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羔羊睾丸细胞eIF3i蛋白的生物信息学分析、真核表达及亚细胞定位
1
作者 吴帅斌 龙宥茨 +4 位作者 鲜思美 孙创奇 蒋尊 安红艳 杨琴 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第9期164-171,共8页
为了研究羔羊睾丸(Lamb Testicular,LT)细胞eIF3i蛋白的生物学功能,试验通过克隆测序获得eIF3i基因并构建系统进化树,采用生物信息学软件分析其生物学特征并将其编码基因的PCR扩增产物亚克隆至pDsRED-Monomer-N1真核表达载体,构建重组质... 为了研究羔羊睾丸(Lamb Testicular,LT)细胞eIF3i蛋白的生物学功能,试验通过克隆测序获得eIF3i基因并构建系统进化树,采用生物信息学软件分析其生物学特征并将其编码基因的PCR扩增产物亚克隆至pDsRED-Monomer-N1真核表达载体,构建重组质粒pDsRED-Monomer-N1-eIF3i,经酶切、测序鉴定正确后,转染至HEK-293T细胞,Western Blotting分析eIF3i蛋白的表达情况,激光共聚焦显微镜观察eIF3i蛋白在HEK-293T细胞内的定位。结果显示,羔羊LT细胞eIF3i基因大小为978 bp,编码345个氨基酸,其序列与绵羊的亲缘关系最近(相似性高达99.2%),与家鼠亲缘关系最远(相似性为55.0%)。eIF3i是一种无信号肽和跨膜结构、稳定亲水性非分泌蛋白;eIF3i的二级结构主要由延伸链、无规则卷曲构成,与三级结构预测结果一致;eIF3i无核定位和核输出信号;此外,试验成功构建出重组质粒pDsRED-Monomer-N1-eIF3i,eIF3i蛋白在HEK-293T细胞中成功表达,其大小约为36 KDa,eIF3i定位于HEK-293T细胞的细胞质中。本研究成功地对eIF3i蛋白进行生物信息学分析、真核表达及亚细胞定位,为后续eIF3i蛋白细胞内功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 eif3i 羔羊睾丸细胞 真核表达 亚细胞定位 生物信息学分析
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羔羊睾丸细胞eIF3i基因编码蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备与应用
2
作者 吴琴 吴帅斌 +4 位作者 鲜思美 龙宥茨 郑维豪 余梦怡 李京 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第7期1478-1484,共7页
为制备羊源eIF3i基因编码蛋白的多克隆抗体,本试验利用PCR技术从羔羊睾丸(lamb testicular, LT)细胞中扩增eIF3i基因,并将其克隆至pCold载体,构建pCold-eIF3i质粒,通过质粒PCR、双酶切和序列测定进行验证;将其转化至宿主表达菌BL21(DE3)... 为制备羊源eIF3i基因编码蛋白的多克隆抗体,本试验利用PCR技术从羔羊睾丸(lamb testicular, LT)细胞中扩增eIF3i基因,并将其克隆至pCold载体,构建pCold-eIF3i质粒,通过质粒PCR、双酶切和序列测定进行验证;将其转化至宿主表达菌BL21(DE3)中,在优化表达条件(IPTG浓度、温度、时间)下诱导eIF3i重组蛋白,利用SDS-PAGE及Western blot检测目的蛋白表达及反应原性;以纯化的eIF3i重组蛋白作为抗原,联合弗氏完全/不完全佐剂免疫新西兰大白兔,经3次免疫后采集血清,采用间接ELISA检测抗血清效价,Western blot分析抗体特异性,间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)检测抗体应用效果。结果显示,PCR扩增出LT细胞eIF3i基因大小为978 bp;eIF3i重组蛋白的最佳表达条件:IPTG浓度为0.2 mmol/L,温度为37℃,时间为8 h;eIF3i重组蛋白以包涵体形式表达,其大小约为36 kDa;制备的eIF3i蛋白多克隆抗体效价1∶51 200。Western blot和IFA结果显示,制备的eIF3i蛋白多克隆抗体具有良好的反应原性及特异性。综上所述,本研究成功制备了兔抗eIF3i蛋白多克隆抗体,并证实其能特异性识别内源性eIF3i蛋白,为进一步研究eIF3i蛋白的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 羔羊睾丸细胞 eif3i基因 原核表达 多克隆抗体
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沉默长链非编码RNA EIF3J-DT通过调控miR-874-3p对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响
3
作者 陆凯 陆建菊 +1 位作者 郭文利 黄建棋 《中国药物与临床》 2025年第3期174-179,F0003,共7页
