番鸭细小病毒和鹅细小病毒的抗原相关性研究 被引量：17

1

作者 程晓霞 陈仕龙 +3 位作者 陈少莺 林锋强 王劭 朱小丽 《福建农业学报》 CAS 2013年第9期869-871,共3页

应用微量交叉中和试验(NT)和胶乳凝集抑制试验(LPAI)比较番鸭细小病毒、鹅细小病毒和番鸭源鹅细小病毒之间的抗原相关性。结果显示:3种病毒与同源抗血清的中和效价和LPAI效价均明显高于异源血清;番鸭细小病毒与番鸭源鹅细小病毒、鹅细... 应用微量交叉中和试验(NT)和胶乳凝集抑制试验(LPAI)比较番鸭细小病毒、鹅细小病毒和番鸭源鹅细小病毒之间的抗原相关性。结果显示:3种病毒与同源抗血清的中和效价和LPAI效价均明显高于异源血清;番鸭细小病毒与番鸭源鹅细小病毒、鹅细小病毒之间的R值均小于0.1;番鸭源鹅细小病毒与鹅细小病毒的R值大于0.25。结果表明番鸭细小病毒与鹅细小病毒(番鸭源或鹅源)的抗原相关性较低,提示番鸭源鹅细小病毒与鹅细小病毒属于同一血清型的不同亚型。 展开更多

关键词 番鸭细小病毒 番鸭源鹅细小病毒 鹅细小病毒 抗原相关性

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鸭呼肠孤病毒自然感染肉鸭的病毒分布与病理学观察 被引量：8

2

作者 赵赫 李爽 +4 位作者 谷长勤 张万坡 程国富 刘晓丽 胡薛英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期119-123,共5页

为了解2006-2010年湖北省地区暴发的鸭呼肠孤病毒感染的病理特征,地域性特点,运用病理剖检、常规石蜡切片及HE染色、免疫组织化学等技术对鸭呼肠孤病毒自然感染病鸭进行研究。剖检眼观病变表现为肝、脾表面出现大量黄白色病灶,组织学病... 为了解2006-2010年湖北省地区暴发的鸭呼肠孤病毒感染的病理特征,地域性特点,运用病理剖检、常规石蜡切片及HE染色、免疫组织化学等技术对鸭呼肠孤病毒自然感染病鸭进行研究。剖检眼观病变表现为肝、脾表面出现大量黄白色病灶,组织学病变为肝、脾出血、坏死与肉芽肿形成,免疫组织化学检测结果显示所感染病鸭脾均出现特异性阳性信号,而肝和法氏囊仅部分出现阳性信号。由以上结果推测可知湖北省鸭呼肠孤病毒感染特征表现为肝脾坏死。 展开更多

关键词 鸭源呼肠孤病毒 自然感染 病理变化

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鸭源呼肠孤病毒与沙门菌共感染雏鸭的免疫器官的动态病理学观察 被引量：5

3

作者 赵赫 何莉 +4 位作者 李美霞 谷长勤 张万坡 程国富 胡薛英 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期650-655,共6页

观察了鸭源呼肠孤病毒与沙门菌共感染对雏鸭脾、法氏囊的病理损伤及法氏囊IgY抗体生成细胞数的变化,为进一步探讨鸭源呼肠孤病毒感染的发病机理和免疫防治提供理论依据。雏鸭被分成4组,即对照组、呼肠孤病毒感染组、沙门菌感染组和混合... 观察了鸭源呼肠孤病毒与沙门菌共感染对雏鸭脾、法氏囊的病理损伤及法氏囊IgY抗体生成细胞数的变化,为进一步探讨鸭源呼肠孤病毒感染的发病机理和免疫防治提供理论依据。雏鸭被分成4组,即对照组、呼肠孤病毒感染组、沙门菌感染组和混合感染组,于8日龄对呼肠孤病毒感染组和混合感染组雏鸭接种鸭源呼肠孤病毒,13日龄对沙门菌感染组和混合感染组雏鸭接种鸭源沙门菌。分别于13、14、16和20日龄每组剖杀6只,观察各组脾、法氏囊和胸腺的病理变化、法氏囊IgY抗体生成细胞的数量变化特点。结果显示,呼肠孤病毒感染后脾、法氏囊和胸腺出现不同程度损伤,组织内出现明显坏死灶,之后出现肉芽肿结构,法氏囊固有层淋巴滤泡明显减少。混合感染组的病变明显重于其他单独感染组,法氏囊IgY抗体生成细胞数低于对照组。结果表明,呼肠孤病毒感染雏鸭后引起机体免疫抑制,增大了细菌的继发感染。 展开更多

