期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到543篇文章
< 1 2 … 28 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
病原菌胁迫下植物“呼救”策略的研究进展 被引量：3
1
作者 杨林桦 杜晓雪 +2 位作者 张佳宁 谢田朋 杨涛 《微生物学通报》 北大核心 2025年第1期17-32,共16页
植物在生长过程中会受到生物与非生物性胁迫,其中病原菌侵染是生物胁迫中的重要组成部分。由于植物微生物组与植物共同生长进化,当植物受到病原菌胁迫时会通过特殊分泌物或招募有益菌对抗病原菌。本文从病原菌胁迫下植物微生物组变化、... 植物在生长过程中会受到生物与非生物性胁迫,其中病原菌侵染是生物胁迫中的重要组成部分。由于植物微生物组与植物共同生长进化,当植物受到病原菌胁迫时会通过特殊分泌物或招募有益菌对抗病原菌。本文从病原菌胁迫下植物微生物组变化、植物代谢产物变化、植物-微生物互作机制和植物“呼救”后形成的抑病土壤等方面阐述植物“呼救”策略研究进展,为植物土传病害防控提供参考依据。 展开更多
关键词 病原菌 微生物组 代谢物 “呼救”策略
原文传递
Bt Cry毒素广谱检测的胶体金侧流免疫层析试纸 研究 与设计
2
作者 金嘉凤 沈建兴 +8 位作者 沈成 陈蔚 孙吉 徐重新 谢雅晶 张霄 朱庆 刘媛 刘贤金 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第10期2057-2067,共11页
Bt Cry毒素是转基因农产品及其产地环境安全监管的重要对象。为实现转基因农产品的Bt Cry毒素快速检测,本研究基于抗体的胶体金侧流免疫层析法,以前期制备获得的具备Bt Cry毒素广谱识别能力的单克隆抗体为检测抗体,将其标记胶体金形成... Bt Cry毒素是转基因农产品及其产地环境安全监管的重要对象。为实现转基因农产品的Bt Cry毒素快速检测,本研究基于抗体的胶体金侧流免疫层析法,以前期制备获得的具备Bt Cry毒素广谱识别能力的单克隆抗体为检测抗体,将其标记胶体金形成金标探针;同时分别以前期制备获得的具备Bt Cry毒素广谱识别能力的多克隆抗体为检测线(T线)上的捕获抗体、以商品化的羊抗鼠二抗为质控线(C线)上的质控抗体,进而依托硝化纤维膜等组件构建形成胶体金免疫层析检测试纸,并对其检测性能进行试验。结果表明,本研究构建设计的胶体金免疫层析检测试纸对Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Ah、Cry1B、Cry1C和Cry1F的最低肉眼检测线分别为0.5μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、0.5μg/mL和0.5μg/mL,说明本研究研发的检测试纸可用于Bt Cry毒素的广谱快速检测,具有较高的应用价值。 展开更多
关键词 Bt Cry毒素 检测试纸 侧流免疫层析 抗体 广谱检测
在线阅读 下载PDF
木毒蛾钙黏蛋白基因的克隆及其表达与结构特点分析
3
作者 孙媛媛 陈佳宁 +5 位作者 倪涛 任昊杰 蔡鹏宁 彭显程 张飞萍 王荣 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2025年第1期17-25,共9页
【目的】探究木毒蛾钙黏蛋白(LxCad)的分子特征、表达量及其与Cry1Ac毒素的分子互作机制,为深入研究Cry毒素受体蛋白提供参考。【方法】以木毒蛾4龄幼虫cDNA为模板,通过RT-PCR技术对LxCad基因进行克隆并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR... 【目的】探究木毒蛾钙黏蛋白(LxCad)的分子特征、表达量及其与Cry1Ac毒素的分子互作机制,为深入研究Cry毒素受体蛋白提供参考。【方法】以木毒蛾4龄幼虫cDNA为模板,通过RT-PCR技术对LxCad基因进行克隆并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR技术分析该基因在木毒蛾幼虫不同龄期及不同组织(头、中肠、表皮)中的表达模式;通过毒力测定获得Cry1Ac毒素对木毒蛾2龄幼虫的致死中浓度(LC_(50)),并利用qRT-PCR分析经LC_(50)的Cry1Ac胁迫后LxCad的表达量;对LxCad进行同源建模,并从PDB数据库中下载Cry1Ac 3D模型,利用计算机模拟蛋白-蛋白对接,预测蛋白-蛋白相互作用的氨基酸残基。