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Dehydrin PbDHN3 regulates ethylene synthesis and signal transduction to improve salt tolerance in pear
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作者 Fuli Gao Zidong Wang +9 位作者 Wankun Liu Min Liu Baoyi Wang Yingjie Yang Jiankun Song Zhenhua Cui Chenglin Liang Dingli Li Ran Wang Jianlong Liu 《Journal of Integrative Agriculture》 2025年第10期3838-3850,共13页
Dehydrin(DHN)enhances plant resistance to environmental stress by regulating the synthesis of osmotic adjustment substances and scavenging reactive oxygen species.However,the role of PbDHN3 under salt stress remains u... Dehydrin(DHN)enhances plant resistance to environmental stress by regulating the synthesis of osmotic adjustment substances and scavenging reactive oxygen species.However,the role of PbDHN3 under salt stress remains unclear.In this study,salt stress induced high expression of PbDHN3,and the overexpression of PbDHN3(OE-PbDHN3)enhanced plant growth under salt stress compared to wild-type(WT)plants.OE-PbDHN3 plants exhibited higher chlorophyll content and root growth capacity than WT plants under salt stress.Transcriptome analysis revealed that PbDHN3 expression is associated with ethylene signaling pathways.OE-PbDHN3 transgenic plants substantially influenced ethylene content and the expression of related genes.Following treatment with exogenous ethephon,the transgenic lines notably inhibited the processes of ethylene synthesis and signaling transduction.OE-PbDHN3 transgenic lines treated with exogenous ethylene and the ethylene inhibitor 1-MCP demonstrated significant inhibition of ethylene synthesis and signaling transduction,while promoting root development and chlorophyll content.Under salt stress,OE-PbDHN3 downregulated the expression of ethylene biosynthesis genes PbACO1-like and PbACO2,and signal transduction genes PbEIN3-like during the initial stress phase.This early regulation mitigated the adverse effects of salt stress on the plants.These findings demonstrate that PbDHN3 ameliorates the ethylene-mediated plant growth phenotype under salt stress through regulation of ethylene synthesis and signal transduction. 展开更多
关键词 dehydrin salt stress ethylene biosynthesis PEAR
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参与ABA调控小麦种子胚休眠的dehydrin基因的分离与表达分析 被引量:3
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作者 张海萍 常成 +2 位作者 张秀英 闫长生 肖世和 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第6期1175-1181,共7页
dehydrin蛋白是一个通过双向电泳分离出的参与ABA调控种子休眠过程的ABA反应蛋白。本研究利用二级质谱技术(Q-TOF2)获得了dehydrin蛋白的部分肽段序列,以此设计特异引物在万县白麦子中分离了其全长cDNA序列。与来自于durum小麦中的同源... dehydrin蛋白是一个通过双向电泳分离出的参与ABA调控种子休眠过程的ABA反应蛋白。本研究利用二级质谱技术(Q-TOF2)获得了dehydrin蛋白的部分肽段序列,以此设计特异引物在万县白麦子中分离了其全长cDNA序列。与来自于durum小麦中的同源蛋白在DNA水平以及氨基酸水平进行序列比对,发现在3'与5'端以及编码区域都存在碱基变异。进一步从mRNA水平分析了dehydrin基因的表达变化与种子休眠性状的表达之间的关系,结果表明,该基因在转录水平上的表达特性与翻译水平一致,说明该基因早在转录水平就受ABA调控从而参与休眠性状的表达。 展开更多