关键词 鸭源呼肠孤病毒 法氏囊 胸腺 脾 免疫组织化学 IGY

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鸭源流感病毒感染对鸡和家鸭红细胞免疫功能的影响 被引量：8

4

作者 林祥梅 赵增连 +1 位作者 沈红 陈万芳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期135-137,共3页

采用商品来航鸡、樱桃谷鸭分别接种鸭源流感病毒株 A/duck/Nanjing/2 1 /95( H9N?) ,研究了禽流感病毒 ( AIV)感染对红细胞免疫功能的影响。结果发现 ,流感发生与红细胞 CR1花环率之间存在着反向关系 ;正常鸭的红细胞 CR1花环率极显著... 采用商品来航鸡、樱桃谷鸭分别接种鸭源流感病毒株 A/duck/Nanjing/2 1 /95( H9N?) ,研究了禽流感病毒 ( AIV)感染对红细胞免疫功能的影响。结果发现 ,流感发生与红细胞 CR1花环率之间存在着反向关系 ;正常鸭的红细胞 CR1花环率极显著高于正常鸡的红细胞 CR1花环率 ,即使接种 AIV后 ,鸭红细胞 CR1花环率有所下降 ,但也显著高于正常鸡的红细胞 CR1花环率。这些结果表明 ,鸭的红细胞免疫功能在一定意义上比鸡的红细胞免疫功能强 ,这从红细胞免疫功能这一侧面探讨了鸭对 AIV感染表现为无症状 。 展开更多

关键词 鸭源流感病毒 鸭 鸡 红细胞 免疫功能

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福建省番鸭小鹅瘟流行毒株病原学研究 被引量：7

5

作者 林锋强 程晓霞 +2 位作者 朱小丽 陈少莺 江丹丹 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期796-801,共6页

【目的】旨在研究福建省番鸭小鹅瘟病流行毒株及病毒遗传变异状况。【方法】从福建省番鸭主要饲养区收集临床疑似番鸭小鹅瘟病例30份,进行病原学检测、病原分离、病毒感染试验、基因片段序列分析。【结果】显示30份疑似病例中有15份为... 【目的】旨在研究福建省番鸭小鹅瘟病流行毒株及病毒遗传变异状况。【方法】从福建省番鸭主要饲养区收集临床疑似番鸭小鹅瘟病例30份,进行病原学检测、病原分离、病毒感染试验、基因片段序列分析。【结果】显示30份疑似病例中有15份为番鸭源鹅细小病毒(Muscovy duck-origin goose parvovirus,MDGPV)感染,占比50%。分离到的15株MDGPV均能致死番鸭胚,番鸭感染后发病率为60%~100%,死亡率为40%~60%。15株MDGPV分离毒VP 1基因核苷酸同源性在99.5%以上,与MDGPV-PT株同源性在96%以上,未发生碱基缺失、插入或基因重组,较为稳定;而与番鸭细小病毒MDPV-P株同源性小于90%。进化树分析显示15株分离毒与MDGPV-PT株属于同一分支,而与MDPV-P株属于不同分支。【结论】福建省2018年流行的MDGPV毒株与1997年分离的MDGPV-PT株致病性和基因序列特性相似,无明显变化,生物学特性和基因组特性比较稳定,遗传变异程度小。 展开更多

关键词 番鸭小鹅瘟 番鸭源GPV 流行毒株 病原

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基于线粒体DNA 16S rRNA基因鉴别畜禽肉中鸭源性成分研究 被引量：6

