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High-throughput Sequencing Technology and Its Application 被引量:11
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作者 Zhu Qiang-long Liu Shi +1 位作者 Gao Peng Luan Fei-shi 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2014年第3期84-96,共13页
Gene sequencing is a great way to interpret life, and high-throughput sequencing technology is a revolutionary technological innovation in gene sequencing researches. This technology is characterized by low cost and h... Gene sequencing is a great way to interpret life, and high-throughput sequencing technology is a revolutionary technological innovation in gene sequencing researches. This technology is characterized by low cost and high-throughput data. Currently, high-throughput sequencing technology has been widely applied in multi-level researches on genomics, transcriptomics and epigenomics. And it has fundamentally changed the way we approach problems in basic and translational researches and created many new possibilities. This paper presented a general description of high-throughput sequencing technology and a comprehensive review of its application with plain, concisely and precisely. In order to help researchers finish their work faster and better, promote science amateurs and understand it easier and better. 展开更多
关键词 high-throughput sequencing data analysis genome sequence transcriptome sequence BIOINforMATICS
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A Comprehensive Review on RNA-seq Data Analysis 被引量:1
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作者 Zhang Li Liu Xuejun 《Transactions of Nanjing University of Aeronautics and Astronautics》 EI CSCD 2016年第3期339-361,共23页
RNA-sequencing(RNA-seq),based on next-generation sequencing technologies,has rapidly become a standard and popular technology for transcriptome analysis.However,serious challenges still exist in analyzing and interpre... RNA-sequencing(RNA-seq),based on next-generation sequencing technologies,has rapidly become a standard and popular technology for transcriptome analysis.However,serious challenges still exist in analyzing and interpreting the RNA-seq data.With the development of high-throughput sequencing technology,the sequencing depth of RNA-seq data increases explosively.The intricate biological process of transcriptome is more complicated and diversified beyond our imagination.Moreover,most of the remaining organisms still have no available reference genome or have only incomplete genome annotations.Therefore,a large number of bioinformatics methods for various transcriptomics studies are proposed to effectively settle these challenges.This review comprehensively summarizes the various studies in RNA-seq data analysis and their corresponding analysis methods,including genome annotation,quality control and pre-processing of reads,read alignment,transcriptome assembly,gene and isoform expression quantification,differential expression analysis,data visualization and other analyses. 展开更多