【结果】克隆获得木毒蛾中肠LxCad基因(GenBank ID:MN380035.1)开放阅读框(ORF)全长序列,全长为5172 bp,编码1723个氨基酸,理论分子质量为194 ku,等电点为4.24;推断出的氨基酸序列包括1个信号肽(SIG)、1个前蛋白区(PRO)、12个Cad重复区(CR)、1个近膜区(MPR)、1个跨膜区(TM)以及1个胞质区(CYT);序列比对和进化树分析表明,LxCad与舞毒蛾的LdCad的一致性最高。qRT-PCR结果表明,LxCad主要分布于木毒蛾幼虫肠道,在5龄幼虫中的表达量最高,在6龄幼虫中次之,低龄幼虫表达量较低;使用Cry1Ac毒素对木毒蛾2龄幼虫进行胁迫后,发现LxCad的表达量相比于对照组显著上调。蛋白-蛋白分子对接分析结果表明,Cry1Ac毒素和LxCad受体中分别有多个氨基酸残基通过氢键相互作用,这些氨基酸残基分别位于PRO、CR8以及CR9中。【结论】木毒蛾LxCad可能是Cry1Ac的潜在受体蛋白。 展开更多
关键词 木毒蛾 钙黏蛋白 Cry毒素受体 表达谱分析 分子对接
在线阅读 下载PDF
小菜蛾V-ATP酶A亚基表达丰度差异
4
作者 卢莉娜 朱庆 +3 位作者 高美静 谢雅晶 刘贤金 张志勇 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第4期839-846,共8页
V型ATP酶(V-ATPase)在昆虫体内和Cry毒素作用机制中发挥重要作用。本研究采用分子克隆和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术探究小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫体内V-ATP酶A亚基基因在不同生长发育阶段,以及取食Cry1Ac毒素后的表达量丰度... V型ATP酶(V-ATPase)在昆虫体内和Cry毒素作用机制中发挥重要作用。本研究采用分子克隆和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术探究小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫体内V-ATP酶A亚基基因在不同生长发育阶段,以及取食Cry1Ac毒素后的表达量丰度差异和变化情况。结果表明,小菜蛾V-ATP酶A亚基基因CDS区为1848 bp,编码615个氨基酸(GenBank登录号:ON108624),与亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)、二化螟(Chilo suppressalis)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)的同源性约为94%。V-ATP酶A亚基基因在小菜蛾卵、幼虫、蛹和成虫期均有表达,在卵和蛹期表达量较低,在幼虫2龄期时表达量达到最高值,为卵期的4.16倍,3~4龄期表达量下降。小菜蛾幼虫取食含有Cry1Ac毒素的饲料后,体内V-ATP酶A亚基基因表达量整体呈显著下降趋势,取食48 h后表达量恢复至正常水平。在小菜蛾幼虫体内,V-ATP酶A亚基基因的表达量与生长发育和代谢变化密切相关,并且与Cry1Ac毒素的作用有一定关系。 展开更多
关键词 小菜蛾 V-ATP酶A亚基 Cry毒素 表达丰度
在线阅读 下载PDF
柚木驼蛾高毒力Bt菌株筛选及cry杀虫基因鉴定
5
作者 赵纪成 王青华 +4 位作者 刘云朋 张龙娃 孔德治 朱耀军 曲良建 《林业科学》 北大核心 2025年第11期45-55,共11页
