,为甘蓝型油菜不同花期品种选育提供了理论参考。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 MIRNA Bna-miR1040 eif3A 开花时间
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eIF3f plays diagnostic and prognostic roles in hepatocellular carcinoma
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作者 Hong-Yuan Yi You-Kang Chen Hai-Feng Xu 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 2026年第1期1-3,共3页
According to the 2024 global cancer data from GLOBOCAN,liver cancer ranks the 6th most common malignancy and the 3rd leading cause of cancer-related mortality worldwide[1].Among these cases,hepatocellular carcinoma(HC... According to the 2024 global cancer data from GLOBOCAN,liver cancer ranks the 6th most common malignancy and the 3rd leading cause of cancer-related mortality worldwide[1].Among these cases,hepatocellular carcinoma(HCC)accounts for approximately 85%−90%[2,3].Its incidence and mortality rates remain persistently high worldwide.However,China has the highest incidence and mortality rates of the disease in the world[4].And the majority of patients are diagnosed at intermediate or advanced stages.Thus,identifying novel tumor biomarkers for early detection and implementing precision therapy has long been a key focus of research. 展开更多
关键词 incidence hepatocellular carcinoma DIAGNOSTIC eif f global cancer data PROGNOSTIC liver cancer cancer related mortality
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防夏地黄方调控PERK/eIF2α轴介导小胶质细胞极化治疗乳腺癌并发抑郁症的作用机制
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作者 范洪桥 樊英怡 裴晓华 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第14期4015-4025,共11页
从PKR样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2α(eIF2α)轴调节M1/M2型小胶质细胞极化,研究防夏地黄方(FXDH)治疗乳腺癌并发抑郁症的作用机制。除对照组、4T1组外,采用4T1细胞联合皮质酮建立乳腺癌并发抑郁症模型,小鼠分为模型组、PERK/eIF2... 从PKR样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2α(eIF2α)轴调节M1/M2型小胶质细胞极化,研究防夏地黄方(FXDH)治疗乳腺癌并发抑郁症的作用机制。除对照组、4T1组外,采用4T1细胞联合皮质酮建立乳腺癌并发抑郁症模型,小鼠分为模型组、PERK/eIF2α信号轴激动剂(CCT020312,2 mg·kg^(-1)·d^(-1))组、CCT020312(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))+FXDH(13.65 g·kg^(-1)·d^(-1))组、FXDH(13.65 g·kg^(-1)·d^(-1))组、FXDH(13.65 g·kg^(-1)·d^(-1))+卡培他滨片(CAP,390 mg·kg^(-1)·d^(-1))组、盐酸氟西汀胶囊(FXT,2.6 mg·kg^(-1)·d^(-1))+CAP(390 mg·kg^(-1)·d^(-1))组,连续干预21 d。通过糖水偏好实验、旷场实验评估小鼠抑郁样行为;苏木精-伊红(HE)染色评价肿瘤与海马DG区神经元形态;尼氏染色检测海马CA3区尼氏体变化;免疫荧光染色观察海马组织分化簇86(CD86)/离子钙结合适配器分子1(Iba-1)、分化簇206(CD206)/Iba-1;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测海马组织M1型小胶质细胞[白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和M2型[精氨酸酶-1(Arg-1)、IL-10]mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织PERK/eIF2α轴关键因子PERK、eIF2α、激活转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白表达。结果显示,与模型组/CCT020312+FXDH组相比,FXDH组小鼠糖水偏好指数、运动总距离、中央区距离和中央区次数均增加;瘤体质量与体积降低;肿瘤细胞排列稀疏、胞核质比小、核分裂象减少,尼氏体数目增多,神经元细胞核固缩程度减轻;CD206阳性的M2型小胶质细胞表达增加,CD86/Iba-1阳性的M1型小胶质细胞表达减少;IL-6、TNF-αmRNA表达降低,Arg-1、IL-10 mRNA表达升高;PERK、eIF2α、ATF4和CHOP蛋白表达水平降低。结果表明,FXDH治疗乳腺癌并发抑郁症的作用机制可能与抑制PERK/eIF2α轴的活性,降低M1型小胶质细胞比例,提高M2型小胶质细胞比例,从而抑制神经元免疫炎症,改善抑郁症状,进而延缓乳腺癌进展有关。 展开更多