关键词 transcriptome analysis high-throughput sequencing RNA-seq data analysis analysis pipeline
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Advancing Material Stability Prediction: Leveraging Machine Learning and High-Dimensional Data for Improved Accuracy
3
作者 Aasim Ayaz Wani 《Materials Sciences and Applications》 2025年第2期79-105,共27页
Predicting the material stability is essential for accelerating the discovery of advanced materials in renewable energy, aerospace, and catalysis. Traditional approaches, such as Density Functional Theory (DFT), are a... Predicting the material stability is essential for accelerating the discovery of advanced materials in renewable energy, aerospace, and catalysis. Traditional approaches, such as Density Functional Theory (DFT), are accurate but computationally expensive and unsuitable for high-throughput screening. This study introduces a machine learning (ML) framework trained on high-dimensional data from the Open Quantum Materials Database (OQMD) to predict formation energy, a key stability metric. Among the evaluated models, deep learning outperformed Gradient Boosting Machines and Random Forest, achieving up to 0.88 R2 prediction accuracy. Feature importance analysis identified thermodynamic, electronic, and structural properties as the primary drivers of stability, offering interpretable insights into material behavior. Compared to DFT, the proposed ML framework significantly reduces computational costs, enabling the rapid screening of thousands of compounds. These results highlight ML’s transformative potential in materials discovery, with direct applications in energy storage, semiconductors, and catalysis. 展开更多
关键词 high-throughput Screening for Material Discovery Machine Learning data-Driven Structural Stability analysis AI for Chemical Space Exploration Interpretable ML Models for Material Stability Thermodynamic Property Prediction Using AI
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基于高通量测序技术对口腔扁平苔藓患者相关癌变差异LncRNAs的筛选与分析 被引量:2
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作者 董文亮 黄一丹 +2 位作者 郭文卓 杨慧霞 张敬 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第1期80-87,共8页
目的:筛选并分析口腔扁平苔藓(OLP)黏膜组织的长链非编码RNAs(LncRNAs)的癌变相关差异性表达谱,并对其功能进行初步分析,探索其在OLP发生发展过程中可能的作用。方法:收集OLP(糜烂型)病损黏膜组织和正常黏膜组织各5例,应用高通量测序技... 目的:筛选并分析口腔扁平苔藓(OLP)黏膜组织的长链非编码RNAs(LncRNAs)的癌变相关差异性表达谱,并对其功能进行初步分析,探索其在OLP发生发展过程中可能的作用。方法:收集OLP(糜烂型)病损黏膜组织和正常黏膜组织各5例,应用高通量测序技术构建OLP中基因差异表达谱,生物信息学分析得到与口腔扁平苔藓癌变关系密切的LncRNAs。结果:筛选获得400个与OLP相关的LncRNAs,其中250个表达上调,150个表达下调,得到5个与口腔扁平苔藓癌变相关的差异表达LncRNAs:54055、100128560、399717、378825、100130231。结论:筛选得到的OLP病损黏膜中差异表达LncRNAs400个,发现其中5个LncRNAs可能与OLP发病、癌变倾向相关。 展开更多