目的探究长链非编码RNA(lncRNA)EIF3J-DT在乳腺癌中表达及沉默EIF3J-DT通过调控miR-874-3p的表达对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法借助lnCaNet数据库分析乳腺癌组织和癌旁组织中EIF3J-DT的差异表达,分析EIF3J-DT表达与乳腺癌患者生... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)EIF3J-DT在乳腺癌中表达及沉默EIF3J-DT通过调控miR-874-3p的表达对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法借助lnCaNet数据库分析乳腺癌组织和癌旁组织中EIF3J-DT的差异表达,分析EIF3J-DT表达与乳腺癌患者生存期的关系。通过实时荧光聚合酶链式反应检测EIF3J-DT在乳腺癌细胞HCC-1937、MCF-7、BT-549、SK-BR-3和永生化乳腺上皮细胞MCF-10A中表达。向SK-BR-3细胞中分别转染EIF3J-DT干扰质粒(si-EIF3J-DT)及对照质粒(si-NC),标记为si-EIF3J-DT组和si-NC组。采用集落形成实验和细胞划痕实验检测各组SK-BR-3细胞的增殖和迁移情况。双荧光素酶报告实验检测EIF3J-DT和miR-874-3p的互相作用关系。qPCR检测SK-BR-3细胞中miR-874-3p的表达。蛋白质免疫印迹检测SK-BR-3细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白的表达。结果与癌旁组织相比,乳腺癌组织中EIF3J-DT表达上调(P<0.01)。EIF3J-DT高表达的乳腺癌患者生存期短于EIF3J-DT低表达的乳腺癌患者(P<0.01)。与MCF-10A细胞比较,EIF3J-DT在乳腺癌细胞HCC-1937、MCF-7、BT-549、SK-BR-3中上调(均P<0.01),SK-BR-3细胞中EIF3J-DT表达最高(P<0.01)。与si-NC组比较,低表达EIF3J-DT能够降低SK-BR-3细胞的增殖能力(P<0.01)和迁移能力(P<0.01)。EIF3J-DT能靶向结合miR-874-3p(P<0.01)。与si-NC组比较,低表达EIF3J-DT后SK-BR-3细胞中miR-874-3p表达上调(P<0.01),Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达降低(P<0.01)。结论EIF3J-DT在乳腺癌组织和细胞中高表达,其高表达与乳腺癌患者生存期有关联,沉默EIF3J-DT可通过上调miR-874-3p表达对乳腺癌SK-BR-3细胞的增殖和迁移发挥抑制作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 eif3J-DT miR-874-3p 细胞增殖 细胞运动
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miR-409-3p靶向调控eIF3A和eIF4E而影响卵巢癌细胞糖酵解和预后的作用
4
作者 郭苑莉 陶莹 +4 位作者 郭琴 曹荣禹 朱泉燕 罗秋风 钟小燕 《解剖学研究》 2025年第4期350-354,383,共6页
目的探讨miR-409-3p靶向调控eIF3A和eIF4E而影响卵巢癌细胞糖酵解的机制。方法选取30例卵巢癌病例和相应癌旁组织,采用免疫组化检测eIF3A和eIF4E的表达,采用qPCR检测miR-409-3p的表达,培养卵巢癌细胞株SKOV3,通过分别转染miR-NC、miR-40... 目的探讨miR-409-3p靶向调控eIF3A和eIF4E而影响卵巢癌细胞糖酵解的机制。方法选取30例卵巢癌病例和相应癌旁组织,采用免疫组化检测eIF3A和eIF4E的表达,采用qPCR检测miR-409-3p的表达,培养卵巢癌细胞株SKOV3,通过分别转染miR-NC、miR-409-3p-mimic、miR-409-3p-inhibitor,观察各组eIF3A和eIF4E蛋白表达水平有何变化,并通过生物学信息软件进一步验证其靶向关系,同时观察各组细胞增殖、凋亡和糖酵解水平的变化,并检测有氧糖酵解相关蛋白和基因(HK2、LDHA)表达量变化。结果在线数据库GEPIA2显示eIF3A和eIF4E均在卵巢癌组织中呈现高表达状态,且eIF3A和eIF4E在卵巢癌组织表达呈正相关(r=0.23,P<0.05);UALCAN数据分析显示,miR-409-3P在不同分期卵巢癌中差异有统计学意义(P<0.05),在30例临床样本中,与卵巢癌旁组织相比,卵巢癌组织中miR-409-3p、eIF3A和eIF4E显著高表达,在卵巢癌细胞株中miR-409-3p亦高表达(P<0.05)。转染后各组eIF3A和eIF4E以及有氧糖酵解相关蛋白表达量也呈现显著变化,其中anti-miR-409-3p组表达降低,而miR-409-3p mimic组表达升高,miR-409-3p mimic组细胞增殖率明显增加,而anti-miR-409-3p组细胞增殖率明显下降,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);生存分析显示,eIF3A、eIF4E高表达组患者呈现更差的预后(P<0.05)。结论miR-409-3p通过靶向调控eIF3A和eIF4E而影响卵巢癌细胞的生物学行为和糖酵解水平。 展开更多
关键词 miR-409-3p eif3A EIF4E 卵巢癌 糖酵解 SKOV3细胞株
