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直接ELISA检测沙门氏菌方法的建立及其应用研究 被引量：44
1
作者 文其乙 焦新安 +2 位作者 刘秀梵 张如宽 杨静 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1995年第2期105-111,共7页
从已获得的４株沙门氏菌属特异杂交瘤单克隆抗体中，筛选出ＣＢ８和ｄｅ７两株单抗组合成酶标检测试剂，并建立了检测沙门氏菌的直接ＥＬＩＳＡ方法。它能检出沙门氏菌属９９％的菌株，而不与其他肠道杆菌反应（包括大肠杆菌、阴沟杆菌... 从已获得的４株沙门氏菌属特异杂交瘤单克隆抗体中，筛选出ＣＢ８和ｄｅ７两株单抗组合成酶标检测试剂，并建立了检测沙门氏菌的直接ＥＬＩＳＡ方法。它能检出沙门氏菌属９９％的菌株，而不与其他肠道杆菌反应（包括大肠杆菌、阴沟杆菌、产气杆菌、志贺氏菌、枸椽酸杆菌、克雷伯氏菌、变形杆菌和沙雷氏菌）。应用本方法检测粪样、鱼粉、奶样，其敏感性和特异性分别高达１００％和９７．６％，仅出现２．４％的假阳性率。该法不受各种样品成分的影响，而且在２～３ｄ即可完成样品筛选。直接ＥＬＩＳＡ具有快速简便、易于推广的优点，有重要实用价值。 展开更多
关键词 沙门氏菌 单克隆抗体 elisa 检测
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3种ELISA法定量检测转cry1Ac基因水稻Cry1Ac蛋白的比较研究 被引量：9
2
作者 秦崇涛 陈在杰 +1 位作者 苏军 王锋 《福建农业学报》 CAS 2003年第4期258-263,共6页
用从细菌中分离的纯品CryIAe蛋白作为抗原成功制备出了效价较高的CryIAe蛋白的兔多抗,对制备的抗体的免疫学分析表明,其与CryIAc有极显著的免疫交叉反应.并在对转cryIAc基因水稻的检测中具有良好的特异性。用戊二醛一步法对纯化的IgG进... 用从细菌中分离的纯品CryIAe蛋白作为抗原成功制备出了效价较高的CryIAe蛋白的兔多抗,对制备的抗体的免疫学分析表明,其与CryIAc有极显著的免疫交叉反应.并在对转cryIAc基因水稻的检测中具有良好的特异性。用戊二醛一步法对纯化的IgG进行了碱性磷酸酶标记。应用制备的抗体进行了直接法、间接法和双抗夹心法等ELISA方法检测转cryIAc基因水稻中Bt的含量,结果表明直接法和间接法ELISA只能定性而不能定量测定转cryIAc基因水稻,而双抗夹心法是一种比较理想的定量检测水稻中Bt含量的方法。同时确定了双抗夹心法的各项具体条件。 展开更多
关键词 转基因 水稻 细菌 CryIAe蛋白 抗原 抗体 免疫交叉反应 cryIAc基因 BT蛋白 直接法 间接法 双抗夹心法 elisa
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沙丁胺醇直接竞争ELISA法快速测定 被引量：21
3
作者 王保玲 袁利鹏 +5 位作者 雷红涛 徐振林 杨金易 孙远明 丁武 庞杰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第20期270-274,共5页
建立沙丁胺醇的直接竞争ELISA(dcELISA)快速检测方法,采用高碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记沙丁胺醇单克隆抗体,棋盘滴定法确定包被抗原质量浓度和抗体稀释倍数,通过单因素试验,考察反应体系中表面活性剂、离子浓度、甲醇体积分数、pH... 建立沙丁胺醇的直接竞争ELISA(dcELISA)快速检测方法,采用高碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记沙丁胺醇单克隆抗体,棋盘滴定法确定包被抗原质量浓度和抗体稀释倍数,通过单因素试验,考察反应体系中表面活性剂、离子浓度、甲醇体积分数、pH值因素对dcELISA性能的影响,确定最优检测条件,同时考察方法的特异性。结果表明:酶标抗体克分子比为2.1时偶合物的滴度最高,最佳反应条件为包被抗原质量浓度1μg/mL,酶标抗体稀释2560倍,0.01mol/L、pH7.4的磷酸盐抗体稀释液(PBS)中含体积分数0.05%的Tween-20、0.5mol/LNaCl溶液和体积分数5%的甲醇时dcELISA具有最高的灵敏度和最好的稳定性,所建立方法的IC50为10.3ng/mL,检测限为0.049ng/mL,线性范围0.3～76.30ng/mL,批内变异系数13.8%,批间变异系数为22.38%,与克伦特罗交叉反应率为321.18%,与溴布特罗交差反应率为29.09%,与其他结构类似物没有明显交叉反应。本研究所建立的dcELISA可用于沙丁胺醇和克伦特罗的多残留检测。 展开更多