【目的】筛选对柚木驼蛾具高毒力的苏云金芽孢杆菌(Bt)菌株,并基于不同菌株的毒力参数探究强弱毒株在伴孢晶体种类、形态、cry基因型和杀虫蛋白分子量等方面的差异,为柚木驼蛾等害虫的绿色高效防控提供优良生防资源,为高毒力Bt菌株的分... 【目的】筛选对柚木驼蛾具高毒力的苏云金芽孢杆菌(Bt)菌株,并基于不同菌株的毒力参数探究强弱毒株在伴孢晶体种类、形态、cry基因型和杀虫蛋白分子量等方面的差异,为柚木驼蛾等害虫的绿色高效防控提供优良生防资源,为高毒力Bt菌株的分子筛选和科学鉴定提供参考。【方法】测定10株Bt菌株对柚木驼蛾3龄幼虫的生物活性,基于光学(相差)及电子扫描显微镜(SEM)观察、PCR-RFLP分析结合目的基因片段测序和SDS-PAGE分析等方法探究强弱毒株在伴孢晶体种类和形态、cry基因型以及杀虫晶体蛋白分子量等方面的异同。【结果】1)10株Bt菌株对柚木驼蛾3龄幼虫均有杀虫活性,其中菌株FJ-3、YN-1和YN-2的毒力最高,48 h致死率可达到或接近100%,且3株高毒力菌株对柚木驼蛾幼虫的致死中浓度(LC_(50))分别为1.51×10^(7)、6.20×10^(6)和2.22×10^(6) cfu·mL^(−1),致死中时间(LT_(50))分别为22.14、19.87和17.04 h。2)电子扫描显微镜观察发现,高毒力菌株产生的伴孢晶体种类较多(3~4种),且形态主要为菱形和镶嵌形,而低毒力菌株只能产生1~2种晶体,且形态大多为球形和不规则形。3)10株Bt菌株在cry基因型和杀虫晶体蛋白分子量上亦存在差异,高毒力菌株(FJ-3、YN-1和YN-2)均含有3种cry基因型,分别为cry1Aa、cry2Ab和cry1Ia。【结论】本研究筛选出针对柚木驼蛾具高毒力的FJ-3、YN-1和YN-2共3株Bt菌株,分析强弱毒株的伴孢晶体特征并鉴定出Bt菌株cry基因型,可为今后优良生防资源的分子筛选和挖掘利用提供借鉴。 展开更多
关键词 柚木驼蛾 红树林 苏云金芽孢杆菌 伴孢晶体特征 cry基因型
在线阅读 下载PDF
全球价值链位置如何影响企业盈利能力 被引量：2
6
作者 张志明 杜明威 耿景珠 《国际经贸探索》 北大核心 2025年第3期58-74,共17页
文章借助三阶段垄断竞争模型探讨了企业全球价值链位置与其盈利能力间非线性关系的理论机制,分析得出全球价值链高端环节与低端环节间生产率之差小于相应的进入成本之差是形成二者间倒“U”型关系的必要条件。进一步地,基于中国微观数... 文章借助三阶段垄断竞争模型探讨了企业全球价值链位置与其盈利能力间非线性关系的理论机制,分析得出全球价值链高端环节与低端环节间生产率之差小于相应的进入成本之差是形成二者间倒“U”型关系的必要条件。进一步地,基于中国微观数据的实证检验发现,中国企业全球价值链位置与其盈利能力间呈现显著的倒“U”型“武藏曲线”关系,位居全球价值链中游阶段的企业盈利能力最强,该结论经过一系列稳健性检验后仍然成立。异质性分析表明,中国企业全球价值链位置与其盈利能力间的倒“U”型关系仅显著存在于私营企业、外资企业、从事加工与混合贸易的企业以及位处高市场化程度地区的企业。文章为优化中国企业参与全球价值链的利益分配和促进企业全球价值链地位的攀升提供了有益启示。 展开更多
关键词 全球价值链位置 盈利能力 微笑曲线 武藏曲线
原文传递
保护性耕作抑制玉米真菌病害发生的机制
7
作者 白子轩 敖曼 +4 位作者 葛志强 焦明翠 潘珠云 马驷骢 关义新 《土壤与作物》 2025年第1期120-127,共8页
玉米是我国第一大粮食作物,为保障粮食安全起到重要作用。然而,玉米生长过程中极易受到病害侵染,其中真菌病害分布广、传播快且危害大,对玉米产量和质量都有较大影响。本文针对病原侵染玉米后“呼救”-响应-抵抗3个方面,综述了保护性耕... 玉米是我国第一大粮食作物,为保障粮食安全起到重要作用。然而,玉米生长过程中极易受到病害侵染,其中真菌病害分布广、传播快且危害大,对玉米产量和质量都有较大影响。本文针对病原侵染玉米后“呼救”-响应-抵抗3个方面,综述了保护性耕作抑制玉米真菌病害的研究进展,以期为防治玉米真菌病害的研究及生态阻控提供参考。保护性耕作下土壤微生态会产生响应抵抗玉米真菌病害侵染的信号,进而引发玉米的主动抗病反应。在这一过程中,保护性耕作会促进根际有益微生物的富集,增加土壤中矿质元素的含量,在抑制真菌病害发生的同时,对玉米具有促进生长和提高抗病能力的作用。本文也提出了保护性耕作抑制玉米真菌病害未来需要研究的问题。 展开更多
关键词 保护性耕作 真菌病害 “呼救”假说 微生物群落 作物抗病性
在线阅读 下载PDF
高温熔盐法合成铀酰硅酸盐晶体[K_(4)Cs_(2)][(UO_(2))_(3)(Si_(8)O_(22))]
8
作者 韩振宇 张笑晨 +5 位作者 杨庆明 战春源 王靖阳 刘德邦 张萌 张蕾 《哈尔滨工程大学学报》 北大核心 2025年第11期2190-2198,共9页
