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BALB/cA.Cg.SHJH^(hr)小鼠的培育及其相关遗传学特性分析
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作者 谈小倩 杨颢 +6 位作者 唐慧青 瞿伟 李亮 钱珍 顾坚忠 肖君华 徐平 《实验动物与比较医学》 CAS 2023年第4期363-370,共8页
目的将自发突变培育的SHJHhr小鼠的突变Hr基因导入到遗传背景清晰的BALB/cAShjh近交系小鼠,通过突变基因筛查和遗传学特性分析为后续研究Hr基因突变导致异常表型的分子机制以及该模型的推广应用提供依据。方法采用在表型监测指导下回交... 目的将自发突变培育的SHJHhr小鼠的突变Hr基因导入到遗传背景清晰的BALB/cAShjh近交系小鼠,通过突变基因筛查和遗传学特性分析为后续研究Hr基因突变导致异常表型的分子机制以及该模型的推广应用提供依据。方法采用在表型监测指导下回交-互交的育种方法,将自发突变培育的SHJHhr小鼠的突变基因以同源突变导入方式导入到近交系BALB/cAShjh小鼠,经10代后培育成BALB/cA.Cg.SHJH^(hr)(简称C.Cg.SHJH^(hr))小鼠。通过多重PCR建库后二代测序的方法,分析C.Cg.SHJH^(hr)小鼠中随机分布于基因组上的90个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测位点基因型。然后按照GB/T 14927.1—2008的方法,对C.Cg.SHJH^(hr)小鼠中14个生化位点标记基因进行检测。最后利用全基因组外显子测序技术,检测该小鼠的突变基因。结果自2018年5月至2022年3月,共进行了10代的回交-互交,完成了C.Cg.SHJH^(hr)小鼠品系的构建。在检测的90个SNP位点中,除了rs13484115、rs13484116两个位点不同外,C.Cg.SHJH^(hr)小鼠的其他位点基因型均与受体小鼠BALB/cAShjh相同;生化位点标记基因检测结果显示,C.Cg.SHJH^(hr)小鼠的14个位点全部与受体小鼠相同;全基因组外显子测序发现,该小鼠相比受体小鼠品系存在109个位点突变,包括同义突变71个,终止密码子增加1个,错义突变37个,涉及蛋白质序列改变的基因20个(包括已报告的Hr基因)。结论成功培育了突变导入系C.Cg.SHJH^(hr)小鼠,通过全基因组外显子测序分析发现了3个主要引起表型变异的Hr突变基因及关联突变基因,为该小鼠在生物医学研究中的拓展应用提供了基础数据。 展开更多
关键词 BALB/ca.Cg.SHJH^(hr)小鼠 外显子测序 突变基因 遗传学特性
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THE RELATIONSHIP BETWEEN EGYPT AND PALESTINE IN THE EARLY BRONZE AGE(ca.3400-2000 BCE)
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作者 Guo Dantong, IHAC 《Journal of Ancient Civilizations》 2002年第1期1-6,共6页
The relationship between Egypt and Palestine can be traced back to theChalcolithic Age thanks to the evidence of current excavations in the Nile Deltaand Sinal.Palestinian pottery and cast metal objects from the Delta... The relationship between Egypt and Palestine can be traced back to theChalcolithic Age thanks to the evidence of current excavations in the Nile Deltaand Sinal.Palestinian pottery and cast metal objects from the Delta sites of Maadi,Minshat Abu Omar,and elsewhere have proved contacts with Palestine inProtodynastic(Nagada Ⅱ-Ⅲ)times.The Egyptian Protodynastic Period andDynasty 1 were contemporary with the Palestinian EB Ⅰ and EB Ⅲ,and 展开更多
关键词 ca.3400-2000 BCE THE RELATIONSHIP BETWEEN EGYPT AND PALESTINE IN THE EARLY BRONZE AGE
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Newly Discovered Ca. 163 Ma OIB-Type Diabase Dike from the Shiquanhe Ophiolites, Western Tibet 被引量:1
