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1,25二羟基维生素D_(3)通过抑制cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路降低双链DNA诱导的小鼠外周血单个核细胞中炎症因子分泌
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作者 黄诒洁 杭倩如 +5 位作者 徐腾姣 张威 翁于格 林奕哲 何小解 丁艳 《中国热带医学》 北大核心 2025年第5期630-636,共7页
目的探讨1,25二羟基维生素D3(1,25(OH)2D_(3))是否通过抑制cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路使双链DNA(double strands DNA,dsDNA)诱导的小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)中的炎症因子IFN-α、IFN-β分泌减少,... 目的探讨1,25二羟基维生素D3(1,25(OH)2D_(3))是否通过抑制cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路使双链DNA(double strands DNA,dsDNA)诱导的小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)中的炎症因子IFN-α、IFN-β分泌减少,探寻1,25(OH)_(2)D_(3)治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosue,SLE)的新靶点。方法取10只8周龄雌性C57BL/6小鼠,10%水合氯醛麻醉小鼠,腹主动脉取血,分离PBMCs,将其分为2组,第1组为dsDNA(0、20、40、80μg/L)诱导组,其中0μg/L的为对照组,筛选dsDNA最佳作用剂量。第2组PBMCs首先使用诱导dsDNA(40μg/L)处理,然后再用1,25(OH)_(2)D_(3)(10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)μmol/L)进行治疗,其中空白组为未经1,25(OH)_(2)D_(3)处理的0μg/L dsDNA的小鼠PBMCs,对照组为未经1,25(OH)_(2)D_(3)处理的40μg/L dsDNA的小鼠PBMCs。48 h后,采用CCK8检测各组PBMCs的细胞活力,ELISA法检测各组PBMCs中IFN-α和IFN-β的分泌水平,Western blot检测各组小鼠PBMCs中cGAS、pTBK1、pSTING、pIRF3的蛋白表达水平,观察1,25(OH)_(2)D_(3)对cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号的蛋白表达及IFN-α、IFN-β分泌的影响。结果dsDNA剂量依赖性地使PBMCs的细胞活力显著下降(P<0.01),在40μg/L的dsDNA时,细胞活力差异较显著性,且dsDNA剂量依赖性地促进炎症因子IFN-α和IFN-β的分泌(P<0.01),小鼠PBMCs中cGAS、pTBK1、pSTING、pIRF3的表达水平较对照组上调(P<0.05)。在1,25(OH)_(2)D_(3)治疗dsDNA诱导PBMCs的细胞组中,1,25(OH)_(2)D_(3)剂量依赖性地使dsDNA处理的PBMCs细胞活力显著提升(P<0.01),降低了炎症因子IFN-α和IFN-β的分泌(P<0.01),在加入1,25(OH)_(2)D_(3)治疗的dsDNA处理的PBMCs中cGAS、pTBK1、pSTING、pIRF3、IFN-Ⅰ的表达水平较对照组下调(P<0.05)。结论1,25(OH)2D3可负反馈调节dsDNA激活PBMCs中的cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路且降低炎症因子的IFN-α和IFN-β的分泌。 展开更多
关键词 1 25二羟基维生素D3 系统性红斑狼疮 cgas/sting/ifn-ⅰ 干扰素-α 干扰素-Β
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白术内酯Ⅰ调节cGAS-STING通路对乙型肝炎模型大鼠肝功能的影响 被引量:2
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作者 韩成美 陈茂丽 任维鑫 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期615-619,共5页
