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HPV E6/E7 mRNA检测与宫颈细胞学联合筛查对CIN2+病变的诊断价值比较
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作者 余绍兰 关霞 +3 位作者 聂大燕 单丽辉 陈坤 尼珍 《诊断病理学杂志》 2026年第2期219-224,共6页
目的探讨HPV E6/E7 mRNA检测联合宫颈细胞学(TCT)在CIN2+病变筛查中的诊断效能,并比较其与传统HPV DNA检测联合TCT的差异。方法纳入2023年9月至2025年3月在四川省妇幼保健院妇科行HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA分型、TCT及组织学检测的210例... 目的探讨HPV E6/E7 mRNA检测联合宫颈细胞学(TCT)在CIN2+病变筛查中的诊断效能,并比较其与传统HPV DNA检测联合TCT的差异。方法纳入2023年9月至2025年3月在四川省妇幼保健院妇科行HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA分型、TCT及组织学检测的210例女性受检者。以组织学结果为金标准,分别计算mRNA+TCT及DNA+TCT两种并联(任一阳性为阳)与串联(两项均阳为阳)判读模式的灵敏度(Se)、特异性(Sp)、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)及曲线下面积(AUC),采用DeLong法比较AUC差异。结果在并联模式下,mRNA+TCT的敏感性为96.2%,特异性为78.0%,PPV为72.1%,AUC为0.871,均优于DNA+TCT(Sp=65.2%,PPV=61.7%,AUC=0.800,P=0.030)。串联模式下,mRNA+TCT的特异性进一步提高至96.2%,PPV达93.1%,每检出1例CIN2+所需转诊人数(NNC)由1.31降至1.07。亚组分析显示,在OHR-HPV(非16/18型)人群中,mRNA+TCT的特异性较DNA+TCT提高约15%(P=0.002),AUC显著增加(0.909 vs 0.834)。免疫组化结果显示,mRNA阳性病例多伴p16弥漫块状阳性及Ki-67外扩表达,与组织学分级一致。结论HPV E6/E7 mRNA检测联合细胞学在保持高敏感性的同时显著提高筛查特异性和阳性预测值,尤其在非16/18型感染人群中可有效减少假阳性转诊。该策略通过反映病毒致癌活性,为宫颈病变的风险分层与分子病理诊断提供了更具功能性的证据支持,对优化宫颈癌筛查体系具有重要临床与病理学意义。 展开更多
关键词 HPV e6/E7 mRNA 宫颈细胞学 CIN2+ 特异性 分子病理学 诊断效能
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DNA倍体分析与HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈HR-HPV感染患者分流诊断中的应用
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作者 闵保华 马旭辉 +2 位作者 林华龙 李建波 任晓艳 《检验医学与临床》 2026年第4期433-438,444,共7页
目的探讨DNA倍体分析与人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA检测在宫颈高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染患者分流诊断中的应用,比较2种方法在不同级别宫颈病变中的诊断效能。方法回顾性分析该院2022年12月至2024年12月收治的580例HPV感染患者的... 目的探讨DNA倍体分析与人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA检测在宫颈高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染患者分流诊断中的应用,比较2种方法在不同级别宫颈病变中的诊断效能。方法回顾性分析该院2022年12月至2024年12月收治的580例HPV感染患者的临床资料。分析不同宫颈组织病理学分级中HPV E6/E7 mRNA检测与DNA倍体分析的阳性率;以宫颈组织病理学检查为金标准,分析并比较DNA倍体分析与HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈病变中的诊断效能。结果580例患者经HR-HPV分型检测初筛均为阳性。组织病理学检查结果显示,580例患者中炎症或单纯HPV感染291例(50.17%)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)206例(35.52%)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)+宫颈癌83例(14.31%)。DNA倍体分析结果显示,580例患者中阳性459例(79.14%),其中炎症或单纯HPV感染患者DNA倍体分析阳性率为74.91%(218/291),LSIL患者阳性率为83.01%(171/206),HSIL+宫颈癌患者阳性率为84.34%(70/83)。在不同组织病理学分级患者中,DNA倍体分析阳性率随宫颈病变程度加重呈递增趋势(χ^(2)_(趋势)=8.364,P_(趋势)=0.004)。HPV E6/E7 mRNA结果显示,580例患者中阳性401例(69.14%),其中炎症或单纯HPV感染患者的HPV E6/E7 m RNA检测阳性率为47.08%(137/291),LSIL患者阳性率为89.81%(185/206),HSIL+宫颈癌患者阳性率为95.18%(79/83)。在不同组织病理学分级患者中,HPV E6/E7 m RNA阳性率随宫颈病变程度加重呈逐步升高趋势(χ^(2)_(趋势)=104.776,P_(趋势)<0.001)。在炎症或单纯HPV感染患者中,DNA倍体分析阳性率显著高于HPV E6/E7 mRNA检测(P<0.001);在LSIL及HSIL+宫颈癌患者中,HPV E6/E7 mR-NA检测阳性率均明显高于DNA倍体分析(P<0.05)。HPV E6/E7 mRNA检测的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均高于DNA倍体分析(P<0.05)。一致性检验结果显示,DNA倍体分析与组织病理学检查结果一致性较差(Kappa=0.085,P<0.05),HPV E6/E7 mRNA检测与组织病理学检查结果中度一致(Kappa=0.442,P<0.05)。结论HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈HR-HPV感染患者分流中具有更高的诊断效能,可有效区分一过性感染与持续性致癌感染,减少过度诊疗。 展开更多
