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真核生物mRNA差显技术(Differential Display)的研究进展 被引量：12
1
作者 李玉京 李子银 李振声 《生物技术通报》 CAS CSCD 1998年第5期23-30,共8页
真核生物ｍＲＮＡ差显技术（ＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｌＤｉｓｐｌａｙ）的创立及其对该技术的一系列改进，为研究与生殖、发育、细胞分化、癌变、病变、衰老、程序化死亡及抗逆性与抗病性等生命过程有关的基因的差异表达，以及有关基因的... 真核生物ｍＲＮＡ差显技术（ＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｌＤｉｓｐｌａｙ）的创立及其对该技术的一系列改进，为研究与生殖、发育、细胞分化、癌变、病变、衰老、程序化死亡及抗逆性与抗病性等生命过程有关的基因的差异表达，以及有关基因的分子克隆提供了有效工具。本文简要概述差显技术的原理、优越性、主要缺陷、技术改进等方面的研究进展。 展开更多
关键词 真核生物 MRNA 差别显示 CDNA-AFLP cdna-rflp
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DNA和cDNA水平对比研究施肥对稻田土壤细菌多样性的影响 被引量：3
2
作者 王聪 吴讷 +3 位作者 侯海军 汤亚芳 沈健林 秦红灵 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第11期4372-4379,共8页
依托长沙农业环境观测研究站不同施肥方式长期定位试验,直接从土壤中抽提总DNA和RNA,应用T-RFLP和RTPCR技术在DNA和c DNA水平对比研究施肥对亚热带稻田土壤细菌丰度和群落结构的影响.结果表明,施肥和秸秆还田显著改变了土壤细菌群落组成... 依托长沙农业环境观测研究站不同施肥方式长期定位试验,直接从土壤中抽提总DNA和RNA,应用T-RFLP和RTPCR技术在DNA和c DNA水平对比研究施肥对亚热带稻田土壤细菌丰度和群落结构的影响.结果表明,施肥和秸秆还田显著改变了土壤细菌群落组成(DNA水平)和转录组成(c DNA水平)结构,且不同处理中DNA水平的T-RFLP图谱与cDNA水平相差很大.施肥和秸秆还田降低了土壤中存在的细菌多样性,对土壤中转录的细菌多样性没有影响.土壤16S rRNA基因丰度(DNA水平)平均是其转录丰度(c DNA水平)的337倍,与不施氮肥处理(N0)相比,平衡施肥(NPK)没有改变土壤细菌的数量,在平衡施肥的基础上进行秸秆还田增加了土壤细菌的数量,但高量与低量秸秆还田没有显著差异.RDA分析表明,稻田土壤中铵态氮含量是调控各处理土壤中存在及转录的细菌群落的关键因子.总体而言,不管在DNA还是c DNA水平,研究施肥对土壤细菌丰度的影响均是可行并可信的;但只有在c DNA水平开展研究,才能有效发现细菌群落对环境的适应性. 展开更多
关键词 施肥 土壤细菌 c DNA T-RFLP RT-PCR
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LDL受体基因cDNA的RT－PCR分离、克隆及其在RFLP中的应用 被引量：1
3
作者 周天鸿 王彤歌 +2 位作者 李月琴 谢建雄 刘飞鹏 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1996年第5期535-539,共5页
利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分离低密度脂蛋白受体基因ｃＤＮＡ，将长为２６０５ｂｐ的ｃＤＮＡ插入质粒ｐＪＮ６，并经全序列测定证实，该序列与已报道序列相比，存在两个变异碱基，即第７５４位Ｃ→Ｔ，和１６５４位的Ｇ→Ａ，这两个变异碱... 利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分离低密度脂蛋白受体基因ｃＤＮＡ，将长为２６０５ｂｐ的ｃＤＮＡ插入质粒ｐＪＮ６，并经全序列测定证实，该序列与已报道序列相比，存在两个变异碱基，即第７５４位Ｃ→Ｔ，和１６５４位的Ｇ→Ａ，这两个变异碱基并不改变编码的氨基酸，利用ＬＤＬ受体基因ｃＤＮＡ中的ＣｌａⅠ片段作为探针，检测到ＬＤＬ受体基因上外显子８的ＳｔｕⅠ位点是个限制性片段长度多态性位点。所克隆的ｃＤＮＡ含有可译框架的全部密码，因此可作为基因表达材料。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白 受体基因 RT-PCR cDNA RFLP
