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基于纳米载体的dsRNA杀菌剂研究进展
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作者 丁晓杰 李佳轶 +1 位作者 周如军 吴元华 《植物医学》 2025年第4期1-11,共11页
植物病害每年给农作物产量带来巨大损失,寻找新的绿色防控策略对粮食安全生产至关重要。基于RNA干扰(RNA Interference,RNAi)原理发展而来的喷雾诱导基因沉默(Spray-induced Gene Silencing,SIGS),通过在植物上喷施外源双链RNA(Double-s... 植物病害每年给农作物产量带来巨大损失,寻找新的绿色防控策略对粮食安全生产至关重要。基于RNA干扰(RNA Interference,RNAi)原理发展而来的喷雾诱导基因沉默(Spray-induced Gene Silencing,SIGS),通过在植物上喷施外源双链RNA(Double-stranded RNA,dsRNA),干扰病原菌的生长或致病相关基因的正常表达,从而实现病害的防控,该技术在植物保护领域展现出巨大的应用潜力。然而,dsRNA的稳定性差及递送效率低等问题亟待解决。纳米材料的应用可以有效保护dsRNA不被降解,提高其递送效率,并延长对作物的保护时间,从而提升dsRNA对植物病害的防治效果。本文综述了基于纳米载体的dsRNA杀菌剂的发展历程及其在植物病害防控领域的研究现状,并对行业未来发展前景进行了展望。 展开更多
关键词 RNA干扰 SIGS dsrna 纳米载体 绿色防控
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解析T7RNA聚合酶:从构效关系到dsRNA挑战与生物技术应用
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作者 宁苇辰 华雨 +4 位作者 尤慧玲 李秋实 吴尧 刘云龙 胡振新 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第9期2280-2294,共15页
T7RNA聚合酶(T7RNApolymerase,T7RNAP)凭借其独特的结构特性成为研究RNA合成机制的重要模型。本文系统解析了其标志性的“右手”结构框架,并通过整合结构的动态变化和动力学分析,阐述了完整的T7RNAP转录过程,构建了从静态结构解析到动... T7RNA聚合酶(T7RNApolymerase,T7RNAP)凭借其独特的结构特性成为研究RNA合成机制的重要模型。本文系统解析了其标志性的“右手”结构框架,并通过整合结构的动态变化和动力学分析,阐述了完整的T7RNAP转录过程,构建了从静态结构解析到动态过程的完整框架。T7RNAP在催化过程中会产生副产物双链RNA(dsRNA),其存在不仅会降低mRNA产物的纯度,还会引发自身非特异性免疫反应,从而限制T7RNAP在生物技术和医学领域的应用。文中详细探讨了dsRNA的形成机理,并对规避dsRNA产生的不同思路及当前研究进展进行了阐述。通过梳理近期研究成果,本文系统归纳了通过半理性设计改造的T7RNAP突变及突变效果,如活性和热稳定性的提升、底物和启动子特异性的改变、转录效率改善等,清晰展现该领域的技术突破路径。此外,T7RNAP在基因编辑及基因工程、检测诊断及信号转导、mRNA疫苗等领域得到快速发展和广泛应用。本文综述了T7RNAP的结构功能、dsRNA形成机理及规避策略,同时探讨了T7RNAP工程优化与功能拓展,并对目前亟待解决的问题进行了阐述,讨论了当前T7RNAP实际应用中的主要问题并对未来研究的可能方向进行了展望,旨在为T7RNAP的研发与应用提供新的见解,促进相关领域的思考与发展。 展开更多
关键词 T7RNA聚合酶 结构 功能 转录 动力学 dsrna MRNA
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外源dsRNA在植物抗病虫害中的应用研究进展
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作者 李林燕 张高阳 +4 位作者 刘星雨 孙千惠 孙忠科 李成伟 罗德平 《农药》 北大核心 2025年第7期469-479,共11页
双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)是RNA干扰(RNA interference,RNAi)途径中的关键效应因子,能够触发基因沉默机制。近年来,基于RNAi原理开发的基因沉默技术已被广泛应用于植物抗病虫害能力的提升。外源dsRNA通过干扰植物内源或与植... 双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)是RNA干扰(RNA interference,RNAi)途径中的关键效应因子,能够触发基因沉默机制。近年来,基于RNAi原理开发的基因沉默技术已被广泛应用于植物抗病虫害能力的提升。外源dsRNA通过干扰植物内源或与植物病虫害相关的外源特定靶基因或靶基因簇的表达,从而直接提升植物抗病虫害的能力,或间接增强植物抗逆性,减少病虫害的侵染。综述了外源dsRNA在植物抗病虫害中的应用,重点介绍了dsRNA的制备、传递以及其直接或间接对病虫害防治中的应用进展,为增强植物抗病虫害能力提供了新的思路。 展开更多