关键词 长链非编码RNAs 口腔扁平苔藓 高通量测序 生物信息学分析 癌变
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不同发酵条件对枳壳真菌群落与化学成分的影响
5
作者 严志宏 刘秀梅 +8 位作者 关秋艳 宋永贵 艾志福 朱根华 平欲晖 杨明 郑琴 徐焕华 苏丹 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第11期254-262,共9页
目的:考察不同发酵方式和发酵时间对枳壳真菌菌群和化学成分的影响,以获得最佳发酵条件和菌群结构,保证发酵品种的稳定性和可控性。方法:采用扫描电子显微镜对不同发酵条件下的枳壳表面菌落进行观察和分析菌落特征。利用内转录第二间隔... 目的:考察不同发酵方式和发酵时间对枳壳真菌菌群和化学成分的影响,以获得最佳发酵条件和菌群结构,保证发酵品种的稳定性和可控性。方法:采用扫描电子显微镜对不同发酵条件下的枳壳表面菌落进行观察和分析菌落特征。利用内转录第二间隔区(ITS2)高通量测序技术,结合真菌群落多样性分析和真菌群落结构分析分别获得枳壳在传统压架发酵和非压架自然发酵7、14、21 d(前者编号Y1~Y3,后者编号F1~F3)条件下的真菌菌群微生物类别,同时采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)检测发酵过程中的化学成分,结合主成分分析(PCA),偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)及化合物保留时间、母离子、特征碎片离子等信息,筛选并鉴定不同发酵样品间的差异化合物。结果:真菌群落多样性分析显示,在采用传统枳壳架压片发酵法中,优势菌群在不同发酵时间点未发生变化,而非压架自然发酵法中优势菌群则随发酵进程出现明显差异,在属水平上,样品Y1、Y2、Y3和F2优势菌属为曲霉属(Aspergillus),而样品F1和F3的优势菌属均为根霉属(Rhizopus)。表明传统枳壳架压片发酵方式提供的微生物生长环境更稳定,菌群结构更稳固,更有利于发酵工艺和发酵品的稳定可控。经成分分析,共鉴定出155个化合物,其中黄酮类化合物70个,香豆素类化合物38个,生物碱类化合物10个,有机酸34个和其他类3个,发酵后均产生日立宁、泼朗弗林2个新生成分。不同发酵条件还带来化学成分的差异,多元统计分析获得2种不同发酵方式下存在26种差异化合物,主要包括黄酮类、有机酸类和香豆素类化合物。综合各项指标,传统枳壳架压片发酵14 d样品菌群结构稳定,物种丰富度较高且差异化合物整体含量较高,为最佳炮制条件。结论:传统压架法发酵在菌群结构稳定性和化学成分含量方面具有明显优势,且以枳壳架压片发酵14 d为最佳条件。该研究有助于促进枳壳发酵品质量稳定性和发酵生物利用率的提升,同时也为该品种质量控制方法的进一步完善提供实验基础。 展开更多
关键词 枳壳 发酵 真菌 高通量测序 化学成分 多元统计分析 菌群分析
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低温大曲感官特征及其细菌群落结构解析
6
作者 赵恒 蔡文超 +4 位作者 余培荣 陈炜 单春会 张海波 郭壮 《中国酿造》 北大核心 2025年第5期113-119,共7页
该研究采用电子鼻和电子舌技术与Mi Seq高通量测序技术测定山东省梁山地区低温大曲的感官特征和细菌群落结构,并分析两者之间的相关性。将其与襄阳地区低温大曲的细菌类群进行比较,并通过纯培养技术及分子生物学技术从中分离鉴定芽孢杆... 该研究采用电子鼻和电子舌技术与Mi Seq高通量测序技术测定山东省梁山地区低温大曲的感官特征和细菌群落结构,并分析两者之间的相关性。将其与襄阳地区低温大曲的细菌类群进行比较,并通过纯培养技术及分子生物学技术从中分离鉴定芽孢杆菌(Bacillus)菌株。结果表明,梁山低温大曲中的挥发性香气成分主要体现在硫化物、乙醇和醛酮类物质上;咸味和鲜味较为突出,酸味和鲜的回味较弱。优势细菌属主要为片球菌属(Pediococcus)(25.33%)、魏斯氏菌属(Weissella)(21.58%)和伴生乳杆菌属(Companilactobacillus)(5.27%)。Pediococcus、乳植杆菌属(Lactiplantibacillus)和发酵剂乳杆菌属(Levilactobacillus)与苦味或苦的回味呈显著正相关(P<0.05)。与襄阳低温大曲相比,梁山低温大曲中的细菌菌群丰富度较低,芽孢杆菌含量较少,乳酸菌含量较高;共有的细菌类群包括芽孢杆菌、克罗彭斯特德菌属(Kroppenstedtia)和部分乳酸菌。从梁山低温大曲中共分离鉴定出8株芽孢杆菌,包括3株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、2株索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)、2株副地衣芽孢杆菌(Bacillus paralicheniformis)和1株海恩斯氏芽孢杆菌(Bacillus haynesii)。 展开更多
关键词 低温大曲 电子鼻 电子舌 MiSeq高通量测序 细菌类群 结构解析
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下呼吸道感染患者肺泡灌洗液金黄色葡萄球菌丰度和分布特征
7
作者 蒋雅先 杨晓钰 +3 位作者 郑瑞 李艺坤 李春蕊 高玉红 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2025年第15期2263-2267,共5页