关键词 防夏地黄方 乳腺癌并发抑郁症 PERK/eif2α轴 小胶质细胞极化
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miR-409-3p靶向调控eIF3A和eIF4E而影响卵巢癌细胞糖酵解和预后的作用
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作者 郭苑莉 陶莹 +4 位作者 郭琴 曹荣禹 朱泉燕 罗秋风 钟小燕 《解剖学研究》 2025年第4期350-354,383,共6页
目的探讨miR-409-3p靶向调控eIF3A和eIF4E而影响卵巢癌细胞糖酵解的机制。方法选取30例卵巢癌病例和相应癌旁组织,采用免疫组化检测eIF3A和eIF4E的表达,采用qPCR检测miR-409-3p的表达,培养卵巢癌细胞株SKOV3,通过分别转染miR-NC、miR-40... 目的探讨miR-409-3p靶向调控eIF3A和eIF4E而影响卵巢癌细胞糖酵解的机制。方法选取30例卵巢癌病例和相应癌旁组织,采用免疫组化检测eIF3A和eIF4E的表达,采用qPCR检测miR-409-3p的表达,培养卵巢癌细胞株SKOV3,通过分别转染miR-NC、miR-409-3p-mimic、miR-409-3p-inhibitor,观察各组eIF3A和eIF4E蛋白表达水平有何变化,并通过生物学信息软件进一步验证其靶向关系,同时观察各组细胞增殖、凋亡和糖酵解水平的变化,并检测有氧糖酵解相关蛋白和基因(HK2、LDHA)表达量变化。结果在线数据库GEPIA2显示eIF3A和eIF4E均在卵巢癌组织中呈现高表达状态,且eIF3A和eIF4E在卵巢癌组织表达呈正相关(r=0.23,P<0.05);UALCAN数据分析显示,miR-409-3P在不同分期卵巢癌中差异有统计学意义(P<0.05),在30例临床样本中,与卵巢癌旁组织相比,卵巢癌组织中miR-409-3p、eIF3A和eIF4E显著高表达,在卵巢癌细胞株中miR-409-3p亦高表达(P<0.05)。转染后各组eIF3A和eIF4E以及有氧糖酵解相关蛋白表达量也呈现显著变化,其中anti-miR-409-3p组表达降低,而miR-409-3p mimic组表达升高,miR-409-3p mimic组细胞增殖率明显增加,而anti-miR-409-3p组细胞增殖率明显下降,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);生存分析显示,eIF3A、eIF4E高表达组患者呈现更差的预后(P<0.05)。结论miR-409-3p通过靶向调控eIF3A和eIF4E而影响卵巢癌细胞的生物学行为和糖酵解水平。 展开更多
关键词 miR-409-3p eif3A eif4E 卵巢癌 糖酵解 SKOV3细胞株
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安寐丹的化学成分分析及调控ERK1/2/MNK/eIF4E信号通路改善失眠大鼠昼夜节律的机制 被引量:4
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作者 高艺 徐波 +1 位作者 夏婧 陈林霖 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第10期44-53,共10页
目的:鉴定安寐丹中主要化学成分,探讨安寐丹调控下丘脑细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)/丝裂原活化蛋白激酶相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(MNK)/真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)信号通路改善失眠大鼠昼夜节律的作用机制。方法:基于超高... 目的:鉴定安寐丹中主要化学成分,探讨安寐丹调控下丘脑细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)/丝裂原活化蛋白激酶相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(MNK)/真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)信号通路改善失眠大鼠昼夜节律的作用机制。方法:基于超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱(UPLC-LTQ/Orbitrap/MS)技术结合对照品对安寐丹主要化学成分进行鉴定。将60只雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,褪黑素组,安寐丹低、中、高剂量组,每组10只,除空白组外均采用对氯苯丙氨酸腹腔注射建立失眠模型;运用旷场实验、昼夜节律实验检测大鼠活动-静息节律,苏木素-伊红(HE)染色法、尼氏(Nissl)染色法观察下丘脑神经元细胞结构变化,免疫荧光、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测下丘脑ERK1/2/MNK/eIF4E通路相关mRNA和蛋白表达情况。