关键词 外源dsrna 病害虫防治 植物品质改良 生物农药
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苹果黄蚜致死基因筛选及4种dsRNA杀虫活性比较
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作者 申宗蕊 霍宝伟 +4 位作者 岳王昊辰 范银君 滕子文 万方浩 周洪旭 《烟台果树》 2025年第3期15-20,共6页
为筛选苹果黄蚜高效RNA干扰基因(RNA interference,RNAi),使用点滴法测定dsRNA片段对苹果黄蚜的致死效率,经分析和评估筛选出高效致死基因。结果表明,4个基因的dsRNA处理苹果黄蚜24~72 h,基因的干扰效率在56.6%~99.5%,产蚜量与对照组ds... 为筛选苹果黄蚜高效RNA干扰基因(RNA interference,RNAi),使用点滴法测定dsRNA片段对苹果黄蚜的致死效率,经分析和评估筛选出高效致死基因。结果表明,4个基因的dsRNA处理苹果黄蚜24~72 h,基因的干扰效率在56.6%~99.5%,产蚜量与对照组dsGFP相比dsATPD和dsSyn基因无显著性差异,dsCP19在48 h和72 h时有显著性差异,P<0.0488和P<0.0160,dsCSB在72 h时有显著性差异,P<0.0165。校正死亡率为12.9%~23.5%,其中dsSyn处理组72 h校正死亡率为23.5%,24 h干扰效率为99.5%,高于dsCSB、dsCP19和dsATPD处理组。 展开更多
关键词 苹果黄蚜 RNAi干扰 dsrna 致死基因
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dsRNA在激活抗肿瘤免疫中的研究进展
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作者 高锐 高兴华 《药学研究》 2025年第5期491-496,共6页
双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)是一种具有重要生物学功能的核酸分子,广泛存在于病毒基因组和宿主免疫反应过程中。在近年来的研究中,dsRNA作为免疫反应的强效激活因子,能够通过激活模式识别受体,从而触发一系列信号转导过程,诱导... 双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)是一种具有重要生物学功能的核酸分子,广泛存在于病毒基因组和宿主免疫反应过程中。在近年来的研究中,dsRNA作为免疫反应的强效激活因子,能够通过激活模式识别受体,从而触发一系列信号转导过程,诱导I型干扰素和炎症细胞因子的表达,最终有效激活机体免疫应答,成为癌症免疫治疗中的一个重要研究方向。本文系统综述了dsRNA在抗肿瘤免疫中的最新研究进展,重点探讨了其通过dsRNA感应通路的激活、病毒拟态机制以及参与肿瘤微环境重塑等多种机制促进抗肿瘤免疫的作用。此外,本文还阐述了dsRNA在癌症疫苗开发、免疫检查点抑制剂联用以及RNA干扰疗法等前沿治疗策略中的应用潜力,旨在为dsRNA在癌症免疫治疗中的进一步研究和应用提供更为明确的方向与思路。 展开更多
关键词 dsrna 抗肿瘤免疫 病毒拟态反应
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基于纳米颗粒递送的dsRNA在农林植物病虫害防治中的应用
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作者 严楚枚 谢贤安 《自然科学》 2025年第3期455-464,共10页
随着全球森林和农作物病虫害问题的日益严重,传统化学农药防治方法因其环境污染和生物抗性问题而受到公众的质疑。近年来,越来越多的研究者将目光转向RNA干扰(RNAi)技术,利用RNAi的特性控制农林植物病虫害,并减少对环境的负面影响。本... 随着全球森林和农作物病虫害问题的日益严重,传统化学农药防治方法因其环境污染和生物抗性问题而受到公众的质疑。近年来,越来越多的研究者将目光转向RNA干扰(RNAi)技术,利用RNAi的特性控制农林植物病虫害,并减少对环境的负面影响。本综述聚焦于RNAi技术的原理、外源性dsRNA的应用,并分析目前面临的机遇和挑战。同时探讨纳米颗粒在dsRNA递送应用方面的研究进展,如壳聚糖纳米颗粒(CNPs)、层状氢氧化物(LDH)和星形阳离子聚合物(SPc)等,这些纳米颗粒可以有效保护dsRNA并提高其传递效率。这些研究为农林业可持续发展提供了新的解决方案,有助于保护森林植被和提高农作物的产量与质量。