蟾毒它灵促进内质网应激和细胞自噬抑制肝细胞癌增殖

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作者 杨芳 李雨晨 +3 位作者 王章斌 李瑞梅 冯承涛 赵永旭 《山西医科大学学报》 2026年第1期1-10,共10页

目的探讨蟾毒它灵(Bufotalin)对肝细胞癌的治疗作用及其机制。方法人肝癌细胞株HepG2和Huh-7分别用0,10,25,50,100,500,1000 nmol/L的蟾毒它灵处理24,48 h,使用CCK-8法检测蟾毒它灵对细胞存活率的影响。用0,2.5,5,10 nmol/L的蟾毒它灵处... 目的探讨蟾毒它灵(Bufotalin)对肝细胞癌的治疗作用及其机制。方法人肝癌细胞株HepG2和Huh-7分别用0,10,25,50,100,500,1000 nmol/L的蟾毒它灵处理24,48 h,使用CCK-8法检测蟾毒它灵对细胞存活率的影响。用0,2.5,5,10 nmol/L的蟾毒它灵处理,检测蟾毒它灵对细胞克隆形成能力的影响。人肝癌细胞株HepG2和Huh-7分为空白对照组和蟾毒它灵组(500 nmol/L),流式细胞术检测蟾毒它灵对凋亡和细胞周期的影响;DCFH-DA荧光探针染色检测细胞活性氧的含量;转录组测序(RNA-seq)检测细胞整体基因表达和信号通路变化。使用250,500,1000 nmol/L的蟾毒它灵处理细胞,蛋白免疫印迹实验检测细胞内质网应激蛋白(ATF4,CHOP)和自噬相关蛋白(p62,Beclin1,LC3)的表达变化。人肝癌细胞株HepG2和Huh-7使用25,50,100,500,1000 nmol/L的蟾毒它灵添加或不添加10μmol/L的氯喹,使用CCK-8法检测抑制自噬对蟾毒它灵作用的影响。H22小鼠肝癌细胞注入KM小鼠进行荷瘤实验,设置空白对照组、阳性药物5-氟尿嘧啶组(30 mg/kg)、蟾毒它灵低剂量组(1 mg/kg)和高剂量组(2 mg/kg),检测蟾毒它灵对肿瘤体内增殖的影响。结果10,25,50,100 nmol/L的蟾毒它灵处理24,48 h后细胞存活率呈剂量依赖性降低(P<0.01)。2.5,5,10 nmol/L的蟾毒它灵处理后,细胞克隆形成能力也呈剂量依赖性降低(P<0.05)。与空白对照组相比,蟾毒它灵组细胞凋亡比率增加(P<0.05),G0/G1期细胞降低(P<0.05)、G2/M期细胞增加(P<0.05)。与空白对照组比较,蟾毒它灵组活性氧产生增加(P<0.05);内质网应激蛋白ATF4、CHOP和细胞自噬通路基因蛋白Beclin1、LC3-II表达水平显著上调(P<0.01)。与蟾毒它灵组比较,蟾毒它灵+氯喹组细胞存活率升高(P<0.05)。小鼠荷瘤实验结果表明,蟾毒它灵显著抑制小鼠体内肝癌细胞的增殖(P<0.05)。结论蟾毒它灵通过诱导内质网应激和细胞自噬,促进细胞凋亡并抑制其增殖。 展开更多

关键词 蟾毒它灵 肝细胞癌 细胞自噬 内质网应激 活性氧 抗肿瘤

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复方斑蝥胶囊联合TACE加超声微波消融术治疗中晚期肝细胞癌患者的效果 被引量：1

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作者 李春 刘志兴 刘旮 《实用临床医学(江西)》 2025年第2期36-41,共6页

