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古菌分子伴侣素的研究进展
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作者 张雨菲 高乐 《长春理工大学学报(自然科学版)》 2025年第4期68-81,共14页
分子伴侣素(热休克蛋白60,Hsp60)是一类进化上高度保守的蛋白质,帮助细胞在极端温度、渗透压、pH等胁迫条件下存活。许多古菌基因组编码多个分子伴侣素基因。以超嗜热古菌Thermococcus kodakarensis(最适生长温度85℃)为例,其基因组包... 分子伴侣素(热休克蛋白60,Hsp60)是一类进化上高度保守的蛋白质,帮助细胞在极端温度、渗透压、pH等胁迫条件下存活。许多古菌基因组编码多个分子伴侣素基因。以超嗜热古菌Thermococcus kodakarensis(最适生长温度85℃)为例,其基因组包含冷诱导型伴侣素CpkA和热诱导型伴侣素CpkB。尽管两者氨基酸序列一致性高达77%,但其羧基末端存在显著差异。基因敲除实验证明:缺失cpkA的菌株在冷胁迫(60℃)下生长严重受阻,缺失cpkB的菌株在热胁迫(93℃)下生长严重受阻,但在最适温度下均生长正常。这表明CpkA和CpkB分别是适应低温和高温胁迫所必需的。免疫沉淀研究显示,CpkA和CpkB识别不同类型的底物蛋白,即具有不同的底物谱。类似地,其他极端嗜极古菌的旁系同源伴侣素基因,在应对热、冷、高盐、pH波动等不同胁迫时呈现差异表达。这表明这些伴侣素可能被特异性地招募来处理特定胁迫下产生的错误折叠蛋白。这些额外的分子伴侣素基因很可能是为了应对特定选择压力而进化产生的,在这些压力下,组成型表达的伴侣素无法提供充分保护。综上所述,拥有多个功能特化的分子伴侣素基因对古菌在各种胁迫条件下维持蛋白质稳态和生存至关重要。 展开更多
关键词 分子伴侣素 蛋白质折叠 温度适应性 底物特异性 分子伴侣素复合物
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皱纹盘鲍伴侣蛋白CCTζ的分子克隆及其在不同锌含量日粮处理下的表达分析(英文) 被引量:1
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作者 吴成龙 张文兵 +3 位作者 麦康森 张易祥 高俊娥 叶金云 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期393-402,共10页
伴侣蛋白CCT在蛋白折叠、抗胁迫以及调节细胞生长等生理过程中担负重要作用。研究利用同源克隆和RACE技术克隆了皱纹盘鲍伴侣蛋白CCTζ(HdhCCTζ)cDNA全长序列,并对CCTζ基因的序列特征进行了分析。HdhCCTζcDNA序列长1960 bp,开放阅读... 伴侣蛋白CCT在蛋白折叠、抗胁迫以及调节细胞生长等生理过程中担负重要作用。研究利用同源克隆和RACE技术克隆了皱纹盘鲍伴侣蛋白CCTζ(HdhCCTζ)cDNA全长序列,并对CCTζ基因的序列特征进行了分析。HdhCCTζcDNA序列长1960 bp,开放阅读框为1599 bp,编码532个氨基酸,生物学软件推测其编码蛋白相对分子量为58.46 kD,等电点为6.53。BLAST分析结果表明HdhCCTζ与哺乳动物、鸟和鱼类等物种的CCT具有较高的同源性。生物信息学分析结果显示,HdhCCTζ蛋白序列中包含3个典型的CCT信号基序(35RTNLGPKGTLKML47,56LTKDGNVLLHEMQIQHP72和84QDDITGDGT92)以及1个腺苷三磷酸结合基序(89GDGTTS94)。此外,在HdhCCTζ蛋白序列中还包含3个糖基化位点(23NISA26,128NKSL131and234NVSL237)。实时荧光定量PCR检测结果显示,HdhCCTζ在皱纹盘鲍组织中为组成型表达,但主要集中在性腺、血淋巴和肝胰腺中表达。使用不同锌含量(6.69 mg/kg、33.85 mg/kg、710.63 mg/kg和3462.5 mg/kg)的日粮来饲喂幼鲍20周后,取其肝脏和血细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR技术进行HdhCCTζmRNA的表达水平分析。分析结果显示,随着日粮中锌含量的增加,HdhCCTζmRNA在血淋巴和肝胰腺中的表达水平呈现上调的趋势。相比于锌适量组(33.85 mg/kg),过量的锌(3462.5 mg/kg)却能够下调HdhCCTζmRNA的表达水平。上述结果表明,HdhCCTζ的表达受到日粮中锌添加量的影响,而高表达量的HdhCCTζ可能在提高皱纹盘鲍机体抗胁迫过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 伴侣蛋白CCT 皱纹盘鲍 CDNA克隆 MRNA表达
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S100A9与CCTγ在胆管癌中的表达及其意义 被引量:2
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作者 詹茜 沈柏用 +5 位作者 施源 邓侠兴 祝哲诚 陈皓 彭承宏 李宏为 《外科理论与实践》 2011年第6期557-561,共5页