关键词 沙丁胺醇 酶标抗体 直接竞争elisa
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甲胺磷残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研制 被引量：10
4
作者 王华 熊汉国 +1 位作者 张丁联 潘家荣 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2007年第3期122-126,共5页
研制了一种用于检测蔬菜中甲胺磷残留量的直接竞争酶联免疫测定(ELISA)试剂盒,结果表明,该试剂盒的最低检测限为0.01μg/mL,线性检测范围为0.01μg/mL￣100μg/mL,标准曲线的平均板内变异系数为4.05%,板间平均变异系数为13.66%,回收率... 研制了一种用于检测蔬菜中甲胺磷残留量的直接竞争酶联免疫测定(ELISA)试剂盒,结果表明,该试剂盒的最低检测限为0.01μg/mL,线性检测范围为0.01μg/mL￣100μg/mL,标准曲线的平均板内变异系数为4.05%,板间平均变异系数为13.66%,回收率的范围在93.12%￣102%。试剂盒在4℃下至少可以保存6个月以上。 展开更多
关键词 甲胺磷 直接竞争elisa 试剂盒
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直接竞争ELISA法快速测定水产品中6种氟喹诺酮类药物 被引量：13
5
作者 王强 王旭峰 +4 位作者 杨金兰 陈培基 杨宏亮 黎智广 李刘冬 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期61-65,共5页
采用过碘酸钠法将抗环丙沙星单克隆抗体（MAb-CIP）与辣根过氧化物酶（HRP）偶联制备酶标抗体MAbCIP-HRP,建立了检测水产品中6种氟喹诺酮类药物残留的直接竞争酶联免疫吸附分析方法（dcELISA）,考察了包被原浓度、竞争反应时间和有机溶... 采用过碘酸钠法将抗环丙沙星单克隆抗体（MAb-CIP）与辣根过氧化物酶（HRP）偶联制备酶标抗体MAbCIP-HRP,建立了检测水产品中6种氟喹诺酮类药物残留的直接竞争酶联免疫吸附分析方法（dcELISA）,考察了包被原浓度、竞争反应时间和有机溶剂等因素对方法灵敏度的影响。结果表明：在优化的反应条件下,所建立的dcELISA针对环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星、培氟沙星、沙拉沙星和双氟沙星6种氟喹诺酮类药物的检测限（LOD）均不超过0.5ng/mL,线性范围（IC20-IC80）在1.0-12.1ng/mL之间;对虾、鳗鲡和鲫鱼三种水产样品中添加5.0、10.0和20μg/kg时,加标回收率为70.4%-104.1%,相对标准偏差为5.0%~14.7%;本方法可用于水产品中氟喹诺酮类（FQs）药物多残留的快速测定。 展开更多
关键词 氟喹诺酮 抗体 直接竞争elisa 水产品
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河豚毒素直接竞争ELISA检测方法的研究 被引量：19
6
作者 董雪 钟青萍 +2 位作者 黄安诚 雷红涛 孙远明 《现代食品科技》 EI CAS 2009年第8期977-981,共5页
本研究应用直接竞争ELISA法对河豚毒素（tetrodotoxin，TTX）进行快速检测。用过碘酸钠氧化法合成酶标记抗原（HRP-OVA-TFX），用直接ELISA方法对合成的酶标记抗原进行鉴定表明其与抗TTX单克隆抗体具有特异性反应。在比基础上建立了包... 本研究应用直接竞争ELISA法对河豚毒素（tetrodotoxin，TTX）进行快速检测。用过碘酸钠氧化法合成酶标记抗原（HRP-OVA-TFX），用直接ELISA方法对合成的酶标记抗原进行鉴定表明其与抗TTX单克隆抗体具有特异性反应。在比基础上建立了包被单抗的直接竞争ELISA方法。该方法对TTX的检测限可达到1.1μg／L，IC50为20.4μg／L，线性范围3.3-137μg／L，批内变异系数小于6.25％，批间变异系数小于7.34%。对鲫鱼的肌肉组织添加TTX标准品，回收率为65％-93.2％，变异系数为9.41％-12.77％。 展开更多
