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circGFRA1靶向miR-3194-3p调控结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭
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作者 张荣菊 王汝月 +3 位作者 苗志刚 孙荣国 苗玉 周玮玮 《江苏大学学报(医学版)》 2026年第2期136-141,共6页
目的:探讨circGFRA1对结直肠癌细胞SW620增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法:采用qRT-PCR检测结直肠癌组织与癌旁组织、结直肠癌细胞SW620与人正常结肠上皮细胞NCM460中circGFRA1和miR-3194-3p的表达水平;体外培养SW620细胞并分... 目的:探讨circGFRA1对结直肠癌细胞SW620增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法:采用qRT-PCR检测结直肠癌组织与癌旁组织、结直肠癌细胞SW620与人正常结肠上皮细胞NCM460中circGFRA1和miR-3194-3p的表达水平;体外培养SW620细胞并分为6组:si-NC组、si-circGFRA1组、miR-NC组、miR-3194-3p组、si-circGFRA1+anti-miR-NC组、si-circGFRA1+anti-miR-3194-3p组(si-circGFRA1+anti-miR组)。应用CCK-8法、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证circGFRA1与miR-3194-3p的靶向关系;蛋白免疫印迹法检测MMP-2、MMP-9的蛋白表达量。结果:结直肠癌组织中circGFRA1表达水平显著高于癌旁组织(P<0.001),miR-3194-3p表达水平显著低于癌旁组织(P<0.001);SW620细胞中circGFRA1表达水平显著高于NCM460细胞(P<0.001),miR-3194-3p表达水平显著低于NCM460细胞(P<0.001)。与si-NC组相比,si-circGFRA1组细胞活力、克隆形成数、迁移及侵袭细胞数均显著降低(P<0.05),MMP-2、MMP-9蛋白表达量显著下调(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-3194-3p组上述指标变化趋势与si-circGFRA1组一致(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实circGFRA1可靶向结合miR-3194-3p。与si-circGFRA1+anti-miR-NC组相比,si-circGFRA1+anti-miR组细胞活力、克隆形成数、迁移及侵袭细胞数均显著升高(P<0.05),MMP-2、MMP-9蛋白表达量显著上调(P<0.05)。结论:circGFRA1在结直肠癌中高表达,通过靶向抑制miR-3194-3p表达,上调MMP-2、MMP-9蛋白水平,从而促进结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 结直肠癌 circgfra1 miR-3194-3p 增殖 迁移 侵袭 基质金属蛋白酶
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circGFRA1靶向miR-642a-5p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究 被引量:2
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作者 李生贵 潘正启 +2 位作者 叶铄 乔永杰 周胜虎 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2022年第7期1276-1284,共9页
该研究探讨了circGFRA1对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(SFs)增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制。收集了39例RA患者的滑膜组织和39例膝关节创伤且无其他关节异常病史患者的滑膜组织(正常滑膜组织),qRT-PCR法检测组织中circGFRA1和mi... 该研究探讨了circGFRA1对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(SFs)增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制。收集了39例RA患者的滑膜组织和39例膝关节创伤且无其他关节异常病史患者的滑膜组织(正常滑膜组织),qRT-PCR法检测组织中circGFRA1和miR-642a-5p表达情况。体外分离培养RASFs,分别转染circGFRA1小干扰RNA、miR-642a-5p模拟物,或共转染circGFRA1小干扰RNA与miR-642a-5p抑制剂后,CCK-8法、划痕实验、Transwell小室分别检测细胞增殖、迁移和侵袭;蛋白质印迹法检测细胞中Ki-67、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证circGFRA1和miR-642a-5p的调控关系。结果显示,RA患者滑膜组织中circGFRA1表达水平较正常滑膜组织显著升高(P<0.05),miR-642a-5p较正常滑膜组织显著降低(P<0.05);下调circGFRA1或上调miR-642a-5p后,RASFs细胞D值、划痕愈合率、侵袭数及细胞中Ki-67、N-cadherin蛋白表达均呈显著下降趋势(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05);circGFRA1在RASFs中靶向负调控miR-642a-5p;下调miR-642a-5p逆转了下调circGFRA1对RASFs增殖、迁移和侵袭的影响。综上,circGFRA1可能通过靶向下调miR-642a-5p促进类风湿性关节炎细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 circgfra1 miR-642a-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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circGFRA1靶向miR-138-5p调控宫颈癌SiHa细胞生物学行为 被引量:3
