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circCCDC138在炭黑纳米粒子诱导人肺上皮细胞早期恶性转化中的作用
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作者 李润锋 马丽纯 +1 位作者 覃舒琳 刘雯 《环境与职业医学》 北大核心 2025年第4期475-481,共7页
[背景]随着炭黑纳米粒子(CBNPs)的大规模生产和应用,职业和人群暴露呈明显上升趋势。相关研究表明,CBNPs暴露会诱导氧化应激、炎症和DNA损伤。[目的]构建CBNPs暴露诱导的人肺上皮细胞(BEAS-2B)恶性转化细胞(C-BEAS-2B)模型,探究circCCDC... [背景]随着炭黑纳米粒子(CBNPs)的大规模生产和应用,职业和人群暴露呈明显上升趋势。相关研究表明,CBNPs暴露会诱导氧化应激、炎症和DNA损伤。[目的]构建CBNPs暴露诱导的人肺上皮细胞(BEAS-2B)恶性转化细胞(C-BEAS-2B)模型,探究circCCDC138在CBNPs诱导BEAS-2B细胞恶性转化过程中的作用和机制。[方法]设置0、10、20、40、80μg·mL^(-1)CBNPs染毒剂量,采用CCK8试验检测细胞活力;将BEAS-2B细胞暴露于20 mg·mL^(-1)CBNPs 3个月,构建CBNPs诱导的BEAS-2B细胞恶性转化模型;采用细胞划痕和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;采用定量PCR检测BEAS-2B细胞和C-BEAS-2B细胞中circCCDC138的表达量,并通过消化抗性试验验证其稳定性;构建干扰、过表达circCCDC138的细胞模型,采用定量PCR检测细胞中circCCDC138的表达量,通过流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡情况;采用Western blot分析相关细胞中p53蛋白的表达量。[结果]电镜下CBNPs为球形颗粒,呈现链状结构。20μg·mL^(-1)CBNPs染毒条件下BEAS-2B活力的降低相对较小(10%)。与对照组细胞相比,20μg·mL^(-1)CBNPs暴露组在24 h、48 h表现出更明显的细胞迁移和侵袭能力,表明CBNPs暴露诱导了BEAS-2B细胞早期恶性转化(P<0.01)。测定暴露于CBNPs后0、7、15、30 d的C-BEAS-2B中circCCDC138的表达量,提示circCCDC138上调且呈时间依赖性增加。与C-BEAS-2B细胞相比,过表达circCCDC138的CBEAS-2B细胞表现出S期进展受阻(36.9%)与凋亡抗性增加(P<0.01),同时细胞中p53蛋白表达下调(P<0.01),而干扰circCCDC138的C-BEAS-2B细胞则出现相反的结果(P<0.01)。[结论]持续暴露于CBNPs(20μg·mL^(-1))的BEAS-2B细胞具有显著增强的迁移和侵袭能力,表现出早期恶性转化特性。circCCDC138在C-BEAS-2B细胞中呈高表达,具有RNase R消化抗性,并随CBNPs暴露呈时间依赖性增加且可能通过抑制p53蛋白表达来促进细胞恶性转化。 展开更多
关键词 炭黑纳米粒子 BEAS-2B circccdc138 P53
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