为了能更好地研究乏燃料地质储存中铀酰硅酸盐对铀及放射性核素迁移的潜在影响,本文采用高温熔盐法合成了一种新型的铀酰硅酸盐晶体[K_(4)Cs_(2)][(UO_(2))_(3)(Si_(8)O_(22))]。通过单晶X射线衍射测试、粉末X射线衍射测试、扫描电子显... 为了能更好地研究乏燃料地质储存中铀酰硅酸盐对铀及放射性核素迁移的潜在影响,本文采用高温熔盐法合成了一种新型的铀酰硅酸盐晶体[K_(4)Cs_(2)][(UO_(2))_(3)(Si_(8)O_(22))]。通过单晶X射线衍射测试、粉末X射线衍射测试、扫描电子显微镜图像、能量色散光谱和拉曼光谱等测试方法确定其晶体结构。该晶体属于单斜晶系,C2/m空间群。其三维框架由铀氧八面体和硅氧四面体组成,其中硅氧四面体通过点共享形成八聚体,即[Si_(8)O_(22)]^(12-)单元,钾离子和铯离子填充在孔道中以平衡电荷。此外,通过变温X射线衍射测试证实该结构在50~900℃具有良好的热稳定性。 展开更多
关键词 核废物处理处置 铀酰硅酸盐 高温熔盐法 晶体合成 框架结构 硅酸八聚体 钾铯离子共掺 热稳定性
在线阅读 下载PDF
中药贴敷涌泉穴联合推拿对夜啼患儿症状中医证候评分及睡眠质量的影响
9
作者 曹迪 范博妍 +1 位作者 赵艳 江宁祥 《首都食品与医药》 2025年第3期151-153,共3页
目的探讨中药贴敷涌泉穴联合推拿对夜啼患儿症状中医证候评分及睡眠质量的影响.方法选取我院2023年2月-2024年4月收治的118例夜啼患儿,按随机数表法分为对照组(59例)、研究组(59例);对照组予以推拿干预,研究组基于推拿再予以中药贴敷涌... 目的探讨中药贴敷涌泉穴联合推拿对夜啼患儿症状中医证候评分及睡眠质量的影响.方法选取我院2023年2月-2024年4月收治的118例夜啼患儿,按随机数表法分为对照组(59例)、研究组(59例);对照组予以推拿干预,研究组基于推拿再予以中药贴敷涌泉穴干预;对比两组干预效果、中医证候评分、夜啼次数与夜醒时间及睡眠质量.结果研究组干预总有效率较对照组高(P<0.05);研究组干预2个疗程后,中医证候评分中主症、次症及总分均较对照组低(P<0.05);研究组干预2个疗程后,夜啼次数较对照组低,夜醒时间较对照组短(P<0.05);研究组干预2个疗程后,匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评分较对照组低(P<0.05).结论夜啼患儿采用中药贴敷涌泉穴联合推拿干预效果较好,可改善症状中医证候评分,减少夜啼次数与夜醒时间,提升睡眠质量. 展开更多
关键词 夜啼 中药贴敷 涌泉穴 推拿 中医证候评分 睡眠质量
暂未订购
Box-Behnken响应面法优化壮方消积夜啼乳膏成型工艺
10
作者 廖晋钰 雷以恬 +5 位作者 陈郡 韦鼎朔 周蓓 梁静 苏榕 陈广琛 《中国处方药》 2025年第12期16-20,共5页
目的优化壮方消积夜啼乳膏的成型工艺。方法以外观性状、pH值、涂布性、延展性、离心试验、耐热耐寒试验为评价指标,通过单因素实验联合Box-Behnken响应面法优化乳膏的成型处方。结果优选出的最佳成型处方为:聚乙二醇单硬脂酸酯3.00 g... 目的优化壮方消积夜啼乳膏的成型工艺。方法以外观性状、pH值、涂布性、延展性、离心试验、耐热耐寒试验为评价指标,通过单因素实验联合Box-Behnken响应面法优化乳膏的成型处方。结果优选出的最佳成型处方为:聚乙二醇单硬脂酸酯3.00 g、药液12.00 g、液体石蜡3.00 g、胆固醇4.00 g、甘油5.00 g、三乙醇胺3.00 g、纯水16.00 g、十二烷基硫酸钠1.00 g、白蜂蜡3.00 g、鲸蜡硬脂醇3.00g、羊毛脂2.00g、乙二醇苯醚0.20g。结论根据最佳成型处方所制备得到乳膏质量优良,性状稳定,具备临床应用前景与价值。 展开更多
关键词 夜啼 乳膏 单因素实验 Box-Behnken响应面法
暂未订购
循经抚触结合白噪声疗法对新生儿睡眠质量的影响
11
作者 凌美 《世界睡眠医学杂志》 2025年第7期1502-1505,共4页
