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碳纳米管纤维的连续制备及其高性能化工艺
1
作者 黄文彬 闫永杰 倪庆清 《现代纺织技术》 北大核心 2025年第9期98-107,共10页
为了实现碳纳米管纤维(CNTF)的高性能连续化制备,通过浮动催化化学气相沉积法(FCCVD)双参数调控策略,对CNTF进行连续化制备,优化成纤稳定性;并在此基础上对CNTF进行高性能强化工艺处理,逐级提高其力/电性能。结果表明:在500℃出液口温度... 为了实现碳纳米管纤维(CNTF)的高性能连续化制备,通过浮动催化化学气相沉积法(FCCVD)双参数调控策略,对CNTF进行连续化制备,优化成纤稳定性;并在此基础上对CNTF进行高性能强化工艺处理,逐级提高其力/电性能。结果表明:在500℃出液口温度与15 m/min牵伸速率的条件下,CNTF可以实现200 min以上连续出丝,长度超过3000 m。在氯磺酸中浸渍60 s后,通过2.5 cN张力静置6 h及20次以上逐级递增压力辊压,CNTF的力学性能与导电性能得到显著提升,断裂强度达2.6 GPa,模量达41.8 GPa,电导率达3.83×10^(6)S/m。研究结果可为高性能CNTF的稳定制备与工程化应用提供理论与工艺参考。 展开更多
关键词 CNTF 化学气相沉积 氯磺酸 辊压压缩 力学性能 导电性
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NGF与CNTF促进周围神经轴浆运输功能恢复的比较研究 被引量：8
2
作者 李强 伍亚民 +5 位作者 刘媛 龙在云 李民 曾琳 杨恒文 李应玉 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期358-361,共4页
目的: 比较神经生长因子 (nervegrowthfator, NGF) 与睫状神经营养因子 (cili aryneurotrophicfactor, CNTF) 对周围神经轴浆运输功能恢复的促进作用。方法: 利用自行研制的梭形双通道桥接管桥接 32只SD大鼠坐骨神经长 10mm缺损。将动... 目的: 比较神经生长因子 (nervegrowthfator, NGF) 与睫状神经营养因子 (cili aryneurotrophicfactor, CNTF) 对周围神经轴浆运输功能恢复的促进作用。方法: 利用自行研制的梭形双通道桥接管桥接 32只SD大鼠坐骨神经长 10mm缺损。将动物随机分为 2组。A组: 医用几丁糖凝胶组; B组: 医用几丁糖凝胶+NGF和医用几丁糖凝胶 +CNTF。术后 12、16周对再生神经行辣根过氧化物酶和核黄逆行示踪, 并取再生神经行Holmes银染。结果: 术后 12、16周, Holmes银染观察到A组两支管内再生纤维无明显差异, B组CNTF侧再生纤维较NGF侧再生神经外膜薄, 排列整齐, 粗细均匀; 辣根过氧化物酶和核黄显示: 与NGF侧相比,CNTF侧再生神经示踪后, 脊髓内被标记的阳性神经元数目多, 分布稠密。结论: CNTF对周围神经再生纤维形态结构和轴浆运输功能的恢复均优于NGF。 展开更多
关键词 NGF与CNTF 周围神经 轴浆运输 辣根过氧化物酶 核黄
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睫状神经营养因子对应激大鼠行为和海马神经元的影响 被引量：21
3
作者 胡旺平 严进 +1 位作者 路长林 化长林 《中国行为医学科学》 CSCD 1998年第3期174-175,共2页
目的探讨睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对应激大鼠行为和海马神经元的影响。方法采用海马ＣＡ１区微注法，旷场试验法，Ｎｉｓｓｌ染色法和细胞计数观察应激大鼠的行为和海马神经元数量的变化及１００Ｕ、５００Ｕ、１０００Ｕ的ＣＮＴ... 目的探讨睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对应激大鼠行为和海马神经元的影响。方法采用海马ＣＡ１区微注法，旷场试验法，Ｎｉｓｓｌ染色法和细胞计数观察应激大鼠的行为和海马神经元数量的变化及１００Ｕ、５００Ｕ、１０００Ｕ的ＣＮＴＦ对它们的作用。数据以ｘ±ｓ表示，经ｔ检验。结果５００Ｕ和１０００Ｕ的ＣＮＴＦ可显著增加慢性应激大鼠的水平活动和垂直活动（Ｐ＜０．０５～０．０１），明显减少应激大鼠海马神经元细胞的丢失（Ｐ＜０．０５）。结论ＣＮＴＦ对慢性应激大鼠海马神经元损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 应激 行为 海马神经元 CNTF
