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Development of Highly Specific Enzyme Immunoassay for Monitoring Serum Digitoxin Level in Patients
1
作者 Yasuhiko Higashi Yukari Ikeda +1 位作者 Mayumi Douno Youichi Fujii 《Journal of Analytical Sciences, Methods and Instrumentation》 2016年第2期15-22,共8页
We previously developed radioimmunoassays (RIAs) for digitoxin and digoxin using antisera raised against digitoxin 3’-hemisuccinate-bovine serum albumin and digoxin 3’-hemisuccinate-bovine serum albumin conjugates, ... We previously developed radioimmunoassays (RIAs) for digitoxin and digoxin using antisera raised against digitoxin 3’-hemisuccinate-bovine serum albumin and digoxin 3’-hemisuccinate-bovine serum albumin conjugates, respectively. Very recently, we converted the RIA for digoxin to an enzyme immunoassay (EIA) system. Here, we aimed to convert the RIA for digitoxin to an EIA suitable for measuring serum digitoxin level in patients, using digitoxin 3’-hemisuccinate-β-D-galactosidase as an enzyme-labeled antigen. The developed EIA showed a quantification range of 1 to 70 ng/mL and exhibited high specificity for digitoxin, with low cross-reactivity to digitoxin metabolites. Compared with a commercial anti-digitoxin antiserum clinically used to monitor serum digitoxin level in patients, our antiserum showed much higher specificity for intact digitoxin. Intra- and inter-assay variations were less than 10.0% and 8.5%, respectively. Recovery was within the range of 93.7% - 107.5%. Mean digitoxin concentrations measured in serum samples (n = 26) from digitoxin-treated patients by EIA using our new antiserum and the commercial anti-digitoxin antiserum were 11.0 and 13.8 ng/mL, respectively. The present EIA, which is superior to RIA in terms of convenience and disposal of waste materials, is expected to be practically useful for clinical monitoring of intact digitoxin in serum. 展开更多
关键词 digitoxin digitoxin 3’-Hemisuccinate-β-D-Galactosidase digitoxin 3’-Hemisuccinate-Bovine Serum Albumin ANTISERUM Enzyme Immunoassay CROSS-REACTIVITY
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Short term protective effect of digitoxin in sepsis-induced acute lung injury
2
作者 EJDER SAYLAV BORA MÜMIN ALPER ERDOĞAN +4 位作者 BAHATTINÖZKUL İBRAHIM HALIL SEVER İBRAHIM SÖĞÜT CANAN HÜRDAĞ OYTUN ERBAŞ 《BIOCELL》 SCIE 2022年第2期433-439,共7页