目的观察复方斑蝥胶囊联合经肝动脉化疗栓塞(TACE)加超声微波消融术治疗中晚期肝细胞癌(HCC)患者的疗效。方法选取2020年5月至2023年5月于南昌大学第一附属医院住院的中晚期HCC患者100例,按随机数字表法分为对照组(TACE加超声微波消融治... 目的观察复方斑蝥胶囊联合经肝动脉化疗栓塞(TACE)加超声微波消融术治疗中晚期肝细胞癌(HCC)患者的疗效。方法选取2020年5月至2023年5月于南昌大学第一附属医院住院的中晚期HCC患者100例,按随机数字表法分为对照组(TACE加超声微波消融治疗)和联合治疗组(复方斑蝥胶囊联合TACE加超声微波消融治疗),每组各50例。比较2组治疗后客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)及总生存期(OS),治疗前后实验室指标[总胆红素、间接胆红素、甲胎蛋白(AFP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、癌胚抗原(CEA)、CA-125、白细胞计数、血清白蛋白]的变化;单因素和多因素COX回归分析影响患者OS的因素。结果联合治疗组ORR和DCR分别为68%和90%;而对照组ORR和DCR分别为58%和84%。治疗前2组实验室指标比较,其差异无统计学意义(P>0.05),但治疗后联合治疗组的AFP、CEA、CA-125、总胆红素、AST较对照组更低(P<0.05);联合治疗组的OS较对照组更长(P<0.05)。年龄>65岁、总胆红素>34μmol·L^(-1)、AFP>400μg·L^(-1)、多个肿瘤是影响中晚期HCC患者OS的独立危险因素。结论复方斑蝥胶囊联合TACE加超声微波消融术治疗中晚期HCC疗效更好,患者生存期更长,且能有效降低肿瘤标志物水平,保护肝功能。 展开更多

关键词 复方斑蝥胶囊 中晚期肝细胞癌 经肝动脉化疗栓塞 超声微波消融 疗效

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蟾毒它灵抗骨肉瘤作用机制的网络药理学和体外试验研究

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作者 孟晶晶 丁启轩 +5 位作者 胡玉洁 徐玲艳 张婧娴 张湘奇 陈君君 韩永龙 《中国药业》 2025年第23期46-57,共12页

目的探讨蟾毒它灵诱导自噬抗骨肉瘤的作用机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法筛选15种华蟾素注射液体外抗骨肉瘤的活性成分,采用流式细胞术和免疫印迹(Western blot)法检测其对143B和SAOS2细胞凋亡的影响,并构建类器官模型验证其抑... 目的探讨蟾毒它灵诱导自噬抗骨肉瘤的作用机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法筛选15种华蟾素注射液体外抗骨肉瘤的活性成分,采用流式细胞术和免疫印迹(Western blot)法检测其对143B和SAOS2细胞凋亡的影响,并构建类器官模型验证其抑制作用。通过GeneCards,DisGeNET,Comparative Toxicogenomics Database,Pharmmapper,SEA等数据库预测骨肉瘤相关靶点,通过SwissTargetPrediction等数据库预测蟾毒它灵的作用靶点,采用Venny 2.1.0软件获取共有靶点,采用String数据库和CytoScape 3.10.1软件构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,并进行基因本体论(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。采用AutoDock Tools 1.5.7软件对蟾毒它灵和自噬关键靶点进行分子对接验证,选用3-methyladenine(3-MA)作为自噬抑制剂,通过Western blot法、CCK-8法和流式细胞术验证蟾毒它灵调控自噬对细胞增殖和凋亡的影响。结果蟾毒它灵是华蟾素注射液中抗骨肉瘤细胞增殖能力最强的活性成分,可诱导143B和SAOS2细胞凋亡,上调Bax表达,下调B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)表达,且能显著抑制类器官生长,并引起部分凋亡。网络药理学分析结果显示,筛选出蟾毒它灵抗骨肉瘤的潜在靶点88个,蟾毒它灵抗骨肉瘤的作用机制可能与自噬、血管内皮生长因子(VEGF)信号通路、表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶等有关。分子对接结果显示,蟾毒它灵与自噬靶点LC3B和P62结合稳定。体外试验结果显示,蟾毒它灵可上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达,下调P62蛋白表达,诱导骨肉瘤细胞自噬。加入3-MA后,蟾毒它灵对LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和P62蛋白的调控作用被逆转,细胞增殖能力增强,凋亡水平降低。结论蟾毒它灵可能通过诱导自噬发挥抗骨肉瘤作用,为基于自噬调控的骨肉瘤靶向治疗提供了理论依据。 展开更多

关键词 蟾毒它灵 骨肉瘤 网络药理学 体外试验 自噬 LC3B蛋白 P62蛋白

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蟾毒它灵通过抑制DNA损伤修复增加胰腺癌细胞对阿霉素化疗敏感性

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作者 尹明文 韩书婷 +4 位作者 薛蛟 苗筠杰 赵诗颖 于泽 金晶 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第10期1410-1420,共11页