6

作者 张晶鑫 樊艳凤 +4 位作者 唐修君 贾晓旭 葛庆联 陆俊贤 高玉时 《中国家禽》 北大核心 2016年第17期41-44,共4页

研究以鸭线粒体16S rRNA基因序列为靶位点设计特异性引物,以常见畜禽肉包括牛肉、羊肉、猪肉、兔肉、鸽肉、鹌鹑肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉等参考动物肌肉DNA为模板,进行常规PCR和荧光定量PCR扩增,建立鸭源性成分检测方法;并将鸭肉DNA模板浓... 研究以鸭线粒体16S rRNA基因序列为靶位点设计特异性引物,以常见畜禽肉包括牛肉、羊肉、猪肉、兔肉、鸽肉、鹌鹑肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉等参考动物肌肉DNA为模板,进行常规PCR和荧光定量PCR扩增,建立鸭源性成分检测方法;并将鸭肉DNA模板浓度进行8个梯度稀释,检测方法灵敏度。结果显示,所设计的引物对能够有效地对鸭源性成分进行快速检测,具有较强的特异性,方法灵敏度较高,可达pg级,可快速准确地检测畜禽肉中鸭源性成分。 展开更多

关键词 鸭源性成分 荧光定量PCR 线粒体DNA 16 S RRNA 检测

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鸭源H9N2 AIV血凝素基因序列比较 被引量：5

7

作者 万春和 傅光华 +6 位作者 程龙飞 施少华 陈红梅 彭春香 林芳 林建生 黄瑜 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期158-164,共7页

为明确国内外鸭源H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)血凝素基因(hemagglutinin,HA)的遗传进化关系、血凝素蛋白裂解位点的氨基酸结构特征和血凝素蛋白受体结合位点的氨基酸变异特征,本研究选取GenBank中登录鸭源H9N2亚型AI... 为明确国内外鸭源H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)血凝素基因(hemagglutinin,HA)的遗传进化关系、血凝素蛋白裂解位点的氨基酸结构特征和血凝素蛋白受体结合位点的氨基酸变异特征,本研究选取GenBank中登录鸭源H9N2亚型AIV HA基因,通过MEGA4.1进行比对和分析,并绘制其遗传进化树。结果表明,鸭源H9N2亚型AIV在遗传进化上分为2大谱系:即Ck-Bj-1-94-like和North-Ame-like,中国大陆鸭源H9N2亚型AIV和亚欧美其它国家鸭源H9N2亚型AIV在遗传进化上分居完全不同的谱系,相互之间遗传进化关系较远。从血凝素受体结合位点看,亚欧美国家鸭源H9N2亚型AIV在第183、190和226位点的氨基酸均为鸭源AIV经典H、E和Q,且高度保守。但中国大陆地区H9N2亚型AIV第183位为N;第190位为A or V or T,与中国大陆鸡源H9N2亚型AIV一致;第226位中国鸭源H9N2亚型AIV有相当一部分为L,且近年福建省H9N2亚型AIV分离株在此处均为L。提示我们,中国大陆地区H9N2亚型AIV鸭鸡和鸡鸭相互交叉感染较为普遍。 展开更多

关键词 鸭源H9N2亚型禽流感病毒 血凝素 遗传进化 受体结合位点 分子特征

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利用PCR技术鉴别畜禽肉中鸭源性成分研究 被引量：7

8

作者 张晶鑫 高玉时 +4 位作者 樊艳凤 唐修君 贾晓旭 顾荣 陆俊贤 《安徽农业科学》 CAS 2015年第34期202-203,322,共3页

[目的]建立一种快速准确的鸭源性成分检测方法。[方法]分别以线粒体16S rRNA基因和COⅠ基因序列为靶位点设计鸭特异性引物,以常见畜禽肉(羊肉、牛肉、猪肉、兔肉、鸽肉、鹌鹑肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉)DNA为模板,进行PCR扩增,检测引物的特... [目的]建立一种快速准确的鸭源性成分检测方法。[方法]分别以线粒体16S rRNA基因和COⅠ基因序列为靶位点设计鸭特异性引物,以常见畜禽肉(羊肉、牛肉、猪肉、兔肉、鸽肉、鹌鹑肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉)DNA为模板,进行PCR扩增,检测引物的特异性和灵敏度。[结果]筛选的引物能够有效地对鸭源性成分进行检测,方便简洁,灵敏度较高。[结论]该方法能够快速有效地鉴别畜禽肉中鸭源性成分。 展开更多