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作者 LI Chenwei LI Zhijun +1 位作者 CAO Hui ZENG Min 《Acta Geologica Sinica(English Edition)》 SCIE CAS CSCD 2018年第6期2443-2444,共2页
Objective The Shiquanhe ophiolite is an important tectonic belt in western Tibet. It has been debated whether the Shiquanhe ophiolite represents an allochthonous nappe derived from the Bangong-Nujiang suture zone to t... Objective The Shiquanhe ophiolite is an important tectonic belt in western Tibet. It has been debated whether the Shiquanhe ophiolite represents an allochthonous nappe derived from the Bangong-Nujiang suture zone to the north or the 展开更多
关键词 OIB Th Pb Ma OIB-Type Diabase Dike from the Shiquanhe Ophiolites Newly Discovered ca
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Formation of the Giant Bayan Obo Deposit by ca. 1.3 Ga Carbonatitic Magmatism and its Link with Continental Rifting in the Columbia Supercontinent 被引量:1
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作者 ZHANG Shuanhong ZHAO Yue LIU Yongsheng 《Acta Geologica Sinica(English Edition)》 SCIE CAS CSCD 2016年第S1期195-196,共2页
The Bayan Obo in the northern North China Craton is the world’s largest light rare earth element(LREE)deposit and the largest niobium(Nb)and thorium(Th)deposit in China(e.g.,Wu,2008;Kynicky et al.,2012;Ling et al.,
关键词 REE Formation of the Giant Bayan Obo Deposit by ca
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基于CRISPR/Cas9技术创制优质香味粳稻品系
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作者 段敏 谢留杰 +1 位作者 岳雅妮 黄善军 《中国水稻科学》 北大核心 2026年第2期235-243,共9页
【目的】香味是水稻重要的食味品质性状。本研究选择优质粳稻品系台20-29为研究对象,利用CRISPR/Cas9技术对其香味基因Badh2进行编辑,以期获得具有香味的优质粳稻品系。【方法】选择香味基因Badh2第3、第4外显子上的2段序列作靶位点,构... 【目的】香味是水稻重要的食味品质性状。本研究选择优质粳稻品系台20-29为研究对象,利用CRISPR/Cas9技术对其香味基因Badh2进行编辑,以期获得具有香味的优质粳稻品系。【方法】选择香味基因Badh2第3、第4外显子上的2段序列作靶位点,构建双元表达载体pHUE411-Badh2-gRNA并转入台20-29获得转基因植株。【结果】20株T0植株经过加代、潮霉素标记检测、测序比对,共计获得22个T1代无载体纯合突变株,包括6种突变类型,每种突变体在第3、第4外显子上存在不同程度的碱基变化。6个香味突变体bh62、bh64、bh65、bh67、bh68、bh74在穗长、粒长、粒宽、千粒重等方面与野生型台20-29基本一致,结实率有所下降,每穗粒数稍有提升,稻米品质没有明显变化。利用气相色谱-质谱技术检测突变体bh62、bh64、bh65的糙米中香味物质2-AP含量,结果表明糙米中2-AP含量较台20-29极显著提高,分别达到24.27、33.89、38.96 mg/kg。【结论】对水稻香味基因Badh2进行编辑可以高效获得具有香味的水稻优质品系。 展开更多
关键词 水稻 潮霉素 CRISPR/cas9 香味基因 2-乙酰-1-吡咯啉
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外泌体递送CRISPR/Cas系统在靶细胞内可实现基因编辑
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作者 王白燕 杨树 +5 位作者 王弋鸣 吴梦晴 肖瑀 郭梓璇 张博艺 冯书营 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第7期1839-1849,共11页