胰腺癌已成为全球范围内最具挑战性的恶性肿瘤之一,其对药物的高度耐药性是导致化疗失败的主要因素。因此,提高胰腺癌对化疗敏感性成为当前研究的重点,本研究探讨了蟾毒它灵(bufotaline,BT)的抗肿瘤作用,它是一种从中药蟾蜍中提取的蟾... 胰腺癌已成为全球范围内最具挑战性的恶性肿瘤之一,其对药物的高度耐药性是导致化疗失败的主要因素。因此,提高胰腺癌对化疗敏感性成为当前研究的重点,本研究探讨了蟾毒它灵(bufotaline,BT)的抗肿瘤作用,它是一种从中药蟾蜍中提取的蟾蜍甾二烯类化合物,具有显著的抗肿瘤活性。我们重点研究蟾毒它灵在增强胰腺癌细胞对阿霉素(adriamycin,ADR)化疗敏感性方面的潜力,并阐明了其潜在的分子机制。通过CCK-8及集落形成实验证明,蟾毒它灵抑制化疗药阿霉素诱导的胰腺癌细胞Patu-8988T、Aspc-1和Patu-8988S的存活。并且发现使用蟾毒它灵处理阿霉素胰腺癌耐药细胞可以将IC_(50)降低到正常胰腺癌细胞水平。采用蛋白质免疫印迹技术、免疫荧光、彗星实验和TUNEL检测DNA损伤程度,结果显示,蟾毒它灵促进阿霉素诱导的胰腺癌细胞DNA损伤。此外,利用RNA-seq分析胰腺癌细胞Patu-8988T在阿霉素单独处理及阿霉素与蟾毒它灵联合处理后的基因表达变化,并通过qRT-PCR检测发现,蟾毒它灵可以下调DNA损伤修复蛋白质NBS 1和RAD 50的基因表达。同时利用蛋白质免疫印迹检测进一步研究发现,蟾毒它灵抑制DNA损伤应答通路相关修复蛋白质的表达,并且通过免疫荧光实验发现,蟾毒它灵也能阻断ATM/CHK2信号通路的激活。最后,利用裸鼠皮下移植瘤模型发现,蟾毒它灵与阿霉素联合治疗可抑制胰腺癌生长。综上所述,蟾毒它灵促进了阿霉素诱导的胰腺癌细胞化疗敏感性;阿霉素联合蟾毒它灵治疗通过下调NBS 1和RAD 50的基因表达,降低DNA损伤应答通路的修复蛋白质水平,进而阻断ATM/CHK2介导的DNA损伤应答(DNA damage repair,DDR)信号通路,延缓DNA损伤修复。 展开更多

关键词 胰腺癌 DNA损伤修复 蟾毒它灵 化疗敏感性

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UFLC-MS/MS法同时测定加味西黄丸中5个成分的含量

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作者 杨艳 宫睿 +7 位作者 王星 李玉华 于文杰 刘杨 李乐乐 于春宇 关皎 朱鹤云 《药物分析杂志》 北大核心 2025年第10期1709-1716,共8页

目的:建立一种同时测定加味西黄丸中5个成分(沙蟾毒精、蟾毒它灵、蟾毒灵、酯蟾毒配基和华蟾酥毒基)含量的超快速液相色谱-串联质谱法。方法:运用UFLC-MS/MS技术,采用Shimadzu Shim-Pack XR-ODS(75 mm×3.0 mm,2.2μm)色谱柱,以0.1... 目的:建立一种同时测定加味西黄丸中5个成分(沙蟾毒精、蟾毒它灵、蟾毒灵、酯蟾毒配基和华蟾酥毒基)含量的超快速液相色谱-串联质谱法。方法:运用UFLC-MS/MS技术,采用Shimadzu Shim-Pack XR-ODS(75 mm×3.0 mm,2.2μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.6 mL·min^(-1),柱温35℃;采用电喷雾离子源,正离子方式检测,多反应监测模式。结果:沙蟾毒精、蟾毒它灵、蟾毒灵、酯蟾毒配基和华蟾酥毒基的质量浓度分别在0.1~4μg·mL^(-1)(r=0.9993)、0.05~2μg·mL^(-1)(r=0.9983)、0.05~2μg·mL^(-1)(r=0.9987)、0.025~1μg·mL^(-1)(r=0.9996)、0.1~4μg·mL^(-1)(r=0.9990)范围内与峰面积呈良好的线性关系;5个成分的平均回收率(n=9)分别为99.1%、98.9%、100.0%、98.9%和99.7%。6批次加味西黄丸样品中上述5个成分的含量范围分别在19.28~23.58、3.31~4.04、3.64~4.30、1.58~1.93、5.54~6.91μg·g^(-1)。结论:本方法简便、快速,灵敏度高,可用于加味西黄丸的质量控制研究。 展开更多

关键词 加味西黄丸 沙蟾毒精 蟾毒它灵 蟾毒灵 酯蟾毒配基 华蟾酥毒基 超快速液相色谱-串联质谱法

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复方斑蝥胶囊治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及对生存期、免疫功能的影响

