期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到3篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
人copineⅤ蛋白多克隆抗体的制备 被引量：1
1
作者 丁学锋 靳雁斌 +5 位作者 王晓文 吴燕 刘淑红 宋小国 范文红 范明 《生物技术通讯》 CAS 2008年第1期69-72,共4页
目的:制备兔抗人copineⅤ多克隆抗体。方法:将copineⅤN端423 bp(626～1 048 bp)构建到原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;以镍柱纯化后的蛋白为抗原,与等体积佐剂混合后免疫家兔3次;用ELISA和West... 目的:制备兔抗人copineⅤ多克隆抗体。方法:将copineⅤN端423 bp(626～1 048 bp)构建到原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;以镍柱纯化后的蛋白为抗原,与等体积佐剂混合后免疫家兔3次;用ELISA和Western印迹检测抗血清,用(NH4)2SO4沉淀法初步纯化抗体。结果:表达并纯化了copineⅤN端蛋白,ELISA检测表明抗血清具有高亲和性,Western印迹检测表明抗体能特异性识别内源性和过表达的copineⅤ。结论:制备了具有高亲和性和特异性的抗人copineⅤ多克隆抗体。 展开更多
关键词 copinev 原核表达 多克隆抗体
在线阅读 下载PDF
外源表达的人copine Ⅴ诱导细胞死亡的研究 被引量：6
2
作者 王晓文 靳雁斌 +5 位作者 景孝堂 吴燕 马鑫 刘淑红 范文红 范明 《生物技术通讯》 CAS 2006年第2期146-148,共3页
目的:copines蛋白家族是新近发现的一类分布广泛、进化保守的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,copineⅤ是其成员之一。为研究copineⅤ基因的功能,构建了人copineⅤ基因的真核表达质粒并转染HEK293细胞,以进一步研究其功能。方法:构建人copineⅤ... 目的:copines蛋白家族是新近发现的一类分布广泛、进化保守的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,copineⅤ是其成员之一。为研究copineⅤ基因的功能,构建了人copineⅤ基因的真核表达质粒并转染HEK293细胞,以进一步研究其功能。方法:构建人copineⅤ编码区序列的真核表达质粒pCDNA4/copineⅤ,脂质体法转染HEK293细胞。通过RT-PCR、克隆形成实验和Hochesst33342染色等方法观察copineⅤ基因对HEK293细胞生长的影响。结果:外源表达的人copineⅤ可以诱导HEK293细胞死亡,无法筛选到稳定克隆。结论:人copineⅤ可以诱导HEK293细胞死亡,为进一步研究copineⅤ基因的生物功能提供了线索。 展开更多
关键词 copine V 基因转染 细胞死亡
在线阅读 下载PDF
copine Ⅴ蛋白的亚细胞定位 被引量：6
3
作者 王晓文 靳雁斌 +5 位作者 吴燕 吴彦瑞 马鑫 刘淑红 范文红 范明 《生物技术通讯》 CAS 2006年第2期149-151,共3页
目的:确定copineⅤ蛋白的亚细胞定位,初步研究该蛋白的生物学功能。方法:将copineⅤ编码区基因分别构建真核表达载体pEGFP-copineⅤ(或pRED-copineⅤ),转染HEK293、HeLa细胞,在激光共聚焦荧光显微镜下与转染空载体pEGFP-N1(或pRED-N1)... 目的:确定copineⅤ蛋白的亚细胞定位,初步研究该蛋白的生物学功能。方法:将copineⅤ编码区基因分别构建真核表达载体pEGFP-copineⅤ(或pRED-copineⅤ),转染HEK293、HeLa细胞,在激光共聚焦荧光显微镜下与转染空载体pEGFP-N1(或pRED-N1)的细胞比较观察。结果:经限制性内切酶分析鉴定,构建的重组表达载体正确。通过激光共聚焦荧光显微镜观察,转染了重组载体pEGFP-copineⅤ的细胞荧光信号集中分布于胞膜和内膜系统;进一步研究表明copineⅤ定位于内质网而非线粒体,而空载体则在整个细胞中均匀分布。结论:copineⅤ蛋白定位于细胞膜和内质网上,而不定位于线粒体。 展开更多
关键词 copine V蛋白 亚细胞定位 内质网 线粒体 细胞膜
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部