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eIF3e在肥胖症患者大网膜脂肪组织中的表达及意义 被引量：1
5
作者 马筱璇 高菲 +3 位作者 逯素梅 玄晓蕾 张永娇 石晓红 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 2025年第2期72-82,共11页
目的 寻找肥胖能量平衡控制过程中,调控蛋白质翻译启动的关键因子。方法 通过高通量RNA测序分析肥胖者和健康对照者大网膜脂肪组织中差异表达的mRNA。通过基因本体(gene ontology, GO)富集、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedi... 目的 寻找肥胖能量平衡控制过程中,调控蛋白质翻译启动的关键因子。方法 通过高通量RNA测序分析肥胖者和健康对照者大网膜脂肪组织中差异表达的mRNA。通过基因本体(gene ontology, GO)富集、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)通路分析将差异表达的mRNA进行功能富集,围绕真核生物翻译起始家族(eukaryotic translation initiation family,eIFs)进一步分析,并通过GEPIA/GEO数据库验证、免疫印迹实验及qPCR验证eIFs在ob/ob小鼠、db/db小鼠、原代脂肪细胞和C3H10T1/2细胞分化模型中的表达情况。结果 肥胖症患者大网膜脂肪组织中,翻译起始因子3e(eukaryotic initiation factor 3e, eIF3e)表达量下降显著。eIF3e与肥胖相关代谢表型和脂肪生成相关基因呈负相关。在培养的原代脂肪细胞和C3H10T1/2细胞诱导分化过程中,发现eIF3e在脂肪生成过程中发挥负调控作用。在β3肾上腺素能刺激下,在适应性产热小鼠模型和C3H10T1/2细胞中检测到伴随能量的消耗eIF3e正向升高。结论 eIF3e在脂肪生成过程中表达下调,且脂肪分解过程中表达上调,提示eIF3e可能是肥胖能量平衡控制过程中,调控蛋白质翻译启动的关键因子。 展开更多
关键词 肥胖 网膜脂肪组织 翻译起始因子 翻译起始因子3e 翻译调控
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吴茱萸次碱通过抑制Notch1/eIF3a信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化 被引量：25
6
作者 高云星 蒋莉莉 +2 位作者 张倩 左东泽 李先伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第17期3530-3538,共9页
研究吴茱萸次碱（Rut）是否通过抑制Notch1/真核翻译起始因子3a（e IF3a）信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,以及作用是否与促进降钙素基因相关肽（CGRP）合成与释放,进而抑制肺泡上皮细胞间质转分化（EMT）有关。雄性SD大鼠随... 研究吴茱萸次碱（Rut）是否通过抑制Notch1/真核翻译起始因子3a（e IF3a）信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,以及作用是否与促进降钙素基因相关肽（CGRP）合成与释放,进而抑制肺泡上皮细胞间质转分化（EMT）有关。雄性SD大鼠随机分为5组：对照组,博莱霉素组,Rut不同（100,300 mg·kg-1）剂量组及辣椒素（Cap）＋Rut（300 mg·kg-1）剂量组,每组12只。采用博莱霉素（5 mg·kg-1）气管滴注诱导肺纤维化大鼠模型。Cap＋Rut组于造模前1天和造模后第7,14,21天分别皮下注射Cap（50 mg·kg-1）耗竭内源性CGRP。造模后第29天处死动物,颈动脉采血ELISA法测定血浆CGRP含量。HE染色和Masson染色观察肺组织病理学及胶原沉积的变化。免疫组化、q PCR和（或）Western blot法检测肺组织CGRP,α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,E钙粘蛋白（E-cadherin）,紧密连接蛋白-1（ZO-1）,波形蛋白（vimentin）,I型胶原（collagen I）,Notch1,e IF3a mRNA及蛋白表达。结果显示,与对照组相比,博莱霉素组大鼠肺组织结构破坏,肺泡间隔增宽,大量炎性细胞浸润以及成纤维细胞明显增殖,胶原沉积明显增多,同时collagen I,α-SMA,vimentin,Notch1,e IF3a的表达明显升高,而E-cadherin,ZO-1,CGRP的表达及血浆CGRP的水平明显降低（P〈0.05或P〈0.01）。与博莱霉素组相比,不同剂量Rut连续给药4周后能明显改善肺组织损伤,显著降低肺组织胶原的沉积,明显提高E-cadherin,ZO-1,CGRP的表达及血浆CGRP的水平,同时降低collagen I,α-SMA,vimentin,Notch1,e IF3a的表达（P〈0.05或P〈0.01）。而用辣椒素耗竭内源性CGRR后能够取消吴茱萸次碱的这些作用。由此推测,吴茱萸次碱可能通过抑制Notch1/e IF3a信号通路,减缓肺泡上皮细胞EMT的进程,从而缓解博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,此作用与促进CGRP的合成与释放有关。 展开更多