关键词 鸭源性成分 16S RRNA基因 COⅠ基因 PCR 鉴别

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H5N1亚型禽流感病毒的鸭致病性研究 被引量：25

9

作者 刘超男 刘明 +2 位作者 张云 刘春国 高雪丽 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期412-417,共6页

【目的】为了验证H5N1亚型禽流感病毒对鸭是否具有致病作用。【方法】对2003年某地方养鹅场发病鹅群分离的一株H5N1亚型流感病毒A/Goose/HLJ/QFY/2003的生物学特性和致病性进行研究。【结果】动物实验表明该病毒对不仅对鸡具有高致病性(... 【目的】为了验证H5N1亚型禽流感病毒对鸭是否具有致病作用。【方法】对2003年某地方养鹅场发病鹅群分离的一株H5N1亚型流感病毒A/Goose/HLJ/QFY/2003的生物学特性和致病性进行研究。【结果】动物实验表明该病毒对不仅对鸡具有高致病性(IVPI=3),而且对鸭也具有高致病性。雏鸭人工感染该病毒后临床表现典型的神经症状,剖检可见脑膜点状出血,肝脾肿大并见有坏死灶,肺脏严重充血、出血,消化道粘膜弥散性出血。病理组织学检查发现全身各脏器以出血、充血、细胞变性坏死和炎性细胞浸润为主要特征,并表现为不同程度的损伤。感染鸭死亡集中在感染后的4～6d,致死率75%。雏鸭在病毒感染后2～4d的气管、泄殖腔及全身各主要器官均可分离到病毒。虽然攻毒后14d耐过鸭血清中可检测到1∶16的HI抗体;但是此时胰腺中仍然可分离到低水平的病毒。【结论】本研究继从野鸟分离到对鸭具有高致病性禽流感病毒之后,首次证实家禽中也存在对鸭具有高致病性的禽流感病毒流行。 展开更多

关键词 禽流感病毒 鸭流感 鹅源 H5N1亚型

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H9N2亚型禽流感病毒对樱桃谷肉鸭的致病性 被引量：6

10

作者 王蛟 刁有祥 +4 位作者 孙晓艳 郝东敏 刘鑫 葛平萍 鲁爱玲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1732-1737,共6页

为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)对樱桃谷肉鸭的致病性。本试验利用1株鸭源H9N2亚型AIV分别通过静脉注射和鼻内接种途径感染2周龄健康樱桃谷肉鸭,观察感染鸭的症状、排毒规律及组织学变化,流式细胞术分析外周血CD4+和CD8+T细胞变化规律... 为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)对樱桃谷肉鸭的致病性。本试验利用1株鸭源H9N2亚型AIV分别通过静脉注射和鼻内接种途径感染2周龄健康樱桃谷肉鸭,观察感染鸭的症状、排毒规律及组织学变化,流式细胞术分析外周血CD4+和CD8+T细胞变化规律,实时荧光定量(RT-qPCR)检测脾脏中细胞因子的表达水平,并测定血清HI抗体效价。结果显示,攻毒后,静脉注射组鸭出现体质量增长显著缓慢、呼吸道症状以及全身性感染,而鼻内接种组鸭无明显临床症状,仅发生局部感染;两攻毒组鸭泄殖腔较气管排毒量高且排毒时间长;外周血CD8+T细胞显著升高,并且脾脏IFNA、IFNB、IFNG和IL2表达水平上调,IL1B和IL6表达水平仅在静脉注射组上调;血清HI抗体水平低且维持时间短。结果表明,在实验室条件下,H9N2亚型AIV对樱桃谷肉鸭致病力较弱,仅静脉接种组引起鸭体质量增长缓慢及呼吸系统出血、淋巴细胞浸润。 展开更多

