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Enhanced inhibition of triple-negative breast cancer metastases with high-dose Rujifang treatment assessed by optical flow cytometry in vivo
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作者 Fuli Zhang Hongliang Li +9 位作者 Xianxun Zhong Xi Zhu Xuezhang Chen Bin Wang Zhixia Zhu Xikang Chen Guiwen Liang Jingtao Zhang Xunbin Wei Huaqin Tian 《Journal of Innovative Optical Health Sciences》 2025年第5期89-98,共10页
Triple-negative bresst canær(TNBC)metastscis is particularly severe due to its aggressive nsture,leading to rapid disease progresion and significantly reduced survival rates.Rujifang(RJF),a traditional Chinese fo... Triple-negative bresst canær(TNBC)metastscis is particularly severe due to its aggressive nsture,leading to rapid disease progresion and significantly reduced survival rates.Rujifang(RJF),a traditional Chinese formula,has demonstrated potential anti-tumor effects and theability to inhibit TNBC metastasis.However,the efects af varying R.IF dors remain undear.This study utilized Laser-based in vino fow cytometry(IVFC)to monitor circulating tumor cells(CTCs)and evaluate the efficacy of R.IF at different doses.The results indicated that R.IF at the high dose inhibited both the number af CTC:and the formaton of metatatic foci more eflectively compared to the lower dose.TUNEL assays revealed that R.IF trentment promotes apoptosis of tumor cells,with a more pronounced effect observed at the higher dose.Immuno-fluorescence experiments demonstrated that administering a higher dose of R.IF suppreses theеxprescion of Kindlin-1 more effectively in the tumor microenvironment.Although higher doses showed enhanced efficacy,they might also lesd to an increase in side efects.These findings underscore the promise and challenges of using R.IF at high doses for anti-tumor therspy.They highlight the criticnl importance of optimizing the dose of R.JP in the treatment of TNBC and provide valuable insights for its dinical application. 展开更多
关键词 In vito fow cytometry fluorescence imaging triple-negative breæst cancer circulating tumorælls Rujifang dose
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Cry1Ac敏感和抗性小菜蛾bre-3和bre-5基因mRNA的表达差异研究
2