关键词 上皮细胞间质转分化 NOTCH1 eif3a 降钙素基因相关肽 吴茱萸次碱 大鼠
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eIF3a和HE4表达与卵巢癌的相关性 被引量：7
7
作者 王静 罗晨辉 +4 位作者 王瑛 唐雨曦 方铠宁 曾亮 张怡 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1240-1245,共6页
目的:探讨真核细胞翻译起始因子3a(eukaryotic translation initiation factor 3,subunit A,e IF3a)和人附睾蛋白4(human epididymis protein 4,HE4)与卵巢癌发生、发展的关系及e IF3a和HE4表达之间的相关性。方法:分别采用RTPCR和免疫... 目的:探讨真核细胞翻译起始因子3a(eukaryotic translation initiation factor 3,subunit A,e IF3a)和人附睾蛋白4(human epididymis protein 4,HE4)与卵巢癌发生、发展的关系及e IF3a和HE4表达之间的相关性。方法:分别采用RTPCR和免疫组织化学法检测181例卵巢癌患者、卵巢良性肿瘤患者及正常卵巢组织中e IF3a与HE4的m RNA和蛋白表达情况。结果:e IF3a基因和HE4基因在正常卵巢、卵巢良性肿瘤及卵巢癌组织中的m RNA及蛋白表达水平均差异有统计学意义(P<0.05)。e IF3a基因和HE4基因m RNA表达在卵巢癌组织与正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织与正常卵巢组织中差异均有统计学意义(P<0.05);其中正常卵巢组织e IF3a基因m RNA表达水平高于卵巢良性肿瘤和卵巢癌组织,而HE4基因m RNA表达水平从正常卵巢、卵巢良性肿瘤到卵巢癌组织中逐渐升高;HE4基因m RNA表达水平卵巢癌高于卵巢良性肿瘤组织(P<0.001)。e IF3a蛋白在正常卵巢、卵巢良性肿瘤及卵巢癌组织中的阳性表达率分别为0,66.7%和81.0%,HE4蛋白在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织及卵巢癌组织中的阳性表达率分别为0,27.8%和56.2%。e IF3a蛋白和HE4蛋白表达阳性率在卵巢癌组织与卵巢良性肿瘤组织、卵巢癌组织与正常卵巢组织、良性肿瘤组织与正常卵巢组织中差异均有统计学意义(P<0.001)。e IF3a蛋白和HE4蛋白表达水平呈正相关(r=0.35,P<0.05)。结论:e IF3a和HE4的表达与卵巢癌发生相关,二者可能通过细胞外调节蛋白激酶通路相互联系。 展开更多
关键词 eif3a HE4 卵巢癌 相关性
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EIF3h在结直肠癌组织中的表达及临床病理意义 被引量：9
8
作者 吴继华 张建中 +5 位作者 崔彦 冯凯 周金莲 景青萍 尚乐 丁华野 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期2582-2585,共4页
目的探讨真核翻译起始因子3h(eukaryotic translation initiation factor 3 subunit h,EIF3h)在结直肠癌组织中的表达及其临床病理学意义,并分析在结直肠癌组织中EIF3h和Ki-67表达的关系。方法应用免疫组化EnVision法检测76例结直肠癌... 目的探讨真核翻译起始因子3h(eukaryotic translation initiation factor 3 subunit h,EIF3h)在结直肠癌组织中的表达及其临床病理学意义,并分析在结直肠癌组织中EIF3h和Ki-67表达的关系。方法应用免疫组化EnVision法检测76例结直肠癌组织、35例结直肠腺瘤组织、20例距癌10 cm的肠黏膜组织中EIF3h的表达水平。结果 EIF3h在结直肠癌组织、腺瘤组织、距癌10 cm的肠黏膜组织中表达的阳性率分别为86.84%(66/76)、31.43%(11/35)、10.00%(2/20),3组间差异有统计学意义(P<0.01)。EIF3h的表达与肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移相关(P<0.01);与患者的性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关(P>0.05)。结直肠癌组织中EIF3h与Ki-67的表达呈正相关(r=0.42,P<0.01)。结论 EIF3h在结直肠癌组织中呈高表达,提示其可能与结直肠癌的发生、发展密切相关。联合检测EIF3h和Ki-67在结直肠癌中的表达,有助于结直肠癌的诊断和预后的评估。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 eif3h 免疫组化