目的本研究旨在利用高通量测序技术,分析下呼吸道肺泡灌洗液(BALF)中的微生物群落结构,特别关注金黄色葡萄球菌的丰度和分布情况。方法收集云南省第一人民医院2022-2023年间的1650例BALF样本,通过BALF培养和恒温扩增与微流控技术进行金... 目的本研究旨在利用高通量测序技术,分析下呼吸道肺泡灌洗液(BALF)中的微生物群落结构,特别关注金黄色葡萄球菌的丰度和分布情况。方法收集云南省第一人民医院2022-2023年间的1650例BALF样本,通过BALF培养和恒温扩增与微流控技术进行金黄色葡萄球菌基因检测,并将代表性21例金黄色葡萄球菌阳性样本进行分组:金黄色葡萄球菌肺炎组、新冠病毒共感染组、慢性阻塞性肺病组,并进行16S rDNA扩增子高通量测序。结果三个组别的微生物群落组成存在显著差异,种水平的样本层级聚类分析图显示金黄色葡萄球菌肺炎组金黄色葡萄球菌检出多且占比高,慢性阻塞性肺病组以无色杆菌居多,而新冠病毒共感染组则以水甲基杆菌和无色杆菌为主要的构成对象,三组中只有在金黄色葡萄球菌肺炎组金黄色葡萄球菌居优势菌。结论BALF微生物群落的组成与不同疾病状态密切相关,为深入了解肺部感染性疾病的微生物学基础提供参考依据。 展开更多
关键词 肺泡灌洗液 微生物群落 金黄色葡萄球菌 高通量测序 样本层级聚类分析 下呼吸道感染
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青藏高原不同分布区独一味根际土壤理化性质和微生物群落特征 被引量:2
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作者 路岳衡 耿贵工 +1 位作者 王路昊 乔枫 《草业科学》 北大核心 2025年第3期561-576,共16页
独一味(Lamiophlomis rotata)是青藏高原特有的重要药用植物,探究独一味根际土壤的理化性质及其微生物群落的组成特点,对于开发和推广青藏高原特色生物资源有着重要价值。以青藏高原5个独一味主产区根际土壤为研究对象,测定土壤理化指... 独一味(Lamiophlomis rotata)是青藏高原特有的重要药用植物,探究独一味根际土壤的理化性质及其微生物群落的组成特点,对于开发和推广青藏高原特色生物资源有着重要价值。以青藏高原5个独一味主产区根际土壤为研究对象,测定土壤理化指标。同时采用高通量测序技术,结合Spearman、RDA等方法开展微生物群落组成及多样性研究。结果表明:1)独一味适宜在中性偏碱的土壤中生长。2)Candidatus_Udaeobacter、RB41属和赤芍铁杆属(Ferruginibacter)是独一味根际土壤中的优势细菌属;被孢霉属(Mortierella)、寡囊盘菌属(Thelebolus)和地霉菌属(Geotrichum)为独一味根际土壤中的优势真菌属。3)不同地区独一味根际土壤细菌和真菌群落的多样性和丰富度存在显著差异(P<0.05):杂多地区土壤细菌群落丰度最高,大武地区土壤细菌群落丰度最低;大武地区土壤真菌群落的多样性最为丰富,歇武地区土壤真菌群落多样性最低。4)有机碳与全氮含量是影响独一味根际土壤微生物群落分布的关键土壤环境因子。5)细菌Candidatus_Udaeobacter、Telmatobacter、Flaviaesturariibacter和真菌Seimatosporium、Ochronectria为独一味根际土壤的关键核心菌群。研究结果为筛选独一味促生或生防有益功能菌提供了理论依据。 展开更多
关键词 独一味 根际土壤 高通量测序 微生物多样性 核心微生物 相关性分析 冗余分析
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高通量测序在柑橘病毒鉴定与种群多样性分析中的应用 被引量:1
9
作者 李向 杨进 +2 位作者 黄爱军 周俊 易龙 《果树学报》 北大核心 2025年第3期651-661,共11页
中国柑橘产业在全球占据至关重要的地位,然而,柑橘病毒病却给该产业带来了严重的经济损失。随着病毒种类的不断增多,快速、准确地对病毒进行鉴定及遗传多样性分析变得愈发关键。高通量测序(High-Throughput Sequencing,HTS)技术,具有高... 中国柑橘产业在全球占据至关重要的地位,然而,柑橘病毒病却给该产业带来了严重的经济损失。随着病毒种类的不断增多,快速、准确地对病毒进行鉴定及遗传多样性分析变得愈发关键。高通量测序(High-Throughput Sequencing,HTS)技术,具有高通量、高效快速以及效益高的优势,逐渐成为了鉴定柑橘病毒的核心技术手段。HTS技术的应用不仅成功揭示了多种新病毒的存在,还深入挖掘了已知病毒的全基因组信息,提供了大量的基因序列数据,极大地推动了柑橘病毒在遗传变异、进化关系以及生态系统作用等方面的研究。展望未来,随着技术的发展和优化,HTS将在柑橘病毒鉴定与种群多样性分析中发挥更为重要的作用,为柑橘产业的可持续发展提供坚实的支撑。综述了HTS技术在柑橘病毒检测与鉴定,以及种群多样性分析方面的最新进展,并深入探讨了当前面临的挑战、未来的发展前景及其意义。 展开更多
关键词 柑橘 高通量测序技术 柑橘病毒 种群多样性分析
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兰坪主要铅锌矿复垦区氮循环相关细菌群落特征及其与土壤的响应 被引量:2
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作者 黄泽凯 刀承娇 +2 位作者 马鹏翔 李博 阎凯 《环境科学》 北大核心 2025年第1期399-408,共10页
氮循环对土壤生态系统元素循环具有重要影响,理清氮循环微生物的关键环境因素对矿区生态恢复起着至关重要的作用.功能菌群可以通过参与矿区土壤元素生物地球化学循环,调控植被生长,有益于矿区复垦.兰坪铅锌矿是亚洲最大的露天铅锌矿开采... 氮循环对土壤生态系统元素循环具有重要影响,理清氮循环微生物的关键环境因素对矿区生态恢复起着至关重要的作用.功能菌群可以通过参与矿区土壤元素生物地球化学循环,调控植被生长,有益于矿区复垦.兰坪铅锌矿是亚洲最大的露天铅锌矿开采区,矿区土壤镉含量是云南省重金属含量背景值95.6~388.7倍,亟需开展矿区生态恢复.为了探究铅锌矿复垦区氮循环细菌与土壤的响应,以兰坪铅锌矿复垦区土壤样品为研究对象,采用16S rRNA高通量测序技术、共现网络分析、PCoA、Manteltest和随机森林揭示兰坪铅锌矿复垦区在不同养分梯度下对氮循环功能微生物类群的影响.结果表明,优势菌属均来自亚硝化单胞菌科(Nitrosomonadaceae)下的未标注到的物种.铅锌对铅锌矿区氮循环功能微生物影响有限,更多的是有机质(SOM)和pH的影响.铵态氮(NH_(4)^(+)-N)、硝态氮(NO_(3)^(-)-N)和pH分别是影响硝化作用、反硝化作用和固氮微生物的关键理化因子. 展开更多