关键词 宫颈癌 DNA倍体分析 HPV e6/E7 m RNA 分流诊断 灵敏度 高危型人乳头瘤病毒
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HPV E6/E7 mRNA预测宫颈病变、进展及转归的效果
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作者 付玉姣 李碧钦 +2 位作者 黄六英 邓玲娜 凌学民 《吉林医学》 2026年第1期55-57,共3页
目的:研究人乳头瘤病毒(HPV) E6/E7 mRNA在预测宫颈病变、进展及转归的价值。方法:选择2022年2月~2024年2月深圳市龙岗区第二人民医院宫颈病变患者100例,以临床是否确诊为宫颈癌分为非癌变组70例、癌变组30例。测定所有患者HPV E6/E7 m... 目的:研究人乳头瘤病毒(HPV) E6/E7 mRNA在预测宫颈病变、进展及转归的价值。方法:选择2022年2月~2024年2月深圳市龙岗区第二人民医院宫颈病变患者100例,以临床是否确诊为宫颈癌分为非癌变组70例、癌变组30例。测定所有患者HPV E6/E7 mRNA表达水平。以宫颈病理活检诊断为金标准,观察HPV E6/E7 mRNA诊断宫颈癌的敏感性、特异度、准确值、Kappa值及阳、阴性预测值。用Spearman法分析E6/E7 mRNA表达水平与宫颈病变进展(炎性反应、低级别病变、高级别病变、癌)及转归(完全康复、不完全康复、死亡)的相关性。结果:HPV E6/E7 mRNA诊断宫颈癌的敏感度为93.33%,特异性为94.29%,准确值为94.00%,阳性预测值为87.50%,阴性预测值为97.06%,kappa值为0.860。Spearman分析显示,E6/E7 mRNA表达水平与宫颈病变进展、转归呈明显相关关系(P<0.05)。结论:HPV E6/E7 mRNA在预测宫颈病变、进展及转归上有较高价值。 展开更多
关键词 HPV e6/E7 mRNA 宫颈病变 进展 转归
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Effect of Photosensitiser Chlorin E6 on Cancerous Bone Tumor Cells Using Photodynamic Therapy
4
作者 Frank Traub Muhammad A.Panezai +6 位作者 Michaela Moisch Julia Melke Leonard Schöbel Tilmann Busse Fei Xing Jiachen Sun Ulrike Ritz 《Oncology Research》 2026年第3期445-463,共19页
Objectives:Photodynamic therapy(PDT)is a minimally invasive method used in the treatment of various cancers and skin diseases,but it is not widely used in bone cancer,where the current therapy is often not effective a... Objectives:Photodynamic therapy(PDT)is a minimally invasive method used in the treatment of various cancers and skin diseases,but it is not widely used in bone cancer,where the current therapy is often not effective and accompanied by side effects.Alternative and more effective therapies like PDT are needed.In this in-vitro study,the effect of the photosensitizer(PS)chlorin e6(Ce6)on cancerous bone tumor cells using PDT was examined.Methods:A total of 27 tissue specimens from patients with primary bone cancers or bone metastases of different origins were genetically characterized and treated with PDT.Following a 24-h incubation,cell viability was determined,and the effect of PDT on cell migration was analyzed over 48 h.Results:We could demonstrate that the effect on proliferation of PDT in combination with the PS Ce6 was best in cells isolated from primary osteosarcoma and in bone metastases from mammary carcinomas.Besides proliferation,PDT was also effective in inhibiting the migration of these cells.A statistically significant correlation between the PDT effect and CD164 gene expression was detected,indicating that a high expression of this gene could result in a higher effectiveness of the photodynamic treatment.Conclusion:This study analyzes for the first time the effect of PDT in bone cancers and metastases and shows the potential of treating these cancer types with Ce6 PDT. 展开更多
关键词 Photodynamic therapy PHOTOSENSITIZER Chlorin e6 bone cancer bone metastasis Cluster of Differentiation 164