作者 李拓 张友军 +4 位作者 王少丽 吴青君 徐宝云 杨中侠 王沫 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期13-20,共8页
在室内选用Cry1Ac对小菜蛾Plutella xylostella 3龄幼虫进行抗性选育,获得相对抗性为356倍的抗性种群DBM1Ac-R品系。应用实时定量基因扩增荧光检测(real time quantitative PCR,real-time qPCR)技术检测敏感小菜蛾DBM1Ac-S和抗性小菜蛾D... 在室内选用Cry1Ac对小菜蛾Plutella xylostella 3龄幼虫进行抗性选育,获得相对抗性为356倍的抗性种群DBM1Ac-R品系。应用实时定量基因扩增荧光检测(real time quantitative PCR,real-time qPCR)技术检测敏感小菜蛾DBM1Ac-S和抗性小菜蛾DBM1Ac-R品系鞘糖脂(Glycosphingolipids,GSLs)合成酶基因bre-3和bre-5 mRNA在2龄、3龄、4龄和老熟幼虫、蛹及4龄中肠的表达情况。结果显示:bre-3和bre-5在两个品系的5个时期和4龄中肠均有表达,其中DBM1Ac-S品系的bre-3 mRNA在3龄、4龄和老熟幼虫的相对表达量显著高于DBM1Ac-R品系(P<0.05),分别为DBM1Ac-R品系的2.36、5.54和2.68倍;DBM1Ac-S品系的bre-5 mRNA在2龄至蛹期的相对表达量分别为DBM1Ac-R品系的1.19、3.13、1.78、1.75和1.65倍,其中由3龄到蛹期差异显著(P<0.05)。DBM1Ac-R品系3龄至老熟幼虫的bre-3和bre-5 mRNA相对表达量降低可能与小菜蛾长期的Cry1Ac汰选有一定的关系。比较同一种群、同一龄期(包括4龄中肠)的bre-3和bre-5 mRNA相对表达量差异时,发现bre-5相对表达量均高于bre-3。研究结果为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白受体之一GSLs的进一步研究提供了一定的基础。 展开更多
关键词 鞘糖脂 苏云金芽孢杆菌 受体 bre-3 bre-5
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LncRNA BRE-AS1在急性心肌梗死患者血清中表达及对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响 被引量:3
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作者 李现立 胡丰朝 韩兆帅 《中国循证心血管医学杂志》 2021年第1期34-37,46,共5页
目的探究lncRNA BRE-AS1在急性心肌梗死(AMI)患者血清中表达和对缺氧/复氧(H/R)诱导心肌细胞AC16损伤的影响。方法QPCR检测AMI患者血清和H/R处理12 h、24 h、48 h后AC16细胞中lncRNA BRE-AS1表达;将lncRNA BRE-AS1 siRNA和对照siRNA转染... 目的探究lncRNA BRE-AS1在急性心肌梗死(AMI)患者血清中表达和对缺氧/复氧(H/R)诱导心肌细胞AC16损伤的影响。方法QPCR检测AMI患者血清和H/R处理12 h、24 h、48 h后AC16细胞中lncRNA BRE-AS1表达;将lncRNA BRE-AS1 siRNA和对照siRNA转染至AC16细胞中,qPCR检测检测转染后细胞中lncRNA BRE-AS1表达;利用试剂盒检测细胞中氧化应激指标MDA、SOD和GSH-PX含量,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中p38/MAPK信号通路蛋白表达。结果与健康志愿者和常氧组AC16细胞相比,AMI患者血清和H/R处理12 h、24 h、48 h后细胞中lncRNA BRE-AS1表达显著增加(P<0.01)。与沉默对照组比较,沉默BRE-AS1组AC16细胞中lncRNA BRE-AS1表达显著降低(P<0.01)。与常氧组比较,H/R组AC16细胞中MDA含量、细胞凋亡率、p38/MAPK信号通路蛋白p-p38、p-ERK1/2表达显著增加,SOD和GSH-PX含量及细胞增殖能力显著降低(P<0.01);与H/R+沉默对照组比较,H/R+沉默BRE-AS1组AC16细胞中MDA含量、细胞凋亡率、p38/MAPK信号通路蛋白p-p38、p-ERK1/2表达显著降低,SOD和GSH-PX含量及细胞增殖能力显著增加(P<0.01)。结论LncRNA BRE-AS1在AMI患者血清中高表达,沉默lncRNA BRE-AS1能够抑制H/R诱导的心肌细胞损伤,其机制可能与抑制p38/MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 LncRNA bre-AS1 急性心肌梗死 AC16 p38/MAPK信号通路
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长链非编码RNA BRE-AS1慢病毒表达载体的构建与鉴定 被引量:1