背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送... 背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送CRISPR/Cas系统的外泌体来源及工程化策略、外泌体对CRISPR/Cas系统的装载方法、CRISPR/Cas系统的生物形式及其在细胞内的作用途径等方面进行全方面综述,为该领域的研究者提供更直观、更系统的视角。方法:以“exosome,drug delivery systems,delivery,CRISPR/Cas,gene editing,engineered exosomes,targeting”为英文检索词,以“外泌体,药物递送,CRISPR/Cas,工程化”为中文检索词,分别检索Pub Med数据库及中国知网,检索时限为2014-2024年。通过仔细阅读文献的标题和摘要进行初步筛选,排除研究内容相关性差及内容重复的文献,最终纳入了78篇文献进行归纳和探讨。结果与结论:(1)外泌体是一种直径30-150 nm的脂质囊泡,具有循环半衰期长、靶向组织的内在能力、良好的生物相容性以及较小的固有毒性等优势,显现出强大的靶向递送能力;(2)CRISPR/Cas系统虽是一种强大的基因编辑工具,然而现有的CRISPR/Cas系统递送载体各有利弊,无法完全满足需求;(3)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要来源于高产外泌体的细胞或组织,但研究者们依然需要根据研究所需进行选择或进一步工程化;(4)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要通过基因工程修饰、化学修饰、外泌体-脂质体杂交等策略实现工程化;(5)外泌体装载CRISPR/Cas系统的方法包括电穿孔、孵育、转染和主动装载途径等,选择合适的装载方法取决于CRISPR/Cas系统的理化性质;(6)外泌体递送CRISPR/Cas系统的生物形式包括质粒和核糖核蛋白复合体,两种形式各具特点,成功递送的CRISPR/Cas系统在靶细胞内实现基因编辑。 展开更多
关键词 外泌体 CRISPR/cas系统 基因编辑 药物负载 靶向递送 工程化
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高职专业群与区域产业集群深度融合的案例研究——基于CAS理论视域
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作者 牛同训 《高等工程教育研究》 北大核心 2026年第1期128-133,139,共7页
产教融合是高职院校和产业高质量发展的重要举措。针对高职专业群与区域产业集群“合而不融”等问题,基于复杂适应系统(CAS)理论,分析了集群系统与CAS的相似性,构建了集群系统产教融合分析框架。采用扎根理论方法对9个集群系统案例进行... 产教融合是高职院校和产业高质量发展的重要举措。针对高职专业群与区域产业集群“合而不融”等问题,基于复杂适应系统(CAS)理论,分析了集群系统与CAS的相似性,构建了集群系统产教融合分析框架。采用扎根理论方法对9个集群系统案例进行了质性研究,设计了以政府-市场为主的外部环境系统驱动的集群系统产教融合行为产生机理和产教深度融合的机理模型。突破产教融合的静态研究视角,指出在集群系统产教深度融合中,外部环境系统是重要推手、多元主体适应系统是实施关键、“流”系统是重要保障。根据研究结论,提出了发挥外部环境对集群系统产教深度融合的推动作用、发挥产教融合实施主体的关键作用、发挥“流”系统的保障作用等对策建议,引领集群系统深度融合。 展开更多
关键词 高职专业群 区域产业集群 产教融合 caS理论 案例研究
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膀胱癌患者血清CEA、CA19-9、β2-MG水平与预后的相关性分析
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作者 孟佳丽 林海 孟伟 《医学临床研究》 2026年第1期69-72,共4页
【目的】探讨膀胱癌患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)和β2-微球蛋白(β2-MG)水平与患者预后的相关性。【方法】检测106例膀胱癌患者(观察组),85例体检健康者(对照组)的血清CEA、CA19-9、β2-MG水平,分析其与膀胱癌患者预... 【目的】探讨膀胱癌患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)和β2-微球蛋白(β2-MG)水平与患者预后的相关性。【方法】检测106例膀胱癌患者(观察组),85例体检健康者(对照组)的血清CEA、CA19-9、β2-MG水平,分析其与膀胱癌患者预后的关系及患者死亡的危险因素。【结果】观察组术前、术后的CEA、CA19-9、β2-MG水平高于对照组,且观察组患者术前CEA、CA19-9、β2-MG水平高于术后(均P<0.05)。随访36个月,106例膀胱癌患者中63例存活(生存组),43例死亡(死亡组)。死亡组TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤低分化的比例,以及CEA、CA19-9、β2-MG表达水平均高于生存组(P<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤低分化,CEA、CA19-9、β2-MG高表达均是膀胱癌患者死亡的危险因素(P<0.05)。CEA、CA19-9、β2-MG高表达组的3年生存率均显著低于低表达组(P<0.05)。【结论】膀胱癌患者血清CEA、CA19-9、β2-MG水平与患者的预后密切相关,其可作为预测膀胱癌患者预后的指标。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 癌胚抗原 ca19-9抗原 Β2微球蛋白 预后