关键词 河豚毒素 酶标抗原 直接竞争elisa
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直接竞争ELISA检测大米样品中的重金属镉 被引量：20
7
作者 刘艳梅 钟辉 +4 位作者 黄建芳 谈思怡 刘诗琴 邵晨晨 向军俭 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期528-532,共5页
目的直接竞争ELISA方法检测大米样品中重金属镉。方法用纳米Ti O2对微波消解处理的大米样品中的重金属镉进行富集,通过比较不同p H值和不同洗脱体积来优化纳米Ti O2富集方法,再用直接竞争ELISA检测重金属镉的含量。结果在p H为9时,纳米T... 目的直接竞争ELISA方法检测大米样品中重金属镉。方法用纳米Ti O2对微波消解处理的大米样品中的重金属镉进行富集,通过比较不同p H值和不同洗脱体积来优化纳米Ti O2富集方法,再用直接竞争ELISA检测重金属镉的含量。结果在p H为9时,纳米Ti O2对重金属镉有良好的吸附性,20 mg/ml的EDTA·2Na可将纳米Ti O2吸附的镉定量洗脱。用纯化后的镉单克隆抗体建立直接竞争ELISA检测方法,并进行灵敏度和特异性分析,其灵敏度（IC50）为19 ng/ml,检测限（IC10）为2.1 ng/ml,检测范围（IC20~IC80）为3.6~98.2 ng/ml。用优化后的直接竞争ELISA对富集洗脱后的镉溶液进行检测,检测效果满足国家检测标准。结论本研究对6份市售大米样品采用微波消解和富集,通过直接竞争ELISA检测其镉含量,所得结果与仪器法测定结果一致,可用于实际样品的快速检测。 展开更多
关键词 重金属镉 单克隆抗体 直接竞争elisa 纳米TiO2富集
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拟除虫菊酯类农药多残留直接竞争ELISA建立及初步应用 被引量：13
8
作者 余向阳 骆爱兰 +3 位作者 刘媛 徐敦明 刘贤进 常有宏 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期249-252,共4页
以辣根过氧化物酶对兔抗拟除虫菊酯类农药抗体进行标记，通过优化分析条件和样品前处理方法，建立了可同时检测蔬菜中多种拟除虫菊酯类农药的直接竞争抑制ELISA方法（DC-ELISA），并在实际检测中进行了初步应用。该方法可用于同时检测... 以辣根过氧化物酶对兔抗拟除虫菊酯类农药抗体进行标记，通过优化分析条件和样品前处理方法，建立了可同时检测蔬菜中多种拟除虫菊酯类农药的直接竞争抑制ELISA方法（DC-ELISA），并在实际检测中进行了初步应用。该方法可用于同时检测蔬菜中甲氰菊酯、氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯4种农药的残留，检出限（I10）分别为0．25、0．30、0．43、0．81mg·L^-1，青菜样品添加含量为0．5-5．0mg·kg^-1，回收率分别为93％-114％，97％-110％，89％-126％，93％-113％。采用该方法对南京市场抽取的107个样品进行检测，并与气相色谱法进行比较，直接竞争ELISA阳性检出率为8．46％，气相色谱法阳性检出率为3．74％。 展开更多
关键词 拟除虫菊酯 农药残留 直接elisa 甲氰菊酯 氯氰菊酯 三氟氯氰菊酯 溴氰菊酯
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直接竞争ELISA检测氯霉素残留的方法建立及初步应用 被引量：10
9
作者 李晓云 石德时 +4 位作者 王喜亮 熊宁 刘百红 张道宏 毕丁仁 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期723-727,共5页