关键词 H9N2亚型禽流感 樱桃谷肉鸭 流式细胞术 实时荧光定量

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PCR-mtDNA技术鉴别检测不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分 被引量：17

11

作者 张娟 宗卉 张利平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1832-1836,共5页

以鸭肌肉组织DNA为模板,利用PCR-mtDNA技术成功克隆出了鸭mtDNA COⅢ基因(GenBank Accession No.DQ655706)。对所克隆的序列分析表明,其序列包括鸭细胞色素C氧化酶Ⅲ(COⅢ)基因全序列784 bp,通过同源性分析可知,动物的线粒体DNA COⅢ基... 以鸭肌肉组织DNA为模板,利用PCR-mtDNA技术成功克隆出了鸭mtDNA COⅢ基因(GenBank Accession No.DQ655706)。对所克隆的序列分析表明,其序列包括鸭细胞色素C氧化酶Ⅲ(COⅢ)基因全序列784 bp,通过同源性分析可知,动物的线粒体DNA COⅢ基因是相对保守的,利用此特性设计PCR-mtDNA方法鉴别检测鸭源性成分的特异性引物;以各种动物肌肉组织及饲料DNA为模板进行PCR扩增、经反复验证筛选出只能扩增出鸭DNA的目的片段,而不能扩增出其他动物DNA片段的特异性强、稳定性好的引物P3、P4;利用此引物PCR扩增鸭DNA的特异性片段为226 bp,对PCR产物进行测序分析可知与已克隆的鸭mtDNA COⅢ基因同源性达到100%,证明了所筛选引物的准确性。通过对不同含量的DNA模板溶液进行PCR扩增的方法,对筛选出的特异性引物P3、P4进行灵敏度试验,结果分析表明灵敏度约为0.001%,证明该PCR方法具有特异性强、灵敏度高的特点,完全可作为鉴别不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分的方法。 展开更多

关键词 鸭源性成分 鉴别检测 线粒体DNA 细胞色素C氧化酶Ⅲ基因 不同动物肌肉组织和饲料 克隆

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一株鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Shanghai/Y20/2006的全基因组序列测定及遗传演化分析 被引量：5

12

作者 杨德全 葛菲菲 +4 位作者 刘健 鞠厚斌 王建 刘佩红 周锦萍 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期815-822,共8页

为了解鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Shanghai/Y20/2006(DK/SH/Y20/06)的来源、特征及其分子演化规律,进一步丰富水禽流感病毒的基因库,对该病毒8个基因片段分别进行了扩增和序列测定,利用分子生物学软件对测序结果进行序列分析,并与Ge... 为了解鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Shanghai/Y20/2006(DK/SH/Y20/06)的来源、特征及其分子演化规律,进一步丰富水禽流感病毒的基因库,对该病毒8个基因片段分别进行了扩增和序列测定,利用分子生物学软件对测序结果进行序列分析,并与GenBank登录的相关病毒进行了遗传演化分析。结果表明,DK/SH/Y20/06的HA基因切割位点附近的氨基酸序列(PEKASR↓GLF)符合低致病力AIV的特征,其分子遗传演化关系属于欧亚分支;NA基因与A/mallard/Yanchen/2005(H4N6)在同一分支内,核苷酸序列同源性为98.3%;而PB2、PB1、NP、PA基因与目前在国内流行的H6亚型禽流感病毒关系密切;M基因与A/environment/Korea/CSM05/2004(H3N1)处于同一分支;而NS基因与A/wild duck/Korea/YS44/2004(H1N2)同源性最高。且DK/SH/Y20/06的8个基因与美洲H4N6亚型AIV分离株均不处在同一遗传进化分支上,相互之间遗传关系较远。可见,DK/SH/Y20/06可能是由H4N6、H6N2、H6N5、H3N1和H1N2等不同亚型来源的基因在鸭体内经过复杂重组演变的一株重组病毒。 展开更多

