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题名葡萄茎痘伴随病毒cDNA探针检测技术研究
被引量:5
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作者
牛建新
李西平
张强
赵英
马兵钢
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机构
石河子大学农学院园艺系
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出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期239-243,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目(30060053
30360066)
+1 种基金
兵团科委项目(NKB02SDXNK01SW)
国家科技攻关计划引导项目(2003BA546C)
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文摘
选取经RT-PCR检测确认带葡萄茎痘伴随病毒的全球红葡萄品种,以葡萄叶片、皮层作为试材,采用SDS法提取高质量总RNA作为模板,以GRSPaV的特异互补引物引导,反转录合成cDNA,通过PCR扩增,获得830 bp的预期目的片段,并将其克隆测序,其同源性与NCBI中的相关序列的同源性达96%。利用克隆质粒合成了生物素标记的GRSPaV的cDNA探针,在此基础上,研究了影响GRSPaV斑点杂交的因素,结果表明当探针浓度为200 ng/mL,甲酰胺浓度为45%,42℃杂交反应4 h,可获得较高灵敏度。
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关键词
葡萄茎痘伴随病毒
CDNA探针
检测
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Keywords
Grapevine Rupestris Stem Pitting associated Virus (GRSPaV)
edna prob
Detection
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分类号
S436.631
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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