关键词 小麦 dehydrin基因 休眠 ABA
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中华补血草和中亚滨藜叶片中盐激蛋白和dehydrin的研究 被引量:3
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作者 王洪燕 刘箭 石凤 《山东师范大学学报(自然科学版)》 CAS 1999年第4期422-425,共4页
应用二相电泳方法,分析中华补血草Limonium sinensis(Girard.) O.Kuthze.和中亚滨藜AtriplexcentralasiaticaIljin 这二种典型泌盐植物叶片中的蛋白组成变化,发现盐胁迫时,二种植物叶片中均有少量的盐激蛋白出现,其中中亚滨藜叶片中的... 应用二相电泳方法,分析中华补血草Limonium sinensis(Girard.) O.Kuthze.和中亚滨藜AtriplexcentralasiaticaIljin 这二种典型泌盐植物叶片中的蛋白组成变化,发现盐胁迫时,二种植物叶片中均有少量的盐激蛋白出现,其中中亚滨藜叶片中的蛋白质组成变化大一些.运用Western- blot 方法对这二种盐生植物叶片中的dehydrin蛋白进行检测,结果发现,无论是在正常环境下,还是高浓度盐渍环境下。 展开更多
关键词 中华补血草 中亚滨藜 盐激蛋白 dehydrin
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Improvement of Drought Tolerance in Transgenic Tobacco Plants by a Dehydrin-Like Gene Transfer 被引量:5
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作者 SHENYe JIAWei-long +3 位作者 ZHANGYan-qin HUYuan-lei WUQi LINZhongping 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2004年第8期575-583,共9页
A full-length cDNA of dehydrin BcDh2 from Boea crassifolia and its antisense nucleotidesequence have been transferred into tobacco (Nicotiana tabacum) NC89 under the controlof a caulifower mosaic virus 35S promoter. U... A full-length cDNA of dehydrin BcDh2 from Boea crassifolia and its antisense nucleotidesequence have been transferred into tobacco (Nicotiana tabacum) NC89 under the controlof a caulifower mosaic virus 35S promoter. Under a progressive water stress, photosyntheticrate, transpiration rate and stomatal conductance of the sense and antisense plantsreduced, and those of the control reduced much more. Photosynthetic rate, transpirationrate and stomatal conductance of all plants tested increased significantly 24 hourslater after recoveried water supply, and those of the sense and antisense plants werehigher than control. These indicated that overexpression of a dehydrin gene in tobaccomay improve tolerance to water stress for plants, however, antisense BcDh2 gene intransgenic plant did not influence physiological conditions. The results of germinationexperiment of the transgenic seeds showed that on MS medium with different concentrationPEG (8000), sense seed could more endure drought than control, while antisense seed wassensitive to drought. The results suggested that the overexpression of a dehydrin genein tobacco might improve the tolerance to water stress for plants. 展开更多
关键词 dehydrin SENSE ANTISENSE Drought tolerance
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Protein Profiles and Dehydrin Accumulation in Some Soybean Varieties (<i>Glycine max</i>L. Merr) in Drought Stress Conditions 被引量:6