Purpose:Digitoxin is a cardiac glycoside used in the treatment of heart failure.Inspired by its known antiinflammatory effect,this study aims to investigate the effect of digoxin in a sepsis model and to bring to ligh... Purpose:Digitoxin is a cardiac glycoside used in the treatment of heart failure.Inspired by its known antiinflammatory effect,this study aims to investigate the effect of digoxin in a sepsis model and to bring to light its effect and underlying mechanism in acute lung injury(ALI).Method:28 wistar albino rats were divided into 4 groups.Sepsis model is performed by the feces intraperitoneal-injection procedure(FIP).Results:TNF-a,CRP,IL-6,IL 1-Beta,lactic acid,and MDA values were significantly decreased in the FIP+digitoxin group compared to the FIP+Saline group.When the same groups were examined,histological improvements such as decrease in alveolar inflammation and decrease in septal thickening in the digitoxin group and thorax CT were found to be significantly higher in the Hounsfield unit digitoxin group compared to the Saline group.Conclusion:Digitoxin has shown biochemical improvement in sepsis with all known mechanisms of action,and healing effects in both computerized tomography and histology in the lung. 展开更多
关键词 digitoxin Animal model SEPSIS Acute lung injury
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基于Akt/mTOR信号通路探讨洋地黄毒苷调控甲状腺滤泡上皮细胞自噬与凋亡的机制
3
作者 蒋学林 刘长江 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第4期457-464,共8页
目的探究洋地黄毒苷对脂多糖刺激下的人甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-roi3-1凋亡与自噬的影响及其作用机制。方法①将Nthy-roi3-1细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+洋地黄毒苷低剂量组、脂多糖+洋地黄毒苷中剂量组及脂多糖+洋地黄毒苷高... 目的探究洋地黄毒苷对脂多糖刺激下的人甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-roi3-1凋亡与自噬的影响及其作用机制。方法①将Nthy-roi3-1细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+洋地黄毒苷低剂量组、脂多糖+洋地黄毒苷中剂量组及脂多糖+洋地黄毒苷高剂量组,各组进行对应处理后,CCK-8法检测各组细胞活力,免疫荧光染色观察各组细胞自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Bcl-2同源结构域蛋白抗体(Beclin 1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p70S6K蛋白表达情况。②将Nthy-roi3-1细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+洋地黄毒苷组、脂多糖+洋地黄毒苷+自噬抑制剂组,各组进行对应处理后,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR及p70S6K蛋白表达情况。结果①与脂多糖组比较,脂多糖+洋地黄毒苷各组的细胞活力均明显升高(P均<0.05);LC3荧光染色强度随洋地黄毒苷剂量增加逐渐增强,细胞凋亡率均明显降低(P均<0.05);细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),细胞中p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p70S6K蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。