用混合酸酐法合成氯霉素的CAP抗原,用过碘酸钠氧化法合成CAP酶标记抗原,用ELISA方法对合成的CAP抗原、CAP酶标记抗原进行鉴定表明其与抗CAP单克隆抗体具有特异性反应。在此基础上建立了包被二抗的直接竞争ELISA方法。特异性试验结果表明... 用混合酸酐法合成氯霉素的CAP抗原,用过碘酸钠氧化法合成CAP酶标记抗原,用ELISA方法对合成的CAP抗原、CAP酶标记抗原进行鉴定表明其与抗CAP单克隆抗体具有特异性反应。在此基础上建立了包被二抗的直接竞争ELISA方法。特异性试验结果表明,CAP琥珀酸酯、CAP琥珀酸钠盐的交叉反应率分别为107%、106.4%;甲砜霉素、氟甲砜霉素与CAP的交叉反应率小于0.016%;与其他结构类似物间未见交叉反应。该方法对CAP的检测限可达到0.1μg/L,IC50为11.6μg/L,线性范围0.1～100μg/L,批内变异系数小于11.5%,批间变异系数小于19.6%。对猪肉、鸡肉、蜂蜜分别添加1.0、3.0、10.0、30.0μg/L CAP标准品,回收率61.0%～102.0%,变异系数为6.6%～15.8%;对猪肉、鸡肉、蜂蜜中CAP的最低检测限分别为0.48、0.42、1.20μg/kg。 展开更多
关键词 氯霉素 药物残留 酶标抗原 直接竞争elisa
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ELISA方法与国标法在检测鲜奶中沙门氏菌的比较研究 被引量：23
10
作者 田银芳 王翌明 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 1998年第5期32-33,共2页
应用直接ＥＬＩＳＡ方法对３５０份奶样进行沙门氏菌的检测，其阳性检出率为１．４％；同时采用常规方法检测，其阳性检测率为１．２％。与常规方法相比，该法的敏感性和特异性分别为１００％和９９．７％（３５０份奶样）。结果表明，... 应用直接ＥＬＩＳＡ方法对３５０份奶样进行沙门氏菌的检测，其阳性检出率为１．４％；同时采用常规方法检测，其阳性检测率为１．２％。与常规方法相比，该法的敏感性和特异性分别为１００％和９９．７％（３５０份奶样）。结果表明，该法具有快速、准确等特点，２～３天即可完成样品筛选。 展开更多
关键词 elisa法 沙门氏菌 检测 单克隆抗体 鲜奶
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除草剂丁草胺直接竞争ELISA检测方法研究 被引量：6
11
作者 雷红涛 冯伟雯 +4 位作者 沈玉栋 杨金易 王弘 方坚生 孙远明 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期1018-1023,共6页
制备出3种不同结合比的酶标抗体,对检测条件进行了优化,建立了标记抗体固相抗原直接竞争ELISA(cdELISA)检测丁草胺的方法。结果表明,酶标抗体克分子比为1.55时偶合物活性最高,包被浓度1μg·mL-1,酶标抗体800倍稀释,稀释液采用2... 制备出3种不同结合比的酶标抗体,对检测条件进行了优化,建立了标记抗体固相抗原直接竞争ELISA(cdELISA)检测丁草胺的方法。结果表明,酶标抗体克分子比为1.55时偶合物活性最高,包被浓度1μg·mL-1,酶标抗体800倍稀释,稀释液采用2×PBS,不含BSA、甲醇,建立的标准曲线IC50=1.7ng·mL-1,检测限为0.006ng·mL-1,检测范围0.06～2616.7ng·mL-1,批内变系数9.25%,批间变异系数23.55%。蒸馏水以及稀释10倍后的矿泉水、池塘水、稻田水添加1ng·mL-1和10ng·mL-1的丁草胺,用所建立的方法检测,平均回收率分别为93.27%、158.50%、119.75%、124.51%。本研究为进一步开发丁草胺免疫分析试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 丁草胺 酶标抗体 直接竞争elisa 除草剂
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基于单克隆抗体的三聚氰胺ELISA检测方法的建立 被引量：14
12
作者 王黎丽 陈芳芳 +1 位作者 吴超 余为一 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期962-966,共5页