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作者 Estri Laras Arumingtyas Evika Sandi Savitri Runik Dyah Purwoningrahayu 《American Journal of Plant Sciences》 2013年第1期134-141,共8页
Drought is one of environmental stresses which the most limiting to plant growth and productivity. Drought stress led to a series of changes including biochemical changes like accumulation of osmolit and specific prot... Drought is one of environmental stresses which the most limiting to plant growth and productivity. Drought stress led to a series of changes including biochemical changes like accumulation of osmolit and specific proteins involved in stress tolerance. One of the proteins that play a role in the mechanism of drought resistance is dehydrin protein. This study aimed to identify the protein profiles and dehydrin accumulation in 7 varieties of local Indonesian soybeans: Tanggamus, Nanti, Seulawah and Tidar (tolerant), Wilis and Burangrang (moderate) and Detam-1 (drought stress sensitive). Plants were treated with drought stress by adjusting soil water content to 25% below field capacity and compared with plants which were grown on normal condition as control plants. The results of SDS-PAGE electrophoresis showed a new protein with the molecular weight of 13 and 52 kDa were induced in Tanggamus, Nanti, Seulawah and Tidar varieties. Western blotting analysis for dehydrin showed that the quantity of the protein in the leaves of all varieties except Tanggamus decreased in drought stress conditions. The quantity of dehydrin protein in tolerant varieties higher than the protein quantity in both moderate varieties and drought sensitive. 展开更多
关键词 dehydrin Protein Drought Stress Soybean Varieties LEA
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In vivo protective effect of late embryogenesis abundant protein(ApSK3 dehydrin)on Agapanthus praecox to promote post-cryopreservation survival
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作者 TINGTING HUANG SHAN DENG +1 位作者 JIANGYUAN SHENG DI ZHANG 《BIOCELL》 SCIE 2022年第11期2507-2515,共9页
Dehydrins(DHNs),as members of the late embryogenesis abundant protein family,play critical roles in the protection of seeds from dehydration and plant adaptation to multiple abiotic stresses.Vitrification is a basic m... Dehydrins(DHNs),as members of the late embryogenesis abundant protein family,play critical roles in the protection of seeds from dehydration and plant adaptation to multiple abiotic stresses.Vitrification is a basic method in plant cryopreservation and is characterized by forming a glassy state to prevent lethal ice crystals produced during cryogenic storage.In this study,ApSK3 type DHN was genetically transformed into embryogenic calluses(EC)of Agapanthus praecox by overexpression(OE)and RNA interference(RNAi)techniques to evaluate the in