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副干酪乳酪杆菌E6通过其代谢物改善长春瑞滨诱导的斑马鱼免疫抑制
5
作者 许欣筑 郭丽娜 +6 位作者 郑康帝 马燕 林淑娴 何盈犀 盛雯 许素哗 邱峰 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第2期331-339,共9页
目的通过斑马鱼模式生物探究副干酪乳酪杆菌E6改善长春瑞滨诱导免疫抑制的作用机制。方法用异硫氰酸荧光素(FITC)标记副干酪乳酪杆菌E6,在荧光显微镜下观察副干酪乳酪杆菌斑马鱼肠道的定植情况。运用长春瑞滨构建斑马鱼免疫低下模型,分... 目的通过斑马鱼模式生物探究副干酪乳酪杆菌E6改善长春瑞滨诱导免疫抑制的作用机制。方法用异硫氰酸荧光素(FITC)标记副干酪乳酪杆菌E6,在荧光显微镜下观察副干酪乳酪杆菌斑马鱼肠道的定植情况。运用长春瑞滨构建斑马鱼免疫低下模型,分别通过斑马鱼尾部造血组织(CHT)处巨噬细胞、中性粒细胞的生成,胸腺T细胞的生成,以及斑马鱼体内免疫基因白介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达来研究副干酪乳酪杆菌E6的免疫调节活性。运用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)靶向代谢组学技术分别检测副干酪乳酪杆菌E6发酵上清液和副干酪乳酪杆菌E6在斑马鱼体内代谢物短链脂肪酸(SCFAs)的含量。通过斑马鱼免疫低下模型评价SCFAs乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠的免疫调节作用。结果与正常组相比,斑马鱼肠球、中肠和后肠部位均清晰可见FITC标记副干酪乳酪杆菌E6的绿色荧光。与模型组相比,副干酪乳酪杆菌E6缓解长春瑞滨诱导斑马鱼CHT巨噬细胞和中性粒细胞的数量减少(P<0.05),增加斑马鱼体内胸腺T细胞的荧光强度(P<0.05)。同时副干酪乳酪杆菌E6可促进斑马鱼免疫低下模型免疫因子IL-12和IFN-γ基因的表达(P<0.01)。与MRS培养基相比,副干酪乳酪杆菌E6发酵上清液中代谢物SCFAs乙酸、丙酸、丁酸的含量增加(P<0.001)。副干酪乳酪杆菌E6在斑马鱼体内的代谢物SCFAs乙酸、丙酸、丁酸的含量也增加(P<0.05)。SCFAs乙酸钠、丙酸钠均能够增加斑马鱼免疫低下模型CHT处巨噬细胞和中性粒细胞的数量(P<0.001),抑制长春瑞滨诱导斑马鱼胸腺T细胞荧光强度的降低(P<0.01)。结论副干酪乳酪杆菌E6通过其代谢物SCFAs乙酸、丙酸改善长春瑞滨诱导斑马鱼免疫抑制。 展开更多
关键词 副干酪乳酪杆菌e6 代谢物 短链脂肪酸 长春瑞滨 免疫抑制
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PHF5A介导HPV16 E6对宫颈癌细胞生物学特性的影响
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作者 王翠华 张枫 +2 位作者 瞿杰 李敏艳 晏丽 《生物技术》 2025年第4期489-494,共6页
[目的]探究PHF5A介导HPV16 E6对宫颈癌细胞生物学特性的影响。[方法]将宫颈癌HeLa细胞随机分为4组:空白组、siRNA NC组、siRNA PHF5A组和siRNA HPV16 E6组。通过免疫组化分析宫颈癌组织和癌旁的组织PHF5A的表达水平;通过蛋白免疫印迹分... [目的]探究PHF5A介导HPV16 E6对宫颈癌细胞生物学特性的影响。[方法]将宫颈癌HeLa细胞随机分为4组:空白组、siRNA NC组、siRNA PHF5A组和siRNA HPV16 E6组。通过免疫组化分析宫颈癌组织和癌旁的组织PHF5A的表达水平;通过蛋白免疫印迹分析正常宫颈上皮细胞及人宫颈癌细胞中PHF5A的表达差异;通过CCK-8实验分析各组HeLa细胞的增殖能力;通过Transwell实验分析各组HeLa细胞的侵袭能力;通过流式细胞术分析各组HeLa细胞凋亡率;通过蛋白免疫印迹分析HeLa细胞中PHF5A和HPV-16 E6蛋白的表达。[结果]相较于癌旁组织及正常宫颈上皮细胞,宫颈癌组织及宫颈癌细胞中PHF5A表达增加(0.11±0.02 vs 0.37±0.03 vs 0.41±0.050.43±0.01;P<0.05)。与空白组及siRNA NC组比较,si PHF5A组、siRNA HPV16 E6组的HeLa细胞增殖、侵袭能力降低,凋亡率增加(5.52%±0.17%vs 6.23%±0.37%vs 17.18%±1.53%vs 15.32%±1.81%;P<0.05);si PHF5A组、siRNA HPV16 E6组的HeLa细胞的HPV-16 E6蛋白表达均降低(0.88±0.05 vs 0.85±0.08 vs 0.13±0.06 vs 0.22±0.03;P<0.05)。[结论]PHF5A在宫颈癌组织及癌细胞中高表达,下调PHF5A表达后能够抑制HeLa细胞的增殖和侵袭,促进HeLa细胞凋亡。此过程与PHF5A调控HPV16 E6的表达相关。 展开更多
关键词 PHF5A 宫颈癌 增殖 侵袭 凋亡 HPV16 e6 HELA 免疫组化
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人乳头状瘤病毒E6/E7mRNA在宫颈癌筛查中的应用价值
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作者 刘艳 李健美 王鹏 《妇儿健康导刊》 2025年第7期124-127,共4页
目的分析人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA在宫颈癌筛查中的应用价值。方法纳入2023年5月至2024年6月在淄博市妇幼保健院行宫颈癌筛查的女性200例,均进行HPV E6/E7mRNA检测,以病理诊断为金标准,分析检测结果。结果HPV E6/E7mRNA检出阳性101... 目的分析人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA在宫颈癌筛查中的应用价值。方法纳入2023年5月至2024年6月在淄博市妇幼保健院行宫颈癌筛查的女性200例,均进行HPV E6/E7mRNA检测,以病理诊断为金标准,分析检测结果。结果HPV E6/E7mRNA检出阳性101例,阴性99例。经Kappa检验发现,HPV E6/E7mRNA检测与病理结果具有高度一致性(Kappa=0.869,P<0.001)。结论宫颈癌筛查中HPV E6/E7mRNA应用价值较高,可作为宫颈病变筛查和随访管理的有效措施,进一步提高筛查的准确性和有效性。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒e6/E7mRNA 宫颈癌 筛查
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基于小鼠宫颈癌模型的HPV16 E6抗原肽负载树突状细胞治疗效果评价