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作者 周辉 余淦 +1 位作者 徐华 叶章群 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2018年第5期295-300,共6页
目的构建长链非编码RNA BRE-AS1的慢病毒表达载体。方法利用重叠延伸PCR法构建出BRE-AS1的全长目的片段,将全长目的片段及慢病毒载体质粒pCDH-CMV-MCSEF1分别双酶切后进行连接,转化到感受态大肠杆菌后,通过DNA测序鉴定筛选出阳性菌落,... 目的构建长链非编码RNA BRE-AS1的慢病毒表达载体。方法利用重叠延伸PCR法构建出BRE-AS1的全长目的片段,将全长目的片段及慢病毒载体质粒pCDH-CMV-MCSEF1分别双酶切后进行连接,转化到感受态大肠杆菌后,通过DNA测序鉴定筛选出阳性菌落,提取目的质粒。利用目的质粒制备包装慢病毒,并感染肾细胞癌细胞系OS-RC-2,分别利用荧光显微镜和荧光实时定量PCR检测细胞中BRE-AS1是否过表达。结果重叠延伸PCR得到正确的BRE-AS1全长序列,经过双酶切、连接、转化、筛选及DNA测序,成功构建重组慢病毒载体质粒pCDHBRE-AS1。通过荧光显微镜检测,几乎所有经过嘌呤霉素筛选的OS-RC-2细胞均具有绿色荧光,显示其被重组慢病毒感染;荧光实时定量PCR显示,感染了pCDH-BRE-AS1慢病毒的OS-RC-2细胞中,BRE-AS1的表达水平上升了38.5倍。EdU插入实验显示BRE-AS1抑制肾癌细胞的增殖。结论本研究成功构建了BRE-AS1的慢病毒表达载体,并证明BRE-AS1能抑制肾癌细胞增殖。 展开更多
关键词 bre-AS1 慢病毒载体 肾细胞癌 长链非编码RNA
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抗凋亡蛋白BRE、TNFR1和自体吞噬蛋白Beclin1在小鼠肝纤维化的表达及Reversine对其的影响 被引量:2
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作者 李莲莲 陈若翰 +5 位作者 陈淑珍 甄永苏 古维立 蔡冬青 崔耀隆 李嘉豪 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期1941-1944,共4页
目的研究抗凋亡蛋白BRE、TNFR1蛋白和自体吞噬蛋白Beclin1在小鼠肝纤维化的表达,并观察Reversine对其表达的影响。方法 24只昆明小鼠随机分为6组:第1组不作任何处理;第2组皮下注射0.1 mLCCl4/oil2,4 h后处死取肝组织;第3组皮下注射0.1 m... 目的研究抗凋亡蛋白BRE、TNFR1蛋白和自体吞噬蛋白Beclin1在小鼠肝纤维化的表达,并观察Reversine对其表达的影响。方法 24只昆明小鼠随机分为6组:第1组不作任何处理;第2组皮下注射0.1 mLCCl4/oil2,4 h后处死取肝组织;第3组皮下注射0.1 mL CCl4/oil4,8 h后处死;第4组皮下注射0.1 mL CCl4/oil,每周2次,连续注射6周,停止用药后15 d处死;第56、组方法同第4组,停止注射CCl4后分别用Reversine 501、00mg/(kg.d)皮下注射15 d,15 d后进行免疫组织化学检测,对BRE、TNFR1和Beclin1 3种蛋白的表达进行分析。结果免疫组化结果发现BRE、TNFR1和Beclin1 3种蛋白在CCl4诱肝纤维化过程中的表达明显上升,而经过纤维化抑制剂Reversine的处理后3种蛋白的表达下降至正常小鼠肝的水平。结论 BRE、TNFR1和Beclin1 3种应激反应分子可能在肝纤维化与肝炎发病中起重要作用,它们有可能成为肝病诊断标志物和治疗肝脏疾病的重要靶点。 展开更多
关键词 bre TNFR1 BECLIN1 肝纤维化 Reversine
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BRE-AS启动子负调控区变异与启动子活性、母猪繁殖力的关系 被引量:3
6
作者 王杨 王苗苗 +3 位作者 单保森 吴望军 杜星 李齐发 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1153-1160,共8页
[目的]本试验旨在研究BRE反义lncRNA(BRE antisense lncRNA,BRE-AS)基因启动子负调控区(PNRR)序列特征,以及变异位点多态性与母猪繁殖性状、启动子活性的关系。[方法]采用DNA测序法获得大白猪BRE-AS基因PNRR序列;利用池DNA测序筛选大白... [目的]本试验旨在研究BRE反义lncRNA(BRE antisense lncRNA,BRE-AS)基因启动子负调控区(PNRR)序列特征,以及变异位点多态性与母猪繁殖性状、启动子活性的关系。[方法]采用DNA测序法获得大白猪BRE-AS基因PNRR序列;利用池DNA测序筛选大白猪BRE-AS基因PNRR上的变异位点,DNA测序法进行基因分型;利用GLM模型进行变异位点多态性、单倍型与母猪繁殖性状的关联分析;利用荧光素酶报告系统分析变异对BRE-AS基因启动子活性的影响。