目的:探讨白术内酯Ⅰ(ATR-Ⅰ)调节cGAS-STING通路对乙型肝炎病毒(HBV)感染大鼠肝功能的影响。方法:随机选择10只大鼠记为对照组(NC),其余大鼠尾静脉注射HBV抗原构建HBV模型。造模成功的大鼠随机分为HBV组、ATR-Ⅰ组(50μg/kg)、cGAS-ST... 目的:探讨白术内酯Ⅰ(ATR-Ⅰ)调节cGAS-STING通路对乙型肝炎病毒(HBV)感染大鼠肝功能的影响。方法:随机选择10只大鼠记为对照组(NC),其余大鼠尾静脉注射HBV抗原构建HBV模型。造模成功的大鼠随机分为HBV组、ATR-Ⅰ组(50μg/kg)、cGAS-STING通路抑制剂(RU.521)组(450μg/kg)、ATR-Ⅰ+RU.521组(50μg/kg ATR-Ⅰ+450μg/kg RU.521),每组10只,NC组、HBV组注射等量生理盐水,1次/d,持续1周。ELISA检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、IFN-γ、IL-2、TNF-α、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)含量;HE染色检测肝脏组织病理学情况;Masson染色检测肝纤维化程度;Western blot检测肝组织cGASSTING通路蛋白表达。结果:HBV组较NC组胶原容积分数、ALT、AST、HBsAg、HBeAg含量、HA、LN和PCⅢ、IFN-γ、TNF-α和IL-2水平升高,cGAS、STING、p-TBK1/TBK1、p-IRF3/IRF3及IFN-β水平下降(P<0.05);与HBV组比较,ATR-Ⅰ组肝脏损伤、肝纤维化程度改善,胶原容积分数、ALT、AST、HBsAg、HBeAg含量、HA、LN和PCⅢ、IFN-γ、TNF-α和IL-2水平下降(P<0.05),cGAS、STING、p-TBK1/TBK1、p-IRF3/IRF3及IFN-β水平升高(P<0.05),RU.521组呈现相反趋势,RU.521消除了ATR-Ⅰ对HBV大鼠肝功能的改善作用。结论:ATR-Ⅰ可能通过激活cGAS-STING通路改善HBV大鼠肝功能。 展开更多
关键词 白术内酯 cgas-sting通路 乙型肝炎病毒 肝纤维化 肝功能
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cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路介导内皮祖细胞对系统性红斑狼疮相关性动脉粥样硬化的保护作用
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作者 林秋玉 何思懿 +9 位作者 刘玲娟 黄鹏 张路 陶思思 徐志泉 任翼 莫双红 李虹艾 向伟 何小解 《中国医师杂志》 CAS 2024年第12期1766-1772,共7页
目的研究内皮祖细胞(EPCs)对系统性红斑狼疮(SLE)动脉硬化小鼠的主动脉损伤的抑制作用。方法应用降植烷注射APOE^(-/-)小鼠和高脂饮食建立狼疮血管损伤模型,然后将实验小鼠分为正常对照组(ND组)、高脂饮食组(HFD组)、高脂饮食+SLE血管... 目的研究内皮祖细胞(EPCs)对系统性红斑狼疮(SLE)动脉硬化小鼠的主动脉损伤的抑制作用。方法应用降植烷注射APOE^(-/-)小鼠和高脂饮食建立狼疮血管损伤模型,然后将实验小鼠分为正常对照组(ND组)、高脂饮食组(HFD组)、高脂饮食+SLE血管损伤组(HFD+SLE组)、高脂饮食+SLE血管损伤+羟氯喹治疗组(HFD+SLE+Hydro组)、高脂饮食+SLE血管损伤+EPCs治疗组(HFD+SLE+EPCs组),实验末采集各组小鼠的尿液、血液和主动脉组织,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠尿蛋白含量和血清Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)浓度,免疫组化和蛋白印迹法(WB)检测各组小鼠主动脉中环鸟苷酸腺苷酸合酶/干扰素基因刺激因子/Ⅰ型干扰素(cGAS/STING/IFN-1)通路的激活情况、炎症因子、黏附分子和趋化因子的水平,采用油红染色检测主动脉中脂质沉积情况。结果ELISA结果显示,与正常对照组比较,HFD+SLE组尿蛋白及血清IFN-Ⅰ水平升高,EPCs治疗可降低SLE动脉硬化小鼠尿蛋白和血清IFN-Ⅰ水平;WB结果显示,HFD+SLE组CD19、CD68、CD34、趋化因子以及cGAS、p-STING、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)和IFN-Ⅰ表达升高,羟氯喹和EPCs能降低上述因子水平。cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路参与了SLE动脉粥样硬化的发生发展;EPCs与羟氯喹均可抑制cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号激活,从而减轻SLE小鼠的动脉硬化。结论cGAS/STING/IFN-Ⅰ通路参与了SLE动脉粥样硬化的发展。EPCs可通过抑制cGAS/STING信号活化,减少IFN-Ⅰ的表达与分泌,进而减轻血管炎症反应,阻抑SLE相关动脉粥样硬化的发展。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 红斑狼疮 系统性 动脉粥样硬化 型干扰素 cgas/sting信号通路
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Hepatitis B virus confers innate immunity evasion through hepatitis B virus-miR-3 down-regulation of cGAS-Sting-IFN signaling