With the increasing problems of pest and disease of global forests and crops, traditional chemical pesticide control methods are being questioned due to environmental pollution and biological resistance issues. However, recently, more researchers have turned to RNA interference (RNAi) technology, using the properties of RNAi to control plant pests and diseases, reducing the negative impact on the environments. This review focuses on the principles of RNAi technology, the applications of exogenous double-stranded RNA (dsRNA), while analyzing the associated opportunities and challenges. Additionally, we explored the research progress in nanoparticle delivery systems for dsRNA, such as chitosan nanoparticles (CNPs), layered double hydroxide (LDH), and star polycation (SPc), which effectively protect dsRNA and enhance its delivery efficiency. These studies provide innovative solutions for sustainable agricultural and forestry development, contributing to the preservation of forest and the improvement of crop yields and quality. 展开更多
关键词 农林植物病虫害防治 RNA干扰 dsrna 纳米颗粒
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dsRNA纳米融合制剂研制及对烟草普通花叶病毒和烟草脉带花叶病毒的抑制效果
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作者 张盼 郭玉双 +4 位作者 汪汉成 尹国英 曹领改 贾蒙骜 余永旭 《农药学学报》 北大核心 2025年第3期473-483,399,共12页
由烟草普通花叶病毒(TMV)和烟草脉带花叶病毒(TVBMV)所致花叶病是烟草上的主要病害,严重威胁烟叶产业的可持续发展。纳米材料介导的RNA干扰(RNAi)是一种新型的绿色、安全、高效防治技术,在植物病毒病防治中有着巨大的应用潜力。本研究... 由烟草普通花叶病毒(TMV)和烟草脉带花叶病毒(TVBMV)所致花叶病是烟草上的主要病害,严重威胁烟叶产业的可持续发展。纳米材料介导的RNA干扰(RNAi)是一种新型的绿色、安全、高效防治技术,在植物病毒病防治中有着巨大的应用潜力。本研究旨在筛选出对TMV和TVBMV病毒抑制效果最佳的靶标序列,并通过双链RNA(dsRNA)纳米材料递送体系解析其对TMV和TVBMV的抑制效果。基于TMV基因组的外壳蛋白(CP)和P126基因,以及TVBMV基因组的CP和HC Pro基因设计靶标片段,结合病毒诱导基因沉默(VIGS)试验,明确不同片段对TMV和TVBMV的抑制效果,筛选最佳靶标片段。体外合成dsRNA,并分别与3种纳米材料壳聚糖(CS)、碳量子点(CQD)和石墨烯量子点(GQD)融合,筛选最佳融合比例并制备得到纳米材料-dsRNA制剂,通过激光粒度仪、Zeta电位测试仪和透射电镜对3种纳米制剂进行了表征,验证了3种制剂对TMV和TVBMV的抑制效果。结果表明:VIGS注射P126对TMV的抑制效果较好,平均抑制率为53.96%;VIGS注射V-HC对TVBMV的抑制效果较好,平均抑制率为61.22%;表明P126和HC Pro基因片段为TMV和TVBMV的最佳靶标。dsRNA和纳米材料的融合试验表明,dsRNA和CS的最佳融合质量比为1∶1,dsRNA和CQD的最佳融合质量比为1∶10;dsRNA和GQD的最佳融合质量比为1∶7。纳米制剂的表征结果证明,dsRNA被成功负载在纳米材料上。纳米材料-dsRNA制剂对TMV和TVBMV的病毒抑制验证试验表明,纳米制剂显著提高了dsRNA对TMV和TVBMV的抑制效果,且GQDdsRNA和CQD-dsRNA组合的抑制效果最佳。 展开更多
关键词 烟草普通花叶病毒 烟草脉带花叶病毒 RNA干扰 双链RNA 抑制效果 纳米材料
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Role of dsRNA-Based Insecticides in Agriculture:Current Scenario and Future Prospects
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作者 Pratyush Kumar Das Satyabrata Nanda 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2024年第12期3217-3235,共19页