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翻译调控者eIF3a:最复杂的eIF3亚基 被引量：2
9
作者 肖杨斌 杨运泉 +2 位作者 周厚吾 龚双喜 杨丰帅 《中外医学研究》 2014年第36期161-162,共2页
基因表达调控是细胞生理的一个基本步骤,它的异常可能会导致细胞的无限生长和癌症。m RNA的翻译,其主要的调节步骤是限速起始步骤,许多真核翻译起始因子(e IFs)参与其中。最大最复杂的起始因子是e IF3,它在翻译调控,细胞生长和癌症发生... 基因表达调控是细胞生理的一个基本步骤,它的异常可能会导致细胞的无限生长和癌症。m RNA的翻译,其主要的调节步骤是限速起始步骤,许多真核翻译起始因子(e IFs)参与其中。最大最复杂的起始因子是e IF3,它在翻译调控,细胞生长和癌症发生中都起了一定的作用。e IF3最大的亚基是e IF3a,它在所有组织不同程度的表达,并且发现在许多癌症组织中高表达。e IF3a可以调节细胞周期,可能是蛋白质进入S期的翻译调节器。在分化细胞内e IF3a的表达减少,并且抑制它的表达可以扭转细胞的恶性表型和改变细胞周期调节剂的敏感性。然而,e IF3a在癌症发生中所起的作用仍不清楚。但研究证明其参与了癌症的发展并能阻止肿瘤的恶性进展。 展开更多
关键词 翻译调控 eif3a 复杂 eif3 亚基
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eIF3a与肿瘤的研究进展 被引量：3
10
作者 何晖 尹继业 +1 位作者 周宏灏 刘昭前 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期445-448,共4页
翻译是细胞中基因表达调控的一个基本步骤,该环节的异常可能会导致肿瘤的发生。在真核生物的细胞内,mRNA的翻译受到许多真核起始因子(eukaryotic initiation factor,eIF)的调控。起始因子eIF3在转录调控,细胞生长和肿瘤的发生中发挥了... 翻译是细胞中基因表达调控的一个基本步骤,该环节的异常可能会导致肿瘤的发生。在真核生物的细胞内,mRNA的翻译受到许多真核起始因子(eukaryotic initiation factor,eIF)的调控。起始因子eIF3在转录调控,细胞生长和肿瘤的发生中发挥了重要的作用,它的最大的亚基eIF3a可能作为一个mRNA调节器发挥作用。已发现eIF3a与肿瘤的发生相关,并广泛表达于多种肿瘤组织细胞内,调节肿瘤细胞的周期,但对于进展中的肿瘤细胞,eIF3a的表达可能与肿瘤细胞的进展过程负相关;对于化疗药物干预的肿瘤细胞,eIF3a的高表达使肿瘤细胞不易发生耐药,患者的预后更好。关于eIF3a与肿瘤的关系的研究目前还不是很清楚,eIF3a可能参与了肿瘤的病理生理进程,但其发挥的调节作用可能是波动性的。 展开更多
关键词 eif3a 肿瘤 细胞周期 表达 化疗 预后 调控机制
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降钙素基因相关肽对肺纤维化大鼠肺组织eIF3a、p27表达的影响 被引量：6
11
作者 李先伟 左东泽 +1 位作者 沈媛媛 郝伟 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期16-21,共6页
目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对肺纤维化大鼠肺组织真核翻译起始因子3a(e IF3a)、p27表达的影响,探讨CGRP在肺纤维化中的作用及机制。方法:雄性SD大鼠,体重180~220 g,随机分为3组(n=8):对照组、博莱霉素组、博莱霉素+辣椒素组。采... 目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对肺纤维化大鼠肺组织真核翻译起始因子3a(e IF3a)、p27表达的影响,探讨CGRP在肺纤维化中的作用及机制。方法:雄性SD大鼠,体重180~220 g,随机分为3组(n=8):对照组、博莱霉素组、博莱霉素+辣椒素组。采用气管内注射博莱霉素(5 mg/kg)诱导肺纤维化大鼠模型。造模前4 d大鼠皮下注射辣椒素(Capsaicin)(50 mg/kg·d),造模后第28天处死动物,颈动脉采血ELISA法测定血浆CGRP含量。细胞实验分6组(n=9):Control组,转化生长因子-β1(TGF-β1)组,CGRP(1、10、100 nmol/L)组,CGRP8-37 1μmol/L和CGRP 100 nmol/L组。细胞用CGRP和(或)CGRP8-37预处理1 h,再用TGF-β1(5 ng/ml)处理48 h。5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)法检测细胞增殖。免疫组化、real-time PCR和(或)Western blot检测e IF3a、p27、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、collagenⅠm RNA及蛋白表达。结果:博莱霉素诱发肺纤维化动物肺组织e IF3a、α-SMA及Ⅰ胶原表达增高,CGRP及p27的表达明显降低。外源性CGRP可剂量依赖性的抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞增殖,明显抑制e IF3a、α-SMA、Ⅰ胶原的表达,上调p27的表达,这些作用可以被CGRP阻断剂CGRP8-37所取消。结论:CGRP在博莱霉素诱导的肺纤维化中起着重要作用,可能通过抑制e IF3a、上调p27的表达而抑制肺成纤维细胞的增殖,进而抑制肺纤维化的形成与发展。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 肺纤维化 肺成纤维细胞 eif3a P27 大鼠
