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贝纳柯克斯体重组抗原Com1和急性Q热抗原A(adaA)的纯化和鉴定 被引量:3
1
作者 刘静娴 姬艺洪 +1 位作者 史智扬 焦永军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期726-730,共5页
目的原核表达并纯化2种贝纳柯克斯体(C.burnetii)抗原主要外膜蛋白质Com1和急性Q热抗原A(adaA),并对重组Com1和adaA进行质谱鉴定以及抗原性鉴定。方法全基因合成编码Com1和adaA的基因序列,并将其分别构建到原核表达载体pET-20b(+),将构... 目的原核表达并纯化2种贝纳柯克斯体(C.burnetii)抗原主要外膜蛋白质Com1和急性Q热抗原A(adaA),并对重组Com1和adaA进行质谱鉴定以及抗原性鉴定。方法全基因合成编码Com1和adaA的基因序列,并将其分别构建到原核表达载体pET-20b(+),将构建好的载体分别转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组Com1和adaA。通过镍亲和柱层析纯化重组Com1和adaA,切取纯化的蛋白质条带进行质谱鉴定。将纯化的重组Com1和adaA与Q热阳性牛血清进行Western blot分析,检测其免疫反应特性。结果构建了原核表达载体pET-20b(+)-Com1以及pET-20b(+)-adaA,重组抗原Com1和adaA均以可溶形式得到了高效地表达和纯化,SDS-PAGE结果显示其相对分子质量(Mr)分别为27 000与25 000,质谱鉴定结果确证其为C.burnetii的抗原蛋白Com1和adaA。重组Com1和adaA与Q热阳性牛血清均有阳性反应条带,条带Mr大小与SDS-PAGE结果一致。结论成功高效表达了可溶重组Com1和adaA并证实其免疫反应特异性。 展开更多
关键词 贝纳柯克斯体(C.burnetii) 重组抗原com1和adaA 质谱鉴定 抗原性鉴定
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贝氏柯克斯体中国分离株com1基因的序列分析 被引量:3
2
作者 余全 张国全 +2 位作者 FUKUSHI Hideto YAMAGUCHI Tsuyoshi Hirai Katsuya 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期404-406,共3页
目的 通过com1基因序列比较 ,了解贝氏柯克斯体中国分离株的一些遗传特征。方法 对贝氏柯克斯体中国分离株的com1基因进行扩增、测序和分析 ,将我们的结果与国外研究结果进行比较。结果 在 7个中国分离株中 ,可检测到 3种不同的com1... 目的 通过com1基因序列比较 ,了解贝氏柯克斯体中国分离株的一些遗传特征。方法 对贝氏柯克斯体中国分离株的com1基因进行扩增、测序和分析 ,将我们的结果与国外研究结果进行比较。结果 在 7个中国分离株中 ,可检测到 3种不同的com1基因序列。除质粒型相同的分离株表现出类似的com1基因序列外 ,质粒型为QpRS的中国分离株可被单独划分成一个新的基因组。结论 本研究结果显示 ,根据com1基因序列进行的贝氏柯克斯体株基因分组与分离株所含质粒型有很大的相关性 ,而与以前报道的疾病形式和分离株的地理分布无关。 展开更多
关键词 贝氏柯克斯体 com1基因 DNA序列 序列分析 Q热
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Characterizations of Chinese isolates of Coxiella burnetii in the com1 gene sequence
3
作者 余全 张国全 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2002年第2期116-119,共4页
Objective: To know some genetical characterizations of Coxiella burnetii Chinese isolates by comparing the coml gene sequence. Methods: com1 gene sequences of Chinese isolates were amplified, se-quenced, and analyzed ... Objective: To know some genetical characterizations of Coxiella burnetii Chinese isolates by comparing the coml gene sequence. Methods: com1 gene sequences of Chinese isolates were