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作者 刘省超 刘宪青 《肿瘤基础与临床》 2025年第5期625-629,共5页

目的探讨复方斑蝥胶囊治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及对生存期、免疫功能的影响。方法选取2021年1月至2023年6月濮阳市第三人民医院收治的64例晚期NSCLC患者,以随机抽样法将其均分为观察组和对照组,每组32例。对照组以化疗+免疫治... 目的探讨复方斑蝥胶囊治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及对生存期、免疫功能的影响。方法选取2021年1月至2023年6月濮阳市第三人民医院收治的64例晚期NSCLC患者,以随机抽样法将其均分为观察组和对照组,每组32例。对照组以化疗+免疫治疗,观察组增加复方斑蝥胶囊治疗。评估对比2组临床疗效、肿瘤标志物、免疫功能、生活质量、生存期、治疗安全性。结果观察组治疗后客观缓解率、疾病控制率均高于对照组(χ^(2)=4.086,P=0.039;χ^(2)=4.525,P=0.033)。观察组治疗后鳞癌抗原、神经原特异性烯醇酶、细胞角蛋白21-1均低于对照组(t=7.078,P<0.001;t=5.156,P<0.001;t=5.259,P<0.001)。观察组治疗后CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均高于对照组,而CD8^(+)水平低于对照组(t=5.231,P<0.001;t=2.656,P=0.010;t=5.313,P<0.001;t=3.718,P<0.001)。观察组治疗后生理、社会家庭、情感、功能、肺癌相关症状评分均高于对照组(t=2.976,P=0.004;t=3.511,P=0.001;t=3.740,P<0.001;t=3.314,P=0.002;t=2.758,P=0.008)。观察组治疗后疾病进展时间、疾病无进展生存期、总生存期均高于对照组(t=3.053,P=0.003;t=3.469,P=0.001;t=4.616,P<0.001)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.474,P=0.491)。结论复方斑蝥胶囊治疗晚期NSCLC疗效显著,可提高免疫功能、生活质量,延长生存期。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 复方斑蝥胶囊 临床疗效 免疫功能 生存期

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中华大蟾蜍皮化学成分的研究 被引量：37

7

作者 杨立宏 张豁中 +4 位作者 张冰 陈丰 赖朝辉 徐利锋 金向群 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第9期679-683,共5页

从中华大蟾蜍(Bufo bufo gargarizans Cantor)皮水溶性部分应用制备型反相HPLC分离得到一个新蟾蜍毒素,根据光谱(UV,IR,~1HNMR,^(13)CNMR,EIMS,FDMS)、氨基酸分析及化学性质,确定其结构为Ⅰ所示,命名为蟾毒它灵3-丁二酰精氨酸酯,同时还... 从中华大蟾蜍(Bufo bufo gargarizans Cantor)皮水溶性部分应用制备型反相HPLC分离得到一个新蟾蜍毒素,根据光谱(UV,IR,~1HNMR,^(13)CNMR,EIMS,FDMS)、氨基酸分析及化学性质,确定其结构为Ⅰ所示,命名为蟾毒它灵3-丁二酰精氨酸酯,同时还分到三个已和蟾蜍毒素;蟾毒灵3-丁二酰精氨酸酯(Ⅱ),华蟾毒精3-丁二酰精氨酸酯(Ⅲ),脂蟾毒配基3-丁二酰精氨酸酯(Ⅳ)。 展开更多

关键词 中华大蟾蜍 蟾蜍毒素 分析

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HPLC-MS法同时测定六神丸中9种蟾蜍二烯内酯类化合物 被引量：20

8

作者 李娟 狄留庆 +3 位作者 李俊松 钱静 王恒斌 李全 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期700-705,共6页

目的建立HPLC-MS法同时测定六神丸中9种蟾蜍二烯内酯类化合物(和蟾蜍他灵、沙蟾毒精、远华蟾毒精、去乙酰华蟾毒它灵、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基)的方法。方法采用ODS-2(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以... 目的建立HPLC-MS法同时测定六神丸中9种蟾蜍二烯内酯类化合物(和蟾蜍他灵、沙蟾毒精、远华蟾毒精、去乙酰华蟾毒它灵、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基)的方法。方法采用ODS-2(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.15%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1 mL/min,柱温40℃,检测波长296 nm。HPLC-MS联用的色谱条件与HPLC分离基本条件一致,流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液。通过电喷雾离子源,正离子模式扫描,对六神丸中9种蟾蜍二烯内酯类化合物进行分析鉴别。结果 9种蟾蜍二烯内酯类化合物均得到良好分离,线性关系良好(r≥0.999 6)。加样回收率均在92%~105%,RSD<5%。应用建立的HPLC-MS方法测定了10批六神丸中9种蟾蜍二烯内酯类化合物的量,分别为和蟾蜍他灵0.40~0.88 mg/g,沙蟾毒精0.32~0.83 mg/g,远华蟾毒精0.61~2.11 mg/g,去乙酰华蟾毒它灵0.15~0.32 mg/g,蟾毒它灵0.84~1.85 mg/g,华蟾毒它灵25.76~62.14 mg/g,蟾毒灵0.96~2.06 mg/g,华蟾酥毒基2.30~4.75 mg/g,脂蟾毒配基1.20~2.61 mg/g。结论所建立的定量测定方法简便、快速、准确可靠,专属性强,可用于六神丸的质量控制。 展开更多