关键词 鸭源禽流感病毒 H4N6亚型 全基因组序列 遗传演化分析 基因重组

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鸭肉冒充牛羊肉的分子生物学检测 被引量：19

13

作者 王建昌 王金凤 +1 位作者 陈瑞春 田振祥 《肉类研究》 2012年第6期20-23,共4页

针对送检牛肉和羊肉样品,设计合成检测动物源性成分的通用引物,并对PCR产物测序后在NCBI数据库中进行比对;根据牛、羊、鸭源性成分检测的相关标准,合成引物和探针,进行送检样品中牛、羊和鸭源性成分的实时荧光PCR检测。结果表明:在7份... 针对送检牛肉和羊肉样品,设计合成检测动物源性成分的通用引物,并对PCR产物测序后在NCBI数据库中进行比对;根据牛、羊、鸭源性成分检测的相关标准,合成引物和探针,进行送检样品中牛、羊和鸭源性成分的实时荧光PCR检测。结果表明:在7份送检样品中4份检测到鸭源性成分,2份检测到牛源性成分,1份检测到羊源性成分。实时荧光PCR方法灵敏性更高、特异性更强、结果判定更为迅速。 展开更多

关键词 鸭源性成分 通用引物 实时荧光PCR

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家鸭流感病毒的流行病学研究 Ⅱ.鸭源A型流感病毒对鹌鹑与鸡的致病性 被引量：3

14

作者 赵增连 陈溥言 +1 位作者 林祥梅 蔡宝祥 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期212-215,共4页

利用６株鸭源Ａ型流感病毒（ＡＩＶ）的鸡胚传１代、２代或３代尿囊液，采用滴鼻－点眼、腹腔注射、静脉注射或肌注－腹注等途径，分别对鹌鹑、商品来航鸡、ＳＰＦ来航鸡进行人工感染。结果，鹌鹑５０％发病，无死亡；商品鸡１００％发... 利用６株鸭源Ａ型流感病毒（ＡＩＶ）的鸡胚传１代、２代或３代尿囊液，采用滴鼻－点眼、腹腔注射、静脉注射或肌注－腹注等途径，分别对鹌鹑、商品来航鸡、ＳＰＦ来航鸡进行人工感染。结果，鹌鹑５０％发病，无死亡；商品鸡１００％发病，死亡６２．５％；ＳＰＦ鸡１００％发病，死亡９２．４％。结果显示，腹腔注射和静脉注射最为有效，滴鼻、点眼的致病效果同样确实。本试验发现雄禽比雌禽易感，发病率高。试验表明，鸭源弱致病性流感病毒对其他禽类存在致病潜力，因而具有一定的流行病学意义及生态学意义。 展开更多

关键词 鸭源A型 流感病毒 流行病学 生态学

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鸭源H7N9亚型禽流感病毒感染SPF鸡转录组学分析 被引量：2

15

作者 施少华 陈珍 +6 位作者 程龙飞 傅光华 傅秋玲 刘荣昌 万春和 陈红梅 黄瑜 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期886-893,共8页

目的为了分析鸭源H7N9亚型禽流感病毒感染SPF鸡后宿主基因表达水平的变化。方法以鸭源H7N9亚型禽流感病毒感染SPF鸡,收集肺脏进行高通量测序。结果与对照组相比,感染组得到差异表达基因740个,其中上调基因有602个,下调基因有138个。GO... 目的为了分析鸭源H7N9亚型禽流感病毒感染SPF鸡后宿主基因表达水平的变化。方法以鸭源H7N9亚型禽流感病毒感染SPF鸡,收集肺脏进行高通量测序。结果与对照组相比,感染组得到差异表达基因740个,其中上调基因有602个,下调基因有138个。GO条目分析发现,差异基因主要涉及免疫应答反应和炎症反应等。经KEGG数据库比对注释及富集分析显示有7个通路富集显著,其中Toll-like信号通路有11个基因表达上调,分别为IL-6、TLR4、PIK3、IRF7、MD-2、IRF5、MYD88、CD86、STAT1、TLR2和CCL4,NOD-like受体信号通路有7个基因表达上调,分别为IRF7、CTSB、P2RX7、CYBB、PSTPIP1、HSP90AA1和NAMPT。结论鸭源H7N9亚型病毒感染SPF鸡后,免疫相关基因表达明显增强。在Toll-like信号通路中,TLR4在MD-2的协助下被激活,随后依赖MYD88途径激活下游的IRF5,继而引起CCL4、IL-6显著表达。同时NLRP3炎症体在H7N9亚型病毒感染过程中也发挥着重要作用。 展开更多

