期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
chTLR3在传染性法氏囊病病毒感染中的作用及gga-miR-6655-5p对其调控的分子机制 被引量：5
1
作者 欧阳伟 钱晶 +5 位作者 王晶宇 夏兴霞 潘群兴 王晓丽 诸玉梅 王永山 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期215-222,233,共9页
为了探讨鸡Toll样受体3(chicken toll-like receptor 3,chTLR3)在传染性法氏囊病病毒(infectious bursal dis-ease virus,IBDV)感染中的作用及microRNA(miRNA)对其调控的分子机制,本研究用IBDV感染DF-1细胞,qRT-PCR和Western blot分析表... 为了探讨鸡Toll样受体3(chicken toll-like receptor 3,chTLR3)在传染性法氏囊病病毒(infectious bursal dis-ease virus,IBDV)感染中的作用及microRNA(miRNA)对其调控的分子机制,本研究用IBDV感染DF-1细胞,qRT-PCR和Western blot分析表明IBDV感染可使DF-1细胞中chTLR3的表达水平显著升高。chTLR3激活表达后可抑制IBDV的复制,进一步分析其机理发现,chTLR3表达上调可激活IFN-β启动子和抗病毒天然免疫基因Mx启动子的活性及NF-κB和IRF-7信号通路。用生物信息学方法和双荧光素酶报告系统分析发现gga-miR-6655-5p可作用于chTLR3的3′UTR;qRT-PCR和Western blot分析表明gga-miR-6655-5p可以使chTLR3的蛋白水平表达降低,但mRNA水平没有变化。本研究表明:gga-miR-6655-5p可以作用于chTLR3的3′UTR负调控chTLR3的表达,抑制IFN-β启动子和Mx启动子活性,使IBDV在细胞中的复制水平提高。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病 传染性法氏囊病病毒 gga-miR-6655-5p chtlr3 抗病毒天然免疫
原文传递
感染传染性法氏囊病病毒的DF-1细胞中chTLR3表达的动态变化 被引量：3
2
作者 王成成 王杲强 +3 位作者 葛铭 于群 潘龙 张瑞莉 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1304-1308,共5页
为研究鸡Toll样受体3(chTLR3)基因在传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染DF-1细胞过程中的表达情况,用3种不同毒力的IBDV感染DF-1细胞,采用实时荧光定量PCR法以及间接免疫荧光法对细胞内chTLR3基因的表达情况进行了检测。结果显示,DF-1细胞感... 为研究鸡Toll样受体3(chTLR3)基因在传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染DF-1细胞过程中的表达情况,用3种不同毒力的IBDV感染DF-1细胞,采用实时荧光定量PCR法以及间接免疫荧光法对细胞内chTLR3基因的表达情况进行了检测。结果显示,DF-1细胞感染IBDV标准株后,其chTLR3mRNA的表达量呈增长趋势,感染后第48小时mRNA表达量达到峰值(P<0.01),之后逐渐下降;DF-1细胞分别感染IBDV弱毒疫苗株与分离株后,其chTLR3mRNA表达量均出现先上升后下降的趋势,但其表达量低于标准株(P<0.01)。采用间接免疫荧光法检测的chTLR3蛋白的表达变化规律与其基因的表达变化规律相同。结果证实,chTLR3参与IBDV感染DF-1细胞的过程;IBDV的毒力可影响chTLR3的表达。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 chtlr3基因 DF-1细胞
原文传递
抗chTLR3单克隆抗体制备及其初步应用 被引量：4
3
作者 唐泽群 罗海燕 +3 位作者 葛铭 郭荣 许丹蕾 张瑞莉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1292-1300,共9页
Toll样受体3(TLR3)是激发机体天然免疫的模式识别受体,为了制备能与天然结构的鸡TLR3(chTLR3)蛋白结合的单克隆抗体,将前期构建的可以在细胞内表达的真核重组质粒pVAX1-Igk-chTLR3免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗chTLR3单克隆抗体... Toll样受体3(TLR3)是激发机体天然免疫的模式识别受体,为了制备能与天然结构的鸡TLR3(chTLR3)蛋白结合的单克隆抗体,将前期构建的可以在细胞内表达的真核重组质粒pVAX1-Igk-chTLR3免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗chTLR3单克隆抗体;并应用该抗体采用Western blot、流式细胞术及间接免疫荧光技术检测镉中毒雏鸡外周血淋巴细胞与脾内chTLR3的表达变化。结果发现,获得1株阳性杂交瘤细胞,该细胞株单个细胞染色体数量为(94±2)条,细胞上清效价为1∶25,抗体亚类鉴定为IgG3,细胞上清能够与原核表达的chTLR3胞外区蛋白及鸡外周血淋巴细胞中的chTLR3特异性结合。应用此抗体采用Western blot、流式细胞术及间接免疫荧光技术均能够在对照组和染镉组雏鸡外周血淋巴细胞及脾内检测到chTLR3的蛋白表达。结果表明,成功制备了具有天然活性的chTLR3单克隆抗体,该抗体可用于Western blot、间接免疫荧光技术及流式细胞术研究chTLR3在鸡组织细胞的分布定位、表达变化,为示踪chTLR3蛋白分布、表达及研究其在鸡发病机制中的作用提供了重要的物质基础。 展开更多