关键词 氮循环 细菌 铅锌矿复垦区 高通量测序 共现网络分析
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临床基因组测序解读与报告专家共识
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作者 卢宇蓝 李国壮 +31 位作者 王雅琼 徐可欣 董欣然 蔡继昊 吴冰冰 王慧君 方萍 王剑 王华 孙路明 叶勇裕 李晴 刘雅萍 刘丽 刘宁 刘嘉琦 宋昉 杨琳 邱正庆 陈泽夫 罗华夏 郭丹 郝婵娟 赵森 黄尚志 彭镜 蔡小强 睢瑞芳 李林康 吴南 周文浩 张抒扬 《遗传》 北大核心 2025年第3期314-328,共15页
基因组测序(genome sequencing,GS)是一种全面且系统地检测个体核基因组和线粒体基因组DNA序列的技术,旨在识别遗传变异并研究这些变异在人类健康和疾病发生发展中的作用。作为一种应用越来越广泛的检测技术,GS凭借高通量、高准确性和... 基因组测序(genome sequencing,GS)是一种全面且系统地检测个体核基因组和线粒体基因组DNA序列的技术,旨在识别遗传变异并研究这些变异在人类健康和疾病发生发展中的作用。作为一种应用越来越广泛的检测技术,GS凭借高通量、高准确性和全面性的优势,为临床诊断提供了重要支持。然而,其复杂的数据分析与解读对专业知识和经验提出了较高要求,也带来了诸多挑战。运用GS技术进行遗传病分子诊断会涉及临床应用的伦理与技术问题,包括知情同意、诊断性数据解读、报告范围和内容等。本专家共识总结了临床基因组测序(clinical GS,c GS)的核心流程,明确了检测范围与技术局限性,提供了数据质控、分析、注释及变异解读的关键步骤,并对报告内容和知情同意的争议性问题展开讨论。本共识旨在帮助相关从业人员正确理解和规范使用临床基因组测序技术,提升遗传病诊断的准确性,优化技术的临床效用,推动医学科学研究的进步。 展开更多
关键词 遗传罕见病 基因组测序 高通量测序数据分析 变异解读 遗传检测报告
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一种来源于云南棕果蝠肠道的新型博卡病毒及其VP1基因进化特征
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作者 李柳醒 李楠 +3 位作者 何于雯 孟锦昕 杨绍昌 王静林 《中国热带医学》 北大核心 2025年第8期945-950,共6页
目的了解云南棕果蝠(Rousettus leschenaultii)携带病毒的情况及其新型博卡病毒(Bocavirus,BoV)遗传进化关系,为病毒溯源及相关疾病防控提供了新的参考。方法2019年9月在云南省临沧市双江自治县某果园捕捉蝙蝠,经形态鉴定后,将蝙蝠进行... 目的了解云南棕果蝠(Rousettus leschenaultii)携带病毒的情况及其新型博卡病毒(Bocavirus,BoV)遗传进化关系,为病毒溯源及相关疾病防控提供了新的参考。方法2019年9月在云南省临沧市双江自治县某果园捕捉蝙蝠,经形态鉴定后,将蝙蝠进行解剖,分别取肺和肠道及其内容物,研磨后每个样本取200μL上清液混合成2个样本,即肺组织样本和肠道及其内容物样本。2个样本经超速离心浓缩后,提取病毒核酸,采用随机PCR扩增病毒核酸,并对扩增产物进行高通量测序及拼接组装。根据拼接获得的病毒序列进行引物设计、半巢式PCR扩增,并测序验证;采用MEGA-X等生物信息学软件对博卡病毒VP1基因进行序列分析。结果共采集到5只棕果蝠。从肠道及其内容物样本中拼接组装到1条3401 nt序列,经Blast-x比对发现与蝙蝠博卡病毒氨基酸同源性最高,为63.90%;在肺组织样本中未能检测出博卡病毒序列。根据这条序列设计5套引物,分别对5只蝙蝠肠道及其内容物进行半巢式PCR扩增,其中1只棕果蝠(编号:YNSJ03)肠道及其内容物扩增为阳性,对样本进行部分基因组扩增,获得2900 nt的博卡病毒基因序列,将该序列命名为YNSJ03-BtBoV。基于VP1基因氨基酸序列构建系统发育树,遗传进化分析结果显示:本研究在云南省棕果蝠中检测到的YNSJ03-BtBoV单独形成一个进化分支,与2017年和2024年在中国蝙蝠中检测的蝙蝠博卡细小病毒属遗传进化关系较近,它们之间的氨基酸同源性为70.1%(BtMf-PV/HuB2013株),核苷酸同源性为71.0%(YN2016株)。结论本研究在棕果蝠肠道中发现了一种新型博卡病毒,拓展了蝙蝠携带博卡病毒的相关资料,并揭示了蝙蝠中博卡病毒的遗传多样性。 展开更多
关键词 蝙蝠 博卡病毒 VP1基因 遗传进化 同源性 高通量测序
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基于高通量测序3种香型白酒大曲中微生物群落比较
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作者 周森 李婷 刘京国 《中国酿造》 北大核心 2025年第8期82-88,共7页
该研究利用高通量测序技术结合主坐标分析(PCoA)、线性判别分析效应大小(LEfSe),分析比较不同香型(浓香型、清香型、酱香型)白酒大曲微生物群落多样性。结果表明,清香型白酒大曲中细菌和真菌菌群多样性和丰富度最低,酱香型白酒大曲中真... 该研究利用高通量测序技术结合主坐标分析(PCoA)、线性判别分析效应大小(LEfSe),分析比较不同香型(浓香型、清香型、酱香型)白酒大曲微生物群落多样性。结果表明,清香型白酒大曲中细菌和真菌菌群多样性和丰富度最低,酱香型白酒大曲中真菌菌群多样性和丰富度最高,而细菌菌群在浓香型白酒大曲中最高。从3种香型白酒大曲样品中共注释到18个细菌门、351个细菌属以及5个真菌门和166个真菌属,清香型白酒大曲与浓香型白酒大曲样品微生物菌群组成存在一定的相似性,但均与酱香白酒大曲微生物组成存在一定差异。清香型白酒大曲中主要差异微生物为覆膜孢酵母属(Saccharomycopsis),浓香型白酒大曲中主要差异微生物为毕赤酵母属(Pichia)、曲霉属(Aspergillus)、明串珠菌属(Leuconostoc),酱香型白酒大曲中主要差异微生物为嗜热真菌属(Thermomyces)和克罗彭施泰特氏菌属(Kroppenstedtia)。 展开更多