②与脂多糖组比较,脂多糖+洋地黄毒苷组细胞凋亡率明显降低(P<0.05);细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),细胞中p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p70S6K蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。与脂多糖+洋地黄毒苷组比较,脂多糖+洋地黄毒苷+自噬抑制剂组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),细胞中p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p70S6K蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。结论洋地黄毒苷能够促进脂多糖刺激下Nthy-roi3-1细胞自噬,抑制细胞凋亡,该作用可能与其抑制Akt/mTOR信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 人甲状腺滤泡上皮细胞 脂多糖 自噬 Akt/mTOR信号通路
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洋地黄毒苷合成途径3β-羟基类固醇脱氢酶基因克隆及功能分析
4
作者 韩洋 夏梦 +2 位作者 张逸风 苏平 黄璐琦 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期370-378,共9页
洋地黄毒苷作为中药洋地黄中重要的次生代谢产物,是临床中最常用的强心药物之一。3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)是洋地黄毒苷生物合成途径酶,属于短链脱氢酶/还原酶(SDR)家族,起到氧化和异构前体化合物甾醇的作用,参与强心苷类化合物的... 洋地黄毒苷作为中药洋地黄中重要的次生代谢产物,是临床中最常用的强心药物之一。3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)是洋地黄毒苷生物合成途径酶,属于短链脱氢酶/还原酶(SDR)家族,起到氧化和异构前体化合物甾醇的作用,参与强心苷类化合物的生物合成。该研究从洋地黄中首次克隆得到2个3βHSD基因,实验结果显示:Dp3βHSD1开放阅读框为780 bp,编码259个氨基酸;Dp3βHSD2开放阅读框为774 bp,编码257个氨基酸。Dp3βHSD1/2均具有TGxxxA/GxG辅因子结合位点和YxxxK催化位点基序,含有SDR酶的活性位点和NAD(P)结合位点。通过体外酶促试验证实Dp3βHSD1/2均能催化孕烯醇酮生成洋地黄毒苷前体化合物黄体酮,且Dp3βHSD1较Dp3βHSD2具有更强的催化能力。基因表达水平分析表明Dp3βHSD1基因在叶中的表达水平显著高于Dp3βHSD2,而洋地黄毒苷在叶中特异性富集,基于以上结果推测洋地黄毒苷生物合成途径中孕烯醇酮脱氢生成黄体酮过程主要由Dp3βHSD1催化完成。该研究成功解析了功能性3β-羟基类固醇脱氢酶,为进一步解析洋地黄中强心苷类化合物的生物合成途径奠定基础。 展开更多
关键词 洋地黄 洋地黄毒苷 3β-羟基类固醇脱氢酶 功能鉴定
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三种真菌对洋地黄毒苷的生物转化特性研究 被引量:7
5
作者 王丽娟 王敏 +1 位作者 温竹 刘增兵 《天津科技大学学报》 CAS 2008年第3期8-12,共5页
考察了新月弯孢霉(Curvularia lunata)AS3.3589、蓝色犁头霉(Absidia coerulea)CICC40302和雷斯青霉(Penicillium raistrickii)ATCC10490对洋地黄毒苷的生物转化特性.结果表明:新月弯孢霉AS3.3589转化洋地黄毒苷得到2个产物,即产物Ⅰ和... 考察了新月弯孢霉(Curvularia lunata)AS3.3589、蓝色犁头霉(Absidia coerulea)CICC40302和雷斯青霉(Penicillium raistrickii)ATCC10490对洋地黄毒苷的生物转化特性.结果表明:新月弯孢霉AS3.3589转化洋地黄毒苷得到2个产物,即产物Ⅰ和产物Ⅱ,产物Ⅰ的转化率为27%,产物Ⅱ的转化率为5%;蓝色犁头霉CICC40302转化洋地黄毒苷得到1个产物,即产物Ⅲ,转化率为6%;雷斯青霉ATCC10490对洋地黄毒苷不发生转化反应.通过优化新月弯孢霉KA-91生物转化反应的工艺条件,使转化产物Ⅰ的转化率达到38%,产物Ⅱ的转化率达到10%. 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 新月弯孢霉 蓝色犁头霉 雷斯青霉 生物转化
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赭曲霉转化洋地黄毒苷的工艺优化和产物活性分析 被引量:4
6
作者 骆健美 宋霆 +3 位作者 朱凤芝 申雁冰 李景新 王敏 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期398-403,共6页