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CRISPR/Cas基因编辑技术在艾滋病治疗中的研究现状与挑战
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作者 杨灿 刘真 +5 位作者 张敏 张清燕 邓博文 李承乘 李杰 郭会军 《中国艾滋病性病》 北大核心 2026年第1期114-119,共6页
艾滋病基因治疗一直是研究者们关注的热点。成簇规律间隔短回文重复序列/CRISPR相关蛋白系统(CRISPR/Cas)设计简单、操作方便、靶向性强、灵敏度高,是新颖有效的第三代“基因组定点编辑技术”。本文综述了CRISPR/Cas系统的历史由来、作... 艾滋病基因治疗一直是研究者们关注的热点。成簇规律间隔短回文重复序列/CRISPR相关蛋白系统(CRISPR/Cas)设计简单、操作方便、靶向性强、灵敏度高,是新颖有效的第三代“基因组定点编辑技术”。本文综述了CRISPR/Cas系统的历史由来、作用机理及艾滋病治疗中的CRISPR/Cas类型,在此基础之上,聚焦于该系统在艾滋病治疗领域的研究进展和应用,从干扰病毒复制周期,清除潜伏前病毒以及调节宿主免疫三方面进行深入分析。同时提出目前存在的诸多挑战:HIV对CRISPR/Cas系统的逃逸、HIV感染细胞中CRISPR/Cas系统的高效递送、针对HIV的CRISPR/Cas独特且多靶点设计、AIDS患者Cas免疫炎症交错复杂。探讨其可能策略,以期为艾滋病基因治疗的开发和临床应用提供方向。 展开更多
关键词 艾滋病 基因治疗 CRISPR/cas基因编辑
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基于CRISPR/Cas9技术构建猪GRSF1基因敲除细胞系及其对细胞活性的影响分析
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作者 杜鹏飞 彭听雨 +3 位作者 范双旗 郑海学 朱紫祥 陈金顶 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第2期161-167,共7页
利用CRISPR/Cas9技术构建鸟嘌呤富含序列因子1(GRSF1)基因敲除的PK-15细胞并探究GRSF1基因敲除对于细胞活性的影响。首先,设计了4条靶向猪源GRSF1基因的sgRNAs(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3和sgRNA-4),经退火后与慢病毒载体质粒(Lenti-CRI... 利用CRISPR/Cas9技术构建鸟嘌呤富含序列因子1(GRSF1)基因敲除的PK-15细胞并探究GRSF1基因敲除对于细胞活性的影响。首先,设计了4条靶向猪源GRSF1基因的sgRNAs(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3和sgRNA-4),经退火后与慢病毒载体质粒(Lenti-CRISPR v2)连接。随后将构建成功的慢病毒载体与辅助质粒pMD2.G和psPAX2共转染人胚胎肾细胞(HEK-293T),获得慢病毒并感染PK-15细胞。最终经嘌呤霉素筛选和梯度稀释法获得GRSF1敲除的PK-15单克隆细胞系。通过Western-blot及测序验证GRSF1的敲除效率,然后进行单克隆细胞活性检测及IL-6水平检测。结果表明,本研究成功获得3株GRSF1基因敲除成功的PK-15单克隆细胞系,并证实GRSF1基因敲除影响PK-15细胞中IL-6表达的上调,为后续研究猪GRSF1的生物学功能提供细胞模型。 展开更多
关键词 GRSF1 PK-15 CRISPR/cas9 基因敲除
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水稻抗ACCase抑制剂类除草剂两系不育系种质资源的创制
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作者 郭金梦 陶开亮 +10 位作者 朱俊 赵学宇 李康 甘泉 林翠香 汪楠胜 于豪 宋丰顺 李娟 石英尧 倪大虎 《中国水稻科学》 北大核心 2026年第2期223-234,共12页