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睫状神经营养因子对应激引起海马CA3神经元损害的作用 被引量：6
4
作者 严进 汤淑萍 +7 位作者 路长林 王雪琦 何成 王成海 孟玲 胡宗礼 胡旺平 鲍璇 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期99-104,共6页
目的 :探讨睫状神经营养因子对应激引起海马 CA3区神经元损害的作用。方法 :采用 Bielschowsky- Gros-Lawrentjew染色法和常规透射电镜技术 ,观察急性和慢性足底电击大鼠的海马 CA3区神经元形态的变化 ,及双侧海马注射睫状神经营养因子... 目的 :探讨睫状神经营养因子对应激引起海马 CA3区神经元损害的作用。方法 :采用 Bielschowsky- Gros-Lawrentjew染色法和常规透射电镜技术 ,观察急性和慢性足底电击大鼠的海马 CA3区神经元形态的变化 ,及双侧海马注射睫状神经营养因子对其影响。结果 :急性应激大鼠海马神经元形态无明显变化 :慢性应激大鼠海马神经元出现明显的损伤性形态变化 ;睫状神经营养因子对正常大鼠和急性应激大鼠的海马神经元形态无明显作用 ,但可显著减轻海马神经元损伤程度。结论 :睫状神经营养因子可能通过保护海马 展开更多
关键词 CNTF 神经营养因子 应激 海马CA3区 神经元损伤
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人睫状神经营养因子结构和功能的研究 被引量：4
5
作者 何成 陈江野 +2 位作者 路长林 许家军 陈哲宇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期401-405,共5页
目的：制备高活性的重组人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ），并研究其生物学功能。方法：应用大肠杆菌表达ｈＣＮＴＦ，用片段插入和缺失法研究其结构与功能关系；切断大鼠坐骨神经，局部及皮下给予ＣＮＴＦ，应用辣根过氧化物酶逆行追... 目的：制备高活性的重组人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ），并研究其生物学功能。方法：应用大肠杆菌表达ｈＣＮＴＦ，用片段插入和缺失法研究其结构与功能关系；切断大鼠坐骨神经，局部及皮下给予ＣＮＴＦ，应用辣根过氧化物酶逆行追踪技术显示再生轴突通过修复部位的胞体。结果：ｈＣＮＴＦ分子中α－螺旋结构的维持对其生物活性十分重要，Ｃ端松散结构对其生物活性贡献不大，Ｄ螺旋中后段可能与生物活性有密切关系；与对照组相比，ＣＮＴＦ组脊髓标记胞体显著增加。结论：本研究为获得高活性、低副作用的ＣＮＴＦ提供了理论依据；所获ｈＣＮＴＦ能明显促进周围神经运动轴突的再生。 展开更多
关键词 睫状神经 营养因子 基因重组 基因突变 CNTF
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CNTF对应激大鼠行为障碍和海马CA1神经元损害的作用 被引量：8
6
作者 严进 路长林 +7 位作者 汤淑萍 何成 王成海 王雪琦 黄爱军 孟玲 鲍璇 张铁峰 《心理学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2000年第2期210-216,共7页