[结果]大白猪BRE-AS基因的PNRR位于-952~-161 nt,长度792 bp。在大白猪BRE-AS基因PNRR的-794和-756 nt处发现了2个变异位点,分别将其命名为g.-794T>G和g.-756A>C。在大白猪群体中BRE-AS基因g.-794T>G位点有3种基因型,其中TT型为优势基因型(0.752),T为优势等位基因(0.863);在g.-756A>C位点有3种基因型,其中AA型为优势基因型(0.759),A为优势等位基因(0.868);2个变异位点形成3种合并基因型,其中TT/AA型为优势基因型(0.760),T-A为优势单倍型(0.869)。关联分析发现2个位点及其合并基因型均与母猪总产仔数(TNB)、产活仔数(NBA)和健仔数(NSP)等3个繁殖性状间显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)关联。荧光素酶活性分析发现G-C单倍型启动子活性极显著高于T-A单倍型(P<0.01)。[结论]BRE-AS是大白猪繁殖性状的候选基因,其PNRR上2个变异位点(g.-794T>G和g.-756A>C)通过影响启动子活性影响其母猪繁殖力。 展开更多
关键词 大白猪 bre-AS 多态性 繁殖性状 负调控区
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长链非编码RNABRE-AS1在非小细胞肺癌中的表达及其调控功能 被引量:3
7
作者 王娴 张艳秋 +3 位作者 申娴 尹立红 浦跃朴 梁戈玉 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期709-716,共8页
[背景]非小细胞肺癌(NSCLC)是严重危害人类健康的恶性肿瘤,长链非编码RNA(lncRNA)可能在其发生发展中发挥重要作用。[目的]探讨lncRNA BRE-AS1在NSCLC中的表达、生物学功能和调控作用,为进一步了解NSCLC发病机制提供理论依据。[方法]利... [背景]非小细胞肺癌(NSCLC)是严重危害人类健康的恶性肿瘤,长链非编码RNA(lncRNA)可能在其发生发展中发挥重要作用。[目的]探讨lncRNA BRE-AS1在NSCLC中的表达、生物学功能和调控作用,为进一步了解NSCLC发病机制提供理论依据。[方法]利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术对91例来自南京胸科医院的原发性NSCLC患者的癌组织和癌旁组织以及NSCLC细胞中BRE-AS1表达水平进行检测,应用TCGA RNASeqV2系统分析TCGA数据库中BRE-AS1在1016例NSCLC组织和110例正常组织中的表达水平。应用受试者工作特征(ROC)曲线评价BRE-AS1对NSCLC的诊断价值,应用t检验分析不同临床特征NSCLC患者的BRE-AS1表达水平。采用慢病毒转染在NSCLC细胞A549中构建BRE-AS1过表达稳转细胞株,分别以CCK8法和流式细胞术检测BRE-AS1对细胞增殖、周期及凋亡的影响。通过功能富集分析BRE-AS1的下游信号通路并用Western blotting法检测信号通路中关键蛋白表达水平。[结果]RT-qPCR和TCGA数据库分析结果显示BRE-AS1在NSCLC组织[RT-qPCR:差异表达倍数(FC)=-13.15,TCGA:FC=-4.85,P<0.05]和NSCLC细胞A549(FC=-4.87,P<0.05)中表达下调。ROC分析结果显示BRE-AS1对NSCLC具有较强的诊断能力(NSCLC组织:曲线下面积为0.916,95%CI:0.872~0.960;TCGA数据库:曲线下面积为0.853,95%CI:0.809~0.897)。CCK8结果显示,在A549细胞中过表达BRE-AS1后,细胞增殖能力在24、36、48 h降低(P<0.01);同时流式细胞术分析显示,过表达BRE-AS1阻滞A549细胞周期于G2/M期,并诱导细胞凋亡率上升(P<0.05)。功能富集分析发现,磷酸肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路与NSCLC发生发展相关(P<0.05),进一步Western blotting法分析发现,过表达BRE-AS1后,A549细胞中AKT3、p-AKT3、m TOR、p-mTOR表达以及p-AKT3/AKT3、p-mTOR/mTOR均下降,PTEN表达上升,提示过表达BRE-AS1可抑制A549细胞中PI3K-AKT-mTOR信号通路。[结论]BRE-AS1在NSCLC中表达下调,具有较高诊断价值。BRE-AS1可能通过抑制PI3KAKT-mTOR信号传导途径降低A549细胞生长活力,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,进而影响NSCLC发生发展。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA bre-AS1 PI3K-AKT-mTOR信号通路 调控机制