以赭曲霉Rn405转化洋地黄毒苷的微生物转化工艺为研究对象,对助溶剂种类、底物浓度、金属离子种类和浓度等关键参数进行优化,确定的最优转化条件为:发酵培养基中添加1 mmol/L Mn2+离子,28℃,180 rpm振荡培养28 h时加入溶解于DMSO的底物... 以赭曲霉Rn405转化洋地黄毒苷的微生物转化工艺为研究对象,对助溶剂种类、底物浓度、金属离子种类和浓度等关键参数进行优化,确定的最优转化条件为:发酵培养基中添加1 mmol/L Mn2+离子,28℃,180 rpm振荡培养28 h时加入溶解于DMSO的底物溶液,使其终浓度为100 mg/L,然后在相同的条件下转化96 h。此时,底物的转化率和11α-羟基洋地黄毒苷元的生成率分别达到了100%和25.4%,比优化前分别提高了33.1%和14.5%。通过斯氏灌流法和Langendorff灌流法,探讨两个转化产物对蟾蜍和大鼠心肌细胞收缩能力的影响。结果表明,洋地黄毒苷元对心肌细胞收缩率的影响和底物洋地黄毒苷相当,而11α-羟基洋地黄毒苷元对心肌细胞收缩率的影响比底物洋地黄毒苷和洋地黄毒苷元均有所增强。 展开更多
关键词 赭曲霉 洋地黄毒苷 微生物转化 工艺优化 活性分析
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HPLC-MS/MS测定地高辛片中羟基洋地黄毒苷和洋地黄毒苷的含量 被引量:1
7
作者 朱建喜 庄波阳 +1 位作者 王凌 林敏 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2013年第12期1342-1346,共5页
目的 采用HPLC-MS/MS建立同时测定地高辛片中羟基洋地黄毒苷和洋地黄毒苷的方法。方法 色谱柱Agilent C18(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(40∶60),三重四极杆串联质谱检测,电喷雾离子化源(ESI),在负离子条件下... 目的 采用HPLC-MS/MS建立同时测定地高辛片中羟基洋地黄毒苷和洋地黄毒苷的方法。方法 色谱柱Agilent C18(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(40∶60),三重四极杆串联质谱检测,电喷雾离子化源(ESI),在负离子条件下以多反应监测(MRM)方式进行扫描定量。结果 羟基洋地黄毒苷浓度在0.025 65-2.565 μg·mL^-1内与峰面积呈良好的线性关系,r为0.999 3; 洋地黄毒苷浓度在0.025 95-2.596 μg·mL^-1内与峰面积呈良好的线性关系,r为0.999 8;羟基洋地黄毒苷平均加样回收率为99.7%,RSD=2.2%;洋地黄毒苷平均加样回收率为100.9%,RSD=2.3%。结论 本方法简便、准确可靠,适用于地高辛片中羟基洋地黄毒苷和洋地黄毒苷两个主要有关物质的控制。 展开更多
关键词 地高辛片 液相色谱-串联质谱 有关物质 羟基洋地黄毒苷 洋地黄毒苷
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强心甙类药对长春新碱抗肿瘤活性的协同作用 被引量:2
8
作者 俞昌喜 林心建 +2 位作者 黄自强 章雄文 吴国土 《福建医学院学报》 1996年第4期306-309,共4页
目的探讨强心甙类药物洋地黄毒甙或地高辛对长春新碱抗肿瘤活性的协同作用。方法台盼蓝排染法测定药物对K562细胞的杀伤作用;用小鼠肝癌腹水瘤H22模型,观察药物对小鼠生命延长率的影响。结果洋地黄毒甙、地高辛能显著杀伤K5... 目的探讨强心甙类药物洋地黄毒甙或地高辛对长春新碱抗肿瘤活性的协同作用。方法台盼蓝排染法测定药物对K562细胞的杀伤作用;用小鼠肝癌腹水瘤H22模型,观察药物对小鼠生命延长率的影响。结果洋地黄毒甙、地高辛能显著杀伤K562细胞,并有剂量依赖性,IC50分别为0.059,0.101μg/ml;低浓度洋地黄毒甙或地高辛对低浓度长春新碱杀伤K562细胞呈现增强作用(q>1)。洋地黄毒甙或地高辛对长春新碱抑制H22腹水瘤也呈增强作用(g>1)。结论洋地黄毒甙、地高辛对长春新碱抗肿瘤活性有增强作用。 展开更多
关键词 洋地黄毒甙 地高辛 长春新碱 抗肿瘤活性
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傣药雅解沙把解药物毒作用的研究 被引量:3
9
作者 段小花 郑进 +3 位作者 王辉 李秀芳 代蓉 淤泽溥 《云南中医中药杂志》 2013年第10期56-58,89,共3页
目的选用主要在肝脏代谢灭活的洋地黄毒苷,观察"雅解沙把"对小鼠洋地黄毒苷半数致死量(LD50)的影响。方法以主要在肝脏代谢灭活的洋地黄毒苷为研究对象,观察预先给予"雅解沙把"(3.51g/kg)后,小鼠洋地黄毒苷LD50的变... 目的选用主要在肝脏代谢灭活的洋地黄毒苷,观察"雅解沙把"对小鼠洋地黄毒苷半数致死量(LD50)的影响。方法以主要在肝脏代谢灭活的洋地黄毒苷为研究对象,观察预先给予"雅解沙把"(3.51g/kg)后,小鼠洋地黄毒苷LD50的变化,以了解"雅解沙把"是否能够加速洋地黄毒苷的肝脏代谢而降低洋地黄毒苷的毒性。结果洋地黄毒苷小鼠24h内1次性灌胃给药,LD50为28.8718mg/kg;雅解沙把按3.51g生药/kg/天连续灌胃给予7d,第8d时洋地黄毒苷小鼠24h内1次性灌胃给药,LD50为34.9523mg/kg。结论给"雅解沙把"(3.51g/kg)后,小鼠洋地黄毒苷LD50增大,提示"雅解沙把"有一定的解药物毒作用。 展开更多
关键词 雅解沙把 洋地黄毒苷 半数致死量
