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苏云金杆菌以色列亚种cryIVB基因在E.coli中的高表达 被引量：2
1
作者 刘国奇 蒋如璋 张自立 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期215-217,共3页
韭菜迟眼蕈蚊（Ｂｒａｄｙｓｉａｏｄｏｒｉｐｈａｇａ）幼虫以取食根部危害韭菜的生长．为了研究有效的生防制剂，采用ＤＮＡ聚合酶链式反应方法，从苏云金杆菌以色列亚种（Ｂｔｉ）得到３．５ｋｂ的开放阅读框架（ＯＲＦ），其包括Ｂ... 韭菜迟眼蕈蚊（Ｂｒａｄｙｓｉａｏｄｏｒｉｐｈａｇａ）幼虫以取食根部危害韭菜的生长．为了研究有效的生防制剂，采用ＤＮＡ聚合酶链式反应方法，从苏云金杆菌以色列亚种（Ｂｔｉ）得到３．５ｋｂ的开放阅读框架（ＯＲＦ），其包括Ｂｔｉ杀虫蛋白基因ｃｒｙＩＶＢ的结构基因和部分上游启动区．将结构基因亚克隆到高表达载体ｐＱＥ５２中，构建了高表达质粒ｐＱＥ５２Ｂ．在Ｅ．ｃｏｌｉＳＧ１３００９（ｐＲＥＰ４）中，经ＩＰＴＧ诱导，１３０ｋＤ的蛋白表达量约占细胞总蛋白的７．９％，其对韭菜迟眼蕈蚊三龄幼虫具有较强的毒杀作用．为进一步利用ｃｒｙＩＶＢ基因。 展开更多
关键词 cryivb 基因表达 韭菜迟眼蕈蚊 苏云金杆菌
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BticryIVB基因的克隆及表达质粒的构建 被引量：2
2
作者 刘国奇 蒋如璋 张自立 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期54-56,共3页
采用 PCR方法 ,克隆得到 3 .5kb的开放阅读框架 ( ORF) ,其包括 Bti的杀虫蛋白基因 ,cry IVB结构基因和部分上游启动区 .将结构基因亚克隆到高表达载体 p QE52中 ,构建了高表达质粒 p QE52 B.在 E.coli SG1 3 0 0 9( p REP4 )中 ,1 3 0 ... 采用 PCR方法 ,克隆得到 3 .5kb的开放阅读框架 ( ORF) ,其包括 Bti的杀虫蛋白基因 ,cry IVB结构基因和部分上游启动区 .将结构基因亚克隆到高表达载体 p QE52中 ,构建了高表达质粒 p QE52 B.在 E.coli SG1 3 0 0 9( p REP4 )中 ,1 3 0 k D的蛋白得到表达 ,其对韭菜迟眼蕈蚊 ( Bradysia odoriphaga)三龄幼虫具有较强的毒杀作用 . 展开更多
关键词 BTI cryivb 基因表达 克隆 双翅目害虫 生物防治
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