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细胞外钙离子内流上调原发性开角型青光眼患者小梁网细胞Copine1表达的研究 被引量：1
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作者 唐浩英 王璟 卢敏 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第8期725-728,共4页
目的探讨原发性开角型青光眼患者(primary open-angle glaucoma,POAG)小梁网细胞外钙离子内流对膜蛋白copine1表达的影响。方法原代培养POAG患者小梁网细胞,应用荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度,所用钙离子荧光探针为Fluo 3... 目的探讨原发性开角型青光眼患者(primary open-angle glaucoma,POAG)小梁网细胞外钙离子内流对膜蛋白copine1表达的影响。方法原代培养POAG患者小梁网细胞,应用荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度,所用钙离子荧光探针为Fluo 3-AM;;应用钙离子运载剂A23187增加细胞内钙离子浓度;;应用Real-time PCR检测小梁网细胞内钙离子浓度增加前后copine1在转录水平的表达。结果经免疫组织化学鉴定培养的细胞为小梁网细胞。荧光显微镜下观察与流式细胞仪定量结果均显示,应用钙离子运载剂A23187增加了POAG患者小梁网细胞内的钙离子浓度。Real-time PCR检测证实A23187的应用使copine1 mRNA在小梁网细胞中表达增加了(1.8±0.3)倍。结论 POAG患者小梁网细胞内钙离子浓度增高可引起copine1在转录水平表达的上调,copine1在小梁网细胞中的功能研究将会增加对POAG病理学机制的理解,有助于新药物靶点的开发。 展开更多
关键词 原发性开角型青光眼 小梁网细胞 钙离子 copine1
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LPS致PMVECs损伤时CPNE1/CAV-1相互作用机制研究
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作者 吴翔晖 李琪琪 +5 位作者 李帅 陆宗庆 方普 庞晴晴 汪博 尤青海 《临床肺科杂志》 2025年第5期692-698,共7页
目的探讨脂多糖(LPS)刺激肺微血管内皮细胞(PMVECs)时Copine1(CPNE1)与小窝蛋白-1(CAV-1)的相互作用及SHH信号通路对其调控作用。方法体外培养PMVECs,Western Blot(WB)检测LPS刺激时CPNE1、CAV-1和GLI1表达变化,随机分为LPS时效组(LPS 1... 目的探讨脂多糖(LPS)刺激肺微血管内皮细胞(PMVECs)时Copine1(CPNE1)与小窝蛋白-1(CAV-1)的相互作用及SHH信号通路对其调控作用。方法体外培养PMVECs,Western Blot(WB)检测LPS刺激时CPNE1、CAV-1和GLI1表达变化,随机分为LPS时效组(LPS 10mg/L,0、3、6、12、18、24h)和量效组(0、1、5、10、20、40mg/L);siRNA沉默CPNE1,WB和免疫荧光检测沉默CPNE1后PMVECs表达CAV-1变化,随机分为Control组、LPS组、siCPNE1组、siCPNE1+LPS组;10mg/L LPS刺激PMVEC时给予SHH信号通路抑制剂(Vismodegib)干扰,随机分为Control组、LPS组、Vismodegib组、Vismodegib+LPS组;siRNA沉默CPNE1后给予SHH信号通路激动剂(SAG)干扰,分为Control组、si-CPNE1组、SAG组、si-CPNE1+SAG组。结果(1)LPS刺激PMVECs12h后,与0h组比较,CPNE1、CAV-1和GLI1蛋白的表达均显著增加(P<0.05)。(2)共聚焦免疫荧光技术显示LPS刺激PMVECs时CAV-1和CPNE1的荧光信号增强;与Control组比较,si-CPNE1组的荧光信号降低;与LPS组比较,si-CPNE1+LPS组的荧光信号降低。WB检测提示与LPS组比较,siCPNE1+LPS组CAV-1蛋白表达显著下降(P<0.05)。(3)Vismodegib显著下调LPS诱导增加的GLI1、CPNE1和CAV-1蛋白表达水平(P<0.05);SAG显著上调CPNE1、CAV-1和GLI1蛋白表达水平(P<0.05);沉默CPNE1后给予SAG干扰,CAV-1和CPNE1蛋白表达水平并未出现显著上升(P>0.05)。结论LPS刺激时CPNE1与CAV-1在PMVECs中协同响应,且均受SHH信号通路调控。 展开更多
关键词 脂多糖 肺微血管内皮细胞 copine1 小窝蛋白-1 Sonic Hedgehog信号通路
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miR-195-5p、CPNE1在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及与患者临床病理特征、预后的关系研究
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作者 崔媛 王文文 田秀兰 《浙江医学》 2025年第6期584-589,共6页
目的观测微小RNA-195-5p(miR-195-5p)、钙依赖膜结合蛋白Copine蛋白1(CPNE1)在宫颈鳞状细胞癌(CSCC)组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特征、预后的关系。方法回顾性选取2015年6月至2020年6月在首都医科大学附属北京同仁医院行手... 目的观测微小RNA-195-5p(miR-195-5p)、钙依赖膜结合蛋白Copine蛋白1(CPNE1)在宫颈鳞状细胞癌(CSCC)组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特征、预后的关系。方法回顾性选取2015年6月至2020年6月在首都医科大学附属北京同仁医院行手术治疗的CSCC患者102例,留取术中切除的CSCC组织和配对的正常癌旁组织为研究标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测CSCC组织和癌旁组织miR-195-5p、CPNE1 mRNA表达水平,分析其与患者临床病理特征的关系。随访3年,以CSCC组织miR-195-5p、CPNE1 mRNA表达水平平均值为截点将患者分为高表达(≥平均值)患者和低表达(<平均值)患者,采用Kaplan-Meier生存曲线分析CSCC组织miR-195-5p、CPNE1 mRNA表达水平与患者预后的关系;采用Cox回归分析CSCC患者预后的影响因素。结果CSCC组织miR-195-5p表达水平低于癌旁组织(P<0.05),CPNE1 mRNA表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移患者CSCC组织miR-195-5p表达水平分别高于Ⅲ~Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移患者,CPNE1 mRNA表达水平分别低于Ⅲ~Ⅳ期患者低分化、有淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。随访期间失访2例,死亡34例,miR-195-5高表达患者的3年生存率为76.92%(40/52),高于miR-195-5低表达患者的54.17%(26/48),差异有统计学意义(P<0.05);CPNE1 mRNA高表达患者的3年生存率为52.83%(28/53),低于CPNE1 mRNA高表达患者的80.85%(38/47),差异有统计学意义(P<0.05)。低分化、淋巴结转移和CPNE1高表达均是CSCC患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05),miR-195-5p高表达是预后的保护因素(P<0.05)。结论miR-195-5p在CSCC组织中呈低表达,CPNE则呈高表达,与患者肿瘤低分化、淋巴结转移及不良预后的发生有关。 展开更多
关键词 宫颈鳞状细胞癌 微小RNA-195-5p 钙依赖膜结合蛋白Copine蛋白1 病理特征 预后
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