【目的】创制抗除草剂水稻新种质是培育抗除草剂水稻新品种的前提。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以安9S不育系为材料,编辑乙酰辅酶A羧化酶OsACC1基因,创制具有抗除草剂特性的两系不育系水稻新种质。【方法】利用CRISPR/Cas9技术,以乙... 【目的】创制抗除草剂水稻新种质是培育抗除草剂水稻新品种的前提。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以安9S不育系为材料,编辑乙酰辅酶A羧化酶OsACC1基因,创制具有抗除草剂特性的两系不育系水稻新种质。【方法】利用CRISPR/Cas9技术,以乙酰辅酶A羧化酶OsACC1为靶基因,构建单碱基突变载体e PE2-ACC-I1879V,以安9S为转化材料,利用农杆菌介导法转化获得转基因植株,通过对转基因植株的突变位点进行测序结合除草剂喷施试验、农艺性状分析,鉴定基因型及表型。【结果】经分子水平检测验证,T_(0)代获得ACC1^(I1879V)突变植株24株;经分离筛选,T_(1)代24个株系共获得96株纯合突变单株,均具有除草剂抗性。高通量测序结果显示,三个试验组株系(NS512、NS513、NS514)均不含外源转基因成分,且喷施4%甲禾灵存活率仍达到100%。与对照安9S相比,NS512株系株高增加,剑叶变宽;NS513株系株高增高,剑叶变长变宽;NS514株系剑叶变窄;三个试验组株系的育性未发生改变,单株有效穗数、穗长、均没有显著差异。转基因安全性评价分析表明,OsACC1基因编码蛋白与已知毒蛋白、抗营养因子及过敏原均无相似序列,不存在毒性、致敏性问题。【结论】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,能够获得具有抗ACCase抑制剂类除草剂特性、稳定遗传、不含转基因成分、育性不发生改变、安全无害的纯合株系,可为水稻抗除草剂育种提供材料基础。 展开更多
关键词 CRISPR/cas9 基因编辑 乙酰辅酶A羧化酶 不育系
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利用CRISPR/Cas9技术创制香糯籼粳中间型广亲和恢复系
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作者 华宇峰 宋昕蔚 +2 位作者 施勇烽 吴明国 林建荣 《分子植物育种》 北大核心 2026年第3期795-802,共8页
食品加工和酿造等产业对优质香糯稻米的需求量较大,但是用于生产优质香糯稻米的品种稀少,通常产量较低。缺乏高产优质杂交香糯稻品种的主要原因在于缺乏杂交香糯稻亲本种质资源。为了快速创制香糯型籼粳中间型广亲和恢复系,本研究利用CR... 食品加工和酿造等产业对优质香糯稻米的需求量较大,但是用于生产优质香糯稻米的品种稀少,通常产量较低。缺乏高产优质杂交香糯稻品种的主要原因在于缺乏杂交香糯稻亲本种质资源。为了快速创制香糯型籼粳中间型广亲和恢复系,本研究利用CRISPR/Cas9多基因编辑系统构建了pC1300-Cas9-Wx-BADH2载体,以籼粳中间型广亲和恢复系‘T41’为受体,同时编辑了‘T41’的Wx和BADH2基因,遗传转化后获得18株转基因幼苗,经鉴定其中含有13株双突变体;利用分子标记对T_(1)和T_(2)代植株进行转基因成分鉴定,分别筛选出6个和13个不含转基因成分的香糯株系。13个T_(2)代香糯株系遗传稳定,胚乳呈现乳白色;经KOH浸泡法鉴定,叶片的香味浓郁;除千粒重差异显著外,香糯株系的主要农艺性状与‘T41’无显著差异。 展开更多
关键词 香糯稻 CRISPR/cas9多基因编辑 籼粳中间型广亲和恢复系
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利用CRISPR/Cas9技术创制糯稻新种质
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作者 潘月云 黄雨青 +3 位作者 丁正权 施扬 黄海祥 李白 《浙江农业学报》 北大核心 2026年第1期17-23,共7页
稻米直链淀粉含量直接影响其蒸煮食味品质,该性状主要由Waxy(Wx)基因控制。本研究基于Wx基因上SNP的表型关联分析,选择其第3、第4外显子设计编辑靶点。利用CRISPR/Cas9技术,以水稻品种嘉禾香1号为受体,对Wx基因进行编辑。经PCR与Sanger... 稻米直链淀粉含量直接影响其蒸煮食味品质,该性状主要由Waxy(Wx)基因控制。本研究基于Wx基因上SNP的表型关联分析,选择其第3、第4外显子设计编辑靶点。利用CRISPR/Cas9技术,以水稻品种嘉禾香1号为受体,对Wx基因进行编辑。经PCR与Sanger测序验证,获得4个不同类型的双位点纯合突变体。4个双位点纯合T 2代突变体株系的稻米均呈蜡质状,其直链淀粉含量由野生型的16.9%降至0.83%~1.23%,达到糯稻水平。结果表明,利用CRISPR/Cas9技术可快速创制优质香糯型水稻种质资源。 展开更多
关键词 水稻 WX基因 CRISPR/cas9 直链淀粉
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基于CRISPR/Cas9技术的西方蜜蜂AmBgb敲除及功能分析
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作者 赖雨 许瑞鑫 +8 位作者 朱雅楠 傅云熙 田林艳 吴胜利 陈志杰 单简 付艳芳 苏松坤 聂红毅 《昆虫学报》 北大核心 2026年第1期34-41,共8页