Insect pests cause severe crop damage,resulting in substantial economic losses and threats to global food security.Conventional insecticides are low-cost chemical agents that kill the target insects and some non-speci... Insect pests cause severe crop damage,resulting in substantial economic losses and threats to global food security.Conventional insecticides are low-cost chemical agents that kill the target insects and some non-specific beneficial organisms.Due to their toxic and non-biodegradable nature,these conventional insecticides persist in the environment,thus causing pollution and accumulating in the food chain.The development of novel insecticidal products based on double-stranded(dsRNA)-based RNA interference(RNAi)technology is a sustainable tool to effectively control insect pests.The dsRNA-based insecticides are known for their specificity,non-toxicity,and biodegradability.The current review introduces the dsRNA-based RNAi technique as a novel tool to control crop insect pests.The review highlights the mechanism behind dsRNA uptake into insect cells.Furthermore,it discusses the commercial aspects of different dsRNA-based products available in the market,their penetration rates,and public acceptance.The review details the latest developments in the field and the regulatory landscape regarding the technology.The advantages and limitations of dsRNA-based insecticides are discussed,and future research directions to overcome the potential challenges have been briefly suggested.The dsRNA-based insecticidal products may be a better alternative to conventional insecticides,thus delineating the resistance among insects and increasing agricultural productivity. 展开更多
关键词 dsrna INSECTICIDE integrated pest management RNA interference sustainable agriculture
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秀珍菇退化菌株生物学特征比较及dsRNA病毒检测 被引量:17
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作者 柯斌榕 卢政辉 +2 位作者 吴小平 陈发川 兰清秀 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期98-103,共6页
