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沉默circAMOTL1对结直肠癌Caco-2细胞生物学行为影响的体外实验研究
1
作者 于曦 王楠 +1 位作者 金飞 支宇 《联勤军事医学》 CAS 2023年第2期89-95,共7页
目的探讨沉默circAMOTL1对结直肠癌细胞生物学行为的影响及其可能机制。方法实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测结直肠癌组织与癌旁组织中circAMOTL... 目的探讨沉默circAMOTL1对结直肠癌细胞生物学行为的影响及其可能机制。方法实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测结直肠癌组织与癌旁组织中circAMOTL1、miR-296-5p的表达量。Pearson相关分析探讨结直肠癌组织中circAMOTL1、miR-296-5p表达量的相关性。体外培养人结直肠癌细胞Caco-2,sh-NC、sh-circAMOTL1、miR-NC、miR-296-5p mimic分别转染至Caco-2细胞(sh-NC组、sh-circAMOTL1组、miR-NC组、miR-296-5p mimic组),sh-circAMOTL1与miR-296-5p inhibor共转染至Caco-2细胞(sh-circAMOTL1+miR-296-5p inhibor组)。流式细胞术、Transwell实验、Western blot法分别检测细胞凋亡、迁移及侵袭、Cleaved-caspase 3蛋白表达。双荧光素酶报告实验检测circAMOTL1和miR-296-5p靶向调控作用。结果结直肠癌组织中circAMOTL1表达量高于癌旁组织(2.79±0.30 vs.0.89±0.15,P<0.05),miR-296-5p表达量低于癌旁组织(0.42±0.09 vs.1.12±0.14,P<0.05)。circAMOTL1与miR-296-5p呈负相关(r=-0.8125,P<0.0001)。转染sh-circAMOTL1或miR-296-5p mimic后,迁移及侵袭细胞数减少(P均<0.05),细胞凋亡率、Cleaved-caspase 3蛋白水平升高(P均<0.05)。circAMOTL1可靶向调控miR-296-5p的表达。共转染sh-circAMOTL1和miR-296-5p inhibor后,迁移及侵袭细胞数增多(P均<0.05),细胞凋亡率、Cleaved-caspase 3蛋白水平降低(P均<0.05)。结论沉默circAMOTL1可通过靶向调控miR-296-5p表达而抑制结直肠癌细胞迁移、侵袭及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 结直肠癌 circamotl1 miR-296-5p 迁移 侵袭 凋亡
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circAMOTL1靶向调控miR-379-5p对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响
2
作者 周毛仔 陈怡 周进军 《河北医药》 CAS 2023年第10期1474-1478,共5页
目的探讨circAMOTL1靶向调控miR-379-5p对宫颈癌细胞的增殖和凋亡的影响。方法采用qRT-PCR检测宫颈癌组织和细胞内circAMOTL1和miR-365b-3p的表达量。选择Caski细胞为研究对象,将细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-circAMOTL1组(转染si-ci... 目的探讨circAMOTL1靶向调控miR-379-5p对宫颈癌细胞的增殖和凋亡的影响。方法采用qRT-PCR检测宫颈癌组织和细胞内circAMOTL1和miR-365b-3p的表达量。选择Caski细胞为研究对象,将细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-circAMOTL1组(转染si-circAMOTL1)、si-circAMOTL1+anti-miR-NC组(共转染si-circAMOTL1和anti-miR-NC)、si-circAMOTL1+anti-miR-379-5p组(共转染si-circAMOTL1和anti-miR-379-5p)。采用qRT-PCR检测circAMOTL1和miR-379-5p的表达量;MT t检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Western blo t检测CyclinD1、Ki67、Bax、Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circAMOTL1和miR-379-5p的靶向关系。结果与癌旁组织和正常宫颈上皮细胞End1/E6E7相比,circAMOTL1在宫颈癌组织和宫颈癌细胞SiHa、Caski、HeLa、C33a中表达量明显增加,miR-379-5p表达量明显降低(P<0.05);敲低circAMOTL1能降低Caski细胞内OD值、S期细胞比例,增加G0/G1期细胞比例、凋亡率,CyclinD1、Ki67、Bcl-2蛋白表达明降低,Bax蛋白表达明显增加(P<0.05)。circAMOTL1靶向负调控miR-379-5p的表达,抑制miR-379-5p能部分回复敲低circAMOTL1对宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的作用。结论circAMOTL1通过靶向负调控miR-379-5p的表达有效抑制宫颈癌细胞增殖和诱导细胞的凋亡,并阻滞细胞周期。 展开更多
关键词 circamotl1 miR-379-5p 宫颈癌细胞 增殖 凋亡
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肝癌细胞系中circAMOTL1的表达及对肝前体细胞增殖和恶性转化的影响
3
作者 朱恺 李江伟 +4 位作者 刘蓉蓉 王茜 冯俊侨 李韧 李宗芳 《西部医学》 2024年第11期1565-1570,共6页
目的探讨环状RNA circAMOTL1在肝癌细胞系中的表达及其对肝前体细胞(HPCs)系WB-F344的增殖迁移及恶性转化的影响。方法通过实时荧光定量PCR检测circAMOTL1在5种肝癌细胞系和正常肝细胞系L-02以及HPCs系WB-F344中的表达;同时构建过表达... 目的探讨环状RNA circAMOTL1在肝癌细胞系中的表达及其对肝前体细胞(HPCs)系WB-F344的增殖迁移及恶性转化的影响。方法通过实时荧光定量PCR检测circAMOTL1在5种肝癌细胞系和正常肝细胞系L-02以及HPCs系WB-F344中的表达;同时构建过表达和敲除circAMOTL1的WB-F344的细胞系;通过CCK-8实验检测过表达或敲除cAMOTL1后HPCs的增殖变化;细胞划痕实验验证细胞迁移的变化;通过蛋白免疫印迹实验验证过表达或敲除circAMOTL1后对肝癌干细胞(LCSCs)标志物CD133的表达影响。结果5种肝癌细胞系中circAMOTL1的表达水平均高于L-02(P<0.05);过表达circAMOTL1后HPCs的增殖能力显著提高(P<0.01),敲除circAMOTL1后细胞的增殖能力显著下降(P<0.001);过表达circAMOTL1后显著提升了细胞的迁移能力(P<0.01),敲除后细胞的迁移能力明显下降(P<0.01);过表达circAMOTL1后可以检测到CD133的表达。结论circAMOTL1在5种肝癌细胞系中高表达,过表达circAMOTL1可以促进HPCs的增殖和迁移能力,诱导其向LCSCs方向恶性转化。 展开更多
关键词 环状AMOTL1 肝前体细胞 肝癌干细胞 增殖 恶性转化
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