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circPRMT5靶向miR-376a-3p调控胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的作用机制
1
作者 黄超 方兴刚 陈璐 《中西医结合心脑血管病杂志》 2025年第4期547-554,共8页
目的:探讨circPRMT5对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法:选取2020年5月—2022年5月我院脑胶质瘤组织和颅脑外伤病人脑组织标本各37例;胶质瘤细胞U251分为si-NC组、si-circPRMT5组、pcDNA组、pcDNA-circPRMT5组、miR-NC组... 目的:探讨circPRMT5对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法:选取2020年5月—2022年5月我院脑胶质瘤组织和颅脑外伤病人脑组织标本各37例;胶质瘤细胞U251分为si-NC组、si-circPRMT5组、pcDNA组、pcDNA-circPRMT5组、miR-NC组、miR-376a-3p组、si-circPRMT5+anti-miR-NC组及si-circPRMT5+anti-miR-376a-3p组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测circPRMT5和miR-376a-3p表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测细胞增殖及凋亡相关蛋白表达。双荧光素酶报告实验检测circPRMT5和miR-376a-3p的靶向调控关系。结果:与颅脑外伤病人脑组织比较,胶质瘤组织中circPRMT5表达水平(2.55±0.18与1.00±0.07)升高,miR-376a-3p表达水平[(0.42±0.05与1.00±0.06)]降低(P<0.05)。抑制circPRMT5表达后,细胞活性(0.32±0.03与0.74±0.06)降低,细胞凋亡率[(22.37±1.83)%与(7.47±0.62)%]升高,周期蛋白D1(CyclinD1)及B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)蛋白相对表达量降低,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)及Bcl-2相关x蛋白(Bax)相对表达量升高(P<0.05)。过表达miR-376a-3p后,细胞活性(0.41±0.04与0.76±0.07)降低,细胞凋亡率[(19.51±1.40)%与(7.37±0.53)%]升高,CyclinD1及Bcl-2蛋白相对表达量降低,p21及Bax蛋白相对表达量升高(P<0.05)。miR-376a-3p组转染WT-circPRMT5的细胞荧光素酶活性显著低于miR-NC组(0.59±0.04与1.03±0.07,P<0.05),而转染MUT-circPRMT5的细胞荧光素酶活性无显著变化(1.00±0.05与1.02±0.08,P>0.05)。结论:抑制circPRMT5表达可能通过靶向上调miR-376a-3p抑制胶质瘤U251细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胶质瘤 增殖 凋亡 circprmt5 miR-376a-3p 实验研究
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circPRMT5通过靶向miR-98-5p对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭的机制研究
2
作者 谢奕彪 姜良真 崔小健 《中国实验诊断学》 2024年第6期708-713,共6页
目的探究circPRMT5通过靶向miR-98-5p对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭的机制研究。方法qRT-PCR检测永生化正常尿路上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞(T24、J82、HT-1376)中circPRMT5、miR-98-5p和X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)mRNA相对表达... 目的探究circPRMT5通过靶向miR-98-5p对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭的机制研究。方法qRT-PCR检测永生化正常尿路上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞(T24、J82、HT-1376)中circPRMT5、miR-98-5p和X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)mRNA相对表达水平。核糖核酸酶(RNase)R和放线菌素D的消化实验鉴定circPRMT5的环状结构。将T24细胞分为si-NC组、si-circPRMT5组、miR-NC组、miR-98-5p组、si-circPRMT5+anti-miR-NC组、si-circPRMT5+anti-miR-98-5p组。qRT-PCR检测circPRMT5和miR-98-5p表达水平;MTT、克隆实验检测细胞增殖水平;Transwell检测迁移、侵袭能力;Western Blot检测MMP2、MMP9、XIAP蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circPRMT5和miR-98-5p靶向关系。结果与永生化正常尿路上皮细胞SV-HUC-1相比,膀胱癌细胞T24、J82、HT-1376中circPRMT5、XIAP mRNA相对表达水平增加,miR-98-5p降低。circPRMT5比线性PRMT5稳定性更强。沉默circPRMT5或过表达miR-98-5p降低膀胱癌细胞存活率,减少克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数,降低MMP2、MMP9、XIAP蛋白表达。circPRMT5靶向负调控miR-98-5p的表达,抑制miR-98-5p可部分回复沉默circPRMT5对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及XIAP mRNA和蛋白表达的作用。结论circPRMT5靶向负调控miR-98-5p抑制膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 circprmt5 miR-98-5p 膀胱癌 增殖 迁移 侵袭