【目的】比较秀珍菇退化菌株与正常菌株的生物学特征并进行双链RNA(dsRNA)病毒检测,为秀珍菇栽培过程中选择优质菌种提供参考依据。【方法】开展秀珍菇退化菌株菌丝拮抗、菌丝生长速度及出菇试验,与正常菌株进行生物学特征比较,通过ITS... 【目的】比较秀珍菇退化菌株与正常菌株的生物学特征并进行双链RNA(dsRNA)病毒检测,为秀珍菇栽培过程中选择优质菌种提供参考依据。【方法】开展秀珍菇退化菌株菌丝拮抗、菌丝生长速度及出菇试验,与正常菌株进行生物学特征比较,通过ITS扩增,利用RAPD、ISSR和SRAP分子标记分别进行差异性比较,并开展dsRNA病毒检测,分析秀珍菇菌株的退化原因。【结果】秀珍菇退化菌株X9和X13与正常菌株X5、X6及对照菌株X15间存在拮抗反应,当培养基的pH低于5.0时,退化菌株的菌丝生长速度显著降低(P<0.05,下同)。退化菌株X13菌丝的生长速度(4.95mm/d)、常温出菇单袋产量(73.34 g/袋)及低温刺激出菇单袋产量(107.69 g/袋)均显著低于正常菌株和对照菌株。分子标记分析未发现供试菌株间存在遗传差异,dsRNA病毒检测发现供试菌株均存在dsRNA片段,其中退化菌株X13存在特异的dsRNA片段。【结论】秀珍菇退化菌株可能受dsRNA病毒感染,适应环境能力变弱,产量降低,生产上应注意菌株来源,避免使用退化菌株。 展开更多
关键词 秀珍菇 栽培 退化菌株 dsrna病毒检测
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siRNA与dsRNA在白纹伊蚊体内的干扰效果
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作者 吴启星 姜玉庭 +6 位作者 刘露 郭晓霞 郭思含 张瑞香 邢丹 赵彤言 郭文峰 《中国热带医学》 CAS 北大核心 2024年第11期1411-1418,共8页
目的探究siRNA(小干扰RNA)和dsRNA(双链RNA)2种干扰RNA在白纹伊蚊体内作用效果以及对蚊虫生存的影响,为蚊虫基因功能研究、新型杀虫剂研发、媒介蚊虫控制与虫媒病防控提供方法参考与技术支持。方法针对感兴趣的白纹伊蚊基因,设计合成目... 目的探究siRNA(小干扰RNA)和dsRNA(双链RNA)2种干扰RNA在白纹伊蚊体内作用效果以及对蚊虫生存的影响,为蚊虫基因功能研究、新型杀虫剂研发、媒介蚊虫控制与虫媒病防控提供方法参考与技术支持。方法针对感兴趣的白纹伊蚊基因,设计合成目的基因的siRNA交由公司合成,dsRNA则通过扩增目的基因片段、体外转录和纯化方式获取,最终通过琼脂糖凝胶电泳检测验证。利用胸腔显微注射技术将干扰RNA注入白纹伊蚊体内,通过荧光定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法检测注射后第3天的蚊虫样本基因表达量,验证干扰RNA的干扰效果,同时记录蚊虫生存曲线。结果针对10个基因的22对siRNA干扰实验中,与对照组相比,仅有SR-C-2 siRNA、ENR-1 siRNA 2对siRNA成功干扰靶基因表达,干扰率分别为58%和33%,其余siRNA无干扰效果,甚至出现靶基因表达量升高的情况。dsRNA干扰实验中,Mesh dsRNA在3×10^(11)个RNA分子/只浓度下可显著降低靶基因的表达,干扰效果可持续5 d,注射后第3天的干扰率在55%~60%,注射后第5天的干扰率为34%。dsRNA注射后蚊虫3 d内生存率显著高于siRNA注射组。结论羽化后第5日的白纹伊蚊最适宜接受胸腔注射操作。dsRNA较siRNA干扰稳定,注射后生存率更高,更适用于蚊虫基因功能的深入研究。基于siRNA的基因干扰方法更简便易行,但需注重siRNA的纯化方式以及与该蚊种其他基因的同源性情况,避免由于结合蚊虫体内非靶标基因而出现非特异性实验结果。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 RNA干扰 小干扰RNA 双链RNA
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中蜂囊状幼虫病毒RdRp基因dsRNA干扰的研究 被引量:14
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作者 史红霞 党晓群 +5 位作者 朱祥龙 马振刚 刘永梅 黄钰彬 周泽扬 许金山 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期103-111,共9页
中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)可以引起中蜂幼虫死亡,给中蜂的养殖造成严重的威胁。其RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)是病毒复制中必不可少的中心酶,控制着病毒的复制和翻译过程。本研究以CSB... 中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)可以引起中蜂幼虫死亡,给中蜂的养殖造成严重的威胁。其RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)是病毒复制中必不可少的中心酶,控制着病毒的复制和翻译过程。本研究以CSBV RdRp基因为靶标,选取两个干扰区域RdRp-1和RdRp-2,并构建相应的dsRNA表达载体,获取dsRNA后进行RNAi实验,通过qRT-PCR检测CSBV RdRp基因的表达情况。实验结果显示:干扰片段RdRp-1不能显著下调RdRp基因的转录,而干扰片段RdRp-2可显著性下调RdRp表达并具有剂量依赖性,当添食2μg dsRdRp-2时,在72 h RdRp基因表达下调了85%,CSBV的衣壳蛋白VP1基因下调表达78%,幼虫死亡率降低60%,表明RdRp基因可以作为RNA干扰的靶标用于CSBV防治,本研究为后期在养蜂场进行蜜蜂病毒病的防治奠定了基础。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 中蜂囊状幼虫病毒(CSBV) RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp) dsrna的体外表达 RNAI