amplified, se-quenced, and analyzed by comparing our result and the previous published data. Results: Three different com1 sequences were identified in 7 Chinese isolates. Sequence comparison indicated that the isolates harboring the QpRS plasmid could be defined as a new group and, in addition, the isolates carrying the same plas-mid type showed similar com1 gene sequence. Conclusion: Study suggests that the classification of the group based on the coml gene sequence is highly associated with the plasmid type of the isolates and, however, little related to disease forms and geographical origins of the isolates. 展开更多
关键词 Coxiella burnetii com1 gene sequence analysis
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云南省三县市人群和小型兽类贝氏柯克斯体感染调查 被引量:1
4
作者 刘平果 李进春 +4 位作者 尹家祥 卢江丽 韦蓉 郭双玲 罗依 《中国热带医学》 北大核心 2025年第8期971-976,共6页
目的了解云南省梁河县、芒市和弥勒市三县市人群和小型兽类贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii,Cb)感染情况,为Q热(query fever)防治提供依据。方法2019年7—8月,在云南省梁河县、芒市和弥勒市采集人群血清和捕获小型兽类,采用间接酶联免... 目的了解云南省梁河县、芒市和弥勒市三县市人群和小型兽类贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii,Cb)感染情况,为Q热(query fever)防治提供依据。方法2019年7—8月,在云南省梁河县、芒市和弥勒市采集人群血清和捕获小型兽类,采用间接酶联免疫吸附实验检测人群血清Cb抗体;2023年1月,采用磁珠法提取小型兽类脾脏组织DNA,用巢氏PCR方法扩增Cb Com1基因目的片段,对阳性产物进行测序,所得序列作同源性比对和构建系统发育树。在R软件下应用χ^(2)检验和Fisher确切概率法分析人群感染Cb及小型兽类携带Cb的影响因素。结果共采集人群血清368份,检出Cb抗体阳性32份,阳性率8.70%,其中梁河县Cb抗体阳性率10.00%,芒市8.46%,弥勒市6.82%。不同地区、年龄、性别、民族、职业和学历对人群感染Cb差异均无统计学意义(P>0.05);捕获490只小型兽类,隶属于3目5科11属16种,以黄胸鼠和臭鼩鼱为优势种。巢氏PCR方法扩增Cb Com1基因,阳性5只,Cb携带率1.02%,其中梁河县1.29%,芒市1.05%,弥勒市小型兽类未检测出Cb。不同地区、生境、种类、性别对小型兽类携带Cb差异均无统计学意义(P>0.05)。遗传进化分析显示,5份样本基因序列居于同一分支,与GenBank中11株参考株的核苷酸相似性为88.7%~100.0%。结论梁河县、芒市和弥勒市人群中存在Cb既往感染,梁河县和芒市小型兽类Cb携带率较低,弥勒市小型兽类未检出Cb。梁河县和芒市为Cb自然疫源地,弥勒市人群感染Cb的途径有待进一步研究。 展开更多
关键词 贝氏柯克斯体 Q热 小型兽类 抗体阳性率 携带率 com1基因
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中哈边境阿拉山口口岸亚洲璃眼蜱首次检测到Q热立克次体核酸 被引量:1
5
作者 罗丹 尹小平 +4 位作者 王安东 田延河 梁臻 巴特 张江国 《疾病监测》 CAS 2016年第10期814-816,共3页
目的对新疆阿拉山口口岸地区蜱类进行Q热立克次体核酸检测。方法采集蜱样本并进行形态学和分子生物学鉴定。聚合酶链反应扩增Q热com1基因,通过Blast软件比对分析测序产物,利用Mega 6.0软件构建分子遗传进化树。结果共采集253只蜱,其中... 目的对新疆阿拉山口口岸地区蜱类进行Q热立克次体核酸检测。方法采集蜱样本并进行形态学和分子生物学鉴定。聚合酶链反应扩增Q热com1基因,通过Blast软件比对分析测序产物,利用Mega 6.0软件构建分子遗传进化树。结果共采集253只蜱,其中优势蜱种为亚洲璃眼蜱,蜱类的形态学鉴定与分子生物学鉴定结果一致。阿拉山口口岸地区蜱携带Q热立克次体核酸平均阳性率为16.21%(41/253),亚洲璃眼蜱阳性率为22.65%(41/181),血红扇头蜱、短垫血蜱和边缘革蜱均为阴性,亚洲璃眼蜱显著高于其他蜱种。序列分析显示与Coxiella burnetii Cb175_Guyana(HG825990,圭亚那)进化关系较近,核苷酸同源性为99%。结论阿拉山口口岸地区亚洲璃眼蜱在16S rRNA和COⅠ基因序列间存在多样性,并首次在中哈边境地区亚洲璃眼蜱中检测到Q热立克次体核酸。 展开更多
