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CircASAP1靶向miR-4500促进骨肉瘤细胞增殖并抑制凋亡的机制研究
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作者 耿月华 汤丽军 +3 位作者 温路生 林秋燕 许家伦 杨立民 《实用临床医药杂志》 2025年第19期58-64,共7页
目的探讨环状RNA ASAP1(circASAP1)靶向微小RNA-4500(miR-4500)对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的调控作用。方法选取人成骨肉瘤细胞(Saos-2)作为实验对象,将其置于含有10%胎牛血清的DMEM培养基中培养,同时维持5%的CO_(2)。采用RT-qPCR检测circA... 目的探讨环状RNA ASAP1(circASAP1)靶向微小RNA-4500(miR-4500)对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的调控作用。方法选取人成骨肉瘤细胞(Saos-2)作为实验对象,将其置于含有10%胎牛血清的DMEM培养基中培养,同时维持5%的CO_(2)。采用RT-qPCR检测circASAP1和miR-4500在骨肉瘤组织中的表达。分别转染si-NC(40 nmol/L)、si-circASAP1(40 nmol/L)、pcDNA(0.4μg)、pcDNA-circASAP1(0.4μg)、miR-NC(40 nmol/L)、miR-4500模拟物(40 nmol/L)、si-circASAP1+anti-miR-NC(40 nmol/L)、si-circASAP1+anti-miR-4500(40 nmol/L)至Saos-2细胞。采用CCK-8、集落形成实验、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡。采用双荧光素酶报告实验分析circASAP1与miR-4500的相互作用。结果相较于瘤旁组织,骨肉瘤组织中circASAP1表达升高,miR-4500表达降低,差异均有统计学意义(P<0.001)。与si-NC组比较,si-circASAP1组circASAP1表达、吸光度(OD)值、细胞克隆形成数降低,差异均有统计学意义(P<0.001)。与si-NC组比较,si-circASAP1组cleaved-caspase3蛋白水平、cleaved-caspase9蛋白水平、凋亡率上调,差异均有统计学意义(P<0.001)。StarBase搜索发现miR-4500与circASAP1存在特异性结合序列。miR-4500模拟物和WT-circASAP1共转染显著降低细胞的相对荧光素酶活性[(0.34±0.03)与(0.95±0.06),t=27.280,P<0.001]。pcDNA-circASAP1组miR-4500表达低于pcDNA组,而si-circASAP1组miR-4500表达高于si-NC组,差异均有统计学意义(P<0.001)。与miR-NC组比较,miR-4500组miR-4500表达、cleaved-caspase3蛋白水平、cleaved-caspase9蛋白水平、凋亡率升高,而OD值、克隆形成数下降,差异均有统计学意义(P<0.001)。与si-circASAP1+anti-miR-NC组比较,si-circASAP1+anti-miR-4500组miR-4500表达、cleaved-caspase3蛋白水平、cleaved-caspase9蛋白水平、凋亡率下降,而OD值、克隆形成数上调,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论骨肉瘤组织中circASAP1表达增加,miR-4500表达降低,且circASAP1通过靶向miR-4500促进骨肉瘤细胞增殖并抑制凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤 环状rna asap1 微小rna-4500 增殖 凋亡 克隆形成数 集落形成实验 流式细胞术
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circ ASAP1在结直肠癌中的表达水平及临床意义 被引量:3
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作者 宋泓杉 张鹏 +1 位作者 张佃良 柳晓东 《热带医学杂志》 CAS 2022年第10期1340-1344,共5页
目的探讨环状RNA ASAP1(circ ASAP1)、微小RNA-338-3p(miR-338-3p)在结直肠癌(CRC)中的表达水平及其临床意义。方法选取2016年1月-2018年10月青岛市市立医院收治的78例CRC患者进行研究,收集所有CRC患者手术切除的CRC组织及对应的癌旁组... 目的探讨环状RNA ASAP1(circ ASAP1)、微小RNA-338-3p(miR-338-3p)在结直肠癌(CRC)中的表达水平及其临床意义。方法选取2016年1月-2018年10月青岛市市立医院收治的78例CRC患者进行研究,收集所有CRC患者手术切除的CRC组织及对应的癌旁组织,测定CRC组织及对应的癌旁组织中circ ASAP1、miR-338-3p表达水平;分析CRC组织circ ASAP1、miR-338-3p表达水平与CRC患者临床病理特征、预后的关系;分析CRC组织中circ ASAP1表达水平与miR-338-3p的相关性。结果与癌旁组织比较,CRC组织circ ASAP1[(1.01±0.34)vs.(2.45±0.82)]表达水平较高,miR-338-3p表达水平[(1.04±0.35)vs.(0.49±0.17)]较低,差异有统计学意义(t=14.327、12.484,P均<0.05)。CRC组织circ ASAP1、miR-338-3p表达水平与肿瘤TNM分期、分化程度、淋巴结转移相关(P均<0.05)。CRC组织中circ ASAP1表达水平与miR-338-3p成负相关(r=-0.575,P<0.05)。circ ASAP1高表达组、miR-338-3p低表达组CRC患者累积生存率分别低于circ ASAP1低表达组、miR-338-3p高表达组(P均<0.05)。结论CRC组织中circ ASAP1表达水平较高,miR-338-3p表达水平较低,二者成负相关,且circ ASAP1、miR-338-3p有望成为临床诊治CRC、评估CRC预后的辅助指标。 展开更多
关键词 环状rna asap1 结直肠癌 微小rna-338-3p 预后
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