结果:安寐丹中共检测出黄酮类、苯丙素类、三萜皂苷类、生物碱类、木脂素类等50个化学成分;与空白组比较,模型组运动总路程、平均速度、中心区停留时间和身体直立累计时长显著增加(P<0.01),光照、黑暗活动累计时间和活动总时间显著延长(P<0.01);下丘脑神经元排列稀疏、数量减少、部分细胞核消失或核仁破裂、细胞凋亡指数显著上升(P<0.01),胞质内混浊、尼氏体颜色变浅、尼氏体凋亡指数显著增高(P<0.01);下丘脑ERK1/2、MNK、eIF4E mRNA表达水平显著降低(P<0.01);ERK1/2、磷酸化(p)-ERK1/2、MNK、p-MNK、eIF4E、p-eIF4E蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);与模型组比较,AMD高剂量组运动总路程、平均速度、中心区停留时间和身体直立累计时长均显著减少(P<0.01),安寐丹中剂量组运动总路程、平均速度和身体直立累计时长均显著减少(P<0.01),安寐丹各剂量组光照活动累计时间和活动总时间显著缩短(P<0.01),安寐丹高剂量组黑暗活动累计时间显著延长(P<0.01),安寐丹各剂量组昼、夜平均活动时间差异变大,安寐丹中、高剂量组神经元排列紧密、数量增多、下丘脑细胞凋亡指数明显下降(P<0.05,P<0.01),安寐丹低、中、高剂量组胞质内清晰、尼氏体颜色变深,尼氏体凋亡指数显著降低(P<0.01),安寐丹中、高剂量组下丘脑ERK1/2、MNK、e IF4E mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:安寐丹主要包括黄酮类、苯丙素类、三萜皂苷类等50个化学成分,具有多成分、多途径“协同增效”改善失眠的优点,其可通过上调ERK1/2/MNK/eIF4E信号通路相关蛋白改善PCPA所致失眠大鼠的昼夜节律紊乱。 展开更多
关键词 安寐丹 昼夜节律 下丘脑 细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)/丝裂原活化蛋白激酶相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(MNK)/真核细胞翻译起始因子4E(eif4E)
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LncRNA PVT1与EIF4A1促进STC1表达影响胃癌的作用机制初探
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作者 杨蕊 张蕾 +5 位作者 张伟 梁伟华 郑志红 姚立霞 潘泽民 李冬妹 《石河子大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期166-175,共10页
目的探索长链非编码RNA人浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)与真核翻译起始因子4A1(human eukaryotic initiation factor4A1,EIF4A1)促进锡钙素-1(Stanniocalcin-1,STC1)表达在胃癌中的作用。方法采用... 目的探索长链非编码RNA人浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)与真核翻译起始因子4A1(human eukaryotic initiation factor4A1,EIF4A1)促进锡钙素-1(Stanniocalcin-1,STC1)表达在胃癌中的作用。方法采用慢病毒在胃癌细胞SGC7901单独或共同过表达lncRNA PVT1和EIF4A1,采用real time-PCR检测lncRNA PVT1表达水平,Western blot检测EIF4A1表达量。采用Western blot检测STC1在不同过表达组及对照细胞中的表达量。采用4D-DIA定量蛋白质组学技术检测受lncRNA PVT1/EIF4A1调控的蛋白。采用免疫组织化学法检测STC1在胃癌组织和对应癌旁对照组织中的表达量,与lncRNA PVT1、EIF4A1表达水平及病理特征进行相关性分析。采用CCK-8法检测EIF4A1抑制剂CR-1-31-B在SGC-7901细胞系中的IC 50值,采用最佳浓度的CR-1-31-B处理细胞,再次检测STC1蛋白的表达变化。采用MTT和Transwell法检测干扰STC1后,胃癌细胞增殖、迁移能力变化。结果蛋白质组学结果显示,STC1在lncRNA PVT1/EIF4A1共同过表达组表达上调(FC>1.5,P<0.05)。相比对应癌旁对照组织,STC1在胃癌组织中表达升高(P<0.05)。STC1与lncRNA PVT1、EIF4A1的表达具有相关性(P<0.05)。STC1的表达水平与胃癌分型、分化程度、肿瘤深度、淋巴结转移具有相关性(P<0.05),但与年龄、性别无关。STC1在lncRNA PVT1过表达、EIF4A1过表达及lncRNA PVT1/EIF4A1共同过表达的细胞中表达依次升高(P<0.05)。抑制剂的最佳作用浓度为22.78nM,在lncRNA PVT1表达上调的胃癌细胞中,抑制EIF4A1的细胞较未抑制的细胞STC1的表达水平低(P<0.05)。干扰STC1后,胃癌细胞的增殖、迁移能力受到抑制(P<0.05)结论LncRNA PVT1可能通过激活EIF4A1的翻译起始活性促进STC1的表达,进而影响胃癌的进展。 展开更多
关键词 胃癌 LncRNA PVT1 eif4A1 STC1
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基于PERK/eIF2α/CHOP信号通路探讨白虎人参合枳实薤白桂枝汤对糖尿病心肌病MKR小鼠心肌损伤的保护作用
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作者 吕霞琳 刘秀 +2 位作者 向琴 肖凡 喻嵘 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第2期642-648,共7页
目的:观察白虎人参合枳实薤白桂枝汤对糖尿病心肌病MKR小鼠心肌损伤的保护作用,并基于PERK/eIF2α/CHOP通路探讨其作用机制。方法:MKR小鼠按随机数表法分为模型组,二甲双胍组,白虎人参合枳实薤白桂枝汤低、中、高剂量组(以下简称中药低... 目的:观察白虎人参合枳实薤白桂枝汤对糖尿病心肌病MKR小鼠心肌损伤的保护作用,并基于PERK/eIF2α/CHOP通路探讨其作用机制。方法:MKR小鼠按随机数表法分为模型组,二甲双胍组,白虎人参合枳实薤白桂枝汤低、中、高剂量组(以下简称中药低、中、高剂量组),FVB小鼠作为对照组。高脂饮食联合链脲佐菌素诱导糖尿病心肌病模型。二甲双胍(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))和白虎人参合枳实薤白桂枝汤低、中、高剂量(10、20、40 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃4周后测量小鼠空腹血糖(FBG),检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及B型心房钠尿肽(BNP)含量;心脏超声检测小鼠左心室射血分数(EF)、缩短分数(FS);HE染色、透射电子显微镜观察心肌组织病理形态和超微结构;Western Blot检测小鼠心肌组织GRP78、p-eIF2α、p-PERK、CHOP、Caspase12蛋白表达情况。