实验采用 ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ测定、 Ｎｉｓｓｌ染色、 Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色和常规透射电镜技术，观察急性和慢性足底电击应激大鼠的ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态的变化... 实验采用 ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ测定、 Ｎｉｓｓｌ染色、 Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色和常规透射电镜技术，观察急性和慢性足底电击应激大鼠的ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态的变化，及双侧海马注射睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对它的影响。结果表明，急性应激大鼠ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为活动增加，海马ＣＡ１神经元形态无明显变化；慢性应激大鼠ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为活动减少，海马ＣＡ１神经元出现明显的损伤性形态变化；睫状神经营养因子对对照组大鼠和急性应激大鼠的ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态均无明显作用，但可显著减轻慢性应激大鼠海马ＣＡ１神经元损伤程度，改善其行为障碍。实验结果提示睫状神经营养因子可能通过保护海马神经元从而改善慢性应激大鼠的行为障碍。 展开更多
关键词 CNTF 应激 海马 CA1神经元
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联合应用NGF和CNTF对大鼠坐骨神经损伤后功能恢复的影响 被引量：4
7
作者 楚燕飞 朱刚 +3 位作者 陈菁 李兵仓 王宪荣 冯华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期439-441,共3页
目的　探讨联合应用神经营养因子 (Nervegrowthfactor ,NGF)和睫状神经营养因子 (Ciliaryneurotrophicfactor ,CNTF)对大鼠坐骨神经损伤后再生及功能恢复的影响。方法　用硅胶管桥接 12 0只大鼠左侧坐骨神经长 6mm缺损 ,随机分为 4组 ,... 目的　探讨联合应用神经营养因子 (Nervegrowthfactor ,NGF)和睫状神经营养因子 (Ciliaryneurotrophicfactor ,CNTF)对大鼠坐骨神经损伤后再生及功能恢复的影响。方法　用硅胶管桥接 12 0只大鼠左侧坐骨神经长 6mm缺损 ,随机分为 4组 ,分别行NGF +CNTF、CNTF、NGF、生理盐水 (NS)靶肌肉注射。术后行坐骨神经功能指数 (SFI)、电生理检测、病理学检查。结果　联合应用NGF和CNTF组SFI恢复率、各项电生理及轴突图像分析指标明显优于单独用药组。结论　联合应用NGF和CNTF可明显促进大鼠坐骨神经损伤后再生与功能恢复。 展开更多
关键词 周围神经损伤 NGF CNTF 坐骨神经 影响 联合用药
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NGF与CNTF促周围神经再生作用的差异性及协同性研究进展 被引量：11
8
作者 李强 李民 伍亚民 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第7期537-539,共3页
关键词 NGF CNTF 周围神经再生 差异性 协同性 神经生长因子 睫状神经营养因子
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大鼠视神经损伤后视网膜CNTF及CNTFRα mRNA的表达 被引量：7
9
作者 邹倩 叶剑 +2 位作者 朱佩芳 王正国 李泽桂 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2004年第1期54-56,共3页