关键词 Q热立克次体 com1基因 亚洲璃眼蜱 中哈边境地区
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肿瘤相关应激分子p8 被引量:2
6
作者 张博 孙强 +1 位作者 杨晓 尉承泽 《生物技术通讯》 CAS 2009年第6期843-845,共3页
p8是在研究急性胰腺损伤的分子机制中首先鉴定得到的一个小分子核蛋白。胰腺、肝脏、肾脏等诸多脏器受到损伤刺激后,p8能够在短时间内迅速、高水平地上调,被认为是一个应激分子。进一步研究显示,p8在包括胰腺癌、乳腺癌、甲状腺癌及前... p8是在研究急性胰腺损伤的分子机制中首先鉴定得到的一个小分子核蛋白。胰腺、肝脏、肾脏等诸多脏器受到损伤刺激后,p8能够在短时间内迅速、高水平地上调,被认为是一个应激分子。进一步研究显示,p8在包括胰腺癌、乳腺癌、甲状腺癌及前列腺癌等多种肿瘤中存在差异表达,并通过影响细胞的生长、凋亡及转移等过程参与肿瘤的发生、发展。但关于p8在肿瘤中的作用,不同研究的结果并不一致。我们简要综述p8在肿瘤中的作用。 展开更多
关键词 p8/com1/Nupr1 应激蛋白 肿瘤
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利用VB实现串行通信 被引量:2
7
作者 刘建军 《福建电脑》 2004年第7期84-84,80,共2页
串口通信因其通信线路简单、使用灵活方便,在许多领域应用广泛。本文详细介绍了在Windows环境下利用VisualBasic6实现串口通信的方法,并给出一个实现两个串口COM1和COM2通信的测试程序。
关键词 VB 串行通信 串口com1 COM2 MSComm32.OCX控件
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山羊源贝氏柯克斯体抗体间接ELISA检测方法的建立与应用 被引量:1
8
作者 张锐铮 于皓同 +2 位作者 王凯茸 张琪 许信刚 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期21-26,共6页
为建立山羊源贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)抗体间接ELISA检测方法,对贝氏柯克斯体的com1基因进行克隆及原核表达,以com1纯化蛋白作为抗原,建立间接ELISA检测方法,并对临床收集的血清样本进行检测。结果显示,重组蛋白大小为27 ku,经W... 为建立山羊源贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)抗体间接ELISA检测方法,对贝氏柯克斯体的com1基因进行克隆及原核表达,以com1纯化蛋白作为抗原,建立间接ELISA检测方法,并对临床收集的血清样本进行检测。结果显示,重组蛋白大小为27 ku,经Western blot鉴定com1蛋白反应原性良好;ELISA检测方法抗原包被量为4μg/mL,血清的稀释倍数为1∶100,酶标二抗稀释倍数为1∶2500,阴阳临界值为0.278。用该方法对流产衣原体、山羊支原体、牛支原体阳性血清进行检测,均为阴性;当C.burnetii阳性血清稀释至2048倍时检测结果仍为阳性;批内、批间变异系数均小于10%。用该方法对陕西省部分羊场收集到的307份血清样本进行检测,样本阳性率为9.12%。成功建立了一种检测贝氏柯克斯体抗体的间接ELISA检测方法,这为C.burnetii引起的Q热的实验室诊断和流行病学调查提供了技术支持。 展开更多
关键词 贝氏柯克斯体 com1蛋白 酶联免疫吸附试验 抗体检测
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贝氏柯克斯体27kDa外膜蛋白基因的克隆与表达 被引量:2
9
作者 魏文进 崔红 +4 位作者 陈唯军 牛东升 张雪颖 陈梅玲 温博海 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期23-25,共3页