结果:与模型组比较,各给药组小鼠FBG显著下降(P<0.01),中药高剂量组下降更明显(P<0.01,P<0.05);各给药组EF与FS显著升高(P<0.01),血清TC及BNP含量显著减少(P<0.01),二甲双胍组及中药高剂量组TG含量显著减少(P<0.01);各给药组心肌组织排列渐趋整齐,细胞质染色及细胞核分布均匀,心肌细胞线粒体嵴排列渐趋整齐,损伤断裂减少;各给药组小鼠心肌组织GRP78、p-eIF2α、p-PERK、CHOP、Caspase12蛋白显著减少(P<0.01)。结论:白虎人参合枳实薤白桂枝汤能改善糖尿病心肌病MKR小鼠心功能,调整糖脂代谢,减少PERK/eIF2α/CHOP信号通路蛋白表达,从而减少心肌损伤,保护心肌组织,延缓疾病进程。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 白虎人参合枳实薤白桂枝汤 心肌保护 内质网应激 PERK/eif2α/CHOP信号通路
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矮小症患儿EIF2AK3基因多态性特征及其与不同剂量生长激素治疗前后Ghrelin、Nesfatin-1、IGF-1及骨代谢指标变化的相关性研究 被引量:1
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作者 苏聃 于欣 潘冬宁 《河北医科大学学报》 2025年第3期336-341,共6页
目的探讨矮小症患儿真核翻译始动因子2-α激酶3(eukaryotic translation initiation factor 2-alpha kinase 3,EIF2aK3)基因多态性特征及其与不同剂量生长激素治疗前后饥饿素(Ghrelin)、人摄食抑制因子1(Nesfatin-1)、胰岛素样生长因子1... 目的探讨矮小症患儿真核翻译始动因子2-α激酶3(eukaryotic translation initiation factor 2-alpha kinase 3,EIF2aK3)基因多态性特征及其与不同剂量生长激素治疗前后饥饿素(Ghrelin)、人摄食抑制因子1(Nesfatin-1)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)及骨代谢指标变化的相关性。方法选取矮小症患儿126例作为研究对象,采用信封法,将以上患儿随机分为A、B、C三组,另选取同期健康体检的志愿者126例作为对照组,A组采取的治疗剂量为0.26 mg/kg,B组采取的治疗剂量为0.35 mg/kg,C组采取的治疗剂量为0.41 mg/kg,分析矮小症患儿EIF2AK3基因多态性特征,分析不同剂量生长激素水平的Ghrelin、Nesfatin-1、IGF-1及骨代谢指标变化情况。结果通过对对照组和观察组的EIF2AK3基因多态性进行分析,观察组和对照组的EIF2AK3基因中的rs1805165、rs13045、rs867529、rs11684404的基因型和等位基因比较差异有统计学意义(P<0.05),分析显示,rs1805165等位基因中的T、rs13045等位基因中的G、rs867529等位基因中的G、rs11684404等位基因中的C的突变均会造成矮小症的发病;3组治疗1年后的身高[(111.35±3.85)vs.(112.82±2.9)vs.(114.81±3.88)cm]、身高标准差[(2.37±0.82)vs.(1.86±0.77)vs.(1.56±0.78)]、生长速率[(8.09±3.17)vs.(9.22±3.03)vs.(11.11±3.89)cm/年]、骨龄[(10.49±3.61)vs.(10.8±3.79)vs.(11.75±2.88)岁]、身高增加值[(1.31±0.26)vs.(1.32±0.58)vs.(1.37±0.64)cm]、成年身高预测值[(155.75±3.07)vs.(158.4±3.75)vs.(160.99±3.07)cm]以及遗传靶身高[(156.57±2.54)vs.(159.01±2.59)vs.(161.49±2.49)cm]比较差异有统计学意义(P<0.05),通过两两比较,3组随着使用生长激素剂量的升高,患者的身高、身高标准差、生长速率、骨龄、身高年龄、身高增加值、遗传靶身高以及成年身高预测值呈现显著的升高趋势,3组的Ghrelin、Nesfatin-1、IGF-1均显著改善,且随着治疗剂量的升高,患者的Ghrelin[(250.76±2.73)vs.(245.22±3.49)vs.(240.74±2.65)ng/L]显著降低,Nesfatin-1[(0.10±0.02)vs.(0.15±0.03)vs.(0.20±0.02)μg/L]、IGF-1[(218.35±3.87)vs.(227.23±3)vs.(300.09±3.97)μg/L]显著升高。结论矮小症患儿EIF2AK3基因多态性主要表现在rs1805165、rs13045、rs867529、rs11684404的突变,随着对患者的生长激素治疗剂量的升高,其治疗效果显著。 展开更多
关键词 侏儒症 eif2AK3基因 多态性
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EIF2AK2基因变异致脑白质营养不良1例并文献复习
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作者 李润泽 易致 +4 位作者 宋振凤 杨成青 李菲 薛姣 张颖 《中国儿童保健杂志》 北大核心 2025年第6期692-696,共5页
脑白质营养不良是一类累及中枢神经系统白质的遗传性异质性疾病,低髓鞘化脑白质营养不良(hypomyelinating leukodystrophies,HLDs)是其中一组以中枢神经系统髓鞘形成减少为主要特征的神经退行性疾病。本文介绍的脑白质病、发育迟缓、发... 脑白质营养不良是一类累及中枢神经系统白质的遗传性异质性疾病,低髓鞘化脑白质营养不良(hypomyelinating leukodystrophies,HLDs)是其中一组以中枢神经系统髓鞘形成减少为主要特征的神经退行性疾病。本文介绍的脑白质病、发育迟缓、发作性神经退行性综合征是一种以儿童早期出现明显的全面发育迟缓,随后出现与感染相关的神经功能退化为特征的临床综合征,受累个体可出现言语障碍、各种运动异常,部分患者可出现癫痫发作,颅脑MRI常显示髓鞘形成不良、肼眠体变薄等。该综合征的遗传性病因为EIF2AK2基因。 展开更多