关键词 六神丸 蟾酥 蟾蜍二烯内酯 HPLC 和蟾蜍他灵 沙蟾毒精 远华蟾毒精 去乙酰华蟾毒它灵 蟾毒它灵 华蟾毒它灵 蟾毒灵 华蟾酥毒基 脂蟾毒配基

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中华大蟾蜍皮的化学成分 被引量：26

9

作者 张英 邱鹰昆 +3 位作者 陈继勇 博康宁 姜永涛 裴月湖 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期484-487,共4页

目的研究中华大蟾蜍皮的化学成分。方法利用反复硅胶柱、ODS反相柱、制备液相、重结晶等手段分离分离纯化化学成分,根据化合物的理化性质和光谱数据并参考文献鉴定其化学结构。结果从中华大蟾蜍皮中分离得到6个化合物:胆甾醇(cholestero... 目的研究中华大蟾蜍皮的化学成分。方法利用反复硅胶柱、ODS反相柱、制备液相、重结晶等手段分离分离纯化化学成分,根据化合物的理化性质和光谱数据并参考文献鉴定其化学结构。结果从中华大蟾蜍皮中分离得到6个化合物:胆甾醇(cholesterol,1)、棕榈酸胆甾烯酯(palmitatic acid cholesteryl ester,2)、蟾毒它灵(bufotalin,3)、沙蟾毒精(arenobufagin,4)、嚏根草配基(hellebrigenin,5)、嚏根草配基-3-辛二酸半酯(hellebrigenin-3-hemisuberate,6)。结论化合物6为新化合物。 展开更多

关键词 中华大蟾蜍 蟾毒它灵 沙蟾毒精 嚏根草配基 嚏根草配基-3-辛二酸半酯

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国产蟾酥药材质量综合评价研究 被引量：5

10

作者 姬诚 谢媛媛 +2 位作者 王义明 陈丽 罗国安 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期1466-1470,共5页

目的综合考察国产蟾酥药材质量。方法用HPLC测定14批蟾酥药材中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、蟾毒灵等7种指标成分含量,并考察样品中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、蟾毒灵等7种指标成分TLC鉴别和水分、总灰分、酸不溶灰分、醇浸出物等药材常规理... 目的综合考察国产蟾酥药材质量。方法用HPLC测定14批蟾酥药材中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、蟾毒灵等7种指标成分含量,并考察样品中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、蟾毒灵等7种指标成分TLC鉴别和水分、总灰分、酸不溶灰分、醇浸出物等药材常规理化实验项目。结果各样品中均可检测出7种指标成分的色谱峰,蟾酥药材指标成分含量和常规理化实验项目测定结果表明,不同产地蟾酥药材间品质差异较大。结论本实验为蟾酥药材综合质量评价体系的建立提供理论和实验依据。 展开更多

关键词 蟾酥 品质评价 华蟾酥毒基 脂蟾毒配基 蟾毒灵 蟾毒它灵 高效液相色谱法

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蟾毒它灵对人胃癌BGC-823细胞的促凋亡作用 被引量：11

11

作者 吴兴新 孙洋 +3 位作者 周晓斌 张剑 余伯阳 徐强 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 2007年第2期117-119,共3页

目的考察蟾蜍甾烯类化合物的生物转化产物蟾毒它灵(bufotalin)对BGC-823细胞的促凋亡作用,初步探讨其作用机理。方法MTT法检测细胞毒作用、Hoechst染色法和Annexin Ⅴ染色法检测细胞凋亡,免疫印迹杂交法检测裂解形式的caspase-3。结果... 目的考察蟾蜍甾烯类化合物的生物转化产物蟾毒它灵(bufotalin)对BGC-823细胞的促凋亡作用,初步探讨其作用机理。方法MTT法检测细胞毒作用、Hoechst染色法和Annexin Ⅴ染色法检测细胞凋亡,免疫印迹杂交法检测裂解形式的caspase-3。结果蟾毒它灵在1μmol/L时对BGC-823细胞的毒性作用达到50%以上,形态学观察和流式细胞仪检测结果显示蟾毒它灵可明显促进BGC-823细胞的凋亡,上调caspase-3的表达。结论蟾毒它灵对BGC-823细胞有明显的促凋亡作用,其作用机理可能通过caspase-3凋亡途径实现。 展开更多