目的:探究循经抚触结合白噪声疗法对新生儿睡眠质量的影响。方法:选取2024年3月至2025年3月江苏省东南大学附属中大医院接生的足月健康新生儿130例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组65例。对照组行常规护理与... 目的:探究循经抚触结合白噪声疗法对新生儿睡眠质量的影响。方法:选取2024年3月至2025年3月江苏省东南大学附属中大医院接生的足月健康新生儿130例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组65例。对照组行常规护理与白噪声疗法,观察组在对照组基础上行循经抚触护理。比较2组新生儿睡眠优良率,护理前后睡眠参数(睡眠时间、觉醒次数)、睡眠啼哭情况(啼哭次数、最大啼哭持续时间)、睡眠质量评分(PSQI)。结果:观察组睡眠优良率92.31%显著高于对照组80.00%(P<0.05);护理后,2组睡眠时间显著升高,觉醒次数显著下降,且观察组睡眠时间显著高于对照组,觉醒次数显著低于对照组(P<0.05);护理后,2组啼哭次数、最大啼哭持续时间显著下降(P<0.05),且观察组显著低于对照组(P<0.05);护理后,2组PSQI评分显著下降,且观察组显著低于对照组(P<0.05)。结论:循经抚触护理结合白噪声疗法可有效改善新生儿睡眠质量,提高睡眠效率,减少啼哭次数与持续时间,值得临床参考。 展开更多
关键词 新生儿 睡眠质量 循经抚触 白噪声疗法 睡眠优良率 睡眠啼哭 匹兹堡睡眠指数评分 产科护理
暂未订购
黄铁矿载金的原因和特征 被引量：78
12
作者 高振敏 杨竹森 +3 位作者 李红阳 罗泰义 姚林波 饶文波 《高校地质学报》 CAS CSCD 2000年第2期156-162,共7页
对 10 2个金矿床载金矿物的统计表明 ,黄铁矿是最普遍最重要的载金矿物。造成黄铁矿成为主要载金矿物的原因 ,有三个矿物学方面的因素 ,即结构因素、成核因素和电化学因素。结构因素表现在黄铁矿晶体结构中存在对硫 [S2 ]2 - ,对硫形成... 对 10 2个金矿床载金矿物的统计表明 ,黄铁矿是最普遍最重要的载金矿物。造成黄铁矿成为主要载金矿物的原因 ,有三个矿物学方面的因素 ,即结构因素、成核因素和电化学因素。结构因素表现在黄铁矿晶体结构中存在对硫 [S2 ]2 - ,对硫形成过程中对金离子具还原效应。成核因素表现在自然金成核常选择原子排布与之最接近的黄铁矿表面为衬底 ,以降低成核能。电化学因素表现在黄铁矿的热电性导致金离子在其表面发生电化学反应而沉淀结晶。对黄铁矿载金能力的分析表明 ,细粒、它形、裂隙发育程度高、As和Sb含量高以及P型的黄铁矿载金能力高 ,自形黄铁矿中的 { 2 10 }、S面 { 10 0 }及其聚形晶的载金能力高。 展开更多
关键词 黄铁矿 载金矿物 载金原因 晶体生长
在线阅读 下载PDF
苏云金芽孢杆菌无晶体突变株的逐级升温筛选及其转化性能 被引量：24
13
作者 李林 杨超 +2 位作者 刘子铎 李阜棣 喻子牛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期85-90,共6页
逐级从４２ ℃到４４ ℃和４６ ℃升温培养、并用０－０５ ％ ＳＤＳ 处理苏云金芽孢杆菌ＹＢＴ１４６３ ，获得了一系列内生质粒被部分或完全消除的无晶体（Ｃｒｙ －） 突变株，对４ 种Ｃｒｙ － 突变株的转化性能及导入的外源质粒... 逐级从４２ ℃到４４ ℃和４６ ℃升温培养、并用０－０５ ％ ＳＤＳ 处理苏云金芽孢杆菌ＹＢＴ１４６３ ，获得了一系列内生质粒被部分或完全消除的无晶体（Ｃｒｙ －） 突变株，对４ 种Ｃｒｙ － 突变株的转化性能及导入的外源质粒的稳定性进行了研究。用限量培养基和４２ ℃培养筛选到Ｃｒｙ － 突变株后，升温至４４ ℃，从Ｃｒｙ － 突变株得到内生质粒被进一步消除的突变株；然后升温至４６ ℃来培养其中突变株ＢＭＢ１７０ ，并用０－０５ ％ 的ＳＤＳ进行处理，最终筛选到１ 株无质粒突变株ＢＭＢ１７１ 。用ｐＨＴ３１０１ 、ｐＢＭＢ１７３６ 、ｐＢＴＬ１ 和ｐＨＶ１２４９ 等４ 种外源质粒进行的转化及稳定性研究表明，转化频率的大小及导入质粒的稳定性与用作受体菌的Ｃｒｙ － 突变株携有的内生质粒数之间呈现一定的相关性，Ｃｒｙ－ 突变株的转化频率显著高于出发菌株，其中ＢＭＢ１７１ 的转化频率最高达１０７ 转化子／μｇ ＤＮＡ，且所导入的外源质粒的稳定性也高于其它Ｃｒｙ － 突变株及出发菌株ＹＢＴ１４６３ 。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 无晶体突变株 转化性能 受体菌
在线阅读 下载PDF
我国不同森林立地带Bt分离株杀虫晶体蛋白及基因分析 被引量：10
14