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洋地黄毒苷抑制PI3K/AKT信号通路对下咽癌Fadu细胞增殖和凋亡影响 被引量:1
10
作者 陈帅 刘恒 《社区医学杂志》 CAS 2021年第9期553-558,共6页
目的探讨强心苷药物洋地黄毒苷对下咽癌Fadu细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法 0、50、100、200和400nmol/L的洋地黄毒苷不同时间点处理Fadu细胞,细胞计数试剂(CCK-8)和三磷酸腺苷(ATP)发光法检测Fadu细胞增殖,Ann... 目的探讨强心苷药物洋地黄毒苷对下咽癌Fadu细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法 0、50、100、200和400nmol/L的洋地黄毒苷不同时间点处理Fadu细胞,细胞计数试剂(CCK-8)和三磷酸腺苷(ATP)发光法检测Fadu细胞增殖,Annexin Ⅴ-FITC/PI双标流式细胞术和Caspase3/7活细胞荧光实时法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测PI3K和AKT总蛋白和磷酸化蛋白水平。结果细胞增殖检测结果显示,洋地黄毒苷剂量和时间依赖性抑制FaDu细胞增殖,48h后,CCK-8检测值分别为0.73±0.02、0.63±0.02、0.43±0.02和0.23±0.02,低于对照组的1.27±0.05,F浓度=17 810.000,P<0.001;F时间=230.900,P<0.001;F时间×浓度=292.100,P<0.001,IC50值为102nmol/L。而ATP检测值为360 175.00±15 432.88、277 193.00±20 311.25、212 869.66±9 955.65和164 726.66±12 536.46,低于对照组的682 460.66±37 594.12,F浓度=345.600,P=0.003;F时间=120.700,P<0.001;F时间×浓度=95.000,P<0.001。细胞凋亡检测结果显示,随着洋地黄毒苷浓度增加,FaDu细胞的凋亡率增加到(20.42±1.54)%和(34.58±2.16)%,高于对照组的(11.94±1.39)%,F浓度=130.100,P<0.001;而凋亡相关蛋白Caspase3/7的活性增加到33 986.00±2 513.50和43 786.33±1 736.32,高于对照组的22 652.66±2 162.53;F浓度=71.860,P<0.001。蛋白质印迹法分析结果显示,洋地黄毒苷能剂量性的降低p-PI3K蛋白到0.51±0.04和0.18±0.002,低于对照组的1.00±0.07,F浓度=276.400,P<0.001;而p-AKT蛋白降低到0.46±0.03和0.13±0.004,低于对照组1.00±0.05,F浓度=483.500,P<0.001。结论洋地黄毒苷可能通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导下咽癌细胞的凋亡,抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 PI3K/AKT 细胞凋亡 细胞增殖 下咽癌 洋地黄毒苷
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洋地黄毒甙体内抗肿瘤活性及其增效作用 被引量:4
11
作者 林心建 黄自强 李常春 《福建医学院学报》 1996年第2期113-116,共4页
目的探讨洋地黄毒甙(DT)体内抗肿瘤活性及时常用化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)和环磷酰胺(CTX)的增效作用。方法  应用小鼠移植性肿瘤模型,观察药物对小鼠生命延长率或肿瘤抑制率的影响。在可耐受的剂量(0.1mg/k... 目的探讨洋地黄毒甙(DT)体内抗肿瘤活性及时常用化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)和环磷酰胺(CTX)的增效作用。方法  应用小鼠移植性肿瘤模型,观察药物对小鼠生命延长率或肿瘤抑制率的影响。在可耐受的剂量(0.1mg/kg·d-1,ip)下治疗小鼠腹水瘤EAC,H22,P388及实体瘤S180,U14。结果  对腹水瘤无对抗作用,对实体瘤有一定抑制作用,抑瘤率分别为34.6%,35.1%。DT与5-FU(200mg/kg·d-1×1,ip)合用能显著提高5-FU对腹水瘤小鼠的生命延长率,分别达到59.3%,77.4%和93.2%;与轻度抑瘤作用剂量(20mg/kg·d-1×2,ip)的CTX合用,对实体瘤的抑瘤活性高于单独给药组,抑瘤率分别为78.8%,80.8%。结论 DT和5-FU或CTX合用具有增强疗效的作用,毒性无明显相加。 展开更多
关键词 洋地黄毒甙 抗肿瘤活性 小鼠移植性肿瘤 增效作用
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洋地黄毒甙体外抗人癌细胞株的作用 被引量:3
12
作者 林心建 黄自强 李常春 《福建医学院学报》 1996年第1期17-20,共4页