关键词 蟾毒它灵 BGC-823细胞 凋亡 半胱天冬氨酸蛋白酶3

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静脉注射蟾毒它灵和华蟾毒它灵后大鼠胆汁中代谢产物的UPLC-UV-MS法分析 被引量：4

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作者 王也牧 丁存刚 +2 位作者 于垂亮 李周 葛庆华 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期676-680,共5页

建立了超高效液相色谱-紫外分光光度-质谱(UPLC-UV-MS)法研究蟾毒它灵和华蟾毒它灵静脉给药后大鼠胆汁中的代谢产物。UPLC的高分辨率能够基线分离胆汁中的原药和代谢物,UV光谱图揭示了各种化合物量的关系,MS进一步对代谢物进行结构表征... 建立了超高效液相色谱-紫外分光光度-质谱(UPLC-UV-MS)法研究蟾毒它灵和华蟾毒它灵静脉给药后大鼠胆汁中的代谢产物。UPLC的高分辨率能够基线分离胆汁中的原药和代谢物,UV光谱图揭示了各种化合物量的关系,MS进一步对代谢物进行结构表征。结果显示,大鼠胆汁中原药的含量小于5%,主要代谢物是去乙酰基并羟基化蟾毒它灵和去乙酰基华蟾毒它灵。表明蟾毒它灵在大鼠体内代谢途径主要是水解并羟基化,华蟾毒它灵主要是水解反应。 展开更多

关键词 蟾毒它灵 华蟾毒它灵 蟾蜍甾烯 超高效液相色谱 药物代谢

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蟾酥抗肿瘤有效成分的活性追踪分离及急性毒性研究 被引量：24

13

作者 于垂亮 侯惠民 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期307-311,共5页

目的从传统中药蟾酥中寻找抗肿瘤活性强而毒性低的化合物。方法采用追踪分离的方式,以体外肿瘤细胞生长抑制强度为活性指标,同时结合小鼠急性毒性实验,对蟾酥的主要化学成分进行初步研究。结果采用活性追踪分离方式,从蟾酥中分离得到具... 目的从传统中药蟾酥中寻找抗肿瘤活性强而毒性低的化合物。方法采用追踪分离的方式,以体外肿瘤细胞生长抑制强度为活性指标,同时结合小鼠急性毒性实验,对蟾酥的主要化学成分进行初步研究。结果采用活性追踪分离方式,从蟾酥中分离得到具有抑制肿瘤细胞生长活性同时对小鼠急性毒性较低的化合物蟾毒它灵,其对人非小细胞肺癌A549细胞具有较好的生长抑制作用,小鼠iv给药的LD50约为蟾毒灵的4倍,而且稳定性较好。结论综合化合物的活性、毒性及稳定性等因素,初步判断蟾毒它灵较其他同类化合物具有更好的抗肿瘤药物开发前景。 展开更多

关键词 蟾酥 蟾毒它灵 抗肿瘤 急性毒性 蟾毒灵

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HPLC法测定蟾酥中4种蟾毒内酯 被引量：7

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作者 徐玲玲 蔡国琴 +1 位作者 敬应春 张聪 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2151-2155,共5页

目的建立同时测定蟾酥药材中蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的方法。方法 10批蟾酥药材采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.04%三氟乙酸为流动相梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;柱温为35℃;... 目的建立同时测定蟾酥药材中蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的方法。方法 10批蟾酥药材采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.04%三氟乙酸为流动相梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;柱温为35℃;检测波长为296 nm。结果蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基分别在0.05～2.61μg(R2=1),0.10～4.96μg(R2=1),0.10～5.03μg(R2=1),0.10～5.18μg(R2=1)范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为97.62%,97.34%,97.23%,97.34%,RSD值均<2.0%。结论此方法简便、准确。10批不同来源的蟾酥样品测定结果表明,药材中蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基含有量相对稳定,脂蟾毒配基含有量则波动较大。 展开更多