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草莓植株中病毒dsRNA的分离和鉴定 被引量:5
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作者 李贺 代红艳 +3 位作者 张志宏 高秀岩 杜国栋 张馨宇 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期145-152,共8页
目的病毒核酸分离是病毒基因组解析的基础,本研究旨在建立草莓病毒的dsRNA分离方法,获得草莓主要病毒的部分基因组序列。方法采用改进的dsRNA分离方法,对草莓病毒指示植物和栽培品种中的病毒dsRNA进行分离,通过琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR... 目的病毒核酸分离是病毒基因组解析的基础,本研究旨在建立草莓病毒的dsRNA分离方法,获得草莓主要病毒的部分基因组序列。方法采用改进的dsRNA分离方法,对草莓病毒指示植物和栽培品种中的病毒dsRNA进行分离,通过琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR来鉴定。结果不同草莓品种中病毒dsRNA的含量不同,试管苗叶片中dsRNA含量高于露地苗幼叶,而露地苗幼叶中dsRNA含量明显高于完全成熟叶。dsRNA对DNaseⅠ具有很强的耐性;当酶解缓冲液中含0.5mol·L-1NaCl时,dsRNA对RNaseA具有较强的耐性。利用DNA凝胶回收试剂盒,能够有效回收凝胶中的dsRNA片段。应用RT-PCR技术,从凝胶回收的dsRNA及DNaseⅠ/RNaseA两酶酶解处理后的dsRNA中分别扩增出草莓斑驳病毒和草莓轻型黄边病毒的特异片段。结论建立了从草莓植株中分离和鉴定病毒dsRNA的完整技术体系,为草莓病毒中国分离物的基因组解析奠定了重要基础。 展开更多
关键词 草莓 dsrna 病毒 分离 RT-PCR
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栗疫菌低毒力菌株dsRNA的分离及转移 被引量:6
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作者 梁平彦 陈开英 +2 位作者 周淑敏 全勇 刘宏迪 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期253-261,共9页
自云南、广西、江苏、浙江、河北、京郊六个省市的板栗树(Castanea mollissima)溃疡斑上分离了栗疫菌(Endothia parasitica)160株,进行了 dsRNA 的提取及其毒力测定,获得两株含 dsRNA 的低毒力菌株(H),其毒力与带有起源于欧洲的 dsRNA ... 自云南、广西、江苏、浙江、河北、京郊六个省市的板栗树(Castanea mollissima)溃疡斑上分离了栗疫菌(Endothia parasitica)160株,进行了 dsRNA 的提取及其毒力测定,获得两株含 dsRNA 的低毒力菌株(H),其毒力与带有起源于欧洲的 dsRNA 的低毒力菌株比较相近.比较国内菌株与欧洲低毒力菌株的 dsRNA 电泳谱带,示有共同分子量为5×10~6或6.2×10~6的电泳带。与正常毒力菌株(V)混合接种能显著降低致病力。这是欧美大陆发现低毒力菌株后,亚洲地区的首次报告。以5株具有欧洲 dsRNA 的低毒力菌株作为供体,与云南、江苏、浙江的10株毒力菌株配对,16%(8/50)的毒力菌株发生形态变化,dsRNA 转入后毒力明显降低。结果表明,国内毒力菌株可以接受欧洲低毒力因子——dsRNA 并转变为低毒力菌株。 展开更多
关键词 栗疫菌 低毒力 dsrna 基因转变
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一种简单快速的食用菌病毒dsRNA提取方法 被引量:7
14
作者 郭灵芳 张长青 +3 位作者 鲁红学 周燚 徐章逸 章松柏 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2010年第12期51-53,57,共4页
食用菌病毒病一直是食用菌生产的重要问题,明显影响产量和质量。已发现的食用菌病毒很多为dsRNA病毒,因此dsRNA病毒的研究对于食用菌生产非常重要。发展一种简单快速的食用菌病毒dsRNA的提取方法,该法优化了传统提取方法的步骤和对样品... 食用菌病毒病一直是食用菌生产的重要问题,明显影响产量和质量。已发现的食用菌病毒很多为dsRNA病毒,因此dsRNA病毒的研究对于食用菌生产非常重要。发展一种简单快速的食用菌病毒dsRNA的提取方法,该法优化了传统提取方法的步骤和对样品数量的要求,可以从0.5~1.0 g的食用菌组织中快速提取dsRNA,提取效率较传统方法高,提取产物可以直接应用于进行dsRNA的检测、分类以及相关基因的克隆。 展开更多