建立三聚氰胺直接和间接竞争ELISA检测方法。三聚氰胺(melamine)-BSA免疫BALB/c小鼠,通过融合小鼠脾细胞与SP2/0细胞,制备分泌MEL单克隆抗体(monoclonal anti-body)的细胞株;体内诱生腹水制备MEL-mAb。用高碘酸钠法制备MEL-OVA-HRP偶联... 建立三聚氰胺直接和间接竞争ELISA检测方法。三聚氰胺(melamine)-BSA免疫BALB/c小鼠,通过融合小鼠脾细胞与SP2/0细胞,制备分泌MEL单克隆抗体(monoclonal anti-body)的细胞株;体内诱生腹水制备MEL-mAb。用高碘酸钠法制备MEL-OVA-HRP偶联物并对其活性进行鉴定。分别用MEL-OVA和制备的MEL-mAb包被,用三聚氰胺标准液作为抑制物,做直接和间接竞争ELISA,并对两种ELISA方法在灵敏度、线性检测范围、检测时间进行比较。筛选出4株可以稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。其中的C4株腹水效价达到1∶104,亲和力常数(Ka)为2.92×108L/mol。三聚氰胺间接竞争ELISA和直接竞争ELISA检测法的IC50分别为3.12μg/L和56.88μg/L,线性检测范围分别为0.05～10μg/L和0.1～1 000μg/L。两种竞争ELISA方法都能应用于三聚氰胺的快速检测,但间接竞争ELISA比直接竞争ELISA更加灵敏。 展开更多
关键词 三聚氰胺 单克隆抗体 间接竞争elisa 直接竞争elisa
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苏丹红Ⅰ直接竞争ELISA检测试剂盒的研制 被引量：9
13
作者 张明洲 方结红 +4 位作者 陈宗伦 胡华军 杨岭 刘军 俞晓平 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期341-348,共8页
直接包被多克隆抗体建立了苏丹红ⅠELISA检测技术,研制苏丹红ⅠELISA检测试剂盒。结果表明,制备的多克隆抗体对苏丹红Ⅰ亲合力强、特异性高,试剂盒标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为1.55～100μg/L,50%抑制率(IC50... 直接包被多克隆抗体建立了苏丹红ⅠELISA检测技术,研制苏丹红ⅠELISA检测试剂盒。结果表明,制备的多克隆抗体对苏丹红Ⅰ亲合力强、特异性高,试剂盒标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为1.55～100μg/L,50%抑制率(IC50)为13.52μg/L,灵敏度(IC10)为1.95μg/L,平均批内与批间变异系数分别为7.6%与10.6%,与苏丹红Ⅱ、Ⅲ的交叉反应率分别为4.40%和1.70%,与苏丹红Ⅳ及其他违禁食品染色剂交叉反应率低于0.01%;干辣椒、辣椒粉、辣椒油与辣椒酱等4种样品的苏丹红平均添加回收率分别为88.1%、91.4%、78.2%和84.3%,最低检测限分别为1.82、1.71、2.19和2.12μg/kg;与HPLC检测方法具有较高的相符性,4种样品相关系数分别为0.95,0.94,0.86和0.87;该试剂盒在4℃下至少可保存180d,可用于辣椒及其制品中苏丹红Ⅰ的批量快速低成本筛查。 展开更多
关键词 苏丹红Ⅰ 多克隆抗体 elisa直接竞争法 快速检测试剂盒
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孔雀石绿单克隆抗体的制备及直接竞争ELISA方法的建立 被引量：12
14
作者 李晓丽 陈雪岚 +1 位作者 刘春梅 熊勇华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第24期283-286,共4页
通过合成羧基化孔雀石绿,采用活泼酯法制备孔雀石绿免疫抗原CMG-BSA、检测抗原CMG-OVA。采用CMG-BSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化获得了一株稳定的抗孔雀石绿单克隆抗体,并建立了检测孔雀石绿的直接竞争ELISA方法。ELISA方法的... 通过合成羧基化孔雀石绿,采用活泼酯法制备孔雀石绿免疫抗原CMG-BSA、检测抗原CMG-OVA。采用CMG-BSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化获得了一株稳定的抗孔雀石绿单克隆抗体,并建立了检测孔雀石绿的直接竞争ELISA方法。ELISA方法的最佳操作参数:孔雀石绿抗体稀释倍数1:16000(1mg/ml),酶标抗原(CMG-HRP)使用质量浓度0.2μg/ml。该方法具有良好的灵敏度和特异性,IC50值0.3ng/ml,最低检测灵敏度达到0.05ng/ml,标准曲线方程为y=-20.888x+81.423(R2=0.9813)。 展开更多
关键词 孔雀石绿 单克隆抗体 直接竞争elisa
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牛乳铁蛋白直接竞争ELISA检测法的建立 被引量：10