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结直肠癌患者血浆circPRMT5表达水平及临床意义 被引量：2
3
作者 王洪伟 王琳琳 +4 位作者 张翼飞 于永生 刘玉伟 李重 刘欣然 《中华结直肠疾病电子杂志》 2019年第4期390-394,共5页
目的探索结直肠癌患者血浆中circRNA分子的临床意义。方法收集结直肠癌患者与正常人群的血浆,通过基因芯片技术和PCR技术,寻找差异表达的circRNA分子,通过统计学分析探索差异circRNA分子与患者临床病理及预后之间的关系。结果在结直肠... 目的探索结直肠癌患者血浆中circRNA分子的临床意义。方法收集结直肠癌患者与正常人群的血浆,通过基因芯片技术和PCR技术,寻找差异表达的circRNA分子,通过统计学分析探索差异circRNA分子与患者临床病理及预后之间的关系。结果在结直肠癌患者血浆中,circPRMT5显著高表达。circPRMT5高表达患者中,肿瘤分期更晚,淋巴结转移数目更多,提示预后不良的病理因素也更多。高表达circPRMT5患者的总生存时间和无复发生存时间更短;经过单因素和多因素的COX回归分析发现circPRMT5的表达水平,是预测患者总生存和无复发生存的独立危险因素。结论 circPRMT5可能是判断结直肠癌患者预后新的血浆分子标志物。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 circprmt5 预后 淋巴结转移
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环状蛋白质精氨酸甲基转移酶5在结直肠癌细胞增殖、迁移中的作用和机制 被引量：3
4
作者 谢津璧 郭润生 +1 位作者 王善娟 张丽航 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期173-180,共8页
目的评估环状蛋白质精氨酸甲基转移酶5(circPRMT5)在结直肠癌发生、发展中的作用。方法收集2013年1月至2017年12月上海健康医学院附属嘉定区中心医院普外科行结直肠癌根治术患者96例。采用实时荧光定量PCR检测circPRMT5在结直肠癌组织... 目的评估环状蛋白质精氨酸甲基转移酶5(circPRMT5)在结直肠癌发生、发展中的作用。方法收集2013年1月至2017年12月上海健康医学院附属嘉定区中心医院普外科行结直肠癌根治术患者96例。采用实时荧光定量PCR检测circPRMT5在结直肠癌组织中的表达水平;分析circPRMT5表达水平与结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤最大径、肿瘤位置、病理分化、TNM分期、淋巴结转移等因素的相关性。将结直肠癌细胞株SW620和LOVO按不同的处理方式分为对照组、circPRMT5-lenti组和circPRMT5-shRNA-lenti组,检测circPRMT5表达水平对SW620和LOVO细胞活性、凋亡、线粒体膜电位、迁移的影响。采用蛋白质印迹法检测circPRMT5表达水平对上皮钙黏蛋白、Slug、神经钙黏蛋白和波形蛋白表达的影响。采用StarbaseV2.0软件预测circPRMT5的潜在靶miRNA。统计学分析采用Studentt检验、方差分析和卡方检验。结果实时荧光定量PCR结果显示,结直肠癌组织中circPRMT5表达水平高于癌旁组织(2.167±0.345比1.103±0.144),差异有统计学意义(t=26.847,P<0.01),其表达水平与肿瘤最大径、TNM分期、淋巴结转移和远处转移显著相关(χ^2=6.010、10.971、5.321、6.272,P均<0.05)。circPRMT5表达上调可以促进SW620和LOVO细胞的增殖和迁移;circPRMT5表达下调可以抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,且降低细胞线粒体膜电位。蛋白质印迹结果显示,与对照组相比,circPRMT5-lenti组Slug、神经钙黏蛋白和波形蛋白表达均升高(分别为1.023±0.038比2.105±0.042,1.051±0.309比2.277±0.111,1.055±0.040比2.002±0.537),上皮钙黏蛋白表达降低(2.074±0.214比0.627±0.023),差异均有统计学意义(t=31.817、22.065、14.536、9.148,P均<0.01);circPRMT5-shRNA-lenti组Slug、神经钙黏蛋白和波形蛋白表达均降低(1.023±0.038比0.585±0.023,1.051±0.309比0.616±0.043,1.055±0.040比0.537±0.022),上皮钙黏蛋白表达升高(2.074±0.214比2.756±0.148),差异均有统计学意义(t=-13.795、-14.252、-11.794、-13.116,P均<0.05)。StarbaseV2.0软件预测共有21个miRNA与circPRMT5存在潜在结合位点,并且实时荧光定量PCR检测证实SW620和LOVO细胞中miRNA4735-3p、miRNA202-3p、miRNA326、let-7i-5p、miRNA4500与circPRMT5表达水平呈负相关。结论circPRMT5是结直肠癌发生、发展中的重要促癌基因,在结直肠癌靶向药物研发中具有一定应用前景。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 环状RNA-PRMT5 上皮间质转化
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