vivo protective effect of DHNs during cryopreservation.The cell viability showed a completely opposite trend in OE and RNAi cell lines,the cell relative death ratio was decreased by 20.0%in ApSK3-OE EC and significantly increased by 66.15%in ApSK3-RNAi cells after cryopreservation.Overexpression of ApSK3 increased the content of non-enzymatic antioxidants(AsA and GSH)and up-regulated the expression of CAT,SOD,POD,and GPX genes,while ApSK3-RNAi cells decreased antioxidant enzyme activities and FeSOD,POD,and APX genes expression during cryopreservation.These findings suggest that ApSK3 affects ROS metabolism through chelating metal ions(Cu^(2+)and Fe^(3+)),alleviates H_(2)O_(2)and OH·excessive generation,activates the antioxidant system,and improves cellular REDOX balance and membrane lipid peroxidation damage of plant cells during cryopreservation.DHNs can effectively improve cell stress tolerance and have great potential for in vivo or in vitro applications in plant cryopreservation. 展开更多
关键词 dehydrin Embryogenic callus CRYOPRESERVATION RNAI Gene overexpression
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Cloning and expression pattern of a dehydrin-like BDNI gene from drought-tolerant Boea crassifolia Hemsl. 被引量:3
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作者 ZHAO Huiwu, LIU Han, YU Haiyuan, HU Yuanlei, GAO Yin, LI Zhenyu & LIN ZhongpingNational Laboratory of Protein Engineering and Plant Genetic Engineering , Peking University, Beijing 100871, China Botanical Institute, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093, China Correspondence should be addressed to Lin Zhongping 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2000年第22期2072-2077,共6页
A 500-bp cDNA fragment was amplified via RT-PCR from drought-induced total RNA of the drought-tolerant B. crassifolia Hemsl. using primers based on the sequence of published dehydrin conserved region. By using 5’ RAC... A 500-bp cDNA fragment was amplified via RT-PCR from drought-induced total RNA of the drought-tolerant B. crassifolia Hemsl. using primers based on the sequence of published dehydrin conserved region. By using 5’ RACE, full-length coding region (1 148 bp) of BDN1 gene was produced. It is a new member of the dehydrin gene family. Southern analysis indicated that BDN1 is present in the 6. crassifolia genome as a single-copy gene. Northern analysis revealed that its expression is inducible by drought and cold stresses as well as ABA application. 展开更多
关键词 drought-tolerant plant Boea crassifolia Hemsl. dehydrin 5’ RACE BDN1 gene.
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油莎豆CeDHN1基因的克隆与表达分析
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作者 郭静远 陈怡 +2 位作者 孔华 郭运玲 贾瑞宗 《热带农业科学》 2025年第7期1-7,共7页