目的研究视神经损伤后睫状神经营养因子及其受体在大鼠视网膜中的表达变化。方法采用钳夹法制作大鼠视神经损伤模型。分别于伤后1、3、7、14、28d取眼球,以正常大鼠视网膜为对照,提取视网膜组织RNA,运用RT-PCR检测视神经损伤后CNTF和CN... 目的研究视神经损伤后睫状神经营养因子及其受体在大鼠视网膜中的表达变化。方法采用钳夹法制作大鼠视神经损伤模型。分别于伤后1、3、7、14、28d取眼球,以正常大鼠视网膜为对照,提取视网膜组织RNA,运用RT-PCR检测视神经损伤后CNTF和CNTFRαmRNA的表达变化。结果在正常视网膜中存在CNTF和CNTFRαmRNA的表达,视神经损伤后CNTF和CNTFRαmRNA表达量逐渐增加,第7d达到最高,第14d下降,具有统计学意义(P<0.01)。28dCNTF表达仍高于正常组(P<0.01)。结论视神经损伤刺激了视网膜细胞表达CNTF和CNTFRα增加,可能是视网膜神经元自我保护的一种反应。 展开更多
关键词 大鼠 视神经损伤 视网膜 CNTF CNTFRα MRNA 表达 睫状神经营养因子
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靶肌肉注射睫状神经营养因子促周围神经再生的功能评价 被引量：10
10
作者 韩久卉 陆长林 +1 位作者 张经歧 田德虎 《实用手外科杂志》 CAS 2000年第2期87-89,共3页
目的 评价靶肌肉注射睫状神经营养因子(Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF)对受损周围神经功能恢复的影响.方法 用硅胶管桥接80支大鼠左侧6mm长坐骨神经缺损,随机分为2组.分别行CNTF、生理盐水(NS)靶肌肉注射.术后行坐骨神经功能指数(S... 目的 评价靶肌肉注射睫状神经营养因子(Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF)对受损周围神经功能恢复的影响.方法 用硅胶管桥接80支大鼠左侧6mm长坐骨神经缺损,随机分为2组.分别行CNTF、生理盐水(NS)靶肌肉注射.术后行坐骨神经功能指数(SFI)测定、电生理检测、轴突图像分析及霍乱毒素—辣根过氧化物酶(CB-HRP)逆行追踪.结果CNTF组SFI恢复率、各项电生理及轴突图像分析指标、CB-HRP标记的脊髓前角运动细胞数明显优于NS组.结论 靶肌肉注射CNTF可明显促进周围神经再生,提高神经功能恢复. 展开更多
关键词 肌肉注射 周围神经再生 睫状神经营养因子 轴突 CNTF HRP 电生理检测 能指 标记 目的
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重组人睫状神经营养因子突变体的构建、表达及生物活性分析 被引量：6
11
作者 应莲芳 雷清 +2 位作者 梁凌宇 高雪峰 蒋琳 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第4期16-18,共3页
目的:通过对原始CNTF的突变改造,降低表达蛋白的免疫原性,同时增加其稳定性,以期能用于临床治疗肥胖症。方法:以原始CNTF为模板,去掉N端的12个氨基酸、C端的14个氨基酸,并将C端末2个氨基酸点突变为极性较强的赖氨酸,在大肠杆菌中表达,获... 目的:通过对原始CNTF的突变改造,降低表达蛋白的免疫原性,同时增加其稳定性,以期能用于临床治疗肥胖症。方法:以原始CNTF为模板,去掉N端的12个氨基酸、C端的14个氨基酸,并将C端末2个氨基酸点突变为极性较强的赖氨酸,在大肠杆菌中表达,获得CNTF-T突变体。结果:基因序列分析与原设计吻合,目的蛋白表达量占全菌体的35%左右,表达蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性、DEAE-FF纯化,纯度可达95%以上,小鼠体内生物活性测定,能明显抑制小鼠体重增长,且CNTF-T的生物活性比原始序列CNTF的活性高。结论:突变的CNTF-T有望成为新一代的生物减肥制剂应用于临床。 展开更多
关键词 睫状神经营养因子(CNTF) 突变体 基因表达 生物活性 减肥
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逆转录病毒介导的人CNTF在嗅神经鞘细胞中的表达及其对神经细胞存活和突起生长的影响 被引量：4
12
作者 杨浩 金卫林 +2 位作者 范明 游思维 鞠躬 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期337-343,共7页