15
作者 冯挺财 邵谱 +2 位作者 胡珩 杨正涛 张乃生 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第18期7650-7652,7761,共4页
[目的]建立一种检测牛乳铁蛋白（LF）含量的竞争ELISA检测方法。[方法]制备鼠抗牛LF单克隆抗体，采用直接竞争ELISA测定酶标记物效价，建立牛LF的直接竞争ELISA检测方法。[结果]纯化后，制备的鼠抗牛LF单抗效价达1：1280000，且鉴定为I... [目的]建立一种检测牛乳铁蛋白（LF）含量的竞争ELISA检测方法。[方法]制备鼠抗牛LF单克隆抗体，采用直接竞争ELISA测定酶标记物效价，建立牛LF的直接竞争ELISA检测方法。[结果]纯化后，制备的鼠抗牛LF单抗效价达1：1280000，且鉴定为IgGl。该单抗对牛乳铁蛋白具有很强的特异性。制备酶标单抗的效价为1：640000。抗原包被物和酶标单抗的最适工作浓度分别为1．0μg／ml和1：40000。抗原用碳酸盐缓冲液（pH值为9．6）包被先在4℃过夜、再37℃放置2h的效果最好。采用2％牛血清白蛋白作为封闭剂的效果最好。在31．25．1000 ng／ml浓度范围内，牛乳铁蛋白的logit（B／B0）与牛乳铁蛋白浓度的对数值呈显著的线性关系，其回归方程为γ=-1．8991x＋5．0433（R^2=0．9873）。[结论]该研究为研制用于奶牛乳腺炎诊断的牛LF检测试剂盒奠定基础。 展开更多
关键词 牛乳铁蛋白 Celisa 定量检测
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兽药制剂中氯霉素的ELISA检测方法的研究 被引量：7
16
作者 张连彦 王亚芳 +4 位作者 李应超 李蓉蓉 邢维维 杨柳 陶晓奇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第2期85-88,共4页
为了检测兽药制剂中氯霉素的非法添加,优化反应条件和前处理方法,建立直接竞争ELISA方法。该方法检出限为1 mg/kg,添加回收率为81.00%~112.00%,批内和批间变异系数均小于10%,与国标仪器方法检测结果一致性好。本文建立的氯霉素直接竞争E... 为了检测兽药制剂中氯霉素的非法添加,优化反应条件和前处理方法,建立直接竞争ELISA方法。该方法检出限为1 mg/kg,添加回收率为81.00%~112.00%,批内和批间变异系数均小于10%,与国标仪器方法检测结果一致性好。本文建立的氯霉素直接竞争ELISA方法具有较高的精确度和稳定性,操作简单,检测时间短,可满足兽药制剂中氯霉素的检测。 展开更多
关键词 氯霉素 兽药制剂 直接竞争酶联免疫方法
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(don)直接竞争elisa方法的建立 被引量：3
17
作者 张银志 金萍 +2 位作者 孙秀兰 徐丹 邵景东 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期28-32,共5页
利用前期制备得到的DON酶标抗原(辣根过氧化物酶标记)以及抗DON抗体,建立检测食品中DON含量的直接竞争ELISA方法。该方法的检测范围1～100ng/mL,灵敏度达0.56ng/mL,半数抑制浓度IC50为10ng/mL;与DON类似物T-2毒素的交叉反应率为12%;玉... 利用前期制备得到的DON酶标抗原(辣根过氧化物酶标记)以及抗DON抗体,建立检测食品中DON含量的直接竞争ELISA方法。该方法的检测范围1～100ng/mL,灵敏度达0.56ng/mL,半数抑制浓度IC50为10ng/mL;与DON类似物T-2毒素的交叉反应率为12%;玉米淀粉样品回收率在80.2%～91.1%之间,平均批间变异<15%,平均批内变异<3%。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(don) 酶标抗原 抗体 直接竞争elisa 辣根过氧化物酶(hrp)
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3种ELISA法检测Bt杀虫蛋白的比较研究 被引量：5
18
作者 崔林开 叶华智 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2005年第11期2056-2057,共2页