目的:探讨洋地黄毒甙体外抗肿瘤作用。方法:以台盼蓝排染法、中性红活染法和克隆形成实验测定洋地黄毒甙(DT)对多种人癌细胞株的细胞毒作用。结果:0.01~1.25μg/mlDT在体外能显著杀伤HL-60.K562.SM... 目的:探讨洋地黄毒甙体外抗肿瘤作用。方法:以台盼蓝排染法、中性红活染法和克隆形成实验测定洋地黄毒甙(DT)对多种人癌细胞株的细胞毒作用。结果:0.01~1.25μg/mlDT在体外能显著杀伤HL-60.K562.SMMC-7721,SGC-7901细胞,并呈剂量依赖性,药物作用24h.IC50分别是0.132.0.182.0.265.0.489μg/ml。对正常成纤维细胞株HLF的IC(50)为4.288μg/ml.明显高于癌细胞,对癌细胞具有选择毒性作用。克隆形成实验中,0.01~1.25μg/mlDT处理12h,对HL-60和SGC-7901细胞集落形成有明显的抑制作用,IC50分别是0.056.0.l19μg/ml。结论:应用洋地黄毒甙及其他Na+-K+-ATP酶抑制剂防治肿瘤是一个值得探讨新方向。 展开更多
关键词 洋地黄毒甙 人癌细胞株 抗肿瘤作用 体外试验
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洋地黄毒苷通过调控转录因子RORγt的表达抑制Th17细胞产生IL-17A 被引量:5
13
作者 余思菲 杨滨燕 +1 位作者 张燕楠 吴长有 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期519-524,共6页
目的研究洋地黄毒苷(Digitoxin)在体外对人CD4+T细胞产生IL-17A和IFN-γ的影响及其机制。方法人PBMC用抗CD3和抗CD28抗体共刺激或在诱导Th17分化的条件下,同时加或不加Digitoxin,用酶联免疫吸附法检测培养上清中IL-17A和IFN-γ的产生。... 目的研究洋地黄毒苷(Digitoxin)在体外对人CD4+T细胞产生IL-17A和IFN-γ的影响及其机制。方法人PBMC用抗CD3和抗CD28抗体共刺激或在诱导Th17分化的条件下,同时加或不加Digitoxin,用酶联免疫吸附法检测培养上清中IL-17A和IFN-γ的产生。利用流式细胞术检测细胞因子IL-17A、IFN-γ以及转录因子RORγt的表达。利用Western blotting检测Digitoxin对RORγt表达的影响。结果 Digitoxin对人IL-17A有显著的剂量依赖性抑制作用,并且在刺激的早期(第0小时和第6小时)加入Digitoxin能显著地抑制IL-17A的产生,但不影响IFN-γ的产生,而晚期(第12小时和第24小时)加入Digitoxin对IL-17A的产生没有明显地抑制作用。进一步研究发现,Digitoxin抑制Th17细胞的分化,调控IL-17A的转录因子RORγt的表达。结论本实验表明,Digitoxin通过早期调控RORγt的表达来抑制IL-17A的产生,但不抑制IFN-γ的产生,提示Digitoxin除了对心血管作用外,也可以抑制炎症性疾病和自身免疫性疾病的发生发展。 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 TH17细胞 TH1细胞 细胞因子 RORΓT
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洋地黄毒苷对肺癌NCI-H446与A549细胞增殖和周期的影响 被引量:2
14
作者 刘锋 陈志添 +1 位作者 邵孔健 萨本仲 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2015年第1期6-10,共5页
目的:探讨洋地黄毒苷对肺癌NCI-H446与A549细胞增殖和细胞周期的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:体外培养的NCI-H446与A549细胞分别经不同浓度(10、20、40、80、160 nmol/L)的洋地黄毒苷处理24、48和72 h后,采用MTT法检测细胞... 目的:探讨洋地黄毒苷对肺癌NCI-H446与A549细胞增殖和细胞周期的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:体外培养的NCI-H446与A549细胞分别经不同浓度(10、20、40、80、160 nmol/L)的洋地黄毒苷处理24、48和72 h后,采用MTT法检测细胞增殖情况,应用流式细胞术检测洋地黄毒苷处理细胞48 h后各组细胞周期分布,Western blot检测细胞中Cyclin A和P21蛋白表达水平。结果:与未经洋地黄毒苷处理的对照组相比,不同浓度(10、20、40、80和160 nmol/L)的洋地黄毒苷均可抑制NCI-H446与A549细胞的增殖,均呈剂量和时间依赖性(P<0.05),作用48 h后,洋地黄毒苷对NCI-H446与A549细胞的IC值分别为61.26 nmol/L和50110.73 nmol/L。流式细胞仪分析结果显示,随药物作用浓度增加,G0/G1细胞比例降低,S期细胞比例显著增加,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot分析结果显示,洋地黄毒苷能剂量依赖性的下调Cyclin A1蛋白表达和上调P21蛋白的表达(P<0.05)。结论:洋地黄毒苷可抑制体外培养的肺癌NCI-H446与A549细胞增殖,诱导细胞发生S期阻滞,其机制可能与细胞周期相关调控蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 肺癌 细胞周期调控 细胞周期蛋白A1
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洋地黄毒苷对裸鼠甲状腺乳头状癌组织生长的抑制作用 被引量:1