目的　研究含有睫状神经营养因子 (CNTF)表达调控系统修饰的嗅神经鞘细胞 (OECs)对神经细胞存活和突起生长的影响。　方法　通过基因克隆 ,用KpnⅠ +XbaⅠ将pcDNA3 S(NGF信号肽 ) hCNTF质粒中含有NGF信号肽的CNTF切下 ,插入逆转录病毒... 目的　研究含有睫状神经营养因子 (CNTF)表达调控系统修饰的嗅神经鞘细胞 (OECs)对神经细胞存活和突起生长的影响。　方法　通过基因克隆 ,用KpnⅠ +XbaⅠ将pcDNA3 S(NGF信号肽 ) hCNTF质粒中含有NGF信号肽的CNTF切下 ,插入逆转录病毒表达载体pRev TRE中。酶切鉴定后 ,将其与本系统的调控质粒pRev Tet On转入Ecopack 2 93细胞进行病毒包装 ,制备重组缺陷型hCNTF和Tet On逆转录病毒感染原代培养的大鼠OECs,用不同浓度的强力霉素诱导 ,以Western blot法对hCNTF的表达培养上清进行检测。将转染hCNTF的OECs与新生 2d大鼠DRG联合培养 ,用其上清培养视网膜节细胞 (RGCs)。经 β tubulin免疫组织化学染色后 ,分别测量DRG神经突起的长度并统计阳性RGCs数目。　结果　 1 经HindⅢ和BamHⅠ酶切鉴定 ,pRev TRE S hCNTF重组体分别被切下 6 30bp和 4 0 0bp片段 ,插入子的方向和完整性经确认与预期相符。 2 以不同浓度强力霉素诱导hCNTF修饰的OECs ,其培养上清均有分子量约 2 4kD的hCNTF蛋白质的显著特异表达 ,此表达与强力霉素的浓度呈正相关。未诱导组和对照组未见明显蛋白带。 3 同单纯OECs(2 3 15± 4 7)、空载 (2 4 5 5± 5 8)、空白 (16 8± 6 5 )等对照组相比 ,经hCNTF转染的OECs上清组的存活RGC数显著? 展开更多
关键词 逆转录病毒介导 CNTF 嗅神经鞘细胞 表达 神经细胞 存活 突起生长 背根神经节 细胞培养
原文传递
CNTF基因在大鼠脊髓中的表达及生后发育的变化 被引量：2
13
作者 顾晓松 丁斐 +2 位作者 刘炎 沈爱国 姚登兵 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期305-308,T004,共5页
目的　观察CNTF基因在大鼠脊髓中的表达以及生后发育过程中的变化。　方法　以地高辛标记(dig )CNTFcDNA为探针 ,采用原位杂交法 ,观察CNTFmRNA在大鼠脊髓中的分布 ;采用RT PCR法 ,半定量分析大鼠生后发育过程中 ,脊髓CNTFmRNA表达水平... 目的　观察CNTF基因在大鼠脊髓中的表达以及生后发育过程中的变化。　方法　以地高辛标记(dig )CNTFcDNA为探针 ,采用原位杂交法 ,观察CNTFmRNA在大鼠脊髓中的分布 ;采用RT PCR法 ,半定量分析大鼠生后发育过程中 ,脊髓CNTFmRNA表达水平的变化。　结果　CNTFmRNA原位杂交阳性信号存在于正常大鼠脊髓白质的腹索、外侧索周边的部分胶质细胞中 ;灰质中未能发现阳性杂交信号。RT PCR结果显示 ,大鼠生后 1d脊髓组织中即可见CNTFmRNA表达 ,但表达量较低 ;出生 15d表达量迅速增加 ;30d时最高 ;6 0d时的表达量有下降的趋势。　结论　大鼠脊髓白质的部分胶质细胞可表达CNTFmRNA ;大鼠出生后 1dCNTFmRNA即有表达 。 展开更多
关键词 CNTF MRNA 脊髓 发育 大鼠 CNTF基因
原文传递
神经营养因子、凋亡相关因子和轴突导向因子在大鼠神经管畸形发育中的表达 被引量：5
14
作者 曾洪艳 李力燕 +3 位作者 郭小兵 高维 赵晓姝 王廷华 《昆明医科大学学报》 CAS 2012年第11期13-18,31,共7页