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作者 古丽巴努·穆海麦提 阿比丹·吐尔汗 +1 位作者 韩莉莉 玛依努尔·尼牙孜 《现代妇产科进展》 2025年第10期733-737,共5页
目的:建立宫颈癌小鼠模型,探讨负载HPV16 E6抗原肽的树突状细胞(DC)的肿瘤抑制效果及免疫应答反应。方法:选取6~8周龄的健康C57BL/6雌性小鼠,通过皮下注射TC-1细胞的方法建立宫颈癌模型,待肿瘤长至15mm时,将小鼠平均分成3组:control组... 目的:建立宫颈癌小鼠模型,探讨负载HPV16 E6抗原肽的树突状细胞(DC)的肿瘤抑制效果及免疫应答反应。方法:选取6~8周龄的健康C57BL/6雌性小鼠,通过皮下注射TC-1细胞的方法建立宫颈癌模型,待肿瘤长至15mm时,将小鼠平均分成3组:control组、DC组、DC+Peptide组。比较各组肿瘤面积,绘制肿瘤生长曲线。从小鼠的脾脏分离出淋巴细胞,流式细胞术检测各组Treg(CD4+CD25+Foxp3+)、IFN-γ表达情况。结果:DC+Peptide组肿瘤面积及重量均显著低于control组及DC组。小鼠脾组织中DC+Peptide组的CD4+IFN-γ、CD8+IFN-γ表达量显著高于control组、DC治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);DC+Peptide组Treg数量显著低于control组及DC治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:负载HPV16 E6突变抗原肽的DC细胞,能有效激活小鼠T淋巴细胞,引发特异性抗肿瘤免疫反应,从而抑制肿瘤生长。 展开更多
关键词 HPV16 e6突变抗原肽 DC细胞 小鼠宫颈癌模型 治疗效果
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人乳头瘤病毒16和18型的E6和E7蛋白多克隆抗体制备及鉴定
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作者 周艳 张婷 +1 位作者 王志荣 许雪梅 《神经药理学报》 2025年第1期1-6,13,共7页
目的:预测人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型和18型的E6及E7蛋白的B细胞线性表位,制备兔抗HPV16和HPV18的E6和E7的多克隆抗体。方法:利用生物信息学软件分析HPV16和HPV18的E6和E7蛋白的氨基酸序列,预测B细胞线性表位,设计并... 目的:预测人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型和18型的E6及E7蛋白的B细胞线性表位,制备兔抗HPV16和HPV18的E6和E7的多克隆抗体。方法:利用生物信息学软件分析HPV16和HPV18的E6和E7蛋白的氨基酸序列,预测B细胞线性表位,设计并人工合成HPV16 E6、HPV16 E7、HPV18 E6及HPV18 E7多肽,将合成肽分别与血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,免疫新西兰大白兔,制备HPV16和HPV18的E6和E7多克隆抗体。以原核系统表达的重组蛋白Flic-HPV16 E6 E7、Flic-HPV18 E6 E7为检测抗原,采用间接ELISA法和Western blot法检测多克隆抗体的效价和特异性。结果:ELISA法检测所制备的HPV16 E6、HPV16 E7和HPV18 E7多克隆抗体的效价可达1:2.56×10^(5),HPV18 E6多克隆抗体效价可达1:1.28×10^(5)。Western blot结果显示,所制备的抗体均能与相应的重组蛋白Flic-HPV16 E6E7和Flic-HPV18 E6 E7特异性结合。结论:采用人工合成肽作为免疫原成功制备了高效价、特异性好的兔抗HPV16和HPV18的E6和E7蛋白多克隆抗体,为后续进行HPV感染检测、疫苗研发等实验研究创造了条件。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 多克隆抗体 e6蛋白 E7蛋白
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光谱法比较二氢卟吩e6和二氢卟吩e6脂质体与牛血清白蛋白的相互作用
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作者 童雨萌 韩菲菲 +5 位作者 徐晨晨 杨芳 王皙钰 刘金咪 刘钰晨 王海萍 《联勤军事医学》 2025年第4期286-292,共7页
目的从光敏剂与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)相互作用的角度探索脂质体形式光敏剂在光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)治疗肿瘤患者中的优势。方法采用光谱法研究光敏剂二氢卟吩e6(chlorin e6,Ce6)与脂质体包裹的光敏剂C... 目的从光敏剂与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)相互作用的角度探索脂质体形式光敏剂在光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)治疗肿瘤患者中的优势。方法采用光谱法研究光敏剂二氢卟吩e6(chlorin e6,Ce6)与脂质体包裹的光敏剂Ce6,即Ce6脂质体(liposome-Ce6,Lipo-Ce6),与BSA的相互作用、结合常数、结合位点和结合方式。小鼠尾静脉注射两种光敏剂,通过检测不同时间点小鼠血清中光敏剂含量,探究两种形式光敏剂在小鼠体内的代谢规律。结果Ce6和Lipo-Ce6均可以自发与BSA相互结合,Ce6与BSA的结合常数为3.111×10^(5),结合位点数为1.204;Lipo-Ce6与BSA的结合常数为1.644×10^(2),结合位点0.549,Ce6和Lipo-Ce6对BSA的荧光淬灭方式均为静态淬灭。Ce6对色氨酸(Tryptophan,Trp)残基附近的极性环境影响较大,而Lipo-Ce6对Trp和酪氨酸(Tyrosine,Tyr)附近的极性环境影响均较大。血清中Lipo-Ce6的荧光强度也随时间延长有所下降,但其下降的速度远小于游离Ce6,Ce6组小鼠血液内药物浓度下降趋势比Lipo-Ce6组更明显(P<0.05)。Lipo-Ce6在小鼠血液内循环时间明显比Ce6时间长。结论Ce6和Lipo-Ce6两种光敏剂均可以与BSA相互结合,但Lipo-Ce6与BSA的结合程度要低于Ce6,脂质体对于Ce6具有一定的保护作用,可提升药物进入病灶部位的效率。 展开更多