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作者 于明亮 段滨红 +4 位作者 王丹 杜馥曼 马金玲 赵凌斐 刘余 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第21期3670-3672,共3页
目的:探讨洋地黄毒苷对裸鼠甲状腺乳头状癌的治疗效果。方法:建立裸鼠肿瘤模型后,分为空白对照组、实验组,每组8只,分别给予生理盐水、洋地黄毒苷(1 mg/kg),隔日腹腔注射。治疗15天后,分析肿瘤体积,取下瘤体,选取实验组及空白对照组肿... 目的:探讨洋地黄毒苷对裸鼠甲状腺乳头状癌的治疗效果。方法:建立裸鼠肿瘤模型后,分为空白对照组、实验组,每组8只,分别给予生理盐水、洋地黄毒苷(1 mg/kg),隔日腹腔注射。治疗15天后,分析肿瘤体积,取下瘤体,选取实验组及空白对照组肿瘤组织进行HE染色。结果:治疗前,空白对照组与实验组裸鼠肿瘤体积分别为(109.43±7.67)mm^3和(107.15±6.97)mm^3。治疗15天后,空白对照组裸鼠肿瘤体积为(732.67±72.40)mm^3,实验组裸鼠肿瘤体积为(251.91±27.29)mm^3(实验组vs空白对照组,P<0.01)。HE染色结果示,实验组部分区域肿瘤细胞核淡染、缩小,且局部出现了变性、坏死。表明了洋地黄毒苷的抑瘤作用可能与其诱导肿瘤组织的破坏有关。结论:洋地黄毒苷可以抑制裸鼠体内甲状腺乳头状癌的生长。 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 甲状腺乳头状癌 裸鼠
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洋地黄毒苷的合成及基于抗肿瘤活性的糖基修饰研究进展 被引量:3
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作者 符登宪 廖智文 +1 位作者 曾静 万谦 《药学进展》 CAS 2020年第7期501-511,共11页
洋地黄毒苷是一种广泛使用的强心苷类药物,其良好的抗肿瘤活性亦引起了广泛关注。针对洋地黄毒苷的全合成,以及为解决其毒性大、治疗窗口窄等问题而进行的结构修饰和构效关系研究吸引了合成化学家和药物化学家的兴趣。结合国内外研究现... 洋地黄毒苷是一种广泛使用的强心苷类药物,其良好的抗肿瘤活性亦引起了广泛关注。针对洋地黄毒苷的全合成,以及为解决其毒性大、治疗窗口窄等问题而进行的结构修饰和构效关系研究吸引了合成化学家和药物化学家的兴趣。结合国内外研究现状,总结了近十年来洋地黄毒苷的全合成及针对其糖基部分进行的结构修饰和改造方面的研究进展,同时也对洋地黄毒苷抗肿瘤活性的构效关系进行了总结归纳,以期为强心苷的合成、结构修饰以及发现低毒高效的洋地黄毒苷类抗肿瘤药物提供参考。 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 合成 糖基修饰 抗肿瘤活性 糖基化
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不同的洋地黄类药物对甲状腺乳头状癌细胞自噬的影响 被引量:3
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作者 马金玲 王丹 +7 位作者 段滨红 邹宁 王亦薇 杜馥曼 刘余 赵凌斐 仲恒 卞丙凤 《黑龙江医学》 2019年第5期442-443,共2页
目的探讨不同的洋地黄类药物对甲状腺乳头状癌细胞株BC-PAP的自噬调控作用。方法将甲状腺乳头状癌细胞株BC-PAP分为空白对照组、洋地黄毒苷组、地高辛组,应用CCK-8方法测定细胞活性,并观察细胞的生长情况,电镜观察细胞内自噬小体的形成... 目的探讨不同的洋地黄类药物对甲状腺乳头状癌细胞株BC-PAP的自噬调控作用。方法将甲状腺乳头状癌细胞株BC-PAP分为空白对照组、洋地黄毒苷组、地高辛组,应用CCK-8方法测定细胞活性,并观察细胞的生长情况,电镜观察细胞内自噬小体的形成。结果洋地黄毒苷、地高辛均能够呈剂量依赖性地抑制BC-PAP细胞的生长。洋地黄毒苷的IC50浓度为0.25μmol/L,而地高辛的IC50浓度为5μmol/L。结论洋地黄毒苷、地高辛可增强甲状腺癌细胞自噬,洋地黄毒苷诱自噬的作用更强。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 自噬 洋地黄毒苷 地高辛
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米力农与洋地黄毒苷片治疗慢性心力衰竭的疗效及对心功能的影响 被引量:3
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作者 严新美 万红梅 +2 位作者 夏金兰 王菁 曾庆宏 《上海医药》 CAS 2020年第2期21-22,55,共3页