油莎豆播种期长、产量高,是目前已知唯一在块茎器官中积累大量油脂的特种经济作物,具有广阔的综合利用前景。为了进一步提高油莎豆的品质和产量,积极筛选和鉴定相关的抗性基因,研究基于转录组数据,以油莎豆热研1号为材料,采用RT-PCR技... 油莎豆播种期长、产量高,是目前已知唯一在块茎器官中积累大量油脂的特种经济作物,具有广阔的综合利用前景。为了进一步提高油莎豆的品质和产量,积极筛选和鉴定相关的抗性基因,研究基于转录组数据,以油莎豆热研1号为材料,采用RT-PCR技术克隆了油莎豆脱水素基因CeDHN1包含完整ORF在内的708 bp cDNA序列。序列分析表明,CeDHN1预测编码235个氨基酸,理论分子量为25.97 kDa,等电点为5.2,总平均疏水指数为-1.383,不稳定系数为42.81,属于不稳定亲水蛋白。CeDHN1蛋白含有3个保守区域,即2个K片段和一个S片段,属于SKn型脱水素。亚细胞定位结果显示,CeDHN1定位在烟草叶片的细胞核。qRT-PCR分析显示,CeDHN1在油莎豆的根中的表达丰度最高,且显著高于其他组织。这些结果将为下一步的功能鉴定奠定坚实的基础。 展开更多
关键词 油莎豆 脱水素 基因克隆 表达分析 亚细胞定位
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西藏野生垂穗披碱草CnCOR410基因克隆及表达分析
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作者 柴艺 饶鑫媛 +7 位作者 袁璐瑶 王鹤潼 张博宁 苗彦军 曹仲华 杨培志 呼天明 付娟娟 《草地学报》 北大核心 2025年第7期2090-2098,共9页
为了研究脱水素调控植物非生物胁迫应答的分子机制,本研究从西藏野生垂穗披碱草(Campeiostachys nutans Griseb.)中克隆了CnCOR410基因,并进行了生物信息学、基因表达模式和亚细胞定位分析。结果表明:CnCOR410序列全长765 bp,编码254个... 为了研究脱水素调控植物非生物胁迫应答的分子机制,本研究从西藏野生垂穗披碱草(Campeiostachys nutans Griseb.)中克隆了CnCOR410基因,并进行了生物信息学、基因表达模式和亚细胞定位分析。结果表明:CnCOR410序列全长765 bp,编码254个氨基酸,分子量为7504.48 Da,等电点为4.87;CnCOR410蛋白属于亲水蛋白、非跨膜蛋白;二级结构以无规则卷曲为主,占比61.42%;CnCOR410包含脱水素保守结构域属于LEA家族;CnCOR410与小麦(Triticum aestivum L.)的氨基酸序列相似性最高为93.44%,且该蛋白定位在细胞质上;CnCOR410在垂穗披碱草根、茎、叶组织中均有表达,在叶片中表达量最高;且CnCOR410表达受低温、干旱、盐胁迫和ABA调控(P<0.05)。本研究结果为深入探明CnCOR410调控垂穗披碱草非生物胁迫适应机制奠定了基础。 展开更多
关键词 垂穗披碱草 脱水素 CnCOR410 基因克隆 表达响应 西藏
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VyDHN1转化‘西拉’愈伤组织遗传体系的建立及其抗逆性鉴定
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作者 常贺强 刘牧青 +1 位作者 韩国民 代玲敏 《中外葡萄与葡萄酒》 北大核心 2025年第2期12-21,共10页
本研究利用农杆菌介导的葡萄转基因方法,对菌液浓度、侵染时长和延迟培养3个条件进行优化,发现农杆菌菌液浓度OD_(600)=0.2、侵染时长10 min、延迟培养21 d时对‘西拉’愈伤组织的转化效率最高,并建立了‘西拉’愈伤组织高效遗传转化体... 本研究利用农杆菌介导的葡萄转基因方法,对菌液浓度、侵染时长和延迟培养3个条件进行优化,发现农杆菌菌液浓度OD_(600)=0.2、侵染时长10 min、延迟培养21 d时对‘西拉’愈伤组织的转化效率最高,并建立了‘西拉’愈伤组织高效遗传转化体系,获得VyDHN1融合GFP的过表达愈伤组织。正常情况下,转基因株系比野生型愈伤组织生长快,低温、干旱和盐等胁迫处理抑制愈伤组织的长势。低温、干旱和盐胁迫下转基因愈伤组织的细胞膜相对透性、丙二醛含量以及游离脯氨酸含量均低于对照,表明VyDHN1过表达能加快‘西拉’葡萄愈伤的生长速度,在低温、干旱和盐胁迫下保护了细胞膜结构并提高了植物的抗逆境能力。 展开更多
关键词 西拉 愈伤组织 遗传转化 脱水素基因 非生物胁迫抗逆性
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水分胁迫下内生真菌球毛壳ND35对冬小麦苗期生长和抗旱性的影响 被引量:31
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作者 丛国强 尹成林 +2 位作者 何邦令 李玲 高克祥 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期6120-6128,共9页
为明确不同水分条件下内生真菌对冬小麦苗期生长和抗旱性的影响,以抗旱型小麦品种山农16和水分敏感型小麦品种山农22为材料,利用荧光定量PCR技术检测小麦干旱诱导基因脱水素wzy2的表达量来了解冬小麦在干旱胁迫下相关基因的表达差异,通... 为明确不同水分条件下内生真菌对冬小麦苗期生长和抗旱性的影响,以抗旱型小麦品种山农16和水分敏感型小麦品种山农22为材料,利用荧光定量PCR技术检测小麦干旱诱导基因脱水素wzy2的表达量来了解冬小麦在干旱胁迫下相关基因的表达差异,通过测定相关生理指标与酶活性来判断小麦发育及其在干旱胁迫下的生理响应状况。结果表明,与正常水分ND35组相比,接种球毛壳菌(Chaetomium globosum)ND35的干旱处理组小麦的根冠比、总蛋白含量、脯氨酸含量及丙二醛含量等指标显著提高,小麦叶片含水量和可溶性糖含量有所降低。在干旱处理组中,球毛壳菌ND35可以显著提高小麦山农16的根长和山农22的株高,接种球毛壳ND35的山农16脯氨酸含量、可溶性糖含量、过氧化氢酶活性比对照组均显著提高,丙二醛含量比对照组降低9.0%,但差异不显著;山农22脯氨酸含量和过氧化氢酶活性比对照组显著提高,丙二醛含量和可溶性糖含量比对照组有所降低,但可溶性糖含量差异不显著;相对定量检测数据显示,接种球毛壳ND35后,两种小麦脱水素wzy2基因的表达量较对照组均能够显著提高。综合分析说明内生真菌球毛壳ND35可以促进冬小麦苗期根系和植株发育,小麦提前进入三叶期,增强小麦避旱性,同时提高小麦根系活力,增强小麦耐旱性;提高个体细胞内水分、糖分、脯氨酸含量,降低丙二醛的氧化性损伤,增强过氧化氢酶活性,从而提高两种冬小麦对干旱胁迫的耐受能力;球毛壳ND35促进小麦干旱诱导相关基因wzy2的表达量,进而提高抗旱相关蛋白的表达,从而提高两种冬小麦耐脱水性和对干旱胁迫的适应性。 展开更多