关键词 不同香型白酒 大曲 微生物群落 高通量测序 主坐标分析
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长期玉米秸秆还田对褐土真菌群落和玉米产量的影响 被引量:2
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作者 殷浩凯 赵宇航 +3 位作者 解文艳 刘志平 周怀平 杨振兴 《环境科学》 北大核心 2025年第7期4699-4709,共11页
基于1992~2022年连续31 a的秸秆还田长期定位试验,包括4种不同玉米秸秆还田方式:秸秆不还田(CK)、秸秆过腹还田(CM)、秸秆粉碎直接还田(SC)和秸秆覆盖还田(SM),利用高通量测序技术、FUNGuild功能预测和生态网络方法,综合分析了土壤养分... 基于1992~2022年连续31 a的秸秆还田长期定位试验,包括4种不同玉米秸秆还田方式:秸秆不还田(CK)、秸秆过腹还田(CM)、秸秆粉碎直接还田(SC)和秸秆覆盖还田(SM),利用高通量测序技术、FUNGuild功能预测和生态网络方法,综合分析了土壤养分含量、胞外酶活性、真菌群落结构和菌群功能活性,探讨不同秸秆还田模式对褐土农田养分的影响,解析土壤胞外酶和菌群功能活性的变化特征,为高效提升褐土农田土壤肥力提供理论依据.结果表明:①长期不同秸秆还田(SM、SC和CM)可显著提高土壤肥力、玉米产量和胞外酶活性,土壤有机碳(SOC)、全氮(TN)、全磷(TP)、全钾(TK)、碱解氮(AN)、有效磷(AP)、速效钾(AK)、玉米累计产量、土壤葡萄糖苷酶(β-GC)、纤维二糖水解酶(CBH)和脱氢酶(DHA)含量较CK处理提升幅度分别为:17.0%~42.9%、3.0%~50.0%、2.3%~27.9%、4.4%~11.5%、11.2%~71.0%、14.1%~320.8%、17.1%~153.6%、6.4%~23.0%、35.6%~190.7%、41.9%~58.6%和28.8%~773.8%;其中CM处理提升效果最为显著.②长期不同秸秆还田改变了土壤真菌群落结构组成,真菌中被孢霉菌门相对丰度降低了29.05%~31.12%,担子菌门提升了24.76%~481.10%;土壤pH是影响真菌群落组成的重要影响因素.③网络分析结果表明,长期不同秸秆还田处理指示种归属于不同模块,与土壤养分含量和酶活性呈显著相关关系,其中CM处理中富集的Phaeoacremonium和Conocybe通过强烈共生关系形成特定功能微生物集群.④基于FUNGuild的功能预测发现:长期不同秸秆还田均提高了病理和腐生营养型真菌的相对丰度,降低了腐生-共生营养型真菌相对丰度.长期秸秆还田可提高土壤肥力和胞外酶活性,增加有益菌群丰度,显著改变真菌群落结构和组成,有利于碳和氮循环,从而促进褐土形成适合作物和真菌生长的环境. 展开更多
关键词 秸秆还田方式 真菌群落 酶活性 土壤养分 高通量测序 网络分析
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血浆游离DNA检测对非小细胞肺癌靶向治疗相关基因筛选及患者预后预测的研究
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作者 邓绮玲 宋迪 +3 位作者 奚可欣 谢晓婷 吴小延 赵卫 《中国癌症杂志》 北大核心 2025年第4期355-364,共10页
背景与目的:肿瘤患者血浆游离DNA(cell-free DNA,cfDNA)高通量检测广泛用于肿瘤靶向治疗相关基因的筛选。本研究探讨cfDNA中Ⅰ类及Ⅱ类靶向治疗相关基因变异类型及数量与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患癌预后的关系... 背景与目的:肿瘤患者血浆游离DNA(cell-free DNA,cfDNA)高通量检测广泛用于肿瘤靶向治疗相关基因的筛选。本研究探讨cfDNA中Ⅰ类及Ⅱ类靶向治疗相关基因变异类型及数量与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患癌预后的关系。方法:收集2021年—2023年在中山大学肿瘤防治中心进行血浆cfDNA高通量测序项目的NSCLC患者的测序结果及临床资料,并对入组患者从2021年6月1日采集血浆当天开始截至2024年5月27日进行生存随访,并使用GraphPad Prism 8.0及SPSS Statistics 25.0对患者生存期与临床资料及测序结果中Ⅰ类与Ⅱ类靶向治疗相关基因类型及数目进行单因素及多因素统计学分析(伦理批号:B2024-359-01)。结果:313例NSCLC患者中确诊时分期Ⅰ期25例(7.98%)、Ⅱ期20例(6.39%)、Ⅲ期38例(12.14%)和Ⅳ期230例(73.48%);组内NSCLC分型包含腺癌(90.10%),鳞癌(5.11%),大细胞癌(2.87%)及其他分型(1.92%);入组的NSCLC患者血浆cfDNA中Ⅰ类与Ⅱ类靶向治疗相关基因数及占比分别为:0个(25.24%)、1个(17.57%)、2个(19.17%)、3个(14.38%)、4个(8.31%)、5个及以上(15.34%)。患者血浆cfDNA高通量测序检测结果中,突变频率最高的3个基因分别为EGFR、TP53、ERBB2基因,其中EGFR基因突变频率为36.04%,TP53基因突变频率为30.63%,ERBB2基因突变频率为4.95%。患者生存期不仅与热点靶向基因表达情况相关,与血浆cfDNA高通量测序中Ⅰ类和Ⅱ类靶向相关位点基因变异个数也呈正相关。经过治疗后无靶向治疗相关基因的位点变异比有靶向治疗相关基因的位点变异的患者的生存期长,死亡风险可降低63.2%。而单纯一个基因位点变异比多个驱动基因位点变异的患者的生存期长,死亡风险更低,所测得的Ⅰ类及Ⅱ类靶向治疗药物在3个基因数以内,基因数目越少,患者的生存期越长。结论:血浆cfDNA高通量测序中Ⅰ类和Ⅱ类靶向相关位点基因变异个数对经过治疗后的NSCLC患者的生存期有影响。血浆cfDNA高通量测序检测可作为患者预后的评估指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 血浆游离DNA 高通量测序 基因突变位点 靶向治疗药物筛选 生存分析