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作者 汤雪龄 刘柳 蒋沛月 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期514-519,共6页
目的探讨circGFRA1调控宫颈癌细胞生物学行为的分子机制。方法收集2020年3月至2020年7月浙江大学医学院附属妇产科医院收治的45例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织标本,采用qRT-PCR法检测circGFRA1与miR-138-5p的表达量。体外培养人宫颈... 目的探讨circGFRA1调控宫颈癌细胞生物学行为的分子机制。方法收集2020年3月至2020年7月浙江大学医学院附属妇产科医院收治的45例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织标本,采用qRT-PCR法检测circGFRA1与miR-138-5p的表达量。体外培养人宫颈癌SiHa细胞,随机分为si-NC组、si-circGFRA1组、si-circGFRA1+anti-miR-NC组、si-circGFRA1+anti-miR-138-5p组。采用双荧光素酶报告实验检测circGFRA1与miR-138-5p的靶向关系。检测和比较各组的细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力、细胞凋亡、Bax及Bcl-2蛋白表达量。结果宫颈癌组织中circGFRA1表达上调,miR-138-5p表达下调(均P<0.05)。circGFRA1可负向调控miR-138-5p的表达。转染si-circGFRA1可抑制增殖、克隆形成、迁移、侵袭,并促进细胞凋亡。共转染si-circGFRA1和anti-miR-138-5p可减弱si-circGFRA1对SiHa细胞生物学行为的作用。结论干扰circGFRA1表达可通过促进miR-138-5p表达而抑制宫颈癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌 circgfra1 miR-138-5p 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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circGFRA1调节miR-138-5p/ANXA2信号通路对胶质瘤细胞增殖、凋亡和侵袭的影响
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作者 凌鑫 金紫 +1 位作者 宋春春 张红娟 《中国临床神经科学》 2024年第2期130-138,共9页
目的探讨circGFRA1对胶质瘤细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,分析miR-138-5p/膜联蛋白A2(ANXA2)信号通路在其中发挥的作用。方法选取2020年1月至2022年1月河南省第二人民医院收治的72例脑胶质瘤患者以及72例行颅脑损伤内减压术的患者,分别... 目的探讨circGFRA1对胶质瘤细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,分析miR-138-5p/膜联蛋白A2(ANXA2)信号通路在其中发挥的作用。方法选取2020年1月至2022年1月河南省第二人民医院收治的72例脑胶质瘤患者以及72例行颅脑损伤内减压术的患者,分别取脑胶质瘤组织与脑正常组织,体外培养人神经星形胶质细胞株、人神经胶质瘤细胞(U251、CRT、HS683、H4),并将U251、H4细胞分为对照组、si-NC组、si-circGFRA1组、sicircGFRA1+inhibitor NC组、si-circGFRA1+miR-138-5p inhibitor组。用qRT-PCR法测定组织、细胞circGFRA1、miR-138-5p、ANXA2 mRNA水平;CCK-8法、流式细胞术、Transwell小室法分别测定U251、H4细胞吸光度(A450)值、凋亡率、侵袭细胞数目;双荧光素酶分析miR-138-5p和circGFRA1、ANXA2的靶向关系,Western blot法测定U251、H4细胞ANXA2蛋白表达。结果与对照组比较,胶质瘤组织circGFRA1、ANXA2 mRNA表达升高,miR-138-5p表达降低(均P<0.05);与人神经星形胶质细胞株比较,U251、CRT、HS683、H4细胞的circGFRA1和ANXA2 mRNA表达水平升高,miR-138-5p表达降低(均P<0.05);与对照组比较,si-circGFRA1组U251、H4细胞的circGFRA1、ANXA2 mRNA与蛋白表达水平、A450值、侵袭细胞数降低,miR-138-5p、凋亡率均升高(均P<0.05);与si-circGFRA1组比较,si-circGFRA1+miR-138-5p inhibitor组U251、H4细胞circGFRA1、ANXA2 mRNA和蛋白表达、A450值、侵袭细胞数升高,miR-138-5p、凋亡率降低(均P<0.05);miR-138-5p与circGFRA1、ANXA2均存在靶向关系;与mimics NC组比较,miR-138-5p mimics组U251、H4细胞ANXA2 mRNA和蛋白水平下降(均P<0.05)。结论沉默circGFRA1可能通过调控miR-138-5p/ANXA2信号通路抑制胶质瘤恶性进展。 展开更多
关键词 circgfra1 miR-138-5p 胶质瘤 增殖 凋亡 侵袭
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