作者 李长友 袁强 +2 位作者 张永安 戴莲韵 黄大昉 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第3期102-105,共4页
利用苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系和SDS PAGE方法分析了来自我国不同森林立地带土壤中的 72株苏云金芽孢杆菌的cry1、cry2、cry3、cry4、cry5、cry8、cry9、cry10、cry11、cry1I等 10类基因类型和表达蛋白 ,并进行了杀虫活... 利用苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系和SDS PAGE方法分析了来自我国不同森林立地带土壤中的 72株苏云金芽孢杆菌的cry1、cry2、cry3、cry4、cry5、cry8、cry9、cry10、cry11、cry1I等 10类基因类型和表达蛋白 ,并进行了杀虫活性的生物测定。研究表明 :同时含有cry1,cry2 ,cry1I 3类基因的有 2 1株菌 ,6株菌含有cry1,cry2类基因 ,4株菌含有cry1和cry1I类基因 ,只含有cry1基因的有 1株 ,cry2类基因的 4株 ,36株菌不含所鉴定的 10类cry基因。同时证明 ,绝大多数含有cry1基因的菌株表达了 130kDa蛋白 ,含有cry2基因的菌株表达了 6 0kDa蛋白。生物活性测定表明 ,共同含有cry1Aa、cry1Ac和cry2基因的菌株对棉铃虫幼虫具有较强的杀虫活性 ,只含有单一基因和不含上述基因的菌株杀虫活性较弱。 展开更多
关键词 森林立地带 Bt分离株 基因分析 苏云金芽孢杆菌 杀虫晶体蛋白 CRY基因 PCR-RFLP 生物测定 中国
在线阅读 下载PDF
苏云金芽孢杆菌沉默基因cry2Ab3在大肠杆菌中表达及杀虫活性研究 被引量：10
15
作者 陈中义 李长友 +2 位作者 刘加宝 张杰 黄大昉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期561-566,共6页
对苏云金芽孢杆菌C0 0 2菌株cry2Ab基因阳性克隆pHT3 1 5 2Ab进行亚克隆和序列测定 ,在CenBank注册后经国际Bt杀虫蛋白基因委员会正式命名为cry2Ab3。序列分析表明该基因含有芽孢杆菌特异的RBS序列 ,但没有功能性启动子 ,为沉默基因。... 对苏云金芽孢杆菌C0 0 2菌株cry2Ab基因阳性克隆pHT3 1 5 2Ab进行亚克隆和序列测定 ,在CenBank注册后经国际Bt杀虫蛋白基因委员会正式命名为cry2Ab3。序列分析表明该基因含有芽孢杆菌特异的RBS序列 ,但没有功能性启动子 ,为沉默基因。根据大肠杆菌T7表达载体pET 2 1b克隆位点和cry2Ab3开放阅读框架 (ORF)两端序列 ,设计合成一对特异引物L2ab5和L2ab3 ,高保真PCR扩增获得cry2Ab3完整ORF ,经酶切、连接构建了重组表达质粒pET 2Ab3。表达质粒导入大肠杆菌BL2 1 (DE3 ) ,IPTG诱导后 ,SDS PAGE电泳证实了cry2Ab3的表达。生物测定显示诱导培养物对棉铃虫初孵幼虫和小菜蛾二龄幼虫具有杀虫活性 ,能明显抑制二化螟二龄幼虫生长 ,但对甜菜夜蛾和玉米螟没有明显活性。进一步提取Cry2Ab3蛋白 ,生测结果表明其对棉铃虫LC50 为 3 2 5 5 μg g。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 沉默基因 Cry2Ab3 大肠杆菌 表达 杀虫活性
在线阅读 下载PDF
31株苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因型鉴定及表达产物研究 被引量：14
16
作者 张杰 宋福平 +2 位作者 左雅慧 戴莲韵 黄大昉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期372-378,共7页