【目的】核心结合因子(core binding factor,CBF)β亚基(CBFβ)是一种重要的转录因子,在昆虫胚胎发育和免疫调节等过程中发挥关键作用,但是其在西方蜜蜂Apis mellifera中尚未报道。本研究旨在利用CRISPR/Cas9技术探究CBFβ在西方蜜蜂中... 【目的】核心结合因子(core binding factor,CBF)β亚基(CBFβ)是一种重要的转录因子,在昆虫胚胎发育和免疫调节等过程中发挥关键作用,但是其在西方蜜蜂Apis mellifera中尚未报道。本研究旨在利用CRISPR/Cas9技术探究CBFβ在西方蜜蜂中的生理功能。【方法】克隆西方蜜蜂Bgb(big brother)基因AmBgb的编码序列(coding sequence,CDS),并进行生物信息学分析;运用qRT-PCR检测AmBgb在西方蜜蜂不同发育发育阶段(1-3日龄工蜂卵,1,3和5日龄工蜂幼虫,工蜂预蛹,1,3,5,7和9日龄工蜂蛹,刚出房工蜂,10日龄哺育蜂以及21日龄采集蜂)的表达量;采用CRISPR/Cas9敲除西方蜜蜂卵中AmBgb,监测卵的发育和存活情况,并通过PCR和测序的方法检测靶位点,验证AmBgb在西方蜜蜂中的生理功能。【结果】西方蜜蜂AmBgb的CDS全长为759 bp,编码252个氨基酸,第39-201位氨基酸存在1个CBFβ结构域;AmBgb分子量为28982.37 D,无信号肽和跨膜结构,预测其为胞内蛋白;系统进化树显示西方蜜蜂AmBgb与东方蜜蜂A.cerana的Bgb高度同源(氨基酸序列一致性为99.21%),且亲缘关系最密切。AmBgb在2和3日龄工蜂卵中的表达量明显高于其他发育阶段的。基于CRISPR/Cas9处理的西方蜜蜂43粒卵中,有5粒卵孵化为幼虫且AmBgb靶位点无突变;随机对7粒死亡卵进行检测,发现6粒卵中AmBgb的靶位点出现基因编辑,包括不同长度插入、缺失或替换。【结论】西方蜜蜂AmBgb在2和3日龄卵中高量表达,敲除AmBgb导致卵不能正常孵化为幼虫。这些结果表明AmBgb在西方蜜蜂胚胎发育过程中发挥重要作用,这将为其他膜翅目(Hymenoptera)昆虫中该基因的生理功能研究提供理论指导。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 核心结合因子β亚基 基因克隆 时期表达谱 CRISPR/cas9
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类食品乳杆菌LBM 12001基于CRISPR/Cas9技术多基因编辑平台的构建
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作者 黄宗潇 侯倩 +2 位作者 徐岩 黄卫宁 穆晓清 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第3期11-19,共9页
作为传统发酵食品的核心功能菌株,类食品乳杆菌(Lactobacillus paralimentarius)的代谢调控网络解析常受限于低效的遗传操作体系。该研究旨在开发一种高效、无痕的CRISPR/Cas9基因编辑平台,以解决类食品乳杆菌多基因编辑的技术瓶颈。通... 作为传统发酵食品的核心功能菌株,类食品乳杆菌(Lactobacillus paralimentarius)的代谢调控网络解析常受限于低效的遗传操作体系。该研究旨在开发一种高效、无痕的CRISPR/Cas9基因编辑平台,以解决类食品乳杆菌多基因编辑的技术瓶颈。通过优化质粒大小以及引入λ-Red重组酶辅助同源重组,构建了双质粒系统(pCRI01/pCRI02)。实验结果表明,该系统显著提升了转化效率[单基因敲除转化子达(63±11)个,阳性突变率75%],并实现了三基因同步敲除[转化子(57±8)个,突变率(46±7)%]。创新性整合BioBricks模块化组装、温度敏感型复制子及自靶向诱导型sgRNA技术,使多基因编辑周期缩短40%以上。该体系突破了传统方法的效率限制,成功实现多基因无痕编辑,为构建类食品乳杆菌高效细胞工厂提供了关键性技术支撑。 展开更多
关键词 类食品乳杆菌 CRISPR/cas9 多基因编辑 λ-Red重组酶 BioBricks组装
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基于CRISPR/Cas9的拟南芥AT1G10020基因编辑载体构建及功能验证
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作者 田晓娜 常紫茹 +2 位作者 刘明一 王馨磊 杨杞 《分子植物育种》 北大核心 2026年第5期1544-1549,共6页
很多未知功能结构域DUF(domain of unknown function)在植物生长发育中扮演着重要的角色,本研究以含有DUF1005结构域的基因为研究对象,通过CRISPR/Cas系统对拟南芥中AT1G10020进行基因编辑,在AT1G10020的第二外显子上设计sg RNA靶点序列... 很多未知功能结构域DUF(domain of unknown function)在植物生长发育中扮演着重要的角色,本研究以含有DUF1005结构域的基因为研究对象,通过CRISPR/Cas系统对拟南芥中AT1G10020进行基因编辑,在AT1G10020的第二外显子上设计sg RNA靶点序列,构建重组质粒,获得CRISPR/Cas9-AT1G10020重组质粒,并采用农杆菌介导的花序浸染法转化至野生型拟南芥。结果分析发现,经抗性筛选和测序鉴定,共筛选获得6种不同的编辑类型,包括插入、缺失等;且拟南芥幼苗时期的根长发育表型观察显示,基因编辑株系与野生型比较,具有更短的初生根和更少的侧根。本研究获得了AT1G10020编辑纯合突变体,并为DUF1005的生物学功能的研究提供基础,也有助于对未知功能DUF新基因的挖掘和阐释。 展开更多
关键词 基因编辑 CRISPR/cas DUF1005 AT1G10020 初生根
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左侧海马CA4区血脑屏障通透性升高与卒中后认知障碍的关系
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作者 王帅国 王子豪 +2 位作者 荆京 林金嬉 孟霞 《首都医科大学学报》 北大核心 2026年第1期54-61,共8页