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诱导型eIF3g人工microRNA表达载体的构建及应用 被引量：4
12
作者 褚丽莎 韩娜 +1 位作者 宋向阳 曹江 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期135-138,共4页
目的:构建可用四环素调控的针对人eIF3g的人工microRNA表达载体,用于抑制肿瘤细胞中eIF3g的表达。方法:利用网络资源设计针对人eIF3g的人工microRNA,以PCR方法克隆,经DNA测序验证后亚克隆至四环素调控表达系统的pRevTRE2载体上,得到pRev... 目的:构建可用四环素调控的针对人eIF3g的人工microRNA表达载体,用于抑制肿瘤细胞中eIF3g的表达。方法:利用网络资源设计针对人eIF3g的人工microRNA,以PCR方法克隆,经DNA测序验证后亚克隆至四环素调控表达系统的pRevTRE2载体上,得到pRevTRE2-eIF3g-microRNA。将四环素调控表达系统的Tet-off质粒转染K562细胞获得稳定转染克隆后,再利用带有报告基因GFP的pRevTRE2-GFP转染选择调控能力较好的K562/Tet-off细胞株,将pRevTRE2-eIF3g-microRNA转染K562/Tet-off细胞,Westernblot检测eIF3g的表达,以研究eIF3g人工microRNA的作用效果。结果:DNA测序结果显示,针对人eIF3g的人工microRNA的克隆正确。pRevTRE2-GFP转染结果表明所选择的K562/Tet-off细胞株有较好的诱导功能。Westernblot结果显示,转染pRevTRE2-eIF3g-microRNA的K562/Tet-off细胞可用四环素调控eIF3g人工microRNA的表达从而抑制K562细胞中eIF3g的表达。结论:成功构建了可用四环素调控的eIF3g人工mi-croRNA表达载体,能有效调控K562细胞中eIF3g的表达。 展开更多
关键词 eif3g MICRORNA 四环素诱导表达系统
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翻译起始因子EIF3-P66在快速老化模型鼠(SAMP/10)中的异常表达和针刺的调节作用 被引量：5
13
作者 于建春 韩景献 《天津中医药》 CAS 2005年第2期104-107,共4页
[目的]研究真核生物翻译起始因子EIF3-P66在快速老化模型鼠(SAM-P/10)中的表达状况和针刺的调节作用。[方法]采用差别显示(DDRT-PCR)技术,分析SAM-P/10鼠伴加龄脑组织基因表达的变化及针刺的干扰作用。[结果]真核生物翻译起始因子EIF3-... [目的]研究真核生物翻译起始因子EIF3-P66在快速老化模型鼠(SAM-P/10)中的表达状况和针刺的调节作用。[方法]采用差别显示(DDRT-PCR)技术,分析SAM-P/10鼠伴加龄脑组织基因表达的变化及针刺的干扰作用。[结果]真核生物翻译起始因子EIF3-P66的表达伴增龄发生规律性的变化,伴快速老化表达增加,而针刺可下调其表达。同源性分析表明该序列与小鼠及人的翻译起始因子EIF3-P66高度同源。[结论]SAM-P/10的快速老化可能与EIF3-P66的异常表达有关,而针刺延缓衰老的可能机制之一是通过改善EIF3-P66的异常表达,继而减少蛋白质合成异常而发挥作用。 展开更多
关键词 针刺 eif3 衰老相关基因 银染 穴位
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eIF3S10在肺癌组织中的表达及与化疗反应的关系 被引量：7
14
作者 沈杰 李慧华 +4 位作者 张建亭 刘利辉 谭渊明 周宏灏 刘昭前 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2006年第5期369-371,F0002,共4页
目的:研究eIF3S10在肺癌中的表达及其与化疗反应的关系,探讨其在肺癌预后中的作用。方法:收集在湖南省肿瘤医院治疗的31例支气管纤维镜检肺癌组织和20例肺良性病变组织及10例肺癌边缘正常组织的石蜡组织切片。采用免疫组织化学技术检测e... 目的:研究eIF3S10在肺癌中的表达及其与化疗反应的关系,探讨其在肺癌预后中的作用。方法:收集在湖南省肿瘤医院治疗的31例支气管纤维镜检肺癌组织和20例肺良性病变组织及10例肺癌边缘正常组织的石蜡组织切片。采用免疫组织化学技术检测eIF3S10蛋白在肺癌组织、肺良性病变组织和正常肺组织中的表达,并分析eIF3S10表达水平与患者化疗敏感性的关系。结果:肺正常组织和肺良性病变组织中eIF3S10阳性率分别为30%和15%,而肺癌组织中eIF3S10的阳性率达61%。eIF3S10表达水平与化疗敏感性存在一定相关性。结论:肺癌组织中有eIF3S10过表达,而肿瘤组织eIF3S10表达过高可能提示患者对化疗反应敏感。 展开更多