目的探讨神经营养因子(NT-3,CNTF,IGF-1,PDGF)、凋亡相关因子(Caspase-3,Bcl-x)l、轴突导向因子(Netrin)的mRNA在大鼠神经管畸形发育中的表达变化.方法选取孕鼠随机分为正常组(不作任何处理)、对照组(按50 mg/kg橄榄油于E10 d时一次性... 目的探讨神经营养因子(NT-3,CNTF,IGF-1,PDGF)、凋亡相关因子(Caspase-3,Bcl-x)l、轴突导向因子(Netrin)的mRNA在大鼠神经管畸形发育中的表达变化.方法选取孕鼠随机分为正常组(不作任何处理)、对照组(按50 mg/kg橄榄油于E10 d时一次性胃饲孕鼠)和(按50 mg/kg溶于橄榄油的维甲酸于E10 d时一次性胃饲孕鼠).正常组、对照组和实验组又各自分为E15d、E16 d、E17 d、E18 d、E19 d、E20 d组,每组5只胎鼠,用于RT-PCR实验.结果 (1)实验组的胎鼠中66%发生了死胎、脊髓脊柱裂、无尾畸形、下肢不发育等;(2)神经营养因子(NT-3,CNTF,IGF-1,PDGF)、凋亡相关因子(Caspase-3,Bcl-x)l、轴突导向因子(Netrin)在E15 d～E20 d正常及畸形大鼠神经管发育过程中,均有表达.其中,IGF-1在E16d与正常组比较表现为表达减少的趋势;实验组内比较IGF-1表达有先增加后减少再增加的趋势.CNTF在E17d时与正常组比较表达有减少.以上变化均具有统计学意义(P<0.05).凋亡因子(Caspase-3,Bcl-x)l和导向因子(Netrin)均无统计学意义.结论神经营养因子(NT-3,CNTF,IGF-1,PDGF)、凋亡相关因子(Caspase-3,Bcl-x)l、轴突导向因子(Netrin)在E15 d～E20 d正常及畸形大鼠神经管发育过程中有重要作用.IGF-1、CNTF的mRNA变化均较正常组有不同程度减低,可能是维甲酸通过干扰此三类神经营养因子等大分子物质在发育过程中的形成和分布,在某种程度上改变了大鼠神经胚发育的进程和方式,以此也就干扰了神经元的正常的分化增殖发育过程. 展开更多
关键词 神经管畸形 NT-3 CNTF IGF-1 DGF Caspase-3 BCL-XL NETRIN
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质粒pBV220-PTD-tCNTF转化BL21菌株感受态细胞的高效制备方法 被引量：3
15
作者 吴行伟 刘泽源 +7 位作者 李前 蒲韵竹 任汝通 许秀丽 刘霏霏 张琴 吴媛 曲恒燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期584-587,共4页
目的比较几种常用大肠杆菌感受态制备方法,探讨影响pBV220-PTD-tCNTF转化大肠杆菌感受态细胞的因素并得出最优水平组合。方法采用4种制备感受态细胞的方法即CaCl2法,CaCl2-甘油法,TSSG法和INOUE法,比较4种方法制备的感受态细胞即时和-8... 目的比较几种常用大肠杆菌感受态制备方法,探讨影响pBV220-PTD-tCNTF转化大肠杆菌感受态细胞的因素并得出最优水平组合。方法采用4种制备感受态细胞的方法即CaCl2法,CaCl2-甘油法,TSSG法和INOUE法,比较4种方法制备的感受态细胞即时和-80℃保存30 d对质粒PBV220-PTD-tCNTF的转化效率;L8(27)正交设计研究Mg2+、INOUE重悬液、PEG、甘油和DMSO对pBV220-PTD-tCNTF转化大肠杆菌感受态的影响;对得出的最佳水平组合进行验证并对转化好的细胞进行测序验证。结果 CaCl2法,CaCl2-甘油法,TSSG法,INOUE法4种方法的转化率分别为:(5.43±0.72)×106、(7.45±0.65)×106、(9.71±1.81)×106、(8.52±1.22)×107;-80℃保存30 d的转化效率为:(6.20±0.31)×104、(6.57±0.97)×106、(9.76±1.31)×106、(1.63±0.019)×106;正交结果 Mg2+(A)、IN-OUE重悬液(B)、PEG(C)、甘油(D)和DMSO(E)各因素的P值分别为0.0357、0.0154、0.0677、0.2503和0.1749;最佳水平组合实施的转化率为(29.63±4.95)×107并经测序确定转入质粒的正确性。结论分析出各因素对pBV220-PTD-tCNTF转化感受态细胞转化率的影响程度,得出了其最佳水平组合A1B1C1D2E1,并得到了(29.63±4.95)×107的转化效率。 展开更多
关键词 感受态细胞 大肠杆菌 正交设计 转化效率 制备 PBV220 CNTF
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周围神经损伤后局部一次给予重组CNTF对神经元变性和再生的作用 被引量：5