关键词 小麦 苗期生长 内生真菌 球毛壳ND35 水分胁迫 脱水素基因表达
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脱水素研究进展 被引量:27
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作者 孙歆 雷韬 +1 位作者 袁澍 林宏辉 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期299-304,共6页
脱水素(dehydrin)是植物体内的一种LEA蛋白,能够在植物胚胎发育后期以及逆境下大量表达,广泛存在于植物界。它是具有高度热稳定性的亲水性蛋白,有三类非常保守的区域,即K,Y和S片段。依据这三类片段的组成情况,可将脱水素分为5个基本类... 脱水素(dehydrin)是植物体内的一种LEA蛋白,能够在植物胚胎发育后期以及逆境下大量表达,广泛存在于植物界。它是具有高度热稳定性的亲水性蛋白,有三类非常保守的区域,即K,Y和S片段。依据这三类片段的组成情况,可将脱水素分为5个基本类别。脱水素可通过多种转运方式定位于植物细胞的不同部位,以行使其功能。其基因的表达存在依赖ABA和不依赖ABA两种途径,并且受到多种环境因素的影响,能稳定细胞膜和许多大分子的结构以避免脱水对细胞造成的伤害。近年来,脱水素的结构和组成、在细胞中的定位及转运、基因的表达与调控、功能与作用机理等方面的研究已取得了很大的进展。 展开更多
关键词 脱水素 脱落酸(ABA) 水分胁迫
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小麦脱水素基因TaDHN-1的特征及其对非生物胁迫响应 被引量:8
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作者 张宁 孙敏善 +4 位作者 刘露露 孟凡荣 任江萍 尹钧 李永春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期849-858,共10页
【目的】分析小麦脱水素基因特征及其在干旱、高盐、低温和高温胁迫过程中的表达模式,探讨脱水素在小麦抗逆过程中的功能,为脱水素基因在小麦抗逆分子育种中的应用提供理论依据。【方法】利用RT-PCR克隆小麦脱水素基因,通过生物信息学... 【目的】分析小麦脱水素基因特征及其在干旱、高盐、低温和高温胁迫过程中的表达模式,探讨脱水素在小麦抗逆过程中的功能,为脱水素基因在小麦抗逆分子育种中的应用提供理论依据。【方法】利用RT-PCR克隆小麦脱水素基因,通过生物信息学分析研究其编码蛋白特征;采用qRT-PCR分析该基因表达特性模式。【结果】克隆了包含完整编码区的小麦脱水素基因TaDHN-1,序列分析显示该基因cDNA长487 bp,编码112个氨基酸,推测编码蛋白分子量约为11.5 kD,等电点为6.6。氨基酸序列分析表明,TaDHN-1在C端具有保守的K片段,属于Kn类脱水素;二级结构预测显示,该脱水素无规则卷曲占整个蛋白的82.1%,具有很高的亲水性;PredictProtein预测显示,该脱水素无跨膜区域,亚细胞定位于细胞质中。表达特性分析表明,TaDHN-1受植物激素ABA的诱导;在干旱、高盐和低温胁迫条件下,该基因均受胁迫的诱导而表达上调,但对42℃高温胁迫不敏感;在种子发育过程中,TaDHN-1的表达呈下调趋势,且在种子发育后期的表达量极低,推测TaDHN-1不参与小麦种子成熟后期的脱水保护过程。【结论】小麦脱水素基因TaDHN-1属于脱水素基因家族的Kn亚类。该基因通过依赖ABA的非生物胁迫响应路径发挥功能,可能参与了小麦对干旱、高盐和低温胁迫的耐受调节过程,但对高温胁迫不敏感,也未参与种子发育后期的脱水保护过程。 展开更多
关键词 小麦 脱水素 非生物胁迫 表达
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铁皮石斛类原球茎空气干燥法超低温保存中的脱水蛋白分析 被引量:13
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作者 林伟强 边红武 +1 位作者 王君晖 朱睦元 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期64-68,共5页
用空气干燥法将铁皮石斛类原球茎脱水至不同含水量 ,进行超低温保存和热稳定蛋白的SDS PAGE分析 ,并进行脱水蛋白的Western blot检测。结果表明 :在本试验条件下 ,含水量以g/gDM表示时 ,铁皮石斛类原球茎脱水时间 (x)对含水量 (y)的回... 用空气干燥法将铁皮石斛类原球茎脱水至不同含水量 ,进行超低温保存和热稳定蛋白的SDS PAGE分析 ,并进行脱水蛋白的Western blot检测。结果表明 :在本试验条件下 ,含水量以g/gDM表示时 ,铁皮石斛类原球茎脱水时间 (x)对含水量 (y)的回归方程式为y =- 0 12 0 8x +9 96 36。含水量下降为 0 1~ 0 5g/gDM时 ,冻后存活率达到最大值。当含水量达 1 0g/gDM时 ,热稳定蛋白的含量明显增加 ,经免疫检测其中分子量分别为 2 8 7和 34 3kD的两个热稳定蛋白为脱水蛋白。认为含水量是铁皮石斛超低温保存成功的关键因素 ,也是引起脱水蛋白大量积累的重要条件。 展开更多
关键词 铁皮石斛 类原球茎 空气干燥法 超低温保存 脱水蛋白 含水量 中药材 种质资源保存
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棉花脱水素GhDHN1的克隆及其表达 被引量:14
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作者 王俊娟 穆敏 +8 位作者 王帅 陆许可 陈修贵 王德龙 樊伟丽 阴祖军 郭丽雪 叶武威 喻树迅 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第15期2867-2878,共12页