关键词 血清白蛋白 二氢卟吩e6 二氢卟吩e6脂质体 光动力疗法 光谱法 相互作用
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原位杂交检测人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA在高危型人乳头瘤病毒分型检测阴性子宫颈高级别鳞状上皮内病变中的表达研究 被引量:2
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作者 刘玉珍 冯慧敏 张友忠 《实用妇产科杂志》 北大核心 2025年第5期393-399,共7页
目的:通过原位杂交检测技术探索高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)分型检测阴性的子宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)是否由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起,进而为子宫颈HSIL的精确诊断及治疗提供新思路。方法:收集2020年1月至2022年10月就诊于山... 目的:通过原位杂交检测技术探索高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)分型检测阴性的子宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)是否由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起,进而为子宫颈HSIL的精确诊断及治疗提供新思路。方法:收集2020年1月至2022年10月就诊于山东第二医科大学附属医院妇科行子宫颈活检或手术治疗的305例子宫颈HSIL患者的病历资料,其中HR-HPV分型检测阴性患者为研究组(15例),阳性患者为对照组(290例)。采用RNAscope原位杂交技术检测两组患者样本中HPV E6/E7 m RNA的表达,并使用染色强度半定量评分分析HPV E6/E7 m RNA的表达情况,同时采用免疫组织化学(IHC)方法检测p16、Ki-67的表达情况。结果:(1)305例HSIL患者中,15例(4.9%)HR-HPV分型检测为阴性。(2)研究组中73.3%(11/15)HPV E6/E7 m RNA呈阳性表达,与对照组100.0%(290/290)比较,差异有统计学意义(P<0.001)。(3)研究组p16的阳性表达率与对照组比较,差异有统计学意义(93.3%vs.100.0%,P=0.049),两组Ki-67阳性表达率均为100.0%。(4)组织病理学类型为子宫颈上皮内瘤变(CIN)2的样本中,研究组HPV E6/E7 m RNA总体评分明显低于对照组,差异有统计学意义(P=0.004);CIN3的样本中,研究组HPV E6/E7 m RNA总体评分虽低于对照组,但差异无统计学意义(P=0.158)。结论:子宫颈癌筛查中,单纯采用HR-HPV分型检测可能导致4.9%的HSIL患者因结果阴性而出现漏诊或误诊。HPV E6/E7 m RNA原位杂交检测技术可能有助于降低HR-HPV分型检测在HSIL中的假阴性率,并辅助预测子宫颈病变的发展方向,进而为实现个体化精准治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 子宫颈 高级别鳞状上皮内病变 人乳头瘤病毒 人乳头瘤病毒e6/E7 mRNA 原位杂交
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新疆地区宫颈癌妇女HPV16 E6基因T细胞抗原表位与HLA分子亲和能力预测 被引量:1
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作者 古丽巴努·穆海麦提 阿比丹·吐尔汗 +1 位作者 韩莉莉 玛依努尔·尼牙孜 《现代妇产科进展》 2025年第7期522-527,共6页
目的:研究新疆地区维、汉族宫颈癌妇女在不同遗传背景下HLA的多态性,分析HPV16 E6突变对T细胞抗原表位的影响,预测HLA分子与T细胞抗原表位的亲和力。方法:收集2017年至2020年于新疆维吾尔自治区人民医院妇科就诊的HPV16阳性宫颈鳞状细... 目的:研究新疆地区维、汉族宫颈癌妇女在不同遗传背景下HLA的多态性,分析HPV16 E6突变对T细胞抗原表位的影响,预测HLA分子与T细胞抗原表位的亲和力。方法:收集2017年至2020年于新疆维吾尔自治区人民医院妇科就诊的HPV16阳性宫颈鳞状细胞癌维吾尔族、汉族患者共52例,获取患者的血液及组织样本;通过高通量测序技术对其进行HLA分型分析,比较各等位基因在两民族中的分布频率;运用IEDB数据库对本研究团队前期研究中所获得的维吾尔族宫颈癌患者的HPV16 E6突变基因进行抗原表位预测及相关分析处理得到其候选表位,再利用NetMHCIIpan 4.0 Server与NetMHCpan 4.0 Server在线软件预测该抗原表位与HLA分子的亲和力变化。结果:新疆地区维、汉族宫颈癌患者之间存在显著差异的HLA基因型共有11个;HPV16 E6突变基因主要与14个T细胞抗原表位的变异有关;HPV16 E6突变导致的T细胞抗原表位112761、112929与HLA分子亲和力显著增强;HPV16 E6突变导致的T细胞抗原表位110846与HLA分子亲和力显著减弱。结论:新疆地区维族宫颈癌妇女HPV16 E6突变导致的T细胞表位的改变,可能是该人群HPV低感染率、宫颈癌高发率的免疫学原因之一。 展开更多
关键词 HPV感染 HLA多态性 HPV16 e6突变 T细胞抗原表位
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稳定表达TMPRSS2蛋白Vero-E6细胞系的建立及其对新型冠状病毒增殖影响的研究
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作者 吴正双 兰婷 +9 位作者 郭瑶 陈合凤 吉克的渠 王雪 温志远 王金良 钟功勋 葛金英 陈伟业 步志高 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第8期860-866,共7页