关键词 肺癌 化疗敏感性 eif3S10
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eIF3g差异表达的乳癌细胞模型的建立 被引量：2
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作者 李春春 陈丽红 +2 位作者 叶景佳 张行 曹江 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1226-1231,共6页
真核翻译起始因子3的亚单位eIF3g在一些多药耐药肿瘤细胞中表达上调。背景相近而eIF3g表达有明显差异的肿瘤细胞模型的建立对阐明其作用及机制有重要意义。该研究利用四环素调控的Tet-On Advanced诱导表达系统,分别构建了可诱导过表达... 真核翻译起始因子3的亚单位eIF3g在一些多药耐药肿瘤细胞中表达上调。背景相近而eIF3g表达有明显差异的肿瘤细胞模型的建立对阐明其作用及机制有重要意义。该研究利用四环素调控的Tet-On Advanced诱导表达系统,分别构建了可诱导过表达外源性eIF3g和表达eIF3g人工microRNA的载体,并包装为相应的慢病毒,将慢病毒分别感染乳腺癌细胞Bcap37,经400μg/mLG418和0.4μg/mL Puromycin筛选后,分别获得稳定转染的乳癌细胞克隆Bcap37/Tet-On-eIF3g和Bcap37/Tet-On-eIF3gmiR。将这些细胞克隆分别在1μg/mL DOX的作用下诱导培养72 h,用West-ern blot检测eIF3g的表达。结果显示,Bcap37/Tet-On-eIF3g中eIF3g表达明显增加,Bcap37/Tet-On-eIF3gmiR中eIF3g表达抑制明显。该工作成功建立了可诱导外源性eIF3g过表达和抑制内源性eIF3g表达的乳腺癌细胞模型,为进一步的研究打下了基础。 展开更多
关键词 eif3g 差异表达 乳腺癌 细胞模型
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eIF3a与肿瘤发生、演进和干预的研究进展 被引量：4
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作者 赵敏 罗晨辉 +3 位作者 王瑛 唐雨曦 方铠宁 王静 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第12期2392-2395,2290,共5页
真核翻译起始因子3(Eukaryotic translation factor 3,eIF3)是由多个亚单位组成的复合因子,其中eIF3a是其最大的亚单位。很多研究表明在酵母和哺乳动物细胞中,eIF3都参与了m RNA翻译起始,并对蛋白质的合成有很好的调控作用。值得一提的... 真核翻译起始因子3(Eukaryotic translation factor 3,eIF3)是由多个亚单位组成的复合因子,其中eIF3a是其最大的亚单位。很多研究表明在酵母和哺乳动物细胞中,eIF3都参与了m RNA翻译起始,并对蛋白质的合成有很好的调控作用。值得一提的是eIF3a通过调控一系列与肿瘤的生成、细胞周期的调控DNA修复等过程相关的m RNA的翻译从而在肿瘤的发生、演进和干预中发挥重要作用。此外,研究发现eIF3a对RAF-MEK-ERK信号通路有抑制作用。eIF3a对蛋白质翻译的调节及其对RAF-MEK-ERK信号通路的影响使其有望成为肿瘤治疗的新靶点。本文将着重围绕eIF3a在肿瘤发生、演进和干预中的作用进行概述。 展开更多
关键词 真核翻译起始因子 eif3a 翻译调控 肿瘤
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eIF3a的生物学功能研究进展 被引量：2
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作者 徐潇静 周宏灏 刘昭前 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第2期219-224,共6页
eIF3a是真核翻译起始因子eIF3中最大的亚单位。许多研究表明,在酵母细胞和哺乳动物细胞中,eIF3a都参与了mRNA翻译的起始过程,并在蛋白质翻译起始过程中起重要调控作用。同时,eIF3a参与了细胞周期的调控,它与细胞的生长和分化存在着重要... eIF3a是真核翻译起始因子eIF3中最大的亚单位。许多研究表明,在酵母细胞和哺乳动物细胞中,eIF3a都参与了mRNA翻译的起始过程,并在蛋白质翻译起始过程中起重要调控作用。同时,eIF3a参与了细胞周期的调控,它与细胞的生长和分化存在着重要联系。最近的研究发现,eIF3a与肿瘤的发生、发展、预后和化疗疗效密切相关,且eIF3a基因多态性与恶性肿瘤的易感性也有一定相关性。本文对近年来eIF3a的生物学功能研究进展进行综述。 展开更多
关键词 eif3a 翻译 细胞周期 分化增殖 肿瘤
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BPDE诱发16HBE恶性转化过程中eIF3 p36的表达变化 被引量：1