关键词 dsrna RNA病毒 香菇 平菇
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花粉管通道法介导PRSV-CP基因dsRNA转化番木瓜 被引量:7
15
作者 魏军亚 刘德兵 +2 位作者 陈业渊 蔡群芳 周鹏 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2159-2163,共5页
以番木瓜‘蔬罗Ⅰ号’植株为受体材料,采用花粉管通道技术将番木瓜环斑病毒外壳蛋白(PRSV-CP)基因3′-端同源序列dsRNA转入番木瓜子房中。用PCR方法对T0代种子进行了分子检测,获得53株转基因番木瓜,转化率达到8.9%;对获得的T0代转基因... 以番木瓜‘蔬罗Ⅰ号’植株为受体材料,采用花粉管通道技术将番木瓜环斑病毒外壳蛋白(PRSV-CP)基因3′-端同源序列dsRNA转入番木瓜子房中。用PCR方法对T0代种子进行了分子检测,获得53株转基因番木瓜,转化率达到8.9%;对获得的T0代转基因番木瓜进行了田间抗病性鉴定,结果表明,转基因番木瓜植株对番木瓜环斑病毒(PRSV)表现为不同程度的抗性,可以推迟发病。 展开更多
关键词 花粉管通道 dsrna 番木瓜环斑病毒(PRSV)
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鸡传染性法氏囊病病毒dsRNA的提纯与应用 被引量:8
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作者 孙建和 陆苹 +1 位作者 赵渝 李晖 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期311-314,共4页
用传染性法氏囊病病毒 (IBDV)攻击 4周龄的非免疫鸡 ,以超速离心法从感染鸡法氏囊组织中分离、纯化IBDV ,应用蛋白酶K消化和Trizol(异硫氰酸胍 -酚 -氯仿法 )处理 2种方法从纯化的IBDV中抽提dsRNA。通过低熔点琼脂糖割胶 -酚 -氯仿抽提... 用传染性法氏囊病病毒 (IBDV)攻击 4周龄的非免疫鸡 ,以超速离心法从感染鸡法氏囊组织中分离、纯化IBDV ,应用蛋白酶K消化和Trizol(异硫氰酸胍 -酚 -氯仿法 )处理 2种方法从纯化的IBDV中抽提dsRNA。通过低熔点琼脂糖割胶 -酚 -氯仿抽提可获得纯化的dsRNA ,研究发现应用蛋白酶K消化获得的纯化RNA产量高 ,用其作模板进行RT -PCR可扩增IBDV基因组全长cDNAA片段和B片段、VP2基因和VP2 - 4 - 3基因。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 dsrna 提纯 应用
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RNA病毒阻断RIG-I样受体识别dsRNA机制研究进展 被引量:6
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作者 王国庆 朱紫祥 +2 位作者 曹伟军 刘磊 郑海学 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期704-712,共9页
RIG-I样受体(RIG-I-like receptors,RLRs)是一类重要的模式识别受体,其在机体抵抗病毒感染过程中发挥着至关重要的作用。RLRs通过级联放大效应,诱导I型干扰素的表达,激活干扰素通路,最终发挥抗病毒效应。而病毒为了自身长期的生存和繁殖... RIG-I样受体(RIG-I-like receptors,RLRs)是一类重要的模式识别受体,其在机体抵抗病毒感染过程中发挥着至关重要的作用。RLRs通过级联放大效应,诱导I型干扰素的表达,激活干扰素通路,最终发挥抗病毒效应。而病毒为了自身长期的生存和繁殖,在长期的进化和演化过程中,不断的与机体免疫系统进行着抗衡和斗争,由此演化出了一系列的拮抗策略。RLRs主要识别5′端带有三磷酸基团的RNA(包括单链和双链RNA)和双链RNA,其在启动免疫应答过程中可以通过与病毒RNA结合而得以激活,然后招募下游分子,激活整个通路的信号转导。病毒为了阻断RLRs对病毒RNA的识别,拮抗RLRs通路的激活,进化出了非常精细的对抗策略,主要分为:躲避、伪装和攻击三种策略。了解清楚病毒拮抗RLRs抗病毒的分子机制对于研制新的抗病毒药物及发展新的抗病毒策略具有深远意义。本文主要对RNA病毒阻断RLRs识别dsRNA机制的研究进展进行综述。希望为研究不同RNA病毒拮抗RLRs分子机制提供一定的参考和依据。 展开更多
关键词 RIG-I样受体 dsrna RNA病毒 拮抗作用
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葡萄病毒病的双链RNA(dsRNA)检测技术研究 被引量:22
