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circHECTD1在脂多糖诱导巨噬细胞炎症反应中的N6-甲基腺苷依赖性调控机制
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作者 别恒杰 符亚红 +1 位作者 贾恩志 陶正贤 《实用心电与临床诊疗》 2025年第4期481-493,共13页
目的探讨环状RNA circHECTD1作为冠心病的潜在诊断标志物,在巨噬细胞极化过程中的调控作用及相关机制。方法采用脂多糖诱导的M1型巨噬细胞极化模型模拟低度炎症反应过程。通过实时荧光定量PCR检测circHECTD1及N6-甲基腺苷(N6-methyladen... 目的探讨环状RNA circHECTD1作为冠心病的潜在诊断标志物,在巨噬细胞极化过程中的调控作用及相关机制。方法采用脂多糖诱导的M1型巨噬细胞极化模型模拟低度炎症反应过程。通过实时荧光定量PCR检测circHECTD1及N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)调控因子的表达水平,并利用蛋白质印迹法检测M1表型标志蛋白和自噬相关蛋白的表达,采用流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果沉默circHECTD1可显著降低M1表型相关蛋白和炎症因子的表达,降低ROS水平并增强细胞自噬能力。在细胞模型及冠心病患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)样本中,多种m6A调控因子的表达呈紊乱状态。多种m6A甲基化调控因子在冠心病组与对照组间的表达水平差异有统计学意义,提示其在冠心病诊断中的潜在价值。单因素及多因素Logistic回归分析显示,m6A调控因子METTL3、METTL14、ALKBH5和YTHDC2与冠心病风险显著相关。进一步分析发现,在动脉粥样硬化晚期阶段,METTL14和ALKBH5表达显著上调。circHECTD1的表达水平与FTO、YTHDF3、ALKBH5、METTL3、METTL14和YTHDF2显著相关。体外实验结果表明,沉默METTL14和ALKBH5可显著下调circHECTD1的表达,提示METTL14和ALKBH5可正向调控circHECTD1表达。结论m6A调控因子的表达紊乱可能与冠心病的发生发展密切相关,其机制是通过调节circHECTD1的表达和功能参与疾病进程。 展开更多
关键词 冠心病 circhectd1 M1型巨噬细胞 N6-甲基腺苷
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