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康宁木霉K801纤维素酶cbh2基因的克隆及序列分析 被引量:15
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作者 祝令香 于巍 +1 位作者 梁改琴 董志扬 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2001年第2期174-177,共4页
通过聚合酶链式反应(PCR)技术扩增得到纤维素高产菌株康宁木霉Trichoderma k■ningii K801纤维二糖水解酶(CBHII)基因全序列,并克隆到pGEM-Teasy Vector。序列分析表明,所克隆的cbh2基因长1611bp,包含了纤维二糖水解酶基因的完... 通过聚合酶链式反应(PCR)技术扩增得到纤维素高产菌株康宁木霉Trichoderma k■ningii K801纤维二糖水解酶(CBHII)基因全序列,并克隆到pGEM-Teasy Vector。序列分析表明,所克隆的cbh2基因长1611bp,包含了纤维二糖水解酶基因的完整编码区序列,并含有三个真核生物典型的内含子序列,其中四个外显子序列共同编码一个471aa的蛋白质。该序列是国内首次克隆得到的cbh2编码区全序列,与国外报道的T. reesei已知序列的同源性达到99.89%,只有两个碱基差别,而推测的氨基酸序列只有一个位置疏水性氨基酸之间发生替代,在推测的氨基酸序列上发现3个潜在的N-糖基化位点。 展开更多
关键词 cbh2 纤维素酶 康宁木霉 基因克隆 序列分析
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康宁木霉cbh2基因cDNA的克隆及序列分析 被引量:2
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作者 吴兴泉 刘昌雄 +1 位作者 陈士华 张一村 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第5期36-39,共4页
采用植物叶总RNA提取试剂盒提取康宁木霉总RNA,利用依据木霉cbh2基因序列设计合成的一对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增得到了康宁木霉cbh2基因cDNA,并成功转入大肠杆菌.序列测定结果表明该基因序列与已公布的木霉cbh2基因的同源性最高... 采用植物叶总RNA提取试剂盒提取康宁木霉总RNA,利用依据木霉cbh2基因序列设计合成的一对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增得到了康宁木霉cbh2基因cDNA,并成功转入大肠杆菌.序列测定结果表明该基因序列与已公布的木霉cbh2基因的同源性最高可达91.93%. 展开更多
关键词 康宁木霉 cbh2 CDNA 序列分析
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康宁木霉cbh2基因的克隆与结构特征分析 被引量:1
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作者 吴兴泉 陈士华 +2 位作者 刘昌雄 张一村 薛珍 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第12期55-58,共4页
克隆得到了康宁木霉AS3.2774的cbh2基因组DNA及cDNA,序列测定表明:基因组DNA全长1583 bp,cDNA全长1413 bp。对比cbh2基因组DNA序列与cDNA序列,证明该基因由4个外显子组成,被3个内含子间断隔开,编码470个氨基酸的多肽。利用Predictprotei... 克隆得到了康宁木霉AS3.2774的cbh2基因组DNA及cDNA,序列测定表明:基因组DNA全长1583 bp,cDNA全长1413 bp。对比cbh2基因组DNA序列与cDNA序列,证明该基因由4个外显子组成,被3个内含子间断隔开,编码470个氨基酸的多肽。利用Predictprotein软件预测,该蛋白由9个α螺旋结构和10个β折叠结构及其他结构组成,并对其纤维素结构区、2个糖苷水解酶家族6的特征结构区、信号肽等特征性结构区进行了定位。 展开更多
关键词 康宁木霉 cbh2 CDNA 序列分析
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康宁木霉cbh2基因在毕赤酵母中的表达 被引量:1
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作者 陈士华 耿瑞凡 +1 位作者 张磊 吴兴泉 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2010年第4期50-53,共4页
为拓宽酵母菌的应用领域,构建具有分泌纤维素酶能力的酵母工程菌,利用质粒pPICZαA构建了康宁木霉纤维素酶cbh2基因的酵母表达载体,经线性化后采用电穿孔法转入毕赤氏酵母菌中.以甲醇为诱导物进行诱导,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果证明... 为拓宽酵母菌的应用领域,构建具有分泌纤维素酶能力的酵母工程菌,利用质粒pPICZαA构建了康宁木霉纤维素酶cbh2基因的酵母表达载体,经线性化后采用电穿孔法转入毕赤氏酵母菌中.以甲醇为诱导物进行诱导,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果证明该基因可成功表达.对重组蛋白进行了产酶活性测定,结果证明该重组蛋白具有纤维二糖水解活性,从而获得了一株可产生纤维素酶的酵母工程菌. 展开更多
关键词 康宁木霉 酵母 cbh2基因 表达
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