为构建稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的Vero-E6细胞系,并分析其对新型冠状病毒增殖的影响,本研究采用同源重组的方法,将经PCR扩增获得的TMPRSS2和IRES-mCherry基因克隆至真核表达质粒pCAGGSpuro中,构建重组质粒pCAGGS-TMPRSS2-IRE... 为构建稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的Vero-E6细胞系,并分析其对新型冠状病毒增殖的影响,本研究采用同源重组的方法,将经PCR扩增获得的TMPRSS2和IRES-mCherry基因克隆至真核表达质粒pCAGGSpuro中,构建重组质粒pCAGGS-TMPRSS2-IRES-mCherry,经酶切和测序鉴定正确。将1μg/mL~10μg/mL嘌呤霉素加入Vero-E6细胞中加压培养14 d,每天观察细胞死亡情况。以细胞100%死亡的最低浓度为嘌呤霉素的最适浓度。结果显示,5μg/mL~10μg/mL嘌呤霉素培养的Vero-E6细胞全部死亡,其余浓度嘌呤霉素处理后仍有细胞存活。因此,确定其最适浓度为5μg/mL。将pCAGGS-TMPRSS2-IRES-mCherry转染Vero-E6细胞,并以5μg/mL嘌呤霉素筛选培养72 h,采用有限稀释法将单克隆细胞传代,7 d后通过荧光显微镜观察,选择红色荧光较强且仅有1个细胞形成的集落传代,将获得的细胞命名为Vero-E6-TMPRSS2。采用RT-PCR和western blot分别检测该细胞及其不同代次细胞(第5、10、15和20代)中TMPRSS2基因的转录和蛋白的表达水平。将嵌合病毒VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP分别感染Vero-E6-TMPRSS2细胞和对照Vero-E6细胞,培养至12 h和24 h时观察荧光,并在感染后不同时间取上清液,采用Reed-Muench法测定各时间点病毒的TCID_(50),绘制病毒的生长曲线。RT-PCR结果显示,Vero-E6-TMPRSS2细胞及其不同代次均扩增出1596 bp的目的基因片段;Western blot结果显示,该细胞及不同代次的该细胞均在57.7 ku处出现特异性条带,而对照Vero-E6细胞则无任何基因片段和蛋白条带。荧光观察结果显示,VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP接种后不同时间出现绿色荧光的Vero-E6-TMPRSS2细胞数量均明显多于该病毒接种的Vero-E6细胞;生长曲线结果显示,感染Vero-E6细胞后72 h VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP的病毒滴度最高达10^(6.5)TCID_(50)/mL;而在感染Vero-E6-TMPRSS2细胞后36 h VSVΔGS_(BA.1.1)-EGFP的病毒滴度最高达10^(8.6)TCID_(50)/mL。上述结果表明,本研究首次建立了稳定表达TMPRSS2基因的Vero-E6-TMPRSS2细胞系,且Vero-E6-TMPRSS2细胞通过表达的TMPRSS2显著促进VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP的快速增殖与复制,该结果为后续新冠病毒的基础研究及其疫苗的生产奠定了基础并提供了有力的工具。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 跨膜丝氨酸蛋白酶2 VERO-e6细胞
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宫颈癌HPV E6/E7与表观遗传修饰交互作用的研究进展 被引量:1
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作者 田端成 李琛 +1 位作者 杜铭 向阳 《现代妇产科进展》 2025年第4期308-311,共4页
高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染是宫颈癌发生的主要原因,其整合于宿主基因组是宫颈癌进展中的关键分子事件。近年来,表观遗传修饰被认为是肿瘤进展的关键特征,许多研究显示HPV E6/E7与表观遗传修饰之间存在交互作用。因此,为进一... 高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染是宫颈癌发生的主要原因,其整合于宿主基因组是宫颈癌进展中的关键分子事件。近年来,表观遗传修饰被认为是肿瘤进展的关键特征,许多研究显示HPV E6/E7与表观遗传修饰之间存在交互作用。因此,为进一步了解HPV诱导宫颈癌发生发展的内在机制,本综述围绕DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA和m6A甲基化修饰,总结了HPV E6/E7与表观遗传修饰间的交互作用机制,为挖掘HPV相关宫颈癌筛查和治疗靶点提供新的方向。 展开更多
关键词 宫颈癌 HPV e6/E7 表观遗传修饰
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基于二氢卟吩e6-碳纳米管电化学传感器灵敏检测槲皮素
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作者 张运港 诸葛文凤 +3 位作者 黄青 刘凤平 黄念茹 彭金云 《化学研究与应用》 北大核心 2025年第6期1433-1440,共8页
利用碳纳米管(CNTs)管壁上π电子与二氢卟吩e6(Ce6)环上π电子之间的π-π堆积效应,通过超声处理制备Ce6-CNTs复合材料,基于Ce6-CNTs修饰玻碳电极(Ce6-CNTs/GCE)构建槲皮素电化学传感器。采用电化学阻抗谱法(EIS)、计时库仑法(CC)表征... 利用碳纳米管(CNTs)管壁上π电子与二氢卟吩e6(Ce6)环上π电子之间的π-π堆积效应,通过超声处理制备Ce6-CNTs复合材料,基于Ce6-CNTs修饰玻碳电极(Ce6-CNTs/GCE)构建槲皮素电化学传感器。采用电化学阻抗谱法(EIS)、计时库仑法(CC)表征电极界面,循环伏安法(CV)、差分脉冲伏安法(DPV)研究槲皮素在修饰电极上的电化学行为。研究表明,Ce6-CNTs/GCE相比Ce6/GCE、CNTs/GCE电极对槲皮素具有更好的电催化活性,该传感器实现了槲皮素的灵敏检测,线性范围为0.2~10.0μmol/L,检出限为0.056μmol/L。还探讨了槲皮素电化学过程中电子与质子的转移情况,并提出了槲皮素电氧化还原的机理。该传感器具有良好的稳定性、重复性和选择性,血清样品中槲皮素的加标回收率为89.36%~100.73%,在体内药物分析领域显具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 二氢卟吩e6 碳纳米管 槲皮素 电化学传感器
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基于新版ICH GCP E6(R3)标准下的麻醉用药(品)临床试验风险管理
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作者 张翌韦 华烨 +2 位作者 陈迹 王欣 史琳 《麻醉安全与质控》 2025年第5期365-368,共4页