16
作者 许家军 陈尔瑜 +2 位作者 何成 姜宗来 路长林 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期360-362,共3页
目的 :研究周围神经损伤后 ,局部一次给予重组CNTF对神经元变性和再生的作用。方法 :用硅管套接切断的成年大鼠坐骨神经 ,术时在损伤神经局部一次性给予重组CNTF ;用甲苯胺蓝染色和胆碱酯酶组织化学方法研究神经元的逆行变性 ,用HRP逆... 目的 :研究周围神经损伤后 ,局部一次给予重组CNTF对神经元变性和再生的作用。方法 :用硅管套接切断的成年大鼠坐骨神经 ,术时在损伤神经局部一次性给予重组CNTF ;用甲苯胺蓝染色和胆碱酯酶组织化学方法研究神经元的逆行变性 ,用HRP逆行追踪研究轴突的再生 ,并进行后足功能测试。结果 :重组CNTF减轻损伤运动神经元胞核偏位和胆碱酯酶活性的变化 ,增加轴突再生的运动神经元数量 ,改善功能指数。结论 :局部一次给予重组CNTF和再加皮下注射一样能保护损伤运动神经元并促其轴突再生。 展开更多
关键词 周围神经损伤 神经变性 神经再生 CNTF
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孤儿受体TR3与人CNTF受体基因中顺式元件作用机制的研究 被引量：6
17
作者 穆小民 刘以训 张传祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第5期485-491,共7页
应用两对人工合成的寡核苷酸引物，分别通过ＰＣＲ扩增，得到了ＣＮＴＦＲα－Ｉ５ＮＢＲＥ序列两侧的两个扩增片段，将其和在ＥｃｏＲⅤ位点切开的ｐＴ７ｂｌｕｅ一起定向连接，得到了插入在ｐＴ７ｂｌｕｅ的ＥｃｏＲⅤ位点的缺失了Ｎ... 应用两对人工合成的寡核苷酸引物，分别通过ＰＣＲ扩增，得到了ＣＮＴＦＲα－Ｉ５ＮＢＲＥ序列两侧的两个扩增片段，将其和在ＥｃｏＲⅤ位点切开的ｐＴ７ｂｌｕｅ一起定向连接，得到了插入在ｐＴ７ｂｌｕｅ的ＥｃｏＲⅤ位点的缺失了ＮＢＲＥ序列的ＣＮＴＦＲα－Ｉ５，然后再将其切下，插入到具有ＳＶ４０起动子的ＣＡＴ基因表达载体的ＢｇｌⅡ位点，构建了ＣＡＴ报道基因．细胞转染和ＣＡＴ实验表明，缺失ＮＢＲＥ后，ＣＮＴＦＲα－Ｉ５仍具有增强子功能，ＴＲ３通过该增强子对ＣＮＴＦＲα的表达具有诱导作用，说明这种诱导作用并不是单一通过ＮＢＲＥ序列进行的． 展开更多
关键词 孤儿受体TR3 报道基因 表达调控 CNTF受体基因
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人睫状神经营养因子的原核表达、纯化及其生物效应 被引量：3
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作者 咸海青 范明 +2 位作者 甘思德 刘淑红 丁爱石 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期21-24,共4页
人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）克隆入ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α菌株中表达，重组蛋白以包含体的形式存在，表达量为菌体总蛋白的５０％左右。经比较发现用２ｍｏｌ／Ｌ脲洗涤包含体可溶解大量可溶性细菌蛋白，且包含体损失较小。... 人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）克隆入ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α菌株中表达，重组蛋白以包含体的形式存在，表达量为菌体总蛋白的５０％左右。经比较发现用２ｍｏｌ／Ｌ脲洗涤包含体可溶解大量可溶性细菌蛋白，且包含体损失较小。在高浓度变性剂条件下进行ｓｅｐｈａｒｃｙｌＳ－２００凝胶过滤，解决了纯化中ｈＣＮＴＦ易聚合的问题，在低浓度变性剂条件下进行ＤＥＡＥ离子交换，有利于蛋白活性的保持。经两步纯化后得到均一性ｈＣＮＴＦ，纯度达９５％以上。在自然状态下使ｈＣＮＴＦ复性。纯化复性后的ｈＣＮＴＦ对无血清培养的鸡胚背根节神经元和脊髓腹角运动神经元有明显的维持存活和促进生长发育的生物效应。 展开更多