关键词 鸭源 禽流感病毒 H7N9亚型 转录组学

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鸭源基因Ⅸ型禽1型副黏病毒实时荧光定量RT-PCR方法的建立与应用 被引量：3

16

作者 白泉阳 傅光华 +7 位作者 程龙飞 傅秋玲 刘荣昌 施少华 陈红梅 万春和 林建生 黄瑜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1868-1873,共6页

我国水禽中流行的禽1型副黏病毒(APMV-1)除基因Ⅶ外,基因Ⅸ型APMV-1日渐增多,且呈现基因型多样性。本研究基于鸭源基因Ⅸ型APMV-1的F基因特异性序列,建立了一种可快速检测基因Ⅸ型APMV-1的实时荧光定量RT-PCR方法。该方法仅能特异性检... 我国水禽中流行的禽1型副黏病毒(APMV-1)除基因Ⅶ外,基因Ⅸ型APMV-1日渐增多,且呈现基因型多样性。本研究基于鸭源基因Ⅸ型APMV-1的F基因特异性序列,建立了一种可快速检测基因Ⅸ型APMV-1的实时荧光定量RT-PCR方法。该方法仅能特异性检出基因Ⅸ型APMV-1,其检测敏感性高达100拷贝/μL,重复试验批间变异系数小于5%;应用该方法对人工感染鸭组织和采集的临床样品分别进行检测,其结果与常规RT-PCR检测、病毒分离结果的符合率分别为100.0%,96.1%和90.1%,81.8%。以上结果表明,本研究建立的基因Ⅸ型APMV-1实时荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,为该病临床样品检测提供了快速有效的手段,适于鸭源基因Ⅸ型APMV-1感染的病原学监测。 展开更多

关键词 鸭源禽1型副黏病毒 基因Ⅸ型 TAQMAN探针 实时荧光定量RT-PCR

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鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株S2基因的序列分析及其表达 被引量：11

17

作者 刘红 郁宏伟 +3 位作者 朱朝辉 吴志新 李苏芝 廖明 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期224-228,共5页

采用RT-PCR方法从鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株中扩增出了S2基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a(+)中,测序验证后转化入表达宿主菌RosettaTM2(DE3)plysS,进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达出相对分子质量约为50 000的重组融合蛋白,... 采用RT-PCR方法从鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株中扩增出了S2基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a(+)中,测序验证后转化入表达宿主菌RosettaTM2(DE3)plysS,进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达出相对分子质量约为50 000的重组融合蛋白,在浓度为0.6 mmol/L的IPTG诱导4 h的情况下表达效果最好。表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白。经Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗呼肠孤病毒DRV-GZ株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有较好的反应原性。 展开更多

关键词 鸭源呼肠孤病毒 S2基因 克隆 原核表达 纯化 免疫印迹

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鸭源NDV对SPF鸭免疫机能的影响 被引量：2

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作者 崔京腾 刁有祥 +2 位作者 王蛟 孙晓艳 刘鑫 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第12期54-60,共7页