【目的】通过对棉花脱水素基因结构特征及其在低温胁迫下表达模式进行分析,探讨脱水素在棉花响应低温过程中的功能,为棉花抗冷育种提供理论基础。【方法】以棉花抗冷品种豫2067为试验材料,根据棉花陆地棉基因组序列查找已知脱水素(dehyd... 【目的】通过对棉花脱水素基因结构特征及其在低温胁迫下表达模式进行分析,探讨脱水素在棉花响应低温过程中的功能,为棉花抗冷育种提供理论基础。【方法】以棉花抗冷品种豫2067为试验材料,根据棉花陆地棉基因组序列查找已知脱水素(dehydrin,Dhn)基因的CDS序列,利用Primer5软件设计引物,克隆该基因,并命名为GhDHN1;采用生物信息学方法分析其蛋白质性质、氨基酸含量特征、功能结构域、系统进化树;选择XbaⅠ和SmaⅠ酶切位点对植物表达载体p BI121::GFP进行双酶切,采用In-Fusion连接技术构建融合蛋白瞬时表达载体p BI121-GhDHN1::GFP;分析其在洋葱表皮细胞中的瞬时表达,进行亚细胞定位;利用抗冷材料豫2067在三叶期对低温处理(4℃,24 h)前后的叶片和根系进行转录组测序,筛选差异表达基因;在三叶期时分别对豫2067(抗冷品种)和衡棉3号(冷敏感品种)进行低温(4℃,24 h)处理,利用实时荧光定量方法分别比较根、茎、叶中GhDHN1表达量,对该基因在2个抗冷差异材料叶中的表达量进行比较;对豫2067进行不同时间低温(4℃)处理,分析GhDHN1在叶片和根中的动态表达模式。【结果】该基因全长为726 bp,开放阅读编码框为636 bp,编码211个氨基酸,预测分子量为23.79 k D,等电点为5.04,富含谷氨酸(26.10%)和赖氨酸(19.40%),不含色氨酸,半衰期为30 h,蛋白呈酸性,带负带荷,带负电荷的残基总数为60%;GhDHN1的二级结构α螺旋(Alpha helix)包含116个氨基酸残基,占54.98%,组成该蛋白的主体结构,无规则卷曲(Random coil)的氨基酸残基有87个;GhDHN1位于陆地棉D亚组第9染色体(Dt_chr9)上,在cDNA的259—348位置上含有一个长度为90 bp的内含子,2个外显子长度分别为258和378 bp;SMART和CDD分析表明该氨基酸序列含有2个保守的富含赖氨酸的K片段和1个保守的富含丝氨酸S片段,具有亲水素蛋白结构域pfam00257,表明该蛋白为K_2S型脱水素;系统进化树分析表明,陆地棉亲水素GhDHN1与可可亲缘关系最近;洋葱表皮细胞中瞬时表达分析表明,GhDHN1蛋白主要定位在细胞膜附近。转录组分析表明,该基因在棉花三叶期叶片和根中,受低温处理后上调表达;荧光定量PCR分析表明,GhDHN1在4℃低温胁迫24 h后,在叶片、茎、根中均上调表达,在叶中上调表达倍数最大,在低温处理4 h和24 h时叶片中有2个表达高峰,在低温处理6 h和12 h时在根中有2个表达高峰,在抗冷材料叶片中的表达是冷敏感材料的2.47倍,说明该基因可能参与了棉花对低温的适应性调控。【结论】陆地棉GhDHN1属于典型的K2S型脱水素,与可可亲缘关系最近。该基因响应低温胁迫,在抗冷材料和冷敏感材料中表达差异显著,其表达量与棉花的抗冷性呈正相关,可以作为筛选不同抗冷材料的标记,同时可以作为重要的候选基因来培育棉花抗冷新材料。 展开更多
关键词 棉花 脱水素 亚细胞定位 低温胁迫 转录组分析 实时荧光定量PCR
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干旱胁迫下外源ABA对观赏海棠叶片可溶性蛋白和脱水素积累的影响 被引量:10
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作者 胡玉净 邓丽娟 +2 位作者 张杰 沈红香 姚允聪 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第4期35-42,共8页
以抗旱性较强的观赏海棠品种‘王族’和抗旱性较弱的品种‘红丽’幼树为试材,采用"喷施ABA+干旱处理"和"喷水+干旱处理(对照)"2个处理组,测试不同干旱条件下ABA处理的观赏海棠叶片相对含水量(RWC)、相对电导率(REC... 以抗旱性较强的观赏海棠品种‘王族’和抗旱性较弱的品种‘红丽’幼树为试材,采用"喷施ABA+干旱处理"和"喷水+干旱处理(对照)"2个处理组,测试不同干旱条件下ABA处理的观赏海棠叶片相对含水量(RWC)、相对电导率(REC)、可溶性蛋白含量(SPC)、可溶性蛋白和脱水素表达情况。结果显示:与对照相比,ABA处理的‘王族’叶片RWC显著升高,REC和SPC显著降低,而‘红丽’的相应指标变化则相反。SDS-PAGE分析表明:ABA处理分别引起了干旱处理过程中‘王族’叶片14.8,18.0,46.2,50.9,78.1,145.2ku和‘红丽’叶片14.4,18.0,32.8,46.2,89.6,141.0ku可溶性蛋白的变化。免疫蛋白印迹法测定结果表明:干旱处理分别诱导‘王族’叶片14.8,51.0ku和‘红丽’叶片14.4,32.8ku脱水素的积累;ABA处理显著地的诱导2品种叶片干旱处理开始时脱水素的积累,并降低干旱处理7天后‘王族’叶片14.8,51.0ku和‘红丽’叶片14.4ku的积累。ABA能够诱导正常水分条件下观赏海棠叶片脱水素的表达,但当植株处于干旱胁迫时,ABA抑制其叶片中被诱导的脱水素的积累,并且此抑制作用与品种间抗旱性呈正相关性。 展开更多
关键词 观赏海棠 ABA 干旱胁迫 可溶性蛋白 脱水素
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1个油茶Y_2SK_2型脱水素的全长cDNA克隆及生理功能的预测 被引量:7
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作者 胡孝义 谭晓风 +4 位作者 张党权 曾艳铃 陈鸿鹏 田晓明 刘巧 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期55-62,共8页
