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导入dctABD和nifA基因对费氏中华根瘤菌共生固氮的影响研究 被引量：8
1
作者 李友国 周俊初 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期181-188,共8页
以pTR10 2为载体构建重组质粒pHN30 7,其上克隆有来自苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti)的四碳二羧酸转移酶基因dctABD、来自肺炎克氏杆菌 (Klebsiellapneumoniae)的nifA基因和来自pDB30所含的发光酶基因lux AB。经三亲本接合转... 以pTR10 2为载体构建重组质粒pHN30 7,其上克隆有来自苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti)的四碳二羧酸转移酶基因dctABD、来自肺炎克氏杆菌 (Klebsiellapneumoniae)的nifA基因和来自pDB30所含的发光酶基因lux AB。经三亲本接合转移 ,将pHN30 7导入费氏中华根瘤菌 (S .fredii)HN0 1、YC4和GR3,并考察了转移接合子中pHN30 7在传代培养和共生条件下的稳定性。与出发菌相比较的植物盆栽试验结果表明 ,在与大豆黑农 33共生时 ,导入pHN30 7后的转移接合子均可显著提高结瘤植株的瘤重、地上部分干重和地上部分总氮量。在与大豆川早一号共生时 ,转移接合子HN0 1(pHN30 7)可显著提高结瘤植株的瘤数和瘤重 ;GR3(pHN30 7)可显著提高结瘤植株的瘤数、瘤重、地上部分干重和地上部分总氮量 ;导入pHN30 7的YC4却呈现出负作用。本研究表明 ,导入dctABD可提高固氮效率 ,而nifA基因主要影响重组菌的结瘤能力 。 展开更多
关键词 dctabd NIFA luxAB 费氏中华根瘤菌 共生固氮效率 结瘤能力 重组
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导入dctABD和 parCBA/DE基因提高大豆慢生根瘤菌固氮效率和稳定性的研究 被引量：7
2
作者 李友国 李杰 +1 位作者 刘墨青 周俊初 《Acta Genetica Sinica》 CSCD 2000年第8期742-750,共9页
以ｐＬＡＦＲ３为载体构建重组质粒ｐＨＮ２０７，携带有来自首苜蓿根瘤菌（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｍｅｌｉｌｏｔｉ）的四碳二羧酸转移酶基因 ｄｃｔＡＢＤ、来自 ｐＴＲ１０２的ｐａｒＣＢＡ／ＤＥ基因和标记发光酶基因 ｌｕｘ... 以ｐＬＡＦＲ３为载体构建重组质粒ｐＨＮ２０７，携带有来自首苜蓿根瘤菌（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｍｅｌｉｌｏｔｉ）的四碳二羧酸转移酶基因 ｄｃｔＡＢＤ、来自 ｐＴＲ１０２的ｐａｒＣＢＡ／ＤＥ基因和标记发光酶基因 ｌｕｘＡＢ。利用 ２亲本杂交法，将重组质粒 ｐＨＮ２０７导入大豆慢生根瘤菌（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｊａｐｏｎｉｃｕｍ）ＴＡ１１和ＣＢ１８０９，分别考察了转移接合子中外源重组质粒在人工培养条件和共生条件下的稳定性，结果表明ｐａｒ基因的引入明显提高ｐＬＡＦＲ３在ＴＡ１１和ＣＢ１８０９中的稳定性。ｄｃｔＡＢＤ基因可显著提高ＴＡ１１和ＣＢ１８０９在大豆黑龙３３、宁镇一号和渝豆一号上的共生固氮能力，使结瘤植物的地上部分干重（生物量）和总氮量等指标较对照组有显著提高。 展开更多
关键词 大豆慢生根瘤菌 共生固氮效率 稳定性 重组DNA
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导入四碳二羧酸转移酶基因对费氏中华根瘤菌共生固氮效率的影响 被引量：8
3
作者 李友国 李杰 +2 位作者 刘墨青 周岷江 周俊初 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第5期1-7,共7页
将来自苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti)的四碳二羧酸转移酶基因(dctABD)经 pIJ2 92 5克隆到广宿主、稳定性质粒 pTR10 2上 ,获得诱导型表达的重组质粒 pHN2 0 2。在此基础上再引入来自 pDB30所含的发光酶基因 (luxAB)作分子标... 将来自苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti)的四碳二羧酸转移酶基因(dctABD)经 pIJ2 92 5克隆到广宿主、稳定性质粒 pTR10 2上 ,获得诱导型表达的重组质粒 pHN2 0 2。在此基础上再引入来自 pDB30所含的发光酶基因 (luxAB)作分子标记 ,以 pTR10 2为基础构建成带有dctABD和luxAB的重组质粒 pHN2 0 5。经三亲本接合转移 ,将重组质粒 pHN2 0 5导入费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobium fredii)HNO1,GR3和YC4。与出发菌相比较的盆栽试验结果表明 :HN0 1(pHN2 0 5)和GR3(pHN2 0 5)分别在宁镇一号和川早一号大豆上能显著提高植株地上部分干重 (生物量 )和总氮量 ,YC4 (pHN2 0 5)在黑龙 33大豆上能同时显著提高植株地上部分干重 (生物量 ) ,总氮量和根瘤鲜重。本研究结果表明 :导入dctABD基因对共生固氮效率的增效性与受体根瘤菌和大豆品种等因素有关。以luxAB为报告基因进行的转移接合子培养条件下分离单菌落和共生条件下形成根瘤的发光活性检测结果表明 :pHN2 0 5可在供试费氏中华根瘤菌中稳定遗传。 展开更多
关键词 四碳二羧酸转移酶基因 费氏中华根瘤菌 发光酶
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导入detABD和nifA基因对苜蓿中华根瘤菌共生固氮效率的影响 被引量：6
4
作者 宫世勇 孙淑荣 周俊初 《湖北农业科学》 北大核心 2006年第5期538-541,共4页
将克隆有四碳二羧酸转移酶基因dctABD、nifA基因和发光酶基因luxAB的重组质粒pHN307经三亲本杂交分别导入苜蓿根瘤菌HNM1、HNM2、HNM4和1021中得到HNM1(pHN307)等4个转移接合子,进一步比较研究了pHN307在自生培养条件下传代的稳定性,并... 将克隆有四碳二羧酸转移酶基因dctABD、nifA基因和发光酶基因luxAB的重组质粒pHN307经三亲本杂交分别导入苜蓿根瘤菌HNM1、HNM2、HNM4和1021中得到HNM1(pHN307)等4个转移接合子,进一步比较研究了pHN307在自生培养条件下传代的稳定性,并采用本室改进的双层钵无菌砂培盆栽法,分别将4个转移接合子和出发菌接种到苜蓿品种草原1号,公农1号和图牧2号。结果表明,只有用转移接合子HNM4(pHN307)和1021(pHN307)接种到草原1号和图牧2号的植株鲜重和干重明显优于出发菌。 展开更多
关键词 dctA BD NIFA luxAB 苜蓿中华根瘤菌 共生固氮效率
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