【目的】探讨鸭源新城疫病毒(NDV)对SPF鸭免疫机能的影响。【方法】选用120只已免疫H5N1禽流感油乳剂灭活疫苗的SPF鸭,随机分为静脉注射组、点眼滴鼻组和对照组,每组40只。攻毒(2个试验组接种鸭源NDV 0.2mL(含病毒106 ELD50),对照组点... 【目的】探讨鸭源新城疫病毒(NDV)对SPF鸭免疫机能的影响。【方法】选用120只已免疫H5N1禽流感油乳剂灭活疫苗的SPF鸭,随机分为静脉注射组、点眼滴鼻组和对照组,每组40只。攻毒(2个试验组接种鸭源NDV 0.2mL(含病毒106 ELD50),对照组点眼滴鼻等量生理盐水)后观测各组鸭的发病死亡情况,于感染后不同时间随机剖杀试验组和对照组鸭,采集脾脏、法氏囊,按常规方法制备石蜡切片,TUNEL法检测脾脏、法氏囊细胞凋亡情况,同时检测血液生化和血液常规指标,并测定鸭源NDV对SPF鸭外周血中淋巴细胞转化率和H5N1油乳剂灭活疫苗HI抗体效价的影响以及CD4+/CD8+的动态变化,分析不同处理组鸭源NDV对SPF鸭免疫机能的影响。【结果】攻毒后,试验组SPF鸭发病率为100%,死亡率为32.5%,并出现呼吸困难、肺脏出血、腺胃乳头出血等症状及剖检变化;血常规检测结果显示,鸭源NDV静脉注射组和点眼滴鼻组血液中红细胞总数、血红蛋白含量先降低后显著升高,血小板总数、白细胞总数降低且均与对照组差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);血液生化检测结果显示,试验组鸭谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、淀粉酶活性升高,总蛋白含量降低,与对照组相比差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);静脉注射组和点眼滴鼻组的H5N1油乳剂灭活疫苗HI抗体效价比对照组低但差异不显著,淋巴细胞转化率与对照组相比降低且差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);静脉注射组与点眼滴鼻组的CD4+/CD8+变化趋势基本一致,均为先升高后降至正常水平以下。TUNEL法检测脾脏、法氏囊均出现细胞凋亡,且凋亡率随着攻毒后时间的增加而升高。【结论】SPF鸭接种鸭源NDV后能引起免疫抑制。 展开更多

关键词 鸭源新城疫病毒 SPF鸭 免疫抑制

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鸭源新城疫病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备 被引量：2

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作者 程彦丽 刁有祥 +4 位作者 欧全宾 杨建朋 张坤 国纪垒 肖坡 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期666-668,共3页

为制备鸭源新城疫病毒(NDV)的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的鸭源NDV的核衣壳蛋白(NP)为免疫原,免疫6周龄～8周龄的BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,经以重组蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选,获得了2株能稳定分泌抗重... 为制备鸭源新城疫病毒(NDV)的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的鸭源NDV的核衣壳蛋白(NP)为免疫原,免疫6周龄～8周龄的BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,经以重组蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选,获得了2株能稳定分泌抗重组蛋白MAb的杂交瘤细胞株A1和B2,经ELISA检测A1株和B2株细胞上清效价均为212,诱生的腹水的效价分别为107和106。Western blot和IFA检测显示,仅A1株能与鸭源NDV NP蛋白发生特异性反应。抗鸭源NDV NP蛋白MAb的研制,为鸭源NDV的免疫学诊断及致病机理的研究奠定基础。 展开更多

关键词 鸭源新城疫病毒 核衣壳蛋白 单克隆抗体

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鸭坦布苏病毒NS1基因的克隆及原核表达 被引量：2

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作者 郭建伟 董嘉文 +4 位作者 孙敏华 李林林 袁建峰 吴玄光 胡奇林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期71-73,共3页

为原核表达鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)NS1重组蛋白,本研究通过RT-PCR方法扩增NS1基因,将其亚克隆至pET32a(+)载体中构建重组表达质粒pET32a-NS1。将其转化大肠杆菌Rosetta中,经IPTG诱导表达了约59 ku的重组蛋白。Western b... 为原核表达鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)NS1重组蛋白,本研究通过RT-PCR方法扩增NS1基因,将其亚克隆至pET32a(+)载体中构建重组表达质粒pET32a-NS1。将其转化大肠杆菌Rosetta中,经IPTG诱导表达了约59 ku的重组蛋白。Western blot分析表明,该重组蛋白可以与DTMUV阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性。 展开更多

关键词 鸭坦布苏病毒 NS1基因 克隆与表达

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