利用已建立的苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系 ,鉴定了 31株Bt菌株的cry基因类型 ,并进行了SDS PAGE分析和杀虫生物活性测定。研究表明 :2 5株含cry1基因 ,表达蛋白 1 30～ 1 50kD ;其中 1 6株含有对鞘翅目和鳞翅目害虫皆有活... 利用已建立的苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系 ,鉴定了 31株Bt菌株的cry基因类型 ,并进行了SDS PAGE分析和杀虫生物活性测定。研究表明 :2 5株含cry1基因 ,表达蛋白 1 30～ 1 50kD ;其中 1 6株含有对鞘翅目和鳞翅目害虫皆有活性的cry1I基因 ,其表达蛋白为 81kD ;1 5株同时含有cry1和cry2基因 ( 1 3株表达蛋白约为 60kD) ;1 0株含有未知待定基因 ;6株不含所鉴定的cry基因 (其中 2株有表达产物 )。室内生物测定表明 :cry1、cry2基因表达的菌株对鳞翅目害虫具有高杀虫活性 ,7株对舞毒蛾和膜翅目———杨叶蜂幼虫具有较高杀虫活性 ;含有cry1Aa、cry1Ac、cry2或cry1Ab、cry1Ac、cry2基因组合的菌株对棉铃虫幼虫均显示杀虫活性 ,其中 6、1 2、30号菌株毒力最强。不含上述cry基因的菌株均无杀虫活性。以上结果证明 ,通过cry基因类型鉴定和表达产物的SDS PAGE分析可以预测菌株的杀虫活性。 展开更多
关键词 苏云金孢杆菌 CRY基因 基因型鉴定 SDS-PAGE
在线阅读 下载PDF
我国不同森林立地带土壤中苏云金芽孢杆菌cry基因资源研究 被引量：6
17
作者 张永安 宋福平 +2 位作者 戴莲韵 张杰 李长友 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2003年第1期19-25,共7页
利用PCR RFLP鉴定体系和SDS PAGE表达蛋白的分析方法,分析了来自我国不同森林立地带(寒温带、中温带、暖温带、北亚热带、中亚热带、南亚热带、高原亚热带、热带)自然保护区森林土壤中分离的72株苏云金芽孢杆菌的cry1、cry2、cry3、cry4... 利用PCR RFLP鉴定体系和SDS PAGE表达蛋白的分析方法,分析了来自我国不同森林立地带(寒温带、中温带、暖温带、北亚热带、中亚热带、南亚热带、高原亚热带、热带)自然保护区森林土壤中分离的72株苏云金芽孢杆菌的cry1、cry2、cry3、cry4、cry5、cry8、cry9、cry10、cry11、cry1I杀虫晶体蛋白基因类型,表达蛋白和杀虫活性的生物测定。研究表明:同时含有cry1、cry2、cry1I3类基因的有21株菌,6株菌含有cry1、cry2类基因,4株菌含有cry1和cry1I基因,只含有cry1基因的有1株,cry2基因的4株,36株菌不含所鉴定的10类基因。同时证明:绝大多数含有cry1基因的菌株表达了130kD蛋白,含有cry2基因的菌株表达了60kD的蛋白。对不同农、林害虫棉铃虫、杨扇舟蛾、舞毒蛾、马尾松毛虫、黄粉甲、榆兰叶甲、落叶松叶蜂等幼虫的杀虫活性进行了生物测定。进一步证明了苏云金芽孢杆菌cry基因,表达蛋白及杀虫活性三者的相关性。为生产和科研提供了生物治虫、抗虫育种新的苏云金芽孢杆菌cry基因资源。 展开更多
关键词 森林立地带 土壤 苏云金芽孢杆菌 杀虫晶体蛋白 CRY 基因 杀虫剂 杀虫活性
在线阅读 下载PDF
PCR-RFLP筛选DNA文库克隆Bt cry基因的研究 被引量：8
18
作者 陈中义 吴限 +3 位作者 张杰 宋福平 管宇 黄大昉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期398-402,共5页
Bt菌株C0 0 2对水稻二化螟、甜菜夜蛾具有高毒力 ,PCR RFLP鉴定含有cry1Aa、cry2Ab、cry1Ca和未知杀虫蛋白基因cryX等 ,其中cry1Ca位于染色体DNA 6～ 9kb的EcoRI片段。染色体和质粒DNA分别经EcoRI完全酶切和Sau3AI部分酶切、电泳回收 6... Bt菌株C0 0 2对水稻二化螟、甜菜夜蛾具有高毒力 ,PCR RFLP鉴定含有cry1Aa、cry2Ab、cry1Ca和未知杀虫蛋白基因cryX等 ,其中cry1Ca位于染色体DNA 6～ 9kb的EcoRI片段。染色体和质粒DNA分别经EcoRI完全酶切和Sau3AI部分酶切、电泳回收 6～ 9kb片段。E .coli Bt穿梭载体pHT315分别与目的DNA连接、转化大肠杆菌感受态细胞后获得了相应的DNA文库。