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中高温大曲贮存期间理化指标及微生物群落动态分析 被引量:1
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作者 孙亮霞 王生艳 +3 位作者 林一心 赵新民 尉军强 唐云 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第7期122-128,共7页
深入了解中高温大曲贮存期间理化指标以及微生物群落的演替规律,对更好地控制大曲的品质以及提高原酒出酒率具有重要意义。该研究从西北某浓香型制曲车间采集了不同贮存期的4个样品,在对其理化指标评价的基础上,通过MiSep高通量测序,解... 深入了解中高温大曲贮存期间理化指标以及微生物群落的演替规律,对更好地控制大曲的品质以及提高原酒出酒率具有重要意义。该研究从西北某浓香型制曲车间采集了不同贮存期的4个样品,在对其理化指标评价的基础上,通过MiSep高通量测序,解析大曲贮存过程中微生物群落的多样性。结果表明,在贮存过程中(0~3个月)大曲的水分含量为11%~12%,酸度在贮存90 d后达到0.75 mmol/10 g,相对刚出房时,其成曲样品提高了66.7%;大曲的微生物丰富度和多样性均先降低再回升:高温放线菌属(Thermoactinomyces,55.33%)、糖多孢菌属(Saccharopolyspora,21.70%)和嗜热真菌属(Thermomyces,59.33%)占主导地位,乳杆菌属(Lactobacillus)和魏斯氏菌属(Weissella)的相对含量随贮存时间的推移总体呈上升趋势。关联性分析表明,乳杆菌属、糖多孢菌属、魏斯氏菌属、曲霉属(Aspergillus)和威克汉姆酵母属(Wickerhamomyces)等与糖化力呈现正相关关系,嗜热真菌属与液化力、发酵力、酯化力呈现正相关关系。由此可见,在大曲贮存过程中,微生物群落结构不断调整、平衡以至稳定,同时这与理化指标也存在相关性,从而直接影响白酒的产量和品质。因此,中高温大曲的贮存是白酒生产中不可缺少的环节。 展开更多
关键词 大曲 贮存 理化指标 高通量测序 微生物群落 关联性分析
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高原链带藻Desmodesmus sp.YH-1基因组研究及SSR特征分析
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作者 王金虎 宁琰萍 +2 位作者 崔小梅 魏延丽 布多 《海洋渔业》 北大核心 2025年第4期576-588,共13页
为了解和完善高原微藻的基因组遗传信息,对高原链带藻Desmodesmus sp.YH-1进行基因组de novo测序并筛选简单重复序列(SSR)分子标记。采用Illumina高通量测序技术基于K-mer分析手段研究了Desmodesmus sp.YH-1的杂合度和基因组大小,运用... 为了解和完善高原微藻的基因组遗传信息,对高原链带藻Desmodesmus sp.YH-1进行基因组de novo测序并筛选简单重复序列(SSR)分子标记。采用Illumina高通量测序技术基于K-mer分析手段研究了Desmodesmus sp.YH-1的杂合度和基因组大小,运用微卫星识别工具(MISA)鉴定分析SSR序列。结果表明:Desmodesmus sp.YH-1的基因组大小为24.56Mb,基因组杂合度为1.87%,非重复序列比例为90.5%,GC含量为60.57%,测序K-mer值为33.6;通过SSR分子标记分析,基因组中共有SSR 144335个,其中,单、双、三核苷酸重复模体的比例较高,分别占比3.54%、2.55%和92.64%,单核苷酸重复模体中C/G、双核苷酸重复模体中AC/GT、三核苷酸重复模体中AGC/CTG含量最高;对不同SSR类型在基因转录本的密度分布进行统计,结果显示,3个碱基重复9~12次的数目最多。基因组学研究发现,Desmodesmus sp.YH-1基因组呈现杂合度高、重复序列比例低和高级重复单元比例高的特点。研究结果可为高原微藻的生物资源开发和遗传多样性研究提供支撑。 展开更多
关键词 青藏高原 链带藻 高通量测序 基因组 SSR特征分析
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测序数据量对褐斑鲬和条纹斑竹鲨线粒体基因组组装效率的影响
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作者 赵蕊蕊 陆定方 +2 位作者 李鹏飞 韩志强 徐胜勇 《海洋湖沼通报(中英文)》 北大核心 2025年第2期93-99,共7页
高通量测序技术及生物信息学分析方法的快速发展为大规模开展非模式生物基因组测序工作提供了可能,然而如何在低成本的基础上获得基因组信息成为高通量测序技术推广的重要限制因素。鉴于海洋鱼类多样性及其基因组大小的异质性,本研究以... 高通量测序技术及生物信息学分析方法的快速发展为大规模开展非模式生物基因组测序工作提供了可能,然而如何在低成本的基础上获得基因组信息成为高通量测序技术推广的重要限制因素。鉴于海洋鱼类多样性及其基因组大小的异质性,本研究以硬骨鱼褐斑鲬和软骨鱼条纹斑竹鲨为研究对象,对两者进行线粒体基因组组装与分析,探讨测序数据量及测序深度对海洋鱼类线粒体基因组组装效率的影响。根据对褐斑鲬和条纹斑竹鲨样品开展高深度Illumina测序,利用生物信息学软件分别构建10个测序数据量梯度,并使用NOVOPlasty软件进行线粒体基因组组装,从组装效果、时间两方面统计分析线粒体组装结果。结果显示,随着测序数据量及测序深度的下降,线粒体组装时间呈显著下降趋势(Wilcoxon signed rank test,P<0.01)。褐斑鲬数据量0.3 Gb(测序深度~0.4 x)后无法成功组装线粒体基因组、条纹斑竹鲨数据量0.15 Gb(~0.03 x)后线粒体组装时间逐步增加。对组装效果和组装时间进行综合分析,确定褐斑鲬和条纹斑竹鲨线粒体基因组组装的最优数据量分别为0.3 Gb和0.5 Gb,提示0.5 Gb的测序数据量可能是海洋鱼类线粒体基因组组装的最优方案。本研究初步给出了海洋鱼类线粒体基因组组装的最优测序数据量(~0.5 Gb),可为后续相关研究工作提供参考,同时有助于在低成本基础上进行海洋鱼类线粒体基因组组装。 展开更多
