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circADAMTS16的表达谱分析及其对牛脂肪细胞分化的影响 被引量：4
1
作者 户春丽 雷召雄 +4 位作者 汪书哲 盛辉 高玉红 马燕芬 马云 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期208-217,共10页
旨在探究circADAMTS16在牛不同组织和前体脂肪细胞中的表达水平及其对牛脂肪细胞分化的影响,为进一步研究circRNA在细胞分化和脂肪组织发育过程中的调控作用提供依据。采用组织块法分离培养牛原代前体脂肪细胞并诱导分化,模拟牛脂肪组... 旨在探究circADAMTS16在牛不同组织和前体脂肪细胞中的表达水平及其对牛脂肪细胞分化的影响,为进一步研究circRNA在细胞分化和脂肪组织发育过程中的调控作用提供依据。采用组织块法分离培养牛原代前体脂肪细胞并诱导分化,模拟牛脂肪组织生长发育过程;通过qRT-PCR检测circADAMTS16在牛不同组织(心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪)和脂肪细胞分化不同阶段(0 d、2 d、4 d、8 d、10 d)的表达水平;构建circADAMTS16的过表达载体(pCD2.1-circADAMTS16),设计合成circADAMTS16的小干扰RNA(si-circADAMTS16),采用(Lipofectamine3000)转染试剂将pCD2.1-circADAMTS16和si-circADAMTS16转染牛前体脂肪细胞,利用qRT-PCR法检测转染效果,同时检测脂肪分化标志基因PPARγ、C/EBPα和C/EBPβ的表达量变化,并进行油红O染色,综合分析干扰和过表达circADAMTS16对牛脂肪细胞分化的影响。结果如下:(1)qRT-PCR检测结果表明circADAMTS16在心脏中表达量最高,肝脏次之,脾最低;(2)在牛原代前体脂肪细胞分化过程中,circADAMTS16在第2天显著高表达,随后逐渐降低,在第8天时达到最低。(3)在牛前体脂肪细胞中过表达circADAMTST16后,脂肪分化标志基因PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ的表达量显著下降;油红O染色结果显示,过表达后脂滴形成数量明显少于对照组;而干扰circADAMTS16表达后,脂肪分化标志基因PPARγ和C/EBPα表达量显著上升。综上所述,circADAMTS16对牛原代前体脂肪细胞的分化过程具有显著的调控作用,过表达circADAMTST16可抑制牛原代前体脂肪细胞分化进程,而干扰circADAMTS16表达可以促进牛原代前体脂肪细胞分化进程,探明circADAMTS16对牛原代前体脂肪细胞分化的具体调控作用。 展开更多
关键词 牛 circadamts16 脂肪细胞 载体构建 过表达
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