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作者 Zhen-Yu Xu Jia-Shi Gao +3 位作者 Ying He Xin-Qiang Xiao Guo-Zhong Gong Min Zhang 《World Journal of Hepatology》 2025年第2期159-169,共11页
BACKGROUND Hepatitis B virus(HBV)evades the innate immunity and leads to persistent chronic infection,but the molecular mechanism is still not well known.AIM To investigate whether HBV-miR-3 is involved in HBV immune ... BACKGROUND Hepatitis B virus(HBV)evades the innate immunity and leads to persistent chronic infection,but the molecular mechanism is still not well known.AIM To investigate whether HBV-miR-3 is involved in HBV immune evasion.METHODS HBV-miR-3 agomir and antagomir were employed to verify the effectiveness of HBV-miR-3 on cGAS-Sting-IFN pathway through the experiments on relative luciferase activity,cGAS protein expression,Sting phosphorylation and interferon(IFN)production.RESULTS HBV-miR-3 down-regulates cGAS protein expression post-transcriptionally by inhibition of cGAS 3’-untranslated region(3’-UTR)activity,which results in lower Sting phosphorylation and IFN production.HBV-miR-3 antagomir rescued cGAS protein expression,Sting phosphorylation and IFN-βproduction.CONCLUSION HBV-miR-3 plays an important role in HBV immunity evasion by targeting cGAS 3’-UTR and interfering with cGAS-Sting-IFN pathway. 展开更多
关键词 Hepatitis B virus HBV-miR-3 cgas sting ifn-Β
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5⁃羟色胺调控抗病毒先天免疫的作用及机制探究 被引量:4
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作者 于希平 李森 +3 位作者 李佩瑶 张学敏 李慧艳 宋增庆 《军事医学》 CAS CSCD 2023年第10期730-734,共5页
目的探究经典神经递质5⁃羟色胺(5⁃HT)对抗DNA病毒先天免疫的影响与作用机制。方法使用5⁃HT ELISA试剂盒检测1型单纯疱疹病毒(HSV⁃1)感染后小鼠血液中5⁃HT含量变化;在细胞水平使用5⁃HT或5⁃HT转运体抑制剂预处理后进行外源DNA转染或HSV⁃1... 目的探究经典神经递质5⁃羟色胺(5⁃HT)对抗DNA病毒先天免疫的影响与作用机制。方法使用5⁃HT ELISA试剂盒检测1型单纯疱疹病毒(HSV⁃1)感染后小鼠血液中5⁃HT含量变化;在细胞水平使用5⁃HT或5⁃HT转运体抑制剂预处理后进行外源DNA转染或HSV⁃1感染,Western印迹在蛋白质水平检测胞内cGAS⁃STING通路激活情况,实时定量PCR在mRNA水平检测Ⅰ型干扰素及病毒复制水平。体内使用5⁃HT给药后进行HSV⁃1感染,收集血样采用ELISA试剂盒检测血清Ⅰ型干扰素水平,实时定量PCR检测器官中病毒复制量。结果HSV⁃1病毒感染小鼠后,小鼠血液内5⁃HT含量显著上调,在机体或细胞水平给予5⁃HT预处理均会抑制HSV⁃1病毒介导的Ⅰ型干扰素产生,同时病毒复制增强;机制研究发现5⁃HT可能通过5⁃HT转运体进入胞内发挥作用,抑制cGAS⁃STING通路关键蛋白磷酸化,进而抑制下游Ⅰ型干扰素基因的表达,从而影响宿主的抗病毒天然免疫能力。结论5⁃HT可抑制机体cGAS⁃STING通路介导的抗DNA病毒先天免疫,有望为抗病毒药物研发找到新的靶点。 展开更多
关键词 抗病毒免疫 1型单纯疱疹病毒 5⁃羟色胺 型干扰素 cgassting通路
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