目的优化补料培养基中20种氨基酸组分,提高抗体表达量。方法采用JMP Pro 18软件中确定性筛选设计(DSD)方法优化补料培养基中20种氨基酸组分,通过预测刻画器与意愿函数分析,同时结合蒙特卡洛模拟技术,确定最大化意愿氨基酸组合和最优氨...目的优化补料培养基中20种氨基酸组分,提高抗体表达量。方法采用JMP Pro 18软件中确定性筛选设计(DSD)方法优化补料培养基中20种氨基酸组分,通过预测刻画器与意愿函数分析,同时结合蒙特卡洛模拟技术,确定最大化意愿氨基酸组合和最优氨基酸组合,最终通过稳健性验证确定最佳氨基酸配比。结果通过使用优化后的补料培养基,CHO-S细胞株单克隆抗体表达量显著提升23.5%。此外,将优化后的补料培养基应用于CHO-K1细胞株时,抗体表达量也实现7.4%的提升。结论本研究将统计实验设计与计算模拟技术相结合,不仅为培养基优化构建“组分-响应”关系的数学模型,更形成包含预测建模、稳健性验证及跨细胞系验证的系统性方法,为生物制药行业细胞培养基开发及培养工艺开发提供重要参考。展开更多
Xi Jinping,general secretary of the Communist Party of China(CPC)Central Committee,Chinese president and chairman of the Central Military Commission,received a visit from Panchen Erdeni Chos-kyi rGyal-po at Zhongnanha...Xi Jinping,general secretary of the Communist Party of China(CPC)Central Committee,Chinese president and chairman of the Central Military Commission,received a visit from Panchen Erdeni Chos-kyi rGyal-po at Zhongnanhai in Beijing on June 6.展开更多
文摘为了建立基于全柱成像毛细管等电聚焦电泳(capillary isoelectric focusing,cIEF)技术的重组呼吸道合胞病毒蛋白疫苗(CHO细胞)原液抗原等电点(isoelectric point,pI)检测方法,完善疫苗质量控制体系,本研究根据抗原结构特性,采用变性剂RapiGest SF及还原剂二硫苏糖醇对蛋白进行前处理,确保其稳定单体化。通过优化蛋白助溶剂种类、添加比例及供试品上样量等关键参数,建立高效、稳定的cIEF检测方法,并对其主要验证参数和耐用性进行评价。优化后检测条件为使用含34%SimpleSol Protein Solubilizer、0.35%甲基纤维素(methylcellulose,MC)、4%两性电解质及1%等电点标记物混合溶液的样品缓冲液,聚焦程序设定为:1500 V 1 min,3000 V 7 min。采用该方法分析重组呼吸道合胞病毒蛋白疫苗(CHO细胞)原液抗原等电点,可得到峰型清楚且分离度高的图谱。本研究成功建立了适用于重组呼吸道合胞病毒蛋白疫苗(CHO细胞)原液抗原pI检测的cIEF方法。该方法可为该疫苗的分子表征及生产过程中的质量控制提供可靠的技术支持,并为同类重组蛋白疫苗的研发与标准化分析提供参考依据。
文摘目的优化补料培养基中20种氨基酸组分,提高抗体表达量。方法采用JMP Pro 18软件中确定性筛选设计(DSD)方法优化补料培养基中20种氨基酸组分,通过预测刻画器与意愿函数分析,同时结合蒙特卡洛模拟技术,确定最大化意愿氨基酸组合和最优氨基酸组合,最终通过稳健性验证确定最佳氨基酸配比。结果通过使用优化后的补料培养基,CHO-S细胞株单克隆抗体表达量显著提升23.5%。此外,将优化后的补料培养基应用于CHO-K1细胞株时,抗体表达量也实现7.4%的提升。结论本研究将统计实验设计与计算模拟技术相结合,不仅为培养基优化构建“组分-响应”关系的数学模型,更形成包含预测建模、稳健性验证及跨细胞系验证的系统性方法,为生物制药行业细胞培养基开发及培养工艺开发提供重要参考。
文摘Xi Jinping,general secretary of the Communist Party of China(CPC)Central Committee,Chinese president and chairman of the Central Military Commission,received a visit from Panchen Erdeni Chos-kyi rGyal-po at Zhongnanhai in Beijing on June 6.