目的 克隆和表达贝氏柯克斯体 (Coxiellaburnetii) 2 7kDa外膜蛋白基因 (com1 )。方法 采用PCR方法 ,从质粒pGEM -T/com1扩增出Com1基因片段 ,经鉴定后 ,将其克隆于原核表达载体 pQE30 ,构建成重组质粒 pQE30 /com1 ,IPTG诱导表达。... 目的 克隆和表达贝氏柯克斯体 (Coxiellaburnetii) 2 7kDa外膜蛋白基因 (com1 )。方法 采用PCR方法 ,从质粒pGEM -T/com1扩增出Com1基因片段 ,经鉴定后 ,将其克隆于原核表达载体 pQE30 ,构建成重组质粒 pQE30 /com1 ,IPTG诱导表达。结果  (1 )获得长约 760bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知com1序列相同。 (2 )SDS -PAGE检测表达产物 ,在相对分子量 2 7kDa处有表达条带。经薄层扫描分析 ,目的蛋白条带占全菌体蛋白的 1 7 2 %。 (3)经分析 ,有较好的抗原性。 (4)表达菌体超声破碎后 ,目的蛋白主要存在于包涵体中。结论 贝氏柯克斯体com1基因在大肠杆菌中获得了高效表达 。 展开更多
关键词 贝氏柯克斯体 27kDa外膜蛋白基因 克隆 表达 测序
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滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物感染贝氏柯克斯体的调查 被引量:5
10
作者 洪汝丹 刘思彤 +4 位作者 贺琪楠 罗云燕 朱俊洁 艾志琼 尹家祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1031-1038,共8页
目的调查滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物贝氏柯克斯体感染情况。方法2015年12月至2016年10月,课题组以云南省玉龙县、剑川县和梁河县鼠疫疫源地为采样点,使用夹夜法在不同季节、不同海拔、不同生境捕获野外鼠形动物,收集到2524份肝脾样本... 目的调查滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物贝氏柯克斯体感染情况。方法2015年12月至2016年10月,课题组以云南省玉龙县、剑川县和梁河县鼠疫疫源地为采样点,使用夹夜法在不同季节、不同海拔、不同生境捕获野外鼠形动物,收集到2524份肝脾样本。采用巢氏PCR方法对Q热病原体贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii,Cb)Com 1基因的保守片段进行扩增。应用SPSS20.0软件,采用χ^(2)检验或Fisher确切概率法分析不同疫源地、海拔梯度、生境、季节、性别间Cb在野外鼠形动物中的流行分布情况。结果检测2524份样本,Cb阳性23份,阳性率为0.91%。检出Cb的鼠形动物包括齐氏姬鼠、中华姬鼠、黄胸鼠、社鼠、锡金小鼠、大绒鼠、臭鼩鼱和毛猬。不同生境、性别间野外鼠形动物Cb阳性率无差异(χ^(2)_(生境)=6.514,χ^(2)_(性别)=0.076,P>0.05);季节间Cb阳性率春季(2.44%)高于秋季(0.37%)(χ^(2)=11.550,P<0.008);剑川鼠疫疫源地Cb阳性率(1.46%)高于玉龙鼠疫疫源地(0.34%)(χ^(2)=6.121,P<0.017);剑川鼠疫疫源地海拔2450 m以上野外鼠形动物Cb阳性率(4.64%)高于2450m以下(0.13%)(χ^(2)=28.504,P<0.001)。同源性和系统发育分析显示滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb Com1序列和Genbank相关参考序列高度同源。结论滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率较低,但野外鼠形动物Cb感染广泛,Cb Com 1基因片段在野外鼠形动物中呈现出高度保守的流行与分布。 展开更多
关键词 贝氏柯克斯体 Q热 Com 1基因 野外鼠形动物 鼠疫疫源地
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外电波动引起COM-500B-1型宽带功率放大器保护的分析
11
作者 侯智烨 《无线互联科技》 2015年第8期87-88,共2页
文章简单介绍了TSW2500型发射机上所使用的COM500B-1型宽带放大器基本原理,以及在外电闪落的情况下,其自保故障现象及故障原理分析。
关键词 TSW2500型发射机 COM500B-1型宽带放大器
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野营互动
12
作者 楠溪 《CO.公司》 2004年第6期91-91,共1页
熊熊的篝火.清脆的歌声欢快的游戏……快乐的夏令营总能给孩子们留下许许多多美好的回忆.正是这样的回忆,使阿克曼产生了剖建Bunk1.com网站的构想.
关键词 Bunk1.com露营服务网站 创业生涯 野营活动 运营模式 电子邮件 商业计划书
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