本文结合新版ICH GCP E6(R3)标准,针对麻醉用药(品)临床试验的风险管理进行探讨。通过分析麻醉用药(品)临床试验的风险特点,提出试验设计、实施、数据治理等阶段的风险管理要点,并强调基于风险的质量管理方法的应用,以提高临床试验质量... 本文结合新版ICH GCP E6(R3)标准,针对麻醉用药(品)临床试验的风险管理进行探讨。通过分析麻醉用药(品)临床试验的风险特点,提出试验设计、实施、数据治理等阶段的风险管理要点,并强调基于风险的质量管理方法的应用,以提高临床试验质量,保障受试者安全,为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 新版ICH GCP e6(R3) 麻醉用药(品) 临床试验 风险管理
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DH3-HPV DNA与Aptima HPV E6/E7 mRNA检测在子宫颈病变中的对比研究
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作者 顾雨佳 吕炳建 《实用妇产科杂志》 北大核心 2025年第4期336-340,共5页
目的:探究DH3-人乳头瘤病毒(HPV)DNA和Aptima HPV E6/E7 mRNA检测在发现子宫颈病变中的应用价值。方法:回顾性收集2022年1月1日至2023年12月31日在浙江大学医学院附属妇产科医院行DH3-HPV DNA、Aptima HPV E6/E7 mRNA检测病例各1254、8... 目的:探究DH3-人乳头瘤病毒(HPV)DNA和Aptima HPV E6/E7 mRNA检测在发现子宫颈病变中的应用价值。方法:回顾性收集2022年1月1日至2023年12月31日在浙江大学医学院附属妇产科医院行DH3-HPV DNA、Aptima HPV E6/E7 mRNA检测病例各1254、8263例,均有子宫颈活检病理随访结果。以子宫颈活检病理结果为金标准,比较DH3-HPV DNA和Aptima HPV E6/E7 mRNA检测低级别鳞状上皮内病变及以上子宫颈病变(LSIL^(+))、高级别鳞状上皮内病变及以上子宫颈病变(HSIL+)的敏感度和特异度。结果:DH3-HPV DNA检测阳性率75.44%(946/1254),Aptima HPV E6/E7 mRNA检测阳性率79.29%(6552/8263)。在年龄≥55岁女性人群中,Aptima HPV E6/E7 mRNA检测阳性率显著高于DH3-HPV DNA[84.70%(1583/1869)vs.76.34%(200/262),P<0.05]。DH3-HPV DNA、Aptima HPV E6/E7 mRNA检测LSIL^(+)的敏感度分别为90.63%(493/544)、91.79%(2953/3217),差异无统计学意义(P>0.05)。DH3-HPV DNA 16/18、Aptima HPV E6/E7 mRNA 16/18/45分型检测LSIL^(+)特异度分别为83.94%(596/710)、85.67%(4323/5046),差异无统计学意义(P>0.05)。DH3-HPV DNA、Aptima HPV E6/E7 mRNA检测HSIL+的敏感度分别为93.94%(124/132)、97.51%(782/802),差异无统计学意义(P>0.05)。Aptima HPV E6/E7 mRNA 16/18/45分型检测HSIL+特异度83.50%(6230/7461),显著高于DH3-HPV DNA 16/18分型检测81.02%(909/1122),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DH3-HPV DNA与Aptima HPV E6/E7 mRNA检测子宫颈病变中敏感度相似,而Aptima HPV E6/E7 mRNA分型检测HSIL+的特异度高于DH3-HPV DNA分型检测;55岁以上女性,Aptima HPV E6/E7 mRNA检测阳性率高于DH3-HPV DNA,可能提示该年龄段人群HPV整合率较高。 展开更多
关键词 子宫颈癌 鳞状上皮内病变 人乳头瘤病毒e6/E7 mRNA 人乳头瘤病毒分型 人乳头瘤病毒DNA
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人体乳头瘤状病毒16 E6/E7介导的circRNA与宫颈癌临床病理关系分析
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作者 马依努尔·艾肯 热依兰木·买赛地 +1 位作者 范玲玲 韩莉莉 《疑难病杂志》 2025年第12期1496-1502,共7页
目的探讨人体乳头瘤状病毒(HPV)16 E6/E7介导的环状RNA(circRNA)与宫颈癌(CC)临床病理特征的关系。方法选取2021年6月—2024年6月新疆维吾尔自治区人民医院妇科医学诊疗中心HPV⁃16检测阳性的CC患者37例为研究对象,取患者癌组织及癌旁组... 目的探讨人体乳头瘤状病毒(HPV)16 E6/E7介导的环状RNA(circRNA)与宫颈癌(CC)临床病理特征的关系。方法选取2021年6月—2024年6月新疆维吾尔自治区人民医院妇科医学诊疗中心HPV⁃16检测阳性的CC患者37例为研究对象,取患者癌组织及癌旁组织病理样本。采用RT⁃PCR法检测差异circRNA水平,并分析其与临床及病理资料之间的相关性。选择正常宫颈HcerEpic细胞培养后植入HPV⁃16 E6/E7,确定HPV⁃16 E6/E7过表达后采用RNA转录组测序技术结合生物信息学分析寻找差异circRNA。结果基于数据库中释放的蛋白编码基因及转录本的注释信息,通过位置信息比对发现HcerEpic细胞中包含的circRNA共计5584个,应用E6/E7过表达慢病毒转染到HcerEpic细胞筛选出445个差异表达circRNA,其中上调296个,下调149个(P<0.05);HcerEpic细胞经HPV⁃16 E6/E7转染后差异circRNA的GO功能分析发现差异显著富集条目主要涉及核质运输、蛋白质定位至细胞核、内质网膜及蛋白酶体等方面,HcerEpic细胞经HPV⁃16 E6/E7转染后差异circRNA的KEGG分析有7条显著差异性富集信号通路(P<0.05);最终得出3个候选差异表达circRNA,分别为表达上调2个:hsa_circ_0052602、hsa_circ_0051620,表达下调1个:hsa_circ_0038475。