以构建的油茶EST文库为基础,采用电子克隆技术,分离克隆一个脱水素基因的全长cDNA序列,该基因的cDNA全长1406bp,含一个600bp的CDS,编码200aa的小分子蛋白。推测该基因编码蛋白的分子质量为21ku,等电点7,暂命名为CoDHNI。同源性分析发现... 以构建的油茶EST文库为基础,采用电子克隆技术,分离克隆一个脱水素基因的全长cDNA序列,该基因的cDNA全长1406bp,含一个600bp的CDS,编码200aa的小分子蛋白。推测该基因编码蛋白的分子质量为21ku,等电点7,暂命名为CoDHNI。同源性分析发现该基因的编码蛋白具有2个Y-片段(DEYGNP),1个S-片段(SGSSSSSS),2个K-片段(KIKEKLPG),属于典型的Y2SK2型脱水素。经Blast比对,发现富含苏氨酸的Thr-区在各物种间变异显著,推测该区为油茶所特有,有利于在被保护的大分子表面形成水合层;同时还发现一个十分保守的基序:EDDGQGGRRKK,可能有利于脱水素的磷酸化和亚细胞定位。通过与柑桔和拟南芥的脱水素比较,提出CoDHNI有可能缓冲种子脱水胁迫响应时钙离子的瞬时增高,并可结合重金属离子,以减轻活性氧的危害。 展开更多
关键词 油茶 脱水素基因 CDNA文库 RACE 生理功能 生物信息学
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油茶脱水素样蛋白的基因克隆与序列分析及其生理功能预测 被引量:7
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作者 胡孝义 谭晓风 +4 位作者 田晓明 刘巧 罗茜 谢鹏 曾艳玲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1541-1548,共8页
以油茶EST文库为基础,采用5-′RACE技术,分离克隆了一个脱水素样基因的全长cDNA序列(GenBank接受号EU856537),同源分析表明其编码的208 aa的小分子蛋白(id号ACF72673)属于SK2型脱水素,命名为CoDHN2.CoDHN2的肽链内2个类K-片段间富含苏氨... 以油茶EST文库为基础,采用5-′RACE技术,分离克隆了一个脱水素样基因的全长cDNA序列(GenBank接受号EU856537),同源分析表明其编码的208 aa的小分子蛋白(id号ACF72673)属于SK2型脱水素,命名为CoDHN2.CoDHN2的肽链内2个类K-片段间富含苏氨酸,有别于脱水素一般性结构特点,并且同油茶种子中另一类脱水素一样也具有一个十分保守的基序(EDDGQAGRRKK),这可能有利于脱水素的磷酸化和亚细胞定位;采用多种方法预测其二级结构,表明CoDHN2为内在性无规则蛋白,但其中远离C端的一个类K-片段可形成两亲性α-螺旋.CoDHN2含有较多的组氨酸残基以及良好的可溶性,推测它可结合金属离子从而减少活性氧的来源并清除活性氧,并在生理脱水时充当缓冲液.结合其它物种脱水素的研究进展,认为CoDHN2极有可能在油茶油脂合成高峰期同正在发育的脂体结合而保护脂体免受活性氧危害,这为油茶种子细胞的脂体发育研究提出了一个新的方向. 展开更多
关键词 油茶 脱水素基因 CDNA文库 RACE 生理功能
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核桃Y_2SK_2型脱水素基因JrDHN的克隆、表达和单核苷酸多态性分析 被引量:9
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作者 徐丽 陈新 +5 位作者 魏海蓉 张力思 宗晓娟 王甲威 朱东姿 刘庆忠 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1573-1582,共10页
采用RT-PCR和RACE技术从‘香玲’核桃(Juglans regia L.‘Xiangling’)叶片中克隆了1个脱水素基因JrDHN(GenBank登录号KC503061.1),其全长1 056 bp,具有528 bp的开放阅读框,编码175个氨基酸组成的多肽,具有LEA家族成员的特征多肽序列,... 采用RT-PCR和RACE技术从‘香玲’核桃(Juglans regia L.‘Xiangling’)叶片中克隆了1个脱水素基因JrDHN(GenBank登录号KC503061.1),其全长1 056 bp,具有528 bp的开放阅读框,编码175个氨基酸组成的多肽,具有LEA家族成员的特征多肽序列,属于典型的Y2SK2型脱水素。以核桃18S基因为内参,对‘香玲’核桃JrDHN在4℃胁迫下的表达模式进行了初步的研究,结果表明低温诱导下叶片中JrDHN的表达增加,4℃处理4 h后达到最大值;自然越冬条件下,花芽中JrDHN表达量呈先上升后下降的趋势,在12月份表达量最高,推测JrDHN在核桃对低温胁迫响应中发挥重要功能。‘香玲’JrDHN在雌花中表达量高,其次是叶片和树皮,在花芽中最低。单核苷酸多态性分析JrDHN序列中有30个SNPs位点和11个Indels;单倍型分析显示12份核桃材料可分为10个单倍型,单倍型多样性为0.9697。 展开更多
关键词 核桃 脱水素基因 定量RT-PCR 单核苷酸多态性
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低温诱导蛋白及其与植物的耐寒性研究进展 被引量:24
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作者 杨玉珍 雷志华 彭方仁 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期421-428,共8页
低温诱导蛋白是植物在温度逆境条件下诱导产生的一系列蛋白,以抗冻蛋白、脱水蛋白、热激蛋白和热稳定蛋白较多,而且低温诱导蛋白质一旦在体内形成,植物体就会尽快地适应外界环境,表现出较强的抗逆性.本文对几种主要的低温诱导蛋白——... 低温诱导蛋白是植物在温度逆境条件下诱导产生的一系列蛋白,以抗冻蛋白、脱水蛋白、热激蛋白和热稳定蛋白较多,而且低温诱导蛋白质一旦在体内形成,植物体就会尽快地适应外界环境,表现出较强的抗逆性.本文对几种主要的低温诱导蛋白——抗冻蛋白、脱水蛋白、热激蛋白和热稳定蛋白的特性及其与植物耐寒性的关系研究进行综述,以期为进一步阐明植物耐寒的分子机制以及提高植物耐寒力研究提供新的思路. 展开更多
关键词 低温诱导蛋白 抗冻蛋白 脱水蛋白 热激蛋白 耐寒性
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