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野生热带灵芝Ganoderma tropicum(Jungh.) Bres.菌种分离与驯化研究 被引量:11
8
作者 刘国民 吴兴亮 +2 位作者 李娟玲 潘学峰 王康 《海南大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第1期24-29,共6页
以新鲜的野生热带灵芝子实体为材料,经过表面消毒后,分别接种到米饭培养基、CA培养基和PDA培养基上.结果表明,在这3种供试培养基上均能获得纯化的菌丝体.米饭培养基上的菌丝体的生长速度最快;其次为PDA培养基;CA培养基的菌丝体生长最慢... 以新鲜的野生热带灵芝子实体为材料,经过表面消毒后,分别接种到米饭培养基、CA培养基和PDA培养基上.结果表明,在这3种供试培养基上均能获得纯化的菌丝体.米饭培养基上的菌丝体的生长速度最快;其次为PDA培养基;CA培养基的菌丝体生长最慢.对子实体、担孢子和菌丝体的形态特征进行了系统的形态学观察,证实所分离和驯化的菌种为热带灵芝[Ganoderma tropicum(Jungh.) Bres.].用木屑作为主要原料制备培养料对热带灵芝进行了驯化栽培,实验结果表明,冬季较低温条件下形成的子实体多为鹿角状畸形芝;而在2月份中旬以后较高温度下形成的子实体多为正常的掌状子实体.笔者据此认为,在海口地区,热带灵芝宜在春末至秋末气温较高的季节栽培. 展开更多
关键词 热带灵芝 驯化 米饭培养基 CA培养基 PDA培养基
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神经管过表达BRE基因促进体节形成和分化
9
作者 雷健 王广 +4 位作者 李艳 常青 Kenneth KH Lee John YH Chan 杨雪松 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第12期1309-1313,共5页
目的探讨BRE基因对鸡胚胎早期体节发育的作用。方法显微注射法将含有BRE基因的质粒注射入HH10期鸡胚神经管,活体胚胎细胞电穿孔方法转染半侧神经管,以另一侧为正常对照侧,原位杂交及免疫荧光法观察过表达BRE基因后体节的发育。结果 BRE... 目的探讨BRE基因对鸡胚胎早期体节发育的作用。方法显微注射法将含有BRE基因的质粒注射入HH10期鸡胚神经管,活体胚胎细胞电穿孔方法转染半侧神经管,以另一侧为正常对照侧,原位杂交及免疫荧光法观察过表达BRE基因后体节的发育。结果 BRE基因在鸡胚表达始于神经板,而后高表达在脑泡、神经管及体节。过表达BRE基因后,神经管形态及PAX7和FGF8表达与对照侧相比无明显异常,而实验侧体节PAX7标记发现生皮肌节较大,FGF8表达与对照侧相比无明显异常。结论过表达BRE基因对体节的形成和分化有促进作用,其机制可能与PAX7相关。 展开更多
关键词 神经管 体节 bre PAX7 FGF8
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抗凋亡蛋白BRE和多功能受体ANX-Ⅱ在肝癌的高表达
10
作者 张林林 陈若翰 +4 位作者 蒋光愉 崔耀隆 李嘉豪 陈淑珍 蔡冬青 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1108-1110,共3页
目的研究抗凋亡蛋白BRE和多功能性受体annexinⅡ(ANX-Ⅱ)在人的正常肝组织、肝非肿瘤组织以及肝肿瘤组织中的表达情况。方法对5例正常肝组织、23例肝非肿瘤组织和56例肝肿瘤组织,使用免疫组化的方法检测BRE和ANX-Ⅱ抗体在肝组织中表达... 目的研究抗凋亡蛋白BRE和多功能性受体annexinⅡ(ANX-Ⅱ)在人的正常肝组织、肝非肿瘤组织以及肝肿瘤组织中的表达情况。方法对5例正常肝组织、23例肝非肿瘤组织和56例肝肿瘤组织,使用免疫组化的方法检测BRE和ANX-Ⅱ抗体在肝组织中表达情况。结果 5例肝正常组织BRE和ANX-Ⅱ的表达为阴性,BRE的表达在肝非肿瘤组织中57%为弱阳性,43%为阳性;在肝肿瘤中,25%为弱阳性,64%为阳性,11%为强阳性。ANX-Ⅱ的表达在肝非肿瘤组织中,61%为弱阳性,35%为阳性,4%为阴性;在肝肿瘤中,21%为弱阳性,63%为阳性,16%为强阳性。结论 BRE在肝肿瘤中高表达是癌细胞抑制凋亡信号途径所产生的调节,ANX-Ⅱ的高表达是肝癌细胞入侵组织和转移的机制表现,因而BRE和ANX-Ⅱ不但可以成为新的肝肿瘤标志物,更有可能成为新的治疗靶点。 展开更多
关键词 bre ANX-Ⅱ 肝肿瘤 免疫组化 高表达
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去泛素酶复合体Ubp3/Bre5的制备及与Cdc48作用(英文)
11
作者 苏文成 吕操 +8 位作者 时丽丽 景晓飞 盖园明 张洁 谭焕波 王鹏举 夏立新 邹培建 秦刚 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期58-67,共10页
泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中.Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用.为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆... 泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中.Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用.为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆菌中成功表达并纯化重组Ubp3与Bre5单体及Ubp3/Bre5复合体,首次成功大规模制备重组Ubp3/Bre5复合体.通过一系列pulldown实验,检验Ubp3/Bre5与AAA家族中泛素选择性ATP酶Cdc48的相互作用模式,结果发现,Ubp3及Bre5无法单独与Cdc48结合,但Ubp3/Bre5复合体可以有效与Cdc48相互作用.提出了Ubp3/Bre5-Cdc48相互作用的新模式,制备了高质量重组Ubp3/Bre5复合体.该研究为通过生化及结构生物学进行分子机制探索奠定了基础. 展开更多
关键词 结合蛋白质 Ubp3去泛素化酶 结合辅因子bre5 ATP酶Cdc48 去泛素化复合体 与谷光苷肽巯基转移酶沉淀试验 直接相互作用
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lncRNA BRE-AS1调控Wnt/β-catenin信号通路影响宫颈癌SiHa细胞增殖、侵袭和凋亡的实验研究 被引量:11
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作者 张若 张鸢 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期577-581,586,共6页
目的:探讨lncRNA BRE-AS1对宫颈癌SiHa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测人子宫颈上皮永生化细胞系H8和宫颈癌细胞系SiHa中lncRNA BRE-AS1的表达水平。将对数生长期的SiHa细胞分为未转染组(正常培养)... 目的:探讨lncRNA BRE-AS1对宫颈癌SiHa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测人子宫颈上皮永生化细胞系H8和宫颈癌细胞系SiHa中lncRNA BRE-AS1的表达水平。将对数生长期的SiHa细胞分为未转染组(正常培养)、阴性对照组(转染空载体)和lncRNA BRE-AS1组(转染lncRNA BRE-AS1表达载体),采用实时荧光定量PCR检测各细胞中lncRNA BRE-AS1的表达水平,噻唑蓝法检测细胞增殖能力,平板克隆实验细胞克隆形成能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力,流式细胞仪检测细胞凋亡能力,免疫印迹法检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和c-Myc的表达。结果:与人子宫颈上皮永生化细胞系H8相比,宫颈癌细胞系SiHa中lncRNA BRE-AS1的表达水平明显降低(P<0.01)。与未转染组相比,lncRNA BRE-AS1组细胞中lncRNA BRE-AS1的表达水平和细胞凋亡率明显升高,且细胞增殖活力、克隆形成率、穿膜细胞数和细胞中β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、MMP-2蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05);而阴性对照组和未转染组相比,上述指标均未见明显改变(P>0.05)。结论:lncRNA BRE-AS1可抑制宫颈癌SiHa细胞增殖、侵袭并促进其凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 lncRNA bre-AS1 细胞增殖 细胞侵袭 细胞凋亡 WNT/Β-CATENIN信号通路
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BRE基因的研究进展
13
作者 潘可 陈海滨 《解剖学研究》 CAS 2007年第3期222-224,共3页
BRE基因是一种应激反应调节基因,其表达产物广泛分布于不同种属的各种生物以及生物体的多种器官中。它所编码的高度保守的蛋白产物,定位于细胞质与细胞核中,具有调控细胞周期、调节细胞凋亡的功能。因而BRE基因在细胞的生存、增殖、凋... BRE基因是一种应激反应调节基因,其表达产物广泛分布于不同种属的各种生物以及生物体的多种器官中。它所编码的高度保守的蛋白产物,定位于细胞质与细胞核中,具有调控细胞周期、调节细胞凋亡的功能。因而BRE基因在细胞的生存、增殖、凋亡与分化过程中发挥极其重要的作用,可能与某些肿瘤的发生演进有关。 展开更多
关键词 bre 应激反应 调控作用