关键词 HPLC 蟾蜍他灵 蟾毒灵 华蟾酥毒基 脂蟾毒配基 蟾酥

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蟾毒它灵通过线粒体途径诱导急性髓系白血病 HL-60细胞凋亡的实验研究 被引量：5

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作者 李玮 崔胜楠 +4 位作者 周智辉 李媛媛 何春玲 田淼 董昌虎 《中华全科医学》 2019年第6期932-935,954,共5页

目的研究蟾毒它灵对急性髓系白血病HL-60细胞的作用及其机制,为急性髓细胞白血病的治疗提供新的思路。方法用终浓度为0、40、80、160μg/mL的蟾毒它灵作用于对数生长期的HL-60细胞24 h后,用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,通过透射电子显... 目的研究蟾毒它灵对急性髓系白血病HL-60细胞的作用及其机制,为急性髓细胞白血病的治疗提供新的思路。方法用终浓度为0、40、80、160μg/mL的蟾毒它灵作用于对数生长期的HL-60细胞24 h后,用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,通过透射电子显微镜观察细胞内线粒体形态,蛋白免疫印迹法检测Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase-9基因表达情况,并用正常的外周血B淋巴细胞作为对照组观察该化合物对正常细胞的毒性作用。实验结果用SPSS 22.0统计学软件录入数据并进行检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果蟾毒它灵能够抑制HL-60细胞增殖并诱导其凋亡,且对正常细胞毒性作用相较于癌细胞小,差异有统计学意义(P<0.05);随着药物浓度增加,细胞核异形,出现核膜分离,异染色质明显增多,线粒体伴有水肿扩张,部分线粒体脊消失模糊、空泡化,而对照组线粒体形态较好;随着药物浓度增加,Bax/Bcl-2比例增加,Cleaved-Caspase-9基因表达逐渐增加,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论本实验结果表明蟾毒它灵对急性髓系白血病HL-60细胞这种非实体肿瘤细胞也有抑制作用,并且对正常细胞影响较小,其作用机制主要是通过线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 蟾毒它灵 线粒体途径 凋亡

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蟾毒它灵的研究进展 被引量：2

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作者 于垂亮 侯惠民 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期280-283,共4页

本文简要综述了蟾毒它灵的相关研究进展,其研究主要集中在提取分离、抗肿瘤作用机理、药物代谢动力学、毒性及合成等方面。

关键词 蟾酥 蟾毒它灵 抗肿瘤 综述

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基于HPLC-DAD-ELSD串联法同时测定麝香保心丸中8种成分的含量 被引量：6

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作者 石磊 谭广山 《中医药导报》 2021年第12期43-48,共6页

目的:建立麝香保心丸中苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基8种成分的含量测定方法,为麝香保心丸的质量评价提供实验参考。方法:采用HPLC-DADELSD串联法同时测定麝香保心丸中苯甲酸... 目的:建立麝香保心丸中苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基8种成分的含量测定方法,为麝香保心丸的质量评价提供实验参考。方法:采用HPLC-DADELSD串联法同时测定麝香保心丸中苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基8种化学成分的含量,色谱柱为Waters XBridgeTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为280 nm,柱温为30℃;蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度为40℃;载气流量1.5 L/min。结果:苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基分离度良好,分别在2.769~55.370μg/mL(r=0.9998)、2.285~45.700μg/mL(r=0.9999)、2.251~45.021μg/mL(r=0.9997)、2.445~48.902μg/mL(r=0.9998)、1.912~38.230μg/mL(r=0.9999)、2.350~46.990μg/mL(r=0.9998)、2.275~45.500μg/mL(r=0.9999)、2.335~46.700μg/mL(r=0.9998)的范围内线性关系良好;平均回收率分别为99.98%(RSD=0.86%)、100.09%(RSD=0.65%)、99.98%(RSD=0.66%)、101.95%(RSD=0.92%)、99.50%(RSD=0.40%)、100.09%(RSD=0.69%)、99.89%(RSD=0.66%)、99.99%(RSD=0.62%)。结论:该法操作方便、准确、重复性好,可客观、全面地对麝香保心丸的内在质量进行有效评价。 展开更多

关键词 麝香保心丸 苯甲酸苄酯 胆酸 蟾毒他灵 蟾毒灵 人参皂苷Rb1 人参皂苷Rb2 华蟾酥毒基 酯蟾毒配基 HPLC-DAD-ELSD串联法

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2-蟾毒它灵诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展 被引量：1