约 5 0个转化子合为一个转化子池 ,采用PCR RFLP方法快速检测 ,分别从约 2 0 0 0质粒DNA文库转化子和 4 0 0个染色体文库转化子中筛选获得了cry1Aa、cry2Ab、cry1Ca和未知基因cryX的阳性克隆 ,相应命名为pHT 1Aa、pHT 1Ca、pHT 2Ab和pHT X。限制酶切分析表明 ,含有cry1Aa、cry1Ca和cry2Ab基因的克隆片段均含有相应基因的保守物理图谱。进一步将这些质粒分别导入Bt无晶体突变株CryB-,SDS PAGE分析表明 ,只有cry1Ca表达了约 130ku杀虫晶体蛋白。初步杀虫生测结果显示 ,cry1Ca对甜菜夜蛾具有高毒力 ,7d校正死亡率为 10 0 %。 展开更多
关键词 甜菜夜蛾 苏云金芽孢杆菌 微生物杀虫剂 DNA文库 CRY基因 基因克隆 PCR-RFLP 农业害虫 杀虫活性 基因分离
在线阅读 下载PDF
苏云金芽孢杆菌cry基因芯片检测方法的研究 被引量：10
19
作者 刘旭光 宋福平 +3 位作者 文思远 王升启 黄大昉 张杰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期987-992,共6页
建立了一种不经PCR扩增而直接应用寡核苷酸芯片从苏云金芽孢杆菌总DNA中检测cry基因的方法。对探针长度、浓度、总DNA含量、标记方法以及灵敏度等条件进行了研究。结果表明,用高浓度Klenow酶随机标记高浓度的总DNA与寡核苷酸探针(40～50... 建立了一种不经PCR扩增而直接应用寡核苷酸芯片从苏云金芽孢杆菌总DNA中检测cry基因的方法。对探针长度、浓度、总DNA含量、标记方法以及灵敏度等条件进行了研究。结果表明,用高浓度Klenow酶随机标记高浓度的总DNA与寡核苷酸探针(40～50mer、40μmol·L-1)杂交可用于检测Bt菌株中含有的cry基因;不同长度探针之间对杂交信号的影响存在显著性差异(P<0.01),而不同浓度的探针之间没有显著性差异。此方法的其它条件为杂交温度42℃、时间3h;检测的样品总DNA的灵敏度约为2.5μg;标记产物杂交用量(0.625～20μg)的对数值与信号值的对数值之间存在明显的线性关系(r2=0.985～0.989)。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 CRY基因 基因芯片 检测方法 杀虫晶体蛋白 生物防治
在线阅读 下载PDF
中国苏云金芽孢杆菌的分布与cry基因的多样性 被引量：11
20
作者 王津红 吴卫辉 +1 位作者 陈月华 任改新 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期50-55,共6页
采集全中国 2 7个省、自治区及 4个直辖市昆虫孳生地粉尘、土壤等样品 1 0 80份 ,在其中的40 6份中分离到苏云金芽孢杆菌 965株。镜检可观察到大菱形、小菱形、方形、长方形、圆形、椭圆形、镶嵌形和不规则形等 8种主要形态的伴孢晶体 ... 采集全中国 2 7个省、自治区及 4个直辖市昆虫孳生地粉尘、土壤等样品 1 0 80份 ,在其中的40 6份中分离到苏云金芽孢杆菌 965株。镜检可观察到大菱形、小菱形、方形、长方形、圆形、椭圆形、镶嵌形和不规则形等 8种主要形态的伴孢晶体 ;采用cryⅠ、cryⅡ、cryⅢ、cryⅣ和cryⅤ基因的通用引物对 2 2 1株Bt分离株进行的PCR检测结果表明 :各类基因的含量依次为cryⅠ >cryⅡ >cryⅤ>cryⅢ基因 ,分别占被检菌株的 75 6%、 67 9%、 58 4%和 1 4 5% ,没有检测到cryⅣ基因 ,共得到1 0种基因组合类型。对其中含有cryⅠ基因的菌株分别以cryIAc、cryIC和cryIE基因的特异性引物进行PCR检测 ,得到 2 0株同时含有cryIAc、cryIC、cryⅡ和cryⅤ优良基因组合的Bt分离株 ,其中菌株Bt 1 5A3对棉铃虫、甜菜夜蛾及小菜蛾均表现出高毒力 ,具有生产开发潜力。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 伴孢晶体形态 PCR CRY基因 多样性
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 28 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部