目的:研究S100钙结合蛋白A9(S100 calcium-binding protein A9,S100A9)与T细胞受体伴侣蛋白1,亚基3(chaperonin containing T-complex protein 1,subunit 3,CCTγ)作为潜在的生物标志物对胆管癌的诊断意义。方法:利用组织芯片技术对40... 目的:研究S100钙结合蛋白A9(S100 calcium-binding protein A9,S100A9)与T细胞受体伴侣蛋白1,亚基3(chaperonin containing T-complex protein 1,subunit 3,CCTγ)作为潜在的生物标志物对胆管癌的诊断意义。方法:利用组织芯片技术对40例胆管癌组织和10例非肿瘤组织的S100A9与CCTγ表达情况做对比分析。阳性结果分为4级,*1、1、2和3级分别代表弱阳性、轻度阳性、中度阳性和强阳性。结果:S100A9在非肿瘤肝组织内无表达或低表达(7例无表达,3例低表达)。在胆管癌病人中,40例中有37例染色阳性。胆管癌病人阳性表达水平为(0.48±0.35),明显高于非肿瘤对照组(0.05±0.1)(P<0.001)。CCTγ也在非肿瘤肝组织中呈现低表达,胆管癌病人的阳性表达水平为(0.72±0.18),显著高于非肿瘤对照组(0.43±0.22)(P<0.001)。S100A9和CCTγ的ROC曲线下面积分别是0.894(95%CI为0.825~0.962)和0.860(95%CI为0.779~0.942)。结论:S100A9和CCTγ对胆管癌的诊断具有一定价值。对于血清S100A9和CCTγ的进一步研究可发现对胆管癌有诊断意义的肿瘤标志物。 展开更多
关键词 胆管癌 肿瘤标志物 S100A9 CCTγ 组织芯片
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青杄分子伴侣PwTCP-1基因的克隆及表达分析
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作者 孙帆 李长江 +1 位作者 崔晓燕 张凌云 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期29-36,共8页
分子伴侣TCP-1在调节植物生长发育过程中具有重要作用,但在林木生长发育及对非生物逆境胁迫响应机制方面的研究较少。从青杄c DNA文库中筛选出1个分子伴侣PwTCP-1(T-complex polypeptide 1)片段,通过RACE-PCR技术获得PwTCP-1的末端序列... 分子伴侣TCP-1在调节植物生长发育过程中具有重要作用,但在林木生长发育及对非生物逆境胁迫响应机制方面的研究较少。从青杄c DNA文库中筛选出1个分子伴侣PwTCP-1(T-complex polypeptide 1)片段,通过RACE-PCR技术获得PwTCP-1的末端序列,经过与EST序列拼接,获得PwTCP-1c DNA全长序列。使用clustalx、Mega5.0、DNAMAN和Expasy等工具对PwTCP-1的理化性质、二级结构和三级结构进行生物信息学分析。结果显示,PwTCP-1c DNA全长为2024 bp,开放阅读框1 605 bp,编码534个氨基酸残基的蛋白质,其理论分子质量为59.2k Da,理论等电点为6.12,富含α-螺旋。通过RT-q PCR技术检测了PwTCP-1组织特异性表达、激素响应模式及在种子萌发过程中表达量变化。结果表明:PwTCP-1在青杄各个组织中均有表达,在花粉中表达量最高,在茎中表达量最低;PwTCP-1表达量随着种子萌发先上升,在第4天达到最高,之后缓慢下降。PwTCP-1能响应多种激素处理。油菜素内酯(brassinolide,BR)和赤霉素(gibberellin,GA)分别处理后,PwTCP-1的表达量均显著降低,而茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,Me JA)处理后该基因表达量极显著升高。这些结果显示,PwTCP-1可能参与植物种子萌发过程并响应了多种激素反应过程。 展开更多
关键词 青杄 分子伴侣 PwTCP-1 表达分析 植物激素
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CCT在大鼠关节纤维化中的表达及其意义 被引量:1
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作者 易小友 何容涵 +3 位作者 廖瑛扬 王哲 江诗海 王昆 《新医学》 2018年第7期472-477,共6页
目的探讨含t复合多肽伴侣素亚基(CCT)在大鼠关节纤维化中的表达及其意义。方法取12只成年SD大鼠(雌性)的右下肢为固定组,左下肢为对照组,固定组建立大鼠关节纤维化模型,检测2组关节活动度以及成纤维细胞的迁移能力与增殖活力,用蛋白免... 目的探讨含t复合多肽伴侣素亚基(CCT)在大鼠关节纤维化中的表达及其意义。方法取12只成年SD大鼠(雌性)的右下肢为固定组,左下肢为对照组,固定组建立大鼠关节纤维化模型,检测2组关节活动度以及成纤维细胞的迁移能力与增殖活力,用蛋白免疫印迹法、实时荧光定量PCR法检测2组细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-1)以及CCT家族各亚基的蛋白和基因表达情况。结果与对照组比较,固定组关节活动度较低,细胞迁移能力和增殖活力较强,细胞α-SMA、COL-1蛋白和基因的表达量较高,CCT-6b蛋白和基因表达均较低,CCT-1、CCT-2、CCT-4、CCT-6a、CCT-7蛋白表达较高,CCT-1、CCT-2、CCT-4、CCT-6a基因表达较高(P均<0.05)。结论 CCT可能参与了关节纤维化的发生,其中CCT-6b亚基表达的下调提示其可能具有抗纤维化的作用。 展开更多
关键词 含t复合多肽伴侣素亚基 纤维化 成纤维细胞
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