关键词 神经营养因子 CNTF 原核表达 提纯 生物效应
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睫状神经营养因子对大鼠视神经不全损伤后轴浆运输的影响 被引量：8
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作者 李灿 王一 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期408-411,共4页
目的　探讨睫状神经营养因子 (CNTF)对大鼠视神经 (opticnerve ,ON)中度不全损伤后轴浆运输的影响。方法　成年雌性Wistar大鼠 5 0只 ,用无创血管夹于球后 1 5mm钳夹ON 10s,造成ON中度损伤 ,于伤后即刻、伤后 1、2、4和 8周CNTF治疗组... 目的　探讨睫状神经营养因子 (CNTF)对大鼠视神经 (opticnerve ,ON)中度不全损伤后轴浆运输的影响。方法　成年雌性Wistar大鼠 5 0只 ,用无创血管夹于球后 1 5mm钳夹ON 10s,造成ON中度损伤 ,于伤后即刻、伤后 1、2、4和 8周CNTF治疗组玻璃体腔内注射人重组睫状神经营养因子 (rhCNTF) 2 μg ,对照组注射等量双蒸水。分别在不同的时间 ( 1、2、4、8和 12周 )应用辣根过氧化物酶 (horseradishperoxidase ,HRP)观察ON不全损伤后顺行轴浆运输的变化。结果　伤后 1～ 2周在损伤点后HRP顺染纤维度骤然下降 ,于上丘均未见HRP显色 ;伤后 4周ON及上丘顺染密度逐渐增强至 8周达高峰 ,对照组ON损伤远端顺染纤维度恢复至正常的 12 87% ,而治疗组至 3 1 86%。两组间于ON损伤远端和上丘HRP顺染密度均有非常显著性差异 (P <0 0 1)。结论　CNTF可改善ON不全损伤后轴浆运输状况 ,促进ON结构的恢复。 展开更多
关键词 视神经 不全损伤 CNTF HRP 轴浆运输
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血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响 被引量：3
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作者 古今 何新荣 韩亚亮 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1392-1395,共4页
目的:观察血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响,探讨其促进周围神经再生的可能机制。方法:SD大鼠随机分为血竭给药组(灌服血竭的香油溶液)和空白对照组(等体积香油),制备血竭含药血清和空白... 目的:观察血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响,探讨其促进周围神经再生的可能机制。方法:SD大鼠随机分为血竭给药组(灌服血竭的香油溶液)和空白对照组(等体积香油),制备血竭含药血清和空白对照血清。选取出生3 d SD大鼠双侧坐骨神经制备雪旺氏细胞;将培养的雪旺氏细胞分为血竭组和空白对照组,分别用10%血竭含药血清和空白对照血清干预培养。48 h后应用RT-PCR法检测各组雪旺氏细胞NGF,BDNF等基因mRNA表达水平。结果:镜下观察到大部分雪旺氏细胞呈双极梭形,细胞呈肩对肩或端对端排列,免疫细胞化学鉴定均呈阳性;与空白组比较,血竭组NGF,LNGFR,GDNF和GAP-43 mRNA表达上调(P<0.01),BDNF mRNA表达下调(P<0.05),CNTF和TrkA的mRNA均下调(P<0.01),NF-H mRNA无显著差异。结论:中药血竭可能是通过上调NGF,LNGFR,GDNF,GAP-43的mRNA的表达,同时下调BDNF,CNTF,TrkA mRNA来发挥其促进神经修复作用。 展开更多
关键词 血竭 雪旺氏细胞 NGF BDNF CNTF
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