为实现L. casei Zhang的高密度培养,在之前优化增殖培养基的基础上进一步寻求适宜该菌的培养条件。研究了不同中和剂、缓冲盐浓度、葡萄糖浓度、pH值控制、通气条件和补料分批培养对菌体在恒pH条件下发酵的影响,根据不同条件下菌体的比...为实现L. casei Zhang的高密度培养,在之前优化增殖培养基的基础上进一步寻求适宜该菌的培养条件。研究了不同中和剂、缓冲盐浓度、葡萄糖浓度、pH值控制、通气条件和补料分批培养对菌体在恒pH条件下发酵的影响,根据不同条件下菌体的比生长速率、菌体密度和活菌数情况,确定L. casei Zhang较适宜的高密度培养条件为:培养基葡萄糖浓度为80g/L～100g/L,以氨水为中和剂使pH保持5.9,采用间歇通氮气的方法保持环境厌氧,分批培养方式下37°C保温发酵10h～12h后,L. casei Zhang细胞干重达到7g/L,活菌数3.5×1010 CFU/mL,比优化前提高7倍以上,能够满足益生菌制品生产要求的高菌体密度。展开更多
通过研究益生菌Lactobacillus casei Zhang冻干粉对小鼠急性毒性作用,为该菌株的安全应用提供依据。连续14d对小鼠灌胃不同剂量的L.casei Zhang冻干粉,各剂量组小鼠的一般体征、肝脏功能、脏器指数以及肝、肾、脾形态学的观察结果与对...通过研究益生菌Lactobacillus casei Zhang冻干粉对小鼠急性毒性作用,为该菌株的安全应用提供依据。连续14d对小鼠灌胃不同剂量的L.casei Zhang冻干粉,各剂量组小鼠的一般体征、肝脏功能、脏器指数以及肝、肾、脾形态学的观察结果与对照组相比无显著差异(P>0.05)。急性毒性试验及相关指标检测结果显示L.casei Zhang冻干粉无毒副作用。展开更多
Lactobacillus casei Zhang是1株筛选自发酵酸马奶,并具有耐酸等益生特性的益生乳杆菌。该研究利用蛋白质组双向电泳,比较了其在pH值为7.0和5.5的培养液中分别生长至对数生长期中期的蛋白质组表达差异。结果表明,有11个蛋白质点表达发...Lactobacillus casei Zhang是1株筛选自发酵酸马奶,并具有耐酸等益生特性的益生乳杆菌。该研究利用蛋白质组双向电泳,比较了其在pH值为7.0和5.5的培养液中分别生长至对数生长期中期的蛋白质组表达差异。结果表明,有11个蛋白质点表达发生明显变化,经过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定,其中有3个表达增强的蛋白质点分别鉴定为翻译因子(EF-Tu),N-乙酰氨基葡萄糖-6-磷酸脱醛酶(NagA)和小热休克蛋白(sHsp)。酸胁迫可诱导乳酸菌产生复杂的酸应激反应,涉及不同的代谢调控途径。展开更多
为了研究Lactobacillus casei subsp.rhamnosus LCR 719产生抑菌作用的原因,应用牛津杯琼脂扩散法测定LCR719在MRS上清液的抑菌作用。LCR719在MRS中发酵时,醋酸先升后降,乳酸不断增加,乳酸和醋酸的摩尔浓度比从6h的0.28增加到60h的2.63...为了研究Lactobacillus casei subsp.rhamnosus LCR 719产生抑菌作用的原因,应用牛津杯琼脂扩散法测定LCR719在MRS上清液的抑菌作用。LCR719在MRS中发酵时,醋酸先升后降,乳酸不断增加,乳酸和醋酸的摩尔浓度比从6h的0.28增加到60h的2.63。最佳抑菌作用的培养条件为:初始pH6.5,吐温8010.0ml/L,葡萄糖20.0g/L,培养温度37℃,培养时间为42h。该条件下的上清液对S.aureus抑菌圈直径达42mm,对枯草芽孢杆菌和肠炎沙门氏菌也有很好的抑菌效果,可降低E.coli及EHEC O157菌群密度,对酵母无抑制作用。结果表明,LCR719是一种潜在的可用于生物防腐的保护性菌种。展开更多