目的:探讨米力农与洋地黄毒苷片治疗慢性心力衰竭的疗效及对心功能的影响。方法:收集2015年1月—2018年8月收治的慢性心力衰竭患者82例,按照不同用药方案分为观察组35例和对照组47例。对照组给予对症治疗和洋地黄毒苷片,每日0.125 mg/次... 目的:探讨米力农与洋地黄毒苷片治疗慢性心力衰竭的疗效及对心功能的影响。方法:收集2015年1月—2018年8月收治的慢性心力衰竭患者82例,按照不同用药方案分为观察组35例和对照组47例。对照组给予对症治疗和洋地黄毒苷片,每日0.125 mg/次或0.25 mg/次,共2周。观察组在对照组基础上每日静脉泵注含米力农0.3 mg/kg的氯化钠液50 ml,共2周。观察两组患者的疗效和治疗前后Lee氏计分、左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)和心脏指数(CI)变化情况。结果:观察组总有效率为94.29%(33/35),优于对照组的76.60%(36/47,P<0.05)。观察组治疗后Lee氏计分和LVEDD均低于对照组,LVEF和CI均高于对照组(P<0.05)。结论:米力农联合洋地黄毒苷片治疗慢性心力衰竭疗效显著,可明显改善患者心功能,可作为优选治疗方案。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 米力农 洋地黄毒苷片 心功能
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洋地黄毒苷候选参考方法的建立及评价
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作者 唐宁波 刘冠财 +3 位作者 刘晓雨 杨丰繁 龚志梅 孙可其 《检验医学》 CAS 2022年第5期456-462,共7页
目的建立一种基于同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱(ID-UPLC-MS/MS)的血清洋地黄毒苷检测候选参考方法,并对此方法进行性能评价。方法在血清中加入内标物质洋地黄毒苷-21,23,23-d_(3),采用0.5 mol/L硫酸锌溶液进行蛋白沉淀,采用叔丁... 目的建立一种基于同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱(ID-UPLC-MS/MS)的血清洋地黄毒苷检测候选参考方法,并对此方法进行性能评价。方法在血清中加入内标物质洋地黄毒苷-21,23,23-d_(3),采用0.5 mol/L硫酸锌溶液进行蛋白沉淀,采用叔丁基甲基醚对样本进行液液萃取,上清液采用氮气吹干,流动相复溶后采用ID-UPLC-MS/MS检测。采用五点包括法计算血清洋地黄毒苷水平。参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)C62-A文件和CLSI EP15-A3文件对建立的ID-UPLC-MS/MS方法进行性能评价(基质效应、特异性、携带污染、精密度、准确度),同时评估其检测洋地黄毒苷的测量不确定度。结果建立的ID-UPLCMS/MS方法检测血清洋地黄毒苷的线性范围为2.8~94.9 nmol/L,批内变异系数(CV)为0.44~1.98%、总CV为0.41%~1.06%;加标回收率为100.03%~100.48%;检测限[信噪比(R_(SN))=3]及定量限(R_(SN)=10)分别为0.032和0.095 nmol/L;检测2020 RELA-A、2020 RELA-B样本,相对偏移分别为0.62%、0.29%,其中2020 RELA-A样本的不确定度为0.35 nmol/L。结论建立了检测血清洋地黄毒苷的ID-UPLC-MS/MS方法。该方法灵敏度高,重复性好,准确度高,有望作为人血清洋地黄毒苷测定的候选参考方法。 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱 候选参考方法 方法学评价
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洋地黄毒苷诱导小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 詹晓梅 肖义军 林婕 《福建师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期94-99,共6页
应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测洋地黄毒苷对NCI-H446细胞增殖的抑制效果;用AO-EB染色、DNA凝胶电泳分析以及AnnexinⅤ检测法检测细胞凋亡;用碘化丙啶(PI)染色测定其周期变化,利用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)和钙离子(Ca2+)... 应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测洋地黄毒苷对NCI-H446细胞增殖的抑制效果;用AO-EB染色、DNA凝胶电泳分析以及AnnexinⅤ检测法检测细胞凋亡;用碘化丙啶(PI)染色测定其周期变化,利用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)和钙离子(Ca2+)的变化.结果显示洋地黄毒苷明显抑制NCI-H446细胞增殖,AO-EB染色、DNA电泳及AnnexinV检测法显示细胞有明显的凋亡现象,PI染色显示处于S期的细胞增多,激光共聚焦显微镜观察表明细胞内活性氧和钙离子浓度均升高.表明洋地黄毒苷能明显抑制NCI-H446细胞增殖,且细胞被阻滞在S期.细胞内活性氧和钙离子浓度的增加可能与其诱导细胞凋亡有关. 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 NCI—H446细胞 凋亡
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