关键词 chtlr3 单克隆抗体 WESTERN BLOT 间接免疫荧光 流式细胞术
在线阅读 下载PDF
鸡TLR3胞外区基因克隆、表达及多克隆抗体的制备 被引量：2
4
作者 王杲强 葛铭 +2 位作者 于群 李广兴 张瑞莉 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第2期114-117,共4页
为了研究Toll样受体3(chTLR3)在病毒感染过程中的作用,试验采用RT-PCR技术从雏鸡法氏囊组织中扩增chTLR3胞外区部分基因片段(大小为1 317 bp),将其克隆于表达载体pET30a(+)中,经酶切鉴定后转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,然后进行I... 为了研究Toll样受体3(chTLR3)在病毒感染过程中的作用,试验采用RT-PCR技术从雏鸡法氏囊组织中扩增chTLR3胞外区部分基因片段(大小为1 317 bp),将其克隆于表达载体pET30a(+)中,经酶切鉴定后转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,然后进行IPTG诱导表达;用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,获得抗血清;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹(Western-blot)及体外瞬时转染方法进行检测。结果表明:该基因片段得到较高表达,融合蛋白的分子质量约为55.8 ku,主要以包涵体形式存在,试验制备的兔抗chTLR3抗血清效价在1∶32 768以上,具有良好的免疫反应特性。 展开更多
关键词 鸡Toll样受体3(chtlr3) 基因表达 多克隆抗体
原文传递
IBDV感染SPF雏鸡法氏囊中TLR3表达的动态变化 被引量：3
5
作者 赵霞 张瑞莉 +3 位作者 王海彬 姜岩 栾亚男 葛铭 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期168-170,286,共4页
为了研究鸡Toll样受体3(ch TLR3)基因在传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染的雏鸡法氏囊内的表达情况,试验用IBDV感染14日龄SPF雏鸡,采用荧光定量PCR技术及间接免疫荧光技术检测法氏囊中TLR3基因及蛋白的表达情况。结果表明:感染组雏鸡法氏囊... 为了研究鸡Toll样受体3(ch TLR3)基因在传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染的雏鸡法氏囊内的表达情况,试验用IBDV感染14日龄SPF雏鸡,采用荧光定量PCR技术及间接免疫荧光技术检测法氏囊中TLR3基因及蛋白的表达情况。结果表明:感染组雏鸡法氏囊中TLR3 mRNA及蛋白表达均呈先升高后降低的趋势。说明TLR3参与雏鸡抵抗IBDV入侵的过程。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒(IBDV) 鸡Toll样受体3 SPF雏鸡 法氏囊 基因 蛋白
原文传递
鸡Toll样受体3胞外区片段的克隆表达及多克隆抗体的制备
6
作者 何秀苗 甘珊珊 +1 位作者 禤金彩 韦平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期591-595,共5页
以笔者所在课题组扩增测序的广西三黄鸡Toll样受体3(TLR3)基因为基础,采用降落PCR法从鸡外周血淋巴细胞中扩增其胞外功能区片段chTLR3-LRR,并构建该片段的原核表达重组质粒,通过优化蛋白表达条件,用获得的融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多... 以笔者所在课题组扩增测序的广西三黄鸡Toll样受体3(TLR3)基因为基础,采用降落PCR法从鸡外周血淋巴细胞中扩增其胞外功能区片段chTLR3-LRR,并构建该片段的原核表达重组质粒,通过优化蛋白表达条件,用获得的融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,通过Western-blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果显示,该片段长度为834bp,与预测的片段大小、碱基序列相符;构建的原核表达重组质粒pET-chTLR3-LRR经IPTG诱导后,表达出预期的30ku的重组蛋白,所获得的鼠抗鸡TLR3多克隆抗体能够与经传染性法氏囊炎病毒(IBDV)刺激后的鸡胚成纤维细胞的TLR3蛋白发生特异性免疫反应。表明,所选择的区域片段具有很好的免疫原性,制备的鼠抗鸡TLR3多抗具有良好的特异性,这为进一步研究鸡TLR3的功能提供了重要材料。 展开更多
关键词 鸡TLR3 胞外功能区预测 原核表达 多克隆抗体
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部