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作者 冯苏妹 邹晓妮 +2 位作者 魏莲 王敏 雷毅雄 《中国热带医学》 CAS 2008年第9期1492-1494,共3页
目的探讨二羟环氧苯并芘(BPDE)诱发人支气管上皮细胞(16HBE)恶性转化过程中不同阶段真核生物蛋白翻译启始因子(eIF3p36mRNA)表达水平的变化,为进一步阐明BPDE的分子致癌机理提供线索。方法应用RT-PCR和FQ-PCR方法,检测并分析BPDE诱发16... 目的探讨二羟环氧苯并芘(BPDE)诱发人支气管上皮细胞(16HBE)恶性转化过程中不同阶段真核生物蛋白翻译启始因子(eIF3p36mRNA)表达水平的变化,为进一步阐明BPDE的分子致癌机理提供线索。方法应用RT-PCR和FQ-PCR方法,检测并分析BPDE诱发16HBE恶性转化不同阶段的eIF3p36mRNA表达量的变化。结果相对于非转化对照细胞,BPDE诱发恶性转化16HBE不同阶段细胞(转化细胞和成瘤细胞)的eIF3p36mR-NA基因表达水平均显著高于对照组(P<0.01或P<0.05),其中BPDE-转化细胞的eIF3p36平均表达量分别是对照细胞的2.3～5.1倍;而BPDE-转化细胞与BPDE-成瘤细胞的eIF3p36平均表达量相比,差别无显著性(P>0.05),提示eIF3p36的异常表达量与BPDE诱发16HBE细胞恶变程度之间存在一定的正向关系。结论BPDE在诱发16HBE细胞恶变过程中,存在明显的eIF3p36的异常表达现象,其表达水平与细胞的恶变程度密切相关,这可能是BPDE诱发人细胞肿瘤的重要分子致癌机理之一。 展开更多
关键词 二羟环氧苯并芘(BPDE) 人支气管上皮细胞(16HBE) 恶性转化 eif3 P36 FQ—PCR
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翻译起始因子eIF3A调控喉癌顺铂敏感性的试验研究 被引量：2
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作者 郭龙梅 徐雪媚 +2 位作者 蔡勋功 赵东 周彬 《中国实验诊断学》 2020年第11期1856-1859,共4页
目的探讨eIF3A高表达对喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法通过慢病毒感染的方式构建eIF3A高表达的Hep-2稳转细胞及对照Hep-2细胞,两组细胞传代至对数生长期后均利用顺铂进行处理,处理后的24及48h分别计算各组细胞的生长... 目的探讨eIF3A高表达对喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法通过慢病毒感染的方式构建eIF3A高表达的Hep-2稳转细胞及对照Hep-2细胞,两组细胞传代至对数生长期后均利用顺铂进行处理,处理后的24及48h分别计算各组细胞的生长抑制率,处理5天后通过qRT-PCR法检测两组细胞Caspase3mRNA及Survivin mRNA分别的表达情况,最后对各组数据进行统计分析。结果细胞培养24h后,处理组及对照组细胞生长抑制率分别为25.6±5.8及4.1±0.3,差异具有统计学意义(P<0.001);细胞培养48h后,处理组及对照组细胞生长抑制率分别为51.4±7.5及4.0±0.4,差异具有统计学意义(P<0.001)。细胞培养5天后,处理组及对照组细胞Caspase3mRNA表达水平分别为1.93±0.27及0.84±0.14,差异具有统计学意义(P<0.001);处理组及对照组细胞Survivin mRNA表达水平分别为0.52±0.14及1.34±0.17,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论eIF3A高表达能够增加喉癌Hep-2细胞对顺铂的敏感性,调节Caspase3及Survivin的表达。 展开更多
关键词 eif3A 喉癌 CASPASE3 SURVIVIN
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eIF3S10与肿瘤 被引量：1
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作者 沈杰 谭渊明 刘昭前 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2006年第3期216-219,224,共5页
eIF3S10是真核细胞翻译起始因子eIF3最大的亚基,可与多个起始因子亚基相互作用,然而对于其具体的功能意义尚未完全阐明。最近的研究发现,eIF3S10在各肿瘤细胞株以及多种肿瘤,尤其是在各种肺癌组织中过度表达,认为其是细胞分化与增殖调... eIF3S10是真核细胞翻译起始因子eIF3最大的亚基,可与多个起始因子亚基相互作用,然而对于其具体的功能意义尚未完全阐明。最近的研究发现,eIF3S10在各肿瘤细胞株以及多种肿瘤,尤其是在各种肺癌组织中过度表达,认为其是细胞分化与增殖调节过程中重要的功能基因,其异常表达有可能在肿瘤发生发展和维持恶性表型的过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 翻译起始因子 eif3S10 增殖 肿瘤发生
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