目的探索左侧海马阿蒙角4(cornu ammonis 4,CA4)区血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性与卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)之间的关系。方法本研究为多中心前瞻性队列研究,连续纳入97例短暂性脑缺血发作(tra... 目的探索左侧海马阿蒙角4(cornu ammonis 4,CA4)区血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性与卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)之间的关系。方法本研究为多中心前瞻性队列研究,连续纳入97例短暂性脑缺血发作(transient ischemic attack,TIA)/轻型缺血性卒中患者。入院7 d内行动态对比增强磁共振成像,基于Patlak模型计算海马亚区BBB通透性参数——容积转运常数(volume transfer constant,K trans)。根据随访6个月时蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment,MoCA)评分,将患者分为PSCI与卒中后非认知障碍(post-stroke non-cognitive impairment,PSNCI)组。采用多因素Logistic回归探讨左侧海马CA4区BBB通透性与认知结局的关系。结果65例患者完成随访,其中PSCI组13例(20.0%)。PSCI组患者年龄大、教育年限短、基线MoCA评分低(P<0.05)。左侧海马CA4区BBB通透性升高与MoCA总分下降相关,并与执行功能和命名能力评分呈负相关。左侧海马CA4区BBB通透性升高是PSCI的独立危险因素。结论左侧海马CA4区BBB通透性升高与TIA/轻型缺血性卒中患者6个月时的认知评分较低独立相关,可作为预测PSCI的潜在影像学标志物。 展开更多
关键词 卒中后认知障碍 短暂性脑缺血发作 轻型缺血性卒中 血脑屏障 海马ca4区 动态对比增强磁共振成像
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益智清心方调控PKA/CaN通路改善阿尔茨海默病模型小鼠认知功能的机制
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作者 郭晓晨 刘剑刚 +4 位作者 石丹丹 宁梓淇 张瑶瑶 刘方 刘美霞 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第3期97-108,共12页
目的:基于蛋白激酶A(PKA)/钙调磷酸酶(CaN)信号通路,探讨益智清心方调控线粒体Ca^(2+)稳态和动力学平衡改善阿尔茨海默病(AD)线粒体功能障碍的作用机制。方法:将60只3月龄淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠随机分为模型组... 目的:基于蛋白激酶A(PKA)/钙调磷酸酶(CaN)信号通路,探讨益智清心方调控线粒体Ca^(2+)稳态和动力学平衡改善阿尔茨海默病(AD)线粒体功能障碍的作用机制。方法:将60只3月龄淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组(0.65 mg·kg^(-1))、益智清心方低剂量组(2.6 g·kg^(-1))、益智清心方中剂量组(5.2 g·kg^(-1))及益智清心方高剂量组(10.4 g·kg^(-1)),每组12只。同遗传背景的C57BL/6J小鼠12只作为正常组。各治疗组每日灌胃给药,模型组与正常组给予等容积生理盐水,连续干预12周。采用新物体识别(NOR)和Morris水迷宫(MWM)实验评估小鼠学习记忆能力;苏木素-伊红(HE)/尼氏(Nissl)染色观察海马组织病理学改变;透射电子显微镜(TEM)观察线粒体超微结构;氟-4乙酰氧甲基酯(Fluo-4 AM)Ca^(2+)探针测定脑组织胞浆内Ca^(2+)浓度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织中PKA、CaN、钠/钙/锂交换器(NCLX)、线粒体钙单向转运体(MCU)、钙调蛋白(CaM)、动力相关蛋白1(Drp1)、磷酸化(p)-Drp1[丝氨酸637位点(S637)]蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测PKA、CaN、CaM、NCLX、MCU、Drp1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠识别指数(RI)降低(P<0.01),穿越原平台区域次数、目标象限停留时间及路程缩减(P<0.01),PKA、NCLX、p-DRP1(ser637)蛋白表达减少(P<0.05),PKA、NCLX mRNA表达减少(P<0.05);而逃避潜伏期延长(P<0.05),细胞内Ca^(2+)水平升高(P<0.01);CaN、CaM、MCU、Drp1蛋白表达及CaN、MCU、Drp1 mRNA表达增加(P<0.05)。经多奈哌齐及益智清心方干预后,与模型组比较,治疗组小鼠RI提升(P<0.05),穿越平台次数、目标象限停留时间增加(P<0.05),PKA、NCLX、p-Drp1(ser637)蛋白表达及PKA、NCLX mRNA表达增加(P<0.05);第4~5天逃避潜伏期缩短(P<0.05),细胞内Ca^(2+)水平降低(P<0.05),CaN、CaM、MCU、Drp1蛋白表达及CaN、MCU、Drp1 mRNA表达减少(P<0.05)。结论:益智清心方通过调控PKA/CaN通路,上调PKA、NCLX、p-Drp1(ser637)蛋白表达,降低CaN、CaM、MCU、Drp1蛋白表达,调节Ca^(2+)稳态和线粒体动力学平衡,从而提升AD小鼠的空间学习与记忆能力。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 益智清心方 蛋白激酶A(PKA)/钙调磷酸酶(caN)信号通路 ca^(2+)稳态 线粒体动力学