关键词 癫痫 eif2AK2基因变异 脑白质病 发育迟缓 发作性神经退行性综合征
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XRCC1、EIF4EBP1在食管胃结合部腺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 刘梦帆 赵小婵 毛睿 《现代肿瘤医学》 2025年第8期1353-1362,共10页
目的:探索X-射线修复交叉互补基因1(X-ray repair cross-complementing gene 1,XRCC1)和真核生物翻译起始因子4E结合蛋白1(eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein 1,EIF4EBP1)在食管胃结合部腺癌(adenocarcinoma... 目的:探索X-射线修复交叉互补基因1(X-ray repair cross-complementing gene 1,XRCC1)和真核生物翻译起始因子4E结合蛋白1(eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein 1,EIF4EBP1)在食管胃结合部腺癌(adenocarcinoma of esophagogastric junction,AEG)以及癌旁组织中的表达差异,进一步研究这些表达与AEG患者的临床病理特点之间的联系。方法:从TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中检索了XRCC1和EIF4EBP1在胃癌患者中的表达水平和临床数据,并从中筛选出AEG患者的相关数据。研究其在胃癌和AEG中的表达水平和相关性,以及AEG的表达水平与总生存期之间的联系。对我院128例2014年1月至2019年12月的AEG组织和癌旁组织石蜡包埋切片进行免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色,检测XRCC1和EIF4EBP1蛋白的表达水平,同时收集患者的相关临床资料。研究这两种蛋白质的表达水平和它们之间的相关性,以及它们的表达水平与临床病理特征之间的联系。结果:在TCGA数据库里,XRCC1和EIF4EBP1在412个胃癌组织样本中的表达水平明显超过了36个正常组织样本(P<0.001)。并且在这412个胃癌组织样本中,XRCC1和EIF4EBP1的表达之间呈正相关关系(r=0.349,P<0.001)。在其中的AEG患者中,XRCC1和EIF4EBP1在99例AEG组织样本中的表达水平明显超过了14例正常食管胃结合部组织样本(XRCC1:P=0.015,EIF4EBP1:P=0.046),但在这99例AEG组织中,XRCC1和EIF4EBP1的表达之间没有显著相关性(P=0.066)。在临床样本中,128例AEG组织样本中XRCC1和EIF4EBP1的高表达率分别为53.1%(68/128)和82%(105/128),超过了癌旁组织样本的高表达率33.6%(43/128)和54.7%(70/128),且在128例AEG组织样本中,XRCC1和EIF4EBP1的表达呈现出正相关性(r=0.245,P=0.005)。在AEG组织中,XRCC1和EIF4EBP1的表达与患者的大体类型、是否神经侵犯、有无脉管癌栓、分化程度、T分期、N分期、HER-2的表达、临床分期以及总生存期之间,没有显示出具有统计学意义的相关性。在对AEG患者的总生存状况进行多因素分析时,脉管癌栓的形成(P=0.002)和临床分期(P=0.003)与患者的总生存率有着显著的关联。结论:在AEG组织中,XRCC1和EIF4EBP1的表达水平相对于癌旁组织更高,并且这两者表达之间存在正相关关系。在不同的XRCC1和EIF4EBP1表达水平的AEG患者中,无论是大体类型、是否侵犯神经、有无脉管癌栓、分化程度、T分期、N分期、HER-2的表达、临床分期还是总生存期,都没有显著的差异。脉管癌栓及临床分期是决定AEG患者生存预后的关键因素。 展开更多
关键词 XRCC1 eif4EBP1 食管胃结合部腺癌
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安寐丹对PCPA失眠大鼠下丘脑mTOR/4EBP1/eIF4E信号通路的影响
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作者 秦庆花 徐波 +4 位作者 谢光璟 叶子靖 付顺刚 夏婧 王平 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第7期3364-3370,共7页
目的:观察安寐丹对对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠大鼠下丘脑哺乳动物雷帕霉素靶标(mTOR)/真核细胞始动因子4E结合蛋白1(4EBP1)/真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)信号通路的影响。方法:60只SD大鼠随机分为对照组,模型组,安寐丹低、中、高剂量组... 目的:观察安寐丹对对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠大鼠下丘脑哺乳动物雷帕霉素靶标(mTOR)/真核细胞始动因子4E结合蛋白1(4EBP1)/真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)信号通路的影响。方法:60只SD大鼠随机分为对照组,模型组,安寐丹低、中、高剂量组和褪黑素组,每组10只。除对照组外均采用PCPA腹腔注射建立失眠大鼠模型。运用旷场实验检测大鼠焦虑样行为,Morris水迷宫检测其学习记忆能力,透射电镜观察下丘脑神经元线粒体结构,RT-PCR、Western Blot、免疫荧光检测各组大鼠下丘脑mTOR/4EBP1/eIF4E通路相关基因和蛋白表达情况。