原文传递
禽传染性支气管炎病毒免疫原基因cDNA的构建与鉴定
4
作者 王林川 刘福安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期136-141,共6页
以ＩＢＶＢｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｓ１基因两侧２１个碱基的对应序列来合成引物，并在两引物Ｏｌｉｇｏ５、Ｏｌｉｇｏ３的５端分别加有ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切位点，对ＩＢＶ标准毒株Ｍ４１、广东地方肾病变型致弱株Ｄ４１作Ｒ... 以ＩＢＶＢｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｓ１基因两侧２１个碱基的对应序列来合成引物，并在两引物Ｏｌｉｇｏ５、Ｏｌｉｇｏ３的５端分别加有ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切位点，对ＩＢＶ标准毒株Ｍ４１、广东地方肾病变型致弱株Ｄ４１作ＲＴ－ＰＣＲ（反转录－聚合酶链反应），得到了１７２０ｂｐ预计大小的ＤＮＡ片段，又经Ｍ４１株ＰＣＲ产物的ＨａｅⅢ酶切分析，表明此ＤＮＡ片段即为ＩＢＶＳ１基因片段；并用此对引物，以Ｏ１ｉｇｏ３作限制性引物（终浓度０．８ｎｇ／μｌ），两引物浓度比例为１∶１０时，得到Ｄ４１株Ｓ１基因不对称ＰＣＲ的单、双链产物；对广东肾变病鸡中分离致弱的ＩＢＶＤ４１株Ｓ１基因ＰＣＲ产物的ＨａｅⅢ酶切分析，发现其与Ｍ４１株的相同，与美国标准肾变株Ｇｒａｙ、Ｈｏｌｔｅ不同，根据国外同类研究制定的判定标准，Ｄ４１株应归属为马萨诸塞血清型，并由此证明华南地区流行的ＩＢＶ毒株已有变异；将Ｄ４１株Ｓ１基因ＰＣＲ产物插入质粒ｐＵＣ１８，得到两株重组质粒转化菌，以重组质粒ＤＮＡ作模板，用ｆｍｏｌＴＭ测序系统得出Ｄ４１株Ｓ１基因５一端的１６７个碱基序列，其与Ｂｅａｕｄｅｔｅ株的同源性为７４．２５％，与Ｍ４１株的同源性为７１．２６％，对应? 展开更多
关键词 禽 传染性支气管炎 病毒 免疫 基因 CDNA 疫苗
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影响籼粳稻DNA限制性片段长度多态性检测的因素分析 被引量：3
5
作者 吴志浩 徐云碧 朱立煌 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1993年第5期455-461,共7页
对窄叶青(籼稻)和京系17(梗稻)的RFLP进行了系统分析。结果表明,某种酶多态性检测能力与同时检测到此多态性的其余酶的数目之间存在极显著的正相关(r=0.962**)。由此推论,籼粳稻大部分RFLP可能来自大范围DNA的结构变化而不是碱基取代。c... 对窄叶青(籼稻)和京系17(梗稻)的RFLP进行了系统分析。结果表明,某种酶多态性检测能力与同时检测到此多态性的其余酶的数目之间存在极显著的正相关(r=0.962**)。由此推论,籼粳稻大部分RFLP可能来自大范围DNA的结构变化而不是碱基取代。cDNA克隆虽然具有高度的保守性,但却具有比基因组克隆更高的多态性检测能力。在实验使用的探针范围内,探针长度和检测到的多态性无相关性。由探针检测到的多态性位点均匀地散布在水稻的12对染色体上,这可能是这两个品种所属的亚种之间的遗传距离较大的原因。 展开更多
关键词 RFLP 稻 DNA 籼稻 粳稻 基因组
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先天性心脏病家系心室肌球蛋白轻链1基因的RFLP分析
6
作者 王永业 GeorgeJackowski QinweiShi 《中国优生与遗传杂志》 1993年第3期1-5,9,共6页
本研究利用人心室肌球蛋白轻链1cDNA探针对先天性心脏病家系心室肌球蛋白轻链1基因进行了RFLP分析。从患有四种不同先天性心脏病的9个家系40名成员和13名无血缘关系患者的RFLP分析结果发现,有两个家系呈现限制酶切片段多态性,但这种限... 本研究利用人心室肌球蛋白轻链1cDNA探针对先天性心脏病家系心室肌球蛋白轻链1基因进行了RFLP分析。从患有四种不同先天性心脏病的9个家系40名成员和13名无血缘关系患者的RFLP分析结果发现,有两个家系呈现限制酶切片段多态性,但这种限制性酶切片段多态性似与先天性心脏病的发生没有联系。 展开更多
关键词 先天性心脏病 家系 心室肌球蛋白轻链1基因 RFLP
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