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题名circMAN2B2对宫颈癌细胞顺铂敏感性的影响
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作者
蒙秋
谢兴润
张静
王海燕
黄守国
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机构
中南大学湘雅医学院附属海口医院妇产科
中南大学湘雅医学院附属海口医院放射科
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出处
《河北医药》
CAS
2021年第22期3376-3379,3384,共5页
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文摘
目的探讨circMAN2B2对宫颈癌细胞顺铂敏感性的影响及分子机制。方法采用顺铂梯度暴露法构建顺铂耐药宫颈癌细胞株HeLa/DDP,将其分为DDP+si-NC组、DDP+si-circMAN2B2组、DDP+si-circMAN2B2+anti-miR-NC组、DDP+si-circMAN2B2+anti-miR-216a-3p组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率及半数抑制浓度(IC50);实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circMAN2B2和miR-216a-3p的表达水平;双荧光素酶报告实验检测circMAN2B2和miR-216a-3p的靶向调控;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达。结果与HeLa细胞比较,HeLa/DDP细胞增殖抑制率显著降低,IC50值升高,circMAN2B2表达水平升高,miR-216a-3p表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。StarBase预测显示,circMAN2B2的序列中含有与miR-216a-3p互补的核苷酸序列。WT-circMAN2B2与miR-216a-3p共转染的细胞荧光素酶活性低于WT-circMAN2B2与miR-NC组共转染的细胞(P<0.05),而MUT-circMAN2B2与miR-216a-3p或miR-NC共转染的细胞荧光素酶活性比较差异无统计学意义。过表达circMAN2B2,miR-216a-3p表达水平降低(P<0.05),抑制circMAN2B2表达后miR-216a-3p表达水平升高(P<0.05)。与DDP+si-NC组比较,DDP+si-circMAN2B2组circMAN2B2表达水平降低,miR-216a-3p表达水平升高,细胞增殖抑制率升高,细胞凋亡率升高,Ki-67、Bcl-2表达水平降低,Bax表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与DDP+si-circMAN2B2+anti-miR-NC组比较,DDP+si-circMAN2B2+anti-miR-216a-3p组miR-216a-3p表达水平降低,细胞增殖抑制率降低,细胞凋亡率降低,Ki-67、Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制circMAN2B2表达可能通过上调miR-216a-3p增强宫颈癌细胞对顺铂的敏感性。
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关键词
circman2b2
miR-216a-3p
宫颈癌
顺铂
敏感性
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Keywords
circman2b2
miR-216a-3p
cervical cancer
cisplatin
sensitivity
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分类号
R737.33
[医药卫生—肿瘤]
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