运用3种ELISA法对提纯的Bt杀虫蛋白进行检测,结果表明:直接法ELISA和夹心法ELISA的灵敏度相同,都为0.94 ng/孔,但直接法ELISA中Bt蛋白量与OD值间呈极显著的线性关系,夹心法ELISA中Bt蛋白量与OD值间呈显著的线性关系;间接法ELISA的灵敏... 运用3种ELISA法对提纯的Bt杀虫蛋白进行检测,结果表明:直接法ELISA和夹心法ELISA的灵敏度相同,都为0.94 ng/孔,但直接法ELISA中Bt蛋白量与OD值间呈极显著的线性关系,夹心法ELISA中Bt蛋白量与OD值间呈显著的线性关系;间接法ELISA的灵敏度较前两者低,使用HRP-IgG的灵敏度为15 ng/孔,Bt蛋白量与OD值间呈显著的线性关系,使用AKP-IgG的灵敏度为3.75ng/孔,Bt蛋白量与OD值间呈极显著的线性关系。 展开更多
关键词 BT杀虫蛋白 直接法elisa 间接法elisa 夹心法elisa
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直接法McAb-Dot-ELISA检测日本血吸虫感染耕牛血清循环抗原的研究 被引量：2
19
作者 叶萍 张军 +3 位作者 田锷 朱顺海 石耀军 林矫矫 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1993年第6期341-343,共3页
将抗日本血吸虫单克隆抗体标记辣根过氧化物酶,进行直接法单克隆抗体斑点酶联免疫吸附试验(McAb-Dot-ELISA),检测日本血吸虫感染耕牛的血清循环抗原。结果,该方法对实验感染耕牛的阳性检出率为100％(32/32);对安徽、江西和湖南3省血吸... 将抗日本血吸虫单克隆抗体标记辣根过氧化物酶,进行直接法单克隆抗体斑点酶联免疫吸附试验(McAb-Dot-ELISA),检测日本血吸虫感染耕牛的血清循环抗原。结果,该方法对实验感染耕牛的阳性检出率为100％(32/32);对安徽、江西和湖南3省血吸虫病流行区自然感染耕牛(粪孵阳性)的阳性检出率分别为93.93％(418/445),88.50％(100/113)和81.71％(143/175);对健康耕牛的阴性符合率为98.51％(66/77),对16份感染锥虫和8份实验感染肝片吸虫的耕牛血清均未见交叉反应。提示,该方法具有操作简便、快速等优点,可作为一种新的耕牛血吸虫病免疫诊断方法在疫区基层推广应用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 循环抗原 单克隆抗体 DOT-elisa
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直接竞争ELISA法检测动物源食品中利巴韦林残留 被引量：4
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作者 刘卫华 沙芳芳 +2 位作者 李润磊 王鑫伟 王向红 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第9期242-247,252,共7页
本研究针对动物源食品中利巴韦林残留的问题,建立了直接竞争酶联免疫分析方法,快速高效地检测利巴韦林残留。采用活泼酯法将利巴韦林(RBV)与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联制备利巴韦林完全抗原(KLH-RBV),通过免疫新西兰大耳白兔得到多抗血清,经... 本研究针对动物源食品中利巴韦林残留的问题,建立了直接竞争酶联免疫分析方法,快速高效地检测利巴韦林残留。采用活泼酯法将利巴韦林(RBV)与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联制备利巴韦林完全抗原(KLH-RBV),通过免疫新西兰大耳白兔得到多抗血清,经Protein A-Sepharose 4B凝胶柱纯化后得到纯化抗体,在此基础上建立直接竞争ELISA检测方法。该方法的IC_(50)为10.84 ng/mL,最低检测限达0.002 ng/mL,对鸡肉、鸡肝、猪肉、猪肝等实际样品进行检测,加标回收率为80.23%～90.07%。采用高效液相色谱法进行验证,两种方法测定结果呈现良好的线性关系(R^2≥0.99)。本文建立的方法灵敏度高,简便快速,适合现场大批量快速检测动物源食品中利巴韦林残留。 展开更多
关键词 利巴韦林 直接竞争elisa 快速检测 动物源食品
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