结果:与对照组比较,模型组大鼠活动总距离显著增加(P<0.01),中心区停留时间显著减少(P<0.01),上平台潜伏期与游泳总路程均显著延长(P<0.01),穿越平台次数、目标象限停留时间显著减少(P<0.01),且线粒体出现明显肿胀、破损,大部分嵴断裂、溶解,形成空泡样,下丘脑p-mTOR/mTOR、p-4EBP1/4EBP1 mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.01),p-eIF4E/eIF4E、PER1、PER2 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,安寐丹中、高剂量组及褪黑素组大鼠活动总距离显著减少(P<0.05),中心区停留时间显著增加(P<0.05,P<0.01);上平台潜伏期和游泳总路程显著缩短(P<0.05,P<0.01),穿越平台次数和目标象限停留时间显著增加(P<0.05,P<0.01);线粒体损伤减轻;p-mTOR/mTOR、p-4EBP1/4EBP1 mRNA与蛋白表达显著下调(P<0.01),p-eIF4E/eIF4E、PER1、PER2 mRNA与蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:安寐丹改善PCPA失眠大鼠昼夜节律紊乱,其机制可能与调控mTOR/4EBP1/eIF4E信号通路有关。 展开更多
关键词 安寐丹 昼夜节律 睡眠 mTOR/4EBP1/eif4E信号通路
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疏肝健脾方通过PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路调节腹泻型肠易激综合征大鼠内脏高敏感机制研究 被引量:1
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作者 贾梦迪 张声生 《辽宁中医药大学学报》 2025年第6期32-38,共7页
目的探讨疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,D-IBS)大鼠内脏敏感性的调节作用。方法取1日龄雄性SD大鼠随机分为正常组、造模组和药物组,除正常组外,其余采用母婴分离联合束缚应激的方法进... 目的探讨疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,D-IBS)大鼠内脏敏感性的调节作用。方法取1日龄雄性SD大鼠随机分为正常组、造模组和药物组,除正常组外,其余采用母婴分离联合束缚应激的方法进行造模。造模结束后,药物组给予疏肝健脾方灌胃,连续14 d。实验结束后,应用腹壁回撤反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分及腹外斜肌肌电图曲线下面积(electromyography area under curve,EMG AUC)测定内脏敏感性;检测粪便含水量变化;取材后,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定各组大鼠结肠组织胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)、中枢神经特异蛋白(S100β)mRNA水平变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠结肠组织中GFAP、S100β、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化真核翻译起始因子2α激酶(p-eIF2α)、真核翻译起始因子2α激酶(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组粪便含水量明显升高(P<0.01),AWR评分和EMG AUC增加(P<0.05或P<0.01),大鼠结肠组织中GFAP、S100βmRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01),p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,药物组大鼠粪便含水量明显降低(P<0.01),AWR评分和EMG AUC降低(P<0.05或P<0.01),结肠组织中GFAP、S100βmRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01),p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平降低(P<0.01)。3组大鼠PERK、eIF2α蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论疏肝健脾方能够改善D-IBS大鼠内脏敏感性和粪便含水量,其作用机制可能与抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路有关。 展开更多
关键词 疏肝健脾方 腹泻型肠易激综合征 内脏敏感性 PERK/eif2α/ATF4/CHOP通路
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马赛病毒eIF2/eIF5宿主互作蛋白Tup1的初步鉴定及功能研究
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作者 朱梦琪 程彦瑾 钟江 《复旦学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期266-273,共8页
马赛病毒(Marseillevirus)属于巨型病毒家族,是从单细胞生物阿米巴原虫分离到的,其基因组构成与其他病毒相差较大,包含多个与蛋白质翻译相关的基因,其中包括一个被注释为真核翻译起始因子eIF2/eIF5的基因,其是否确实参与蛋白质翻译过程... 马赛病毒(Marseillevirus)属于巨型病毒家族,是从单细胞生物阿米巴原虫分离到的,其基因组构成与其他病毒相差较大,包含多个与蛋白质翻译相关的基因,其中包括一个被注释为真核翻译起始因子eIF2/eIF5的基因,其是否确实参与蛋白质翻译过程有待研究。本研究旨在探讨马赛病毒上海株Mar-SH2016编码的eIF2/eIF5基因,即MarSH_314在病毒复制过程中的功能。首先构建了过表达MarSH_314的卡氏棘阿米巴细胞株,并采用免疫共沉淀和质谱分析识别MarSH_314的互作蛋白。质谱分析未检测到MarSH_314和细胞翻译相关蛋白的互作,但发现它与宿主转录抑制因子Tup1存在相互作用。为探讨其机制,使用siRNA干扰Tup1表达后,病毒复制显著被抑制。综上,本研究未发现MarSH_314与翻译过程的直接关联,但部分结果表明其可能通过与宿主转录抑制因子Tup1的相互作用,影响病毒与宿主的其他生物学过程。 展开更多