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作者 牛建新 李东栋 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期149-152,共4页
将病毒dsRNA分析检测技术应用到果树病毒的诊断检测上熏并对生产中广泛发生的葡萄卷叶病病毒穴GLRV雪、葡萄扇叶病毒穴GFV雪进行了检测并确立检测标准,为今后葡萄病毒病的诊断检测奠定了良好的基础。同时,还对在葡萄上发生的一种黄边花... 将病毒dsRNA分析检测技术应用到果树病毒的诊断检测上熏并对生产中广泛发生的葡萄卷叶病病毒穴GLRV雪、葡萄扇叶病毒穴GFV雪进行了检测并确立检测标准,为今后葡萄病毒病的诊断检测奠定了良好的基础。同时,还对在葡萄上发生的一种黄边花叶病进行了研究,并获得了这种病毒的dsRNA,证实其为病毒侵染所致。 展开更多
关键词 葡萄 病毒诊断 dsrna提取 病毒病 双链RNA检测技术 木本指示植物
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家蚕质多角体病毒(BmCPV)基因组dsRNA片段V的全序列测定 被引量:5
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作者 林伟 徐安龙 +3 位作者 杨文利 孙京臣 卢火斤英 张景强 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期375-377,共3页
dsRNA segment Ⅴ was separated from Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus(BmCPV)of Chinese Guangzhou strainAfter ligation with a ssDNA adaptor,the cDNA fragments overlapping full-length segment Ⅴ of BmCPV ... dsRNA segment Ⅴ was separated from Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus(BmCPV)of Chinese Guangzhou strainAfter ligation with a ssDNA adaptor,the cDNA fragments overlapping full-length segment Ⅴ of BmCPV were acquired by RT-PCR amplificationSegment Ⅴ is 2852 nucleotides long and possesses a single open reading frame encoding a putative protein of 881 amino acidsComparison of amino acid sequences shows 97% homology with BmCPV Japanese isolate segments Ⅴ,86% and 36% with LdCPV-1 and LdCPV-14 segments Ⅴ respectivelyPart of sequence of BmCPV segment Ⅴ exhibits high homology with 2Apro motif of picornavirus members,which may suggest that there might exist some affinities evolutionally between both of 展开更多
关键词 家蚕质多角体病毒 BmCPV 基因组 dsrna片段V 全序列测定
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我国和欧美洲栗疫菌低毒株dsRNA同源性比较 被引量:6
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作者 全勇 梁平彦 +1 位作者 陈开英 周淑敏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期1-5,共5页
在发现我国栗疫苗(Cryphonectria parasitica=Endothia parasitica)含dsRNA低毒力菌株基础上,分别以国内菌株EpC140和EpC32、欧洲低毒株Ep713的dsRNA为探针,同欧洲、美洲及亚洲低毒力菌株dsRNA进行分子杂交,结果表明亚洲株同欧洲株之间... 在发现我国栗疫苗(Cryphonectria parasitica=Endothia parasitica)含dsRNA低毒力菌株基础上,分别以国内菌株EpC140和EpC32、欧洲低毒株Ep713的dsRNA为探针,同欧洲、美洲及亚洲低毒力菌株dsRNA进行分子杂交,结果表明亚洲株同欧洲株之间有序列同源性,同美洲株之间无序列同源性. 展开更多
关键词 栗疫菌 低毒力 同源性 dsrna
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