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Ca^(2+)/Mg^(2+)对(Y_(2)O_(3)+ZrO_(2))-YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)NTC陶瓷电学性能影响
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作者 谭健 蔡冰 +5 位作者 唐良颖 吴聪 黄婷 刘华臣 向正飞 邓腾飞 《陶瓷学报》 北大核心 2026年第1期78-84,共7页
本文通过在(54 mol%Y_(2)O_(3)+6 mol%ZrO_(2))-40 mol%YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)中掺入4 mol%~8 mol%的Ca^(2+)/Mg^(2+),经两步烧结制备负温度系数(Negative Temperature Coefficient,NTC)热敏陶瓷。所有掺杂样品均保持Y_(2)O_(3)与正交... 本文通过在(54 mol%Y_(2)O_(3)+6 mol%ZrO_(2))-40 mol%YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)中掺入4 mol%~8 mol%的Ca^(2+)/Mg^(2+),经两步烧结制备负温度系数(Negative Temperature Coefficient,NTC)热敏陶瓷。所有掺杂样品均保持Y_(2)O_(3)与正交钙钛矿相YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)双相结构,Ca^(2+)/Mg^(2+)主要固溶于钙钛矿相,显微结构呈“海岛”状分布且致密性良好。电学性能方面,Ca^(2+)能显著降低电阻率,当Ca^(2+)掺杂量为8 mol%时,电阻率较未掺杂样品降低约82%。相比之下,Mg^(2+)掺杂仅将电阻率降至5.14×10^(4)Ω·cm,且对应B值较高。XPS分析表明,掺杂Ca^(2+)/Mg^(2+)后,Mn^(4+)/Cr^(4+)比例上升,Ca^(2+)会取代Y^(3+)引发空穴补偿及小极化子跳跃增强,Mg^(2+)会取代半径接近Cr^(3+)/Mn^(3+),导致改性效果不佳。老化实验显示,Ca^(2+)/Mg^(2+)会增大电阻漂移率,但Zr^(4+)的存在通过提升致密度和细化晶粒抑制空位迁移,使漂移率降低1%~2%。综上,结果表明:Ca^(2+)可优化(Y_(2)O_(3)+ZrO_(2))-YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)NTC陶瓷的电阻率、B值及稳定性,具备实际应用潜力。 展开更多
关键词 NTC热敏陶瓷 YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3) ca^(2+)/Mg^(2+)掺杂 电阻率调控
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CRISPR/Cas系统在丝状真菌基因编辑中的进展和挑战
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作者 谷胜博 王娜 +1 位作者 武耀康 刘延峰 《中国生物工程杂志》 北大核心 2026年第1期63-74,共12页
丝状真菌是一类广泛存在于自然界、具有分枝菌丝体结构的真核微生物,在工业生物技术中具有重要应用潜力。然而,其复杂的遗传背景制约了菌株改良与基因组编辑技术的进一步发展。CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromi... 丝状真菌是一类广泛存在于自然界、具有分枝菌丝体结构的真核微生物,在工业生物技术中具有重要应用潜力。然而,其复杂的遗传背景制约了菌株改良与基因组编辑技术的进一步发展。CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)作为一种高效的基因编辑工具,能够实现基因的精准切割与修饰。该系统在丝状真菌中的应用显著提升了基因改造效率,为代谢工程及功能基因研究提供了重要技术支撑。围绕丝状真菌CRISPR/Cas(CRISPR associate system)系统的原理、技术开发和技术应用,综述CRISPR/Cas系统在丝状真菌中的研究进展,并对丝状真菌中的CRISPR/Cas系统面临的挑战和发展前景进行了展望。 展开更多
关键词 丝状真菌 基因编辑 CRISPR/cas
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