18

作者 李玮 崔胜楠 +1 位作者 周智辉 董昌虎 《中国医药导报》 CAS 2019年第1期38-40,48,共4页

蟾毒它灵是从蟾酥中提取的化合物,属于蟾蜍二烯酸内酯,它不仅有抗心律失常、强心、抗菌、局部麻醉、解热、利尿等作用,并且对许多实体肿瘤和非实体肿瘤也有很好的抑制作用。蟾毒它灵诱导肿瘤细胞凋亡的机制主要与线粒体途径、死亡受体... 蟾毒它灵是从蟾酥中提取的化合物,属于蟾蜍二烯酸内酯,它不仅有抗心律失常、强心、抗菌、局部麻醉、解热、利尿等作用,并且对许多实体肿瘤和非实体肿瘤也有很好的抑制作用。蟾毒它灵诱导肿瘤细胞凋亡的机制主要与线粒体途径、死亡受体途径及内质网应激有关,本文就蟾毒它灵诱导肿瘤细胞凋亡分子机制的研究现状进行综述。 展开更多

关键词 蟾毒它灵 肿瘤细胞 凋亡 分子机制 研究进展

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蟾酥干燥炮制前后化学成分和药效学变化考察 被引量：15

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作者 陈瀛澜 郭夫江 +3 位作者 卞雪莲 董志颖 吴迎春 李医明 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1816-1822,共7页

目的考察蟾酥Bufonis venenum鲜浆干燥炮制加工(日晒干燥、50℃真空干燥、50℃鼓风干燥、80℃鼓风干燥、冷冻干燥)前后化学成分及药效变化。方法 HPLC法和TLC法研究蟾酥不同干燥方式炮制前后化学成分的变化,MTT法测试不同炮制干燥品抑制... 目的考察蟾酥Bufonis venenum鲜浆干燥炮制加工(日晒干燥、50℃真空干燥、50℃鼓风干燥、80℃鼓风干燥、冷冻干燥)前后化学成分及药效变化。方法 HPLC法和TLC法研究蟾酥不同干燥方式炮制前后化学成分的变化,MTT法测试不同炮制干燥品抑制5种不同肿瘤细胞株增殖的效果。结果 5种不同加工炮制方法所得蟾酥,性状有较大差异;化学成分的种类及含量没有明显差异;华蟾酥毒基和脂蟾毒配基含量之和都符合《中国药典》2015年版标准,大于6%;50℃和80℃鼓风干燥所得蟾酥具有比其他干燥方法更强的肿瘤细胞抑制效果。结论日晒及50℃鼓风干燥法所得蟾酥符合《中国药典》要求的外观性状。真空干燥和冷冻干燥虽然颜色不符合《中国药典》的规定,但主要有效成分并未发生较大变化。 展开更多

关键词 蟾酥 炮制 干燥 沙蟾毒精 远华蟾毒精 蟾毒它灵 华蟾毒它灵 蟾毒灵 华蟾酥毒基 脂蟾毒配基

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蟾酥原浆HPLC指纹图谱建立及8种成分含量测定 被引量：8

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作者 张东红 金辉辉 +4 位作者 刘星雨 方倩倩 姚建标 王伟 王如伟 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期490-495,共6页

目的建立蟾酥原浆HPLC指纹图谱及原浆中8种成分含量测定方法,对不同产地蟾酥原浆进行成分含量差异比较,同时进行质量评价。方法以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长296 nm,体积流量1.2 m L/min,柱温30℃,进样量10μL;建立蟾酥原浆指纹... 目的建立蟾酥原浆HPLC指纹图谱及原浆中8种成分含量测定方法,对不同产地蟾酥原浆进行成分含量差异比较,同时进行质量评价。方法以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长296 nm,体积流量1.2 m L/min,柱温30℃,进样量10μL;建立蟾酥原浆指纹图谱,测定8个成分含量,对结果进行聚类分析和主成分分析。结果 18批样品指纹图谱中有12个共有峰,各样品相似度有所差异,8个成分在各自范围内线性关系良好(r2≥0.999 5),精密度、重复性RSD<0.5%,在30 h内稳定性较好(RSD<0.7%),日蟾毒它灵、沙蟾毒精、远华蟾蜍精、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基回收率平均值分别为103.7%、103.0%、102.9%、103.0%、103.9%、100.3%、103.4%、103.2%,且RSD均小于1.2%,8个成分含量测定结果及聚类分析和主成分分析结果可知不同产地原浆质量有所差异。结论该方法简便可靠,为蟾酥原浆质量把控提供一定依据及参考。 展开更多

关键词 蟾酥原浆 HPLC 日蟾毒它灵 沙蟾毒精 远华蟾蜍精 蟾毒它灵 华蟾毒它灵 蟾毒灵 华蟾酥毒基 脂蟾毒配基 指纹图谱 聚类分析 主成分分析

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