【背景】光学纯L-苯乳酸是一种天然防腐剂,也是一种高附加值的手性分子,在食品、制药和材料等领域有广阔的应用前景。本实验室已发现来源于Lactobacillus casei CICIM B1192的NADH依赖型L-乳酸脱氢酶(L-LcLDH)可不对称还原苯丙酮酸制备L...【背景】光学纯L-苯乳酸是一种天然防腐剂,也是一种高附加值的手性分子,在食品、制药和材料等领域有广阔的应用前景。本实验室已发现来源于Lactobacillus casei CICIM B1192的NADH依赖型L-乳酸脱氢酶(L-LcLDH)可不对称还原苯丙酮酸制备L-苯乳酸,但其活性较低。为提高L-LcLDH催化苯丙酮酸的催化效率,构建了一个单突变体L-LcLDH^(Q88R),其催化效率kcat/Km是L-LcLDH的4.9倍。【目的】为进一步提高L-LcLDH^(Q88R)催化苯丙酮酸的催化效率,采用饱和突变技术将位于L-LcLDH^(Q88R)底物结合口袋附近的氨基酸残基Ile^(229)随机替换为其他氨基酸,以获得活性更高的优良突变体。【方法】以重组表达质粒p ET-22b-LcldhQ88R为模板,采用全质粒PCR技术对L-LcLDH^(Q88R)基因(LcldhQ88R)中编码Ile^(229)的密码子实施饱和突变,构建突变转化子文库。以催化苯丙酮酸的活性为指标,从文库中筛选出优良的突变转化子。【结果】突变转化子(Escherichia coli/Lcldh^(Q88R/I229Q))表达出一种由Arg和Gln分别替换了Gln88和Ile^(229)的双突变体L-LcLDH^(Q88R/I229Q)。重组表达产物L-LcLDH^(Q88R/I229Q)的酶学性质分析表明:L-LcLDH^(Q88R/I229Q)的比活性是L-LcLDH的18.5倍,是L-LcLDH^(Q88R)的2.3倍;其催化效率分别为后两者的6.8倍和1.4倍。L-LcLDH突变前后的温度和pH特性改变不大。根据分子对接结果推测出,双突变Q88R/I229Q导致L-LcLDH的底物结合口袋的入口变大和构型的变化可能对其催化活性的提高发挥了重要作用。【结论】双突变Q88R/I229Q显著提高了L-LcLDH的活性和催化效率,使得L-LcLDH^(Q88R/I229Q)在不对称还原苯丙酮酸制备L-苯乳酸中成为有潜力的工具酶。展开更多
以益生菌Lactobacillus casei Zhang为研究对象,通过观察该菌株在普通MRS培养基中连续传代1 000代期间细胞形态、菌落形态、活菌数、浊度和菌株活力的变化对其稳定性进行了初步评价。结果表明,L.casei Zhang在1000代期间细胞形态与菌落...以益生菌Lactobacillus casei Zhang为研究对象,通过观察该菌株在普通MRS培养基中连续传代1 000代期间细胞形态、菌落形态、活菌数、浊度和菌株活力的变化对其稳定性进行了初步评价。结果表明,L.casei Zhang在1000代期间细胞形态与菌落形态没有发生变化;活菌数、浊度均和菌株活力随培养代数的增加呈现波动性变化,但波动幅度较小,总数基本维持不变。上述研究结果初步表明L.casei Zhang具有良好的稳定性,暗示其可用于产业化生产。展开更多
文摘为实现L. casei Zhang的高密度培养,在之前优化增殖培养基的基础上进一步寻求适宜该菌的培养条件。研究了不同中和剂、缓冲盐浓度、葡萄糖浓度、pH值控制、通气条件和补料分批培养对菌体在恒pH条件下发酵的影响,根据不同条件下菌体的比生长速率、菌体密度和活菌数情况,确定L. casei Zhang较适宜的高密度培养条件为:培养基葡萄糖浓度为80g/L～100g/L,以氨水为中和剂使pH保持5.9,采用间歇通氮气的方法保持环境厌氧,分批培养方式下37°C保温发酵10h～12h后,L. casei Zhang细胞干重达到7g/L,活菌数3.5×1010 CFU/mL,比优化前提高7倍以上,能够满足益生菌制品生产要求的高菌体密度。
文摘通过研究益生菌Lactobacillus casei Zhang冻干粉对小鼠急性毒性作用,为该菌株的安全应用提供依据。连续14d对小鼠灌胃不同剂量的L.casei Zhang冻干粉,各剂量组小鼠的一般体征、肝脏功能、脏器指数以及肝、肾、脾形态学的观察结果与对照组相比无显著差异(P>0.05)。急性毒性试验及相关指标检测结果显示L.casei Zhang冻干粉无毒副作用。
文摘Lactobacillus casei Zhang是1株筛选自发酵酸马奶,并具有耐酸等益生特性的益生乳杆菌。该研究利用蛋白质组双向电泳,比较了其在pH值为7.0和5.5的培养液中分别生长至对数生长期中期的蛋白质组表达差异。结果表明,有11个蛋白质点表达发生明显变化,经过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定,其中有3个表达增强的蛋白质点分别鉴定为翻译因子(EF-Tu),N-乙酰氨基葡萄糖-6-磷酸脱醛酶(NagA)和小热休克蛋白(sHsp)。酸胁迫可诱导乳酸菌产生复杂的酸应激反应,涉及不同的代谢调控途径。