关键词 马赛病毒 eif2/eif5 RNA干扰 Tup1
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羔羊睾丸细胞eIF3i蛋白的生物信息学分析、真核表达及亚细胞定位
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作者 吴帅斌 龙宥茨 +4 位作者 鲜思美 孙创奇 蒋尊 安红艳 杨琴 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第9期164-171,共8页
为了研究羔羊睾丸(Lamb Testicular,LT)细胞eIF3i蛋白的生物学功能,试验通过克隆测序获得eIF3i基因并构建系统进化树,采用生物信息学软件分析其生物学特征并将其编码基因的PCR扩增产物亚克隆至pDsRED-Monomer-N1真核表达载体,构建重组质... 为了研究羔羊睾丸(Lamb Testicular,LT)细胞eIF3i蛋白的生物学功能,试验通过克隆测序获得eIF3i基因并构建系统进化树,采用生物信息学软件分析其生物学特征并将其编码基因的PCR扩增产物亚克隆至pDsRED-Monomer-N1真核表达载体,构建重组质粒pDsRED-Monomer-N1-eIF3i,经酶切、测序鉴定正确后,转染至HEK-293T细胞,Western Blotting分析eIF3i蛋白的表达情况,激光共聚焦显微镜观察eIF3i蛋白在HEK-293T细胞内的定位。结果显示,羔羊LT细胞eIF3i基因大小为978 bp,编码345个氨基酸,其序列与绵羊的亲缘关系最近(相似性高达99.2%),与家鼠亲缘关系最远(相似性为55.0%)。eIF3i是一种无信号肽和跨膜结构、稳定亲水性非分泌蛋白;eIF3i的二级结构主要由延伸链、无规则卷曲构成,与三级结构预测结果一致;eIF3i无核定位和核输出信号;此外,试验成功构建出重组质粒pDsRED-Monomer-N1-eIF3i,eIF3i蛋白在HEK-293T细胞中成功表达,其大小约为36 KDa,eIF3i定位于HEK-293T细胞的细胞质中。本研究成功地对eIF3i蛋白进行生物信息学分析、真核表达及亚细胞定位,为后续eIF3i蛋白细胞内功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 eif3i 羔羊睾丸细胞 真核表达 亚细胞定位 生物信息学分析
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羔羊睾丸细胞eIF3i基因编码蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备与应用
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作者 吴琴 吴帅斌 +4 位作者 鲜思美 龙宥茨 郑维豪 余梦怡 李京 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第7期1478-1484,共7页
为制备羊源eIF3i基因编码蛋白的多克隆抗体,本试验利用PCR技术从羔羊睾丸(lamb testicular, LT)细胞中扩增eIF3i基因,并将其克隆至pCold载体,构建pCold-eIF3i质粒,通过质粒PCR、双酶切和序列测定进行验证;将其转化至宿主表达菌BL21(DE3)... 为制备羊源eIF3i基因编码蛋白的多克隆抗体,本试验利用PCR技术从羔羊睾丸(lamb testicular, LT)细胞中扩增eIF3i基因,并将其克隆至pCold载体,构建pCold-eIF3i质粒,通过质粒PCR、双酶切和序列测定进行验证;将其转化至宿主表达菌BL21(DE3)中,在优化表达条件(IPTG浓度、温度、时间)下诱导eIF3i重组蛋白,利用SDS-PAGE及Western blot检测目的蛋白表达及反应原性;以纯化的eIF3i重组蛋白作为抗原,联合弗氏完全/不完全佐剂免疫新西兰大白兔,经3次免疫后采集血清,采用间接ELISA检测抗血清效价,Western blot分析抗体特异性,间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)检测抗体应用效果。结果显示,PCR扩增出LT细胞eIF3i基因大小为978 bp;eIF3i重组蛋白的最佳表达条件:IPTG浓度为0.2 mmol/L,温度为37℃,时间为8 h;eIF3i重组蛋白以包涵体形式表达,其大小约为36 kDa;制备的eIF3i蛋白多克隆抗体效价1∶51 200。Western blot和IFA结果显示,制备的eIF3i蛋白多克隆抗体具有良好的反应原性及特异性。综上所述,本研究成功制备了兔抗eIF3i蛋白多克隆抗体,并证实其能特异性识别内源性eIF3i蛋白,为进一步研究eIF3i蛋白的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 羔羊睾丸细胞 eif3i基因 原核表达 多克隆抗体
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香砂六君子汤通过PERK/eIF2α信号通路调节Cajal间质细胞自噬与凋亡的作用机制
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作者 李霭燕 招志辉 +1 位作者 廖文力 赵荣 《广东药科大学学报》 2025年第5期87-94,共8页