关键词 高通量测序 褐斑鲬 条纹斑竹鲨 线粒体基因组组装 比较分析
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四种复种模式对烟草黑胫病发生及土壤细菌群落多样性的影响
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作者 黄思菁 肖金讯 +4 位作者 杨磊 肖楚文 宋潇瑜 朱丹丹 杨友才 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期9-15,49,共8页
本研究采用16S rRNA基因高通量测序,比较分析4种复种模式(烤烟–大豆、烤烟–玉米、烤烟–水稻、烤烟–秋季休耕)下土壤细菌群落结构组成差异及其与烟草黑胫病发病率的关系。结果表明:烤烟–大豆(D)、烤烟–玉米(Y)和烤烟–水稻(S)复种... 本研究采用16S rRNA基因高通量测序,比较分析4种复种模式(烤烟–大豆、烤烟–玉米、烤烟–水稻、烤烟–秋季休耕)下土壤细菌群落结构组成差异及其与烟草黑胫病发病率的关系。结果表明:烤烟–大豆(D)、烤烟–玉米(Y)和烤烟–水稻(S)复种模式下烟草黑胫病发病率分别为59.35%、39.81%和27.17%,均显著低于烤烟–秋季休耕(L)模式的(80.22%);L、D、Y、S复种模式的土壤细菌群落多样性依次增加;变形菌门、绿弯菌门和酸杆菌门是烟田土壤细菌群落中的优势菌门,朱氏杆菌属、罗河杆菌属、非培养酸杆菌和嗜酸杆菌属为共有优势属,不同复种模式的优势菌门和共有优势属相对丰度有差异;相比于L模式,其他3种复种模式下朱氏杆菌属、罗河杆菌属、酸热菌属的相对丰度下降明显;候选物种土源菌属、厌氧绳菌属和嗜盐囊菌属的相对丰度有所上升;朱氏杆菌属、罗河杆菌属、酸热菌属和厚皮杆菌属的丰度与黑胫病发病率呈显著正相关,候选物种土源菌属、厌氧绳菌属和嗜盐囊菌属的丰度与黑胫病发病率呈显著负相关。与烤烟–秋季休耕模式相比,另外3种复种轮作模式可以塑造有利于抵抗病害的土壤细菌群落结构,从而减少烤烟黑胫病的发生。 展开更多
关键词 烤烟 高通量测序 细菌群落 复种模式 多样性分析
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高通量测序分析紫朱软膏对糖尿病小鼠溃疡组织miRNA表达谱的影响
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作者 李文惠 樊炜静 柳国斌 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第17期4337-4346,共10页
背景:糖尿病溃疡反复发作、极难愈合,其发生发展伴随着miRNAs的差异表达,研究“补虚祛瘀生肌”中药紫朱软膏在促进创面愈合过程中对miRNAs表达的影响,将为中医药治疗慢性溃疡提供新思路。目的:通过高通量测序及生物信息学分析方法寻找... 背景:糖尿病溃疡反复发作、极难愈合,其发生发展伴随着miRNAs的差异表达,研究“补虚祛瘀生肌”中药紫朱软膏在促进创面愈合过程中对miRNAs表达的影响,将为中医药治疗慢性溃疡提供新思路。目的:通过高通量测序及生物信息学分析方法寻找紫朱软膏干预糖尿病溃疡的可能机制。方法:选取正常组、模型组和紫朱软膏组小鼠各6只,后两组采用高脂饲料联合链脲佐菌素注射构建糖尿病模型,背部剪除皮肤形成糖尿病慢性溃疡;紫朱软膏组给予紫朱软膏按0.032 g/cm^(2)比例换药,1次/d,周期14 d。评价造模及伤口愈合指标,每组随机选择3只进行测序。分析组间差异miRNA,利用生物信息学方法分析差异miRNAs,初步建立糖尿病溃疡差异表达miRNA与靶基因及基因功能调控网络。结果与结论:①相比正常组,模型组溃疡组织共筛选出1072种已知miRNAs,其中94种差异明显;上调倍数差异前3位是miR-1298-5p、miR-29b-3p、miR-151-5p,下调倍数差异前3位是miR-223-3p、miR-135a-5p,主要与细胞增殖、凋亡、创伤愈合、血管新生、抗炎有关;②糖尿病小鼠溃疡用药前后,溃疡组织种共筛选出1056种已知miRNAs,其中57种差异明显,上调倍数差异前3位是miR-451a、miR-363-3p、miR-122-5p,下调倍数差异前3位是miR-1964-3p、miR-5099、miR-182-3p,主要与细胞增殖迁移、调节巨噬细胞、改善胰岛素抵抗有关;③基因本体论分析结果显示,靶基因的功能主要涉及细胞发育、神经发育、蛋白结合、磷脂酰肌醇3-激酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性等;④京都基因与基因组百科全书功能分析显示,与正常组相比,模型组差异靶基因富通路为哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、磷脂酰肌醇3-激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、腺苷酸活化蛋白激酶、Wnt信号通路及癌症相关通路;紫朱软膏组相比模型组,与乳腺癌、肝癌相关通路和环腺苷酸、p53、Wnt、磷脂酰肌醇3-激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶信号通路相关;⑤提示初步建立了糖尿病溃疡差异表达miRNA与靶基因及基因功能调控网络,紫朱软膏能明显促进糖尿病溃疡愈合,糖尿病会引起miRNAs表达差异,紫朱软膏治疗也会改变miRNAs谱系,为未来从miRNAs角度研究糖尿病溃疡的发生发展规律、治疗机制奠定了基础。 展开更多
关键词 紫朱软膏 糖尿病溃疡 高通量测序 miRNA 生物信息学分析 工程化组织构建
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