HPV⁃16阳性CC癌组织hsa_circ_0052602、hsa_circ_0051620表达水平显著高于癌旁组织,hsa_circ_0038475表达水平显著低于癌旁组织(t/P=11.629/<0.001、11.776/<0.001、8.709/<0.001);FIGO分期Ⅲ期、肿瘤低分化、淋巴结转移CC患者hsa_circ_0052602、hsa_circ_0051620表达水平显著高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤中高分化、无淋巴结转移患者,hsa_circ_0038475表达水平显著低于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤中高分化、无淋巴结转移患者(hsa_circ_0052602:t/P=5.408/<0.001、3.076/<0.001、5.884/<0.001;hsa_circ_0051620:t/P=5.603/<0.001、3.320/0.002、5.558/<0.001;hsa_circ_0038475:t/P=2.792/0.008、2.372/0.031、2.895/0.006);hsa_circ_0052602及hsa_circ_0051620是高FIGO分期,低分化CC、淋巴结转移的独立危险因素[hsa_circ_0052602:OR(95%CI)=3.636(1.296~10.201)、25.954(2.307~291.997)、12.159(2.413~61.275);hsa_circ_0051620:OR(95%CI)=2.545(1.127~5.745)、8.271(1.583~43.221)、2.405(1.033~5.589)],hsa_circ_0038475高则是高FIGO分期、低分化CC、淋巴结转移的独立保护因素[hsa_circ_0038475:OR(95%CI)=0.344(0.132~0.902)、0.063(0.005~0.739)、0.162(0.031~0.865)]。结论HPV⁃16 E6/E7介导的circRNA(hsa_circ_0052602、hsa_circ_0051620、hsa_circ_0038475)分别与CC患者的高FIGO分期、低分化程度及淋巴结转移之间存在显著相关性。 展开更多
关键词 宫颈癌 人体乳头瘤状病毒 circRNA e6蛋白 E7蛋白 临床病理特征
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新疆地区人乳头状瘤病毒16型E6基因的遗传变异分析
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作者 李昜 韩莉莉 《新疆医学》 2025年第4期407-411,共5页
目的研究人乳头状瘤病毒(HPV)16型E6基因在新疆地区的基因多态性分布情况。方法收集HPV16阳性患者的宫颈脱落细胞并提取DNA,对样本中E6基因片段进行PCR扩增,用Sanger法测序。运用Snapgene与参考序列进行比对确定突变位点。MEGA 11软件... 目的研究人乳头状瘤病毒(HPV)16型E6基因在新疆地区的基因多态性分布情况。方法收集HPV16阳性患者的宫颈脱落细胞并提取DNA,对样本中E6基因片段进行PCR扩增,用Sanger法测序。运用Snapgene与参考序列进行比对确定突变位点。MEGA 11软件构建系统发育树,PSIpred server预测E6蛋白的结构,利用ABCpred server寻找理想的B细胞免疫表位。结果E6基因测序成功的样本有226个,与参考序列比对后发现4种非同义突变,未发现同义突变,最常见的是T350G(L83V)突变,其次是T178G(D25E)突变,首次在新疆地区发现A275G(N58D)和G395C(D98H)突变。系统发育树显示新疆地区HPV16 E6基因均为A谱系,无B、C和D谱系。HPV16型E6基因突变导致氨基酸的改变,影响蛋白质二级结构中螺旋、折叠等,可能改变E6蛋白的功能。预测发现新的B细胞结合表位。结论新疆地区HPV16型E6基因最常见的突变为T350G(L83V),其次为T178G(D25E),首次在新疆地区发现了A275G(N58D)和G395C(D98H),研究结果为HPV16检测探针、治疗性疫苗的研究和临床应用提供理论基础。 展开更多
关键词 e6基因 HPV16 变异 B细胞表位预测
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乙型肝炎病毒相关肝细胞癌患者E6AP、BAF155表达及临床预后意义
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作者 左博文 张威 +1 位作者 张伟 牛文 《国际检验医学杂志》 2025年第14期1764-1769,共6页
目的探讨乙型肝炎病毒相关肝细胞癌(HBV-HCC)患者E6相关蛋白(E6AP)、BRG1基因相关因子155(BAF155)表达及临床预后意义。方法回顾性收集自2019年1月至2021年2月哈尔滨医科大学附属第一医院诊治的126例HBV-HCC患者作为研究对象。采用实时... 目的探讨乙型肝炎病毒相关肝细胞癌(HBV-HCC)患者E6相关蛋白(E6AP)、BRG1基因相关因子155(BAF155)表达及临床预后意义。方法回顾性收集自2019年1月至2021年2月哈尔滨医科大学附属第一医院诊治的126例HBV-HCC患者作为研究对象。采用实时荧光定量PCR和免疫组化检测HBV-HCC患者癌组织及癌旁组织E6AP、BAF155表达。分析E6AP mRNA、BAF155 mRNA水平与HBV-HCC患者临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析E6AP mRNA、BAF155 mRNA水平对HBV-HCC患者生存预后的影响。COX回归分析影响HBV-HCC患者生存预后的因素。结果相比于癌旁组织,HBV-HCC患者癌组织E6AP mRNA和蛋白阳性率较低,而BAF155 mRNA和蛋白阳性率较高,差异有统计学意义(P<0.05)。相比于中国肝癌分期方案(CNLC)Ⅰ期、肿瘤最大径<5 cm及HBV-DNA阴性,CNLCⅡ~Ⅲ期、肿瘤最大径≥5 cm及HBV-DNA阳性的HBV-HCC癌组织中E6AP mRNA较低,BAF155 mRNA较高,差异有统计学意义(P<0.05)。E6AP mRNA高表达组、低表达组3年生存率为67.19%(43/64)、38.71%(24/62),差异有统计学意义(Log rankχ^(2)=10.540,P=0.001)。BAF155 mRNA高表达组、低表达组3年生存率为42.62%(26/61)、63.08%(41/65),差异有统计学意义(Log rankχ^(2)=6.876,P=0.009)。多因素COX分析结果显示,CNLCⅡ~Ⅲ期、BAF155 mRNA是影响HBV-HCC预后的危险因素,E6AP mRNA是其保护因素。结论HBV-HCC患者E6AP表达下调,BAF155表达上调,检测E6AP、BAF155表达有助于评估HBV-HCC患者的预后。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒相关性肝癌 e6相关蛋白 BRG1基因相关因子155 预后
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