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盐酸石蒜碱通过调控circSEPT9/miR-654-5p影响结直肠癌SW620细胞增殖及凋亡的机制 被引量：6
1
作者 周晓华 李合 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期44-49,共6页
目的探讨盐酸石蒜碱(lycoline hydrochloride, LH)对人结直肠癌细胞SW620细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法不同剂量的LH处理SW620细胞(LH-L组、LH-M组、LH-H组),同时将正常培养的SW620细胞记为Con组;实验分组:si-NC组、si-... 目的探讨盐酸石蒜碱(lycoline hydrochloride, LH)对人结直肠癌细胞SW620细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法不同剂量的LH处理SW620细胞(LH-L组、LH-M组、LH-H组),同时将正常培养的SW620细胞记为Con组;实验分组:si-NC组、si-circSEPT9组、LH+pcDNA-circSEPT9组、LH+anti-miR-654-5p组;利用MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成及凋亡;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测circSEPT9、miR-654-5p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测circSEPT9与miR-654-5p的靶向关系;Western blot法检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cleaved Caspase-9)蛋白表达量。结果与Con组比较,LH-L组、LH-M组、LH-H组细胞增殖抑制率、miR-654-5p的表达量、细胞凋亡率和cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9蛋白水平升高(均P<0.05),细胞克隆形成数减少(均P<0.05),circSEPT9的表达量降低(均P<0.05),且呈剂量依赖性;circSEPT9可靶向调控miR-654-5p的表达;与si-NC组比较,si-circSEPT9组miR-654-5p的表达量、细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9蛋白水平升高(均P<0.05),细胞克隆形成数减少(均P<0.05);与LH组比较,LH+pcDNA-circSEPT9组、LH+anti-miR-654-5p组miR-654-5p的表达量、细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9蛋白水平降低(均P<0.05),细胞克隆形成数增多(均P<0.05)。结论盐酸石蒜碱可通过调控circSEPT9/miR-654-5p表达而抑制结直肠癌细胞增殖、克隆形成及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 结直肠癌 盐酸石蒜碱 circsept9 miR-654-5p 增殖 凋亡
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CircSEPT9调节miR-650/HSPB1轴对胶质瘤细胞恶性生物学行为影响的探讨 被引量：3
2
作者 任成波 赵丽霞 +5 位作者 杜晓猛 李锦秋 邹念东 王聪 宋晓 张志林 《中国临床新医学》 2023年第8期842-849,共8页
目的探讨环状RNA(CircRNA)SEPT9调节miR-650/热休克蛋白B1(HSPB1)轴对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western blot法检测胶质瘤组织、癌旁组织、人类正常神经胶质细胞HEB及胶质瘤细胞系LN1... 目的探讨环状RNA(CircRNA)SEPT9调节miR-650/热休克蛋白B1(HSPB1)轴对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western blot法检测胶质瘤组织、癌旁组织、人类正常神经胶质细胞HEB及胶质瘤细胞系LN18、SW1088、U251中CircSEPT9、miR-650、HSPB1蛋白表达水平。将U251细胞分为对照组(NC组)、si-NC组、si-CircSEPT9组、mimic NC组、miR-650 mimic组、si-CircSEPT9+inhibitor NC组、si-CircSEPT9+miR-650 inhibitor组、si-CircSEPT9+pcDNA组、si-CircSEPT9+pcDNA-HSPB1组。采用qRT-PCR法检测CircSEPT9、miR-650表达水平。采用Western blot法检测HSPB1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Caspase-3、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达水平。通过双荧光素酶基因实验验证CircSEPT9与miR-650、miR-650与HSPB1的关系。结果在胶质瘤组织和细胞中,CircSEPT9和HSPB1蛋白呈高表达,miR-650呈低表达,且在U251细胞中CircSEPT9以及HSPB1蛋白表达水平最高,miR-650表达水平最低,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默CircSEPT9或过表达miR-650均可抑制U251细胞增殖、侵袭、迁移及Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平,促进细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达。下调miR-650或过表达HSPB1均可减弱沉默CircSEPT9对U251细胞的作用影响。CircSEPT9与miR-650、miR-650与HSPB1存在靶向关系。结论沉默CircSEPT9可能通过海绵化上调miR-650来抑制HSPB1表达,进而抑制U251细胞增殖、迁移与侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA SEPT9 miR-650 热休克蛋白B1 胶质瘤 生物学行为
暂未订购
环状RNA circSEPT9通过靶向miR-432-5p在胶质瘤放射抵抗中的作用研究
3
作者 顾浩 刘俊启 +1 位作者 王鑫 樊锐太 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第3期250-255,共6页
目的探讨circSEPT9在胶质瘤放射抵抗中的作用及其分子机制。方法收集2019年1月—2022年1月在郑州大学第一附属医院接受手术及术后放疗的40例脑胶质瘤患者术后组织标本,分为放射敏感组和放射抵抗组,两组胶质瘤组织采用实时反转录PCR(RT-q... 目的探讨circSEPT9在胶质瘤放射抵抗中的作用及其分子机制。方法收集2019年1月—2022年1月在郑州大学第一附属医院接受手术及术后放疗的40例脑胶质瘤患者术后组织标本,分为放射敏感组和放射抵抗组,两组胶质瘤组织采用实时反转录PCR(RT-qPCR)检测circSEPT9的表达。以人胶质瘤细胞U251为基础构建放射抵抗的胶质瘤细胞U251R,将U251R细胞分为阴性对照组(si-NC组)、circSEPT9敲低组(si-circSEPT9组)、阴性对照+照射组(si-NC+4 Gy组)、circSEPT9敲低+照射组(si-circSEPT9+4 Gy组)、circSEPT9敲低+抑制对照+照射组(si-circSEPT9+NC抑制剂+4 Gy组)、circSEPT9敲低+miR-432-5p抑制+照射组(si-circSEPT9+miR-432-5p抑制剂+4 Gy组)。双荧光素酶报告基因实验验证circSEPT9与miR-432-5p的靶向关系。克隆形成实验检测U251R细胞存活率,流式细胞术检测U251R细胞凋亡率,采用独立样本t检验比较两组患者胶质瘤组织circSEPT9的表达量,采用单因素方差分析比较各组细胞的存活率和凋亡率。结果circSEPT9在放射抵抗组患者胶质瘤组织中的表达量升高(1.00±0.18∶3.25±0.13,P<0.05)。与si-NC组比较,si-circSEPT9组U251R细胞存活分数降低,细胞凋亡率显著升高(9.24±0.83∶19.36±2.13,P<0.05)。给予细胞4、6、8 Gy照射后,与si-NC组相比,si-circSEPT9组细胞的存活分数显著降低(P均<0.05)。与si-NC+4 Gy组相比,si-circSEPT9+4 Gy组细胞的凋亡率增加(18.83±1.94∶35.23±3.56,P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,circSEPT9可靶向并负调控miR-432-5p的表达。与si-circSEPT9+NC抑制剂+4 Gy组比较,si-circSEPT9+miR-432-5p抑制剂+4 Gy组U251R细胞存活分数显著升高(P<0.05)。结论敲低circSEPT9通过靶向miR-432-5p促进细胞凋亡,从而增强胶质瘤细胞的放射敏感性。 展开更多
关键词 circsept9 胶质瘤 miR-432-5p 放射抵抗 凋亡
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