目的 探讨香砂六君子汤通过PERK/eIF2α信号通路调控Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICC)自噬与凋亡的机制,为功能性消化不良(functional dyspepsia, FD)的治疗提供实验依据。方法 采用碘乙酰胺联合不规则饮食建立FD大鼠模... 目的 探讨香砂六君子汤通过PERK/eIF2α信号通路调控Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICC)自噬与凋亡的机制,为功能性消化不良(functional dyspepsia, FD)的治疗提供实验依据。方法 采用碘乙酰胺联合不规则饮食建立FD大鼠模型,并随机分为正常对照组(NC)、模型组(MC)、香砂六君子汤低、中、高剂量组(LD、MD、HD)。LD、MD和HD组分别给予不同剂量香砂六君子汤干预14 d后,提取含药血清处理ICC细胞。通过苏木精-伊红(HE)染色观察胃窦病理变化;单丹酰骷髅素(monodansylcadaverine, MDC)和吖啶橙(acridine orangee, AO)荧光染色检测ICC细胞自噬水平;流式细胞仪检测ICC细胞凋亡率;Western blot检测ICC细胞中PERK、p-eIF2α和eIF2α蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示MC组胃窦组织结构明显受损,腺体紊乱和炎性浸润显著;香砂六君子汤干预后HD组修复效果显著。MDC和AO荧光染色结果表明,MC组自噬水平显著升高,HD组能有效抑制自噬过度。MC组凋亡率显著增加,LD、MD、HD组凋亡率显著降低且呈剂量依赖性(P<0.05);Western blot结果显示,MC组PERK和p-eIF2α蛋白表达水平显著下降,而eIF2α蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。与MC组比较,香砂六君子汤组PERK和p-eIF2α蛋白表达水平显著上调,eIF2α蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。结论 香砂六君子汤通过调控PERK/eIF2α信号通路抑制ICC细胞自噬与凋亡,改善胃肠动力紊乱,具有剂量依赖性,为香砂六君子汤应用于临床治疗FD提供了实验基础。 展开更多
关键词 香砂六君子汤 功能性消化不良 CAJAL间质细胞 自噬 PERK/eif2α信号通路
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氧化固醇通过下调eIF4G1诱导细胞自噬死亡
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作者 钟文杰 钟文彬 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 北大核心 2025年第5期577-586,共10页
目的:探究氧化固醇介导细胞死亡的方式和分子机制。方法:使用Western blot和免疫荧光检测细胞自噬标志物微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达水平;使用流式细胞术检测细胞自噬死亡比例;使用PCR列阵芯片分析氧化固醇诱导的自噬相关差异表达基因... 目的:探究氧化固醇介导细胞死亡的方式和分子机制。方法:使用Western blot和免疫荧光检测细胞自噬标志物微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达水平;使用流式细胞术检测细胞自噬死亡比例;使用PCR列阵芯片分析氧化固醇诱导的自噬相关差异表达基因;使用qRT-PCR和Western blot检测氧化固醇处理后真核翻译起始因子4γ1(eIF4G1)的表达水平;在eIF4G1干扰和过表达质粒转染细胞后,使用Western blot和ATP生物发光测定试剂盒检测氧化固醇处理后LC3的表达及ATP水平。结果:与未处理组相比,10μmol/L的25-羟基胆固醇(25-OHC)、20μmol/L的24-羟基胆固醇(24-OHC)或20μmol/L的7-酮基胆固醇(7-KC)处理会导致HeLa细胞自噬(P<0.05),诱导其死亡(P<0.05)。eIF4G1在10μmol/L的25-OHC处理HeLa细胞时下调最为显著(P<0.05)。干扰eIF4G1会进一步促进10μmol/L的25-OHC诱导HeLa细胞自噬和死亡(P<0.05);相反,过表达eIF4G1会抑制25-OHC诱导细胞自噬和死亡(P<0.05)。结论:氧化固醇可能通过下调eIF4G1诱导细胞自噬死亡。 展开更多
关键词 氧化固醇 eif4G1 自噬 细胞死亡
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eIF4E在白血病中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 祝亮方 陈鑫基 胡建达 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-6,共6页
本研究旨在比较eIF4E在正常人和白血病患者中的表达水平,了解eIF4E是否在白血病的发生和发展中起到一定的作用。收集10例正常人和76例白血病患者的外周血细胞标本,76例患者包括39例急性髓系白血病,15例慢性髓系白血病和22例急性淋巴细... 本研究旨在比较eIF4E在正常人和白血病患者中的表达水平,了解eIF4E是否在白血病的发生和发展中起到一定的作用。收集10例正常人和76例白血病患者的外周血细胞标本,76例患者包括39例急性髓系白血病,15例慢性髓系白血病和22例急性淋巴细胞白血病,分离标本中的白细胞,分别通过实时定量PCR和Western blot检测eIF4E在mRNA和蛋白质水平的表达变化。结果表明,就eIF4E mRNA绝对表达水平而言,在急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病及慢性髓系白血病急变期,其表达增高,与正常对照比较有显著性差异(P<0.05);在慢性髓系白血病慢性期,其表达水平无明显改变,在慢性髓系白血病加速期,其表达水平虽有所上调,但与正常对照无显著性差异。就eIF4E mRNA相对表达水平而言,在慢性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病及除M4、M5之外的急性髓系白血病中,其表达均无显著性变化。eIF4E蛋白质表达在急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性髓系白血病加速期和急变期中均有不同程度的增高,与正常对照比较有显著性差异(P<0.05)。结论:虽然eIF4EmRNA相对表达水平在大多数白血病中并无显著性改变,但是eIF4E mRNA绝对表达水平及其蛋白质水平在大多数白血病中均显著性上调。因此推测,eIF4E可能对白血病的发生和发展起到一定的作用,以它为靶点治疗白血病,尤其是复发和难治性白血病,可能是一条有希望的途径。 展开更多
关键词 白血病 eif4E蛋白 eif4E基因
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