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人Bre1A基因对人喉癌Hep-2细胞的生长影响 被引量:1
14
作者 梁九思 马郑艳 +4 位作者 徐小洁 韩笑 叶棋浓 高风 王雪峰 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期18-21,共4页
为了构建携带Flag标签的Bre1A连接酶的真核表达载体,获得2B-Flag-Bre1A融合表达蛋白,检测其对肿瘤细胞生长的影响.采用PCR技术从乳腺文库中扩增出Bre1A基因,并将其正确插入到2B-Flag载体中;将重组质粒与空载体分别转染人喉癌细胞系Hep-2... 为了构建携带Flag标签的Bre1A连接酶的真核表达载体,获得2B-Flag-Bre1A融合表达蛋白,检测其对肿瘤细胞生长的影响.采用PCR技术从乳腺文库中扩增出Bre1A基因,并将其正确插入到2B-Flag载体中;将重组质粒与空载体分别转染人喉癌细胞系Hep-2后,Western blot检测表达情况,并进行生长曲线实验.双酶切和测序鉴定表明,2B-FlagBre1A真核表达质粒构建成功;转染Hep-2细胞后成功表达,生长曲线实验结果表明,Bre1A抑制喉癌细胞的生长.本论文成功构建了携带2B-Flag标签的人Bre1A基因真核表达载体,重组载体能在人喉癌细胞系Hep-2中表达,且能抑制该细胞的生长,本实验为进一步研究Bre1A在喉癌中的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 bre1A 真核表达 克隆 喉癌
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Vector Breathers in an Averaged Dispersion-Managed Birefringent Fiber System
15
作者 理记涛 韩金钟 张献图 《Communications in Theoretical Physics》 SCIE CAS CSCD 2015年第7期67-70,共4页
A variable-coefficient coupled nonlinear Schrodinger equation in an averaged dispersion-managed birefringent fiber is investigated. Based on the one-to-one correspondence between variable-coefficient and constant-coef... A variable-coefficient coupled nonlinear Schrodinger equation in an averaged dispersion-managed birefringent fiber is investigated. Based on the one-to-one correspondence between variable-coefficient and constant-coefficient equations, an analytical breather solution is derived. As an example to exhibit dynamical behaviors of solution, its controllable excitations including rear excitation, peak excitation and initial excitation are discussed. 展开更多
关键词 coupled nonlinear Schr¨odinger EQUATION VECTOR bre
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英国建筑研究院(BRE)开发防火门检查培训课程
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《消防科学与技术》 CAS 北大核心 2021年第4期476-476,共1页
英国建筑研究院(BRE)提供防火门检查课程培训(虚拟教室)。防火门检查员需要对自己的作用有充分而全面的认识,并对当前的标准有良好的认识,才能达到胜任的程度。英国建筑研究院与门五金联盟(DHF)联合开发了这一综合性和实践性培训课程,... 英国建筑研究院(BRE)提供防火门检查课程培训(虚拟教室)。防火门检查员需要对自己的作用有充分而全面的认识,并对当前的标准有良好的认识,才能达到胜任的程度。英国建筑研究院与门五金联盟(DHF)联合开发了这一综合性和实践性培训课程,提供了在进行防火门检查时必须处理的重要细节。 展开更多
关键词 防火门 虚拟教室 联合开发 课程培训 bre 培训课程 检查员 英国
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人BRE1B基因对眼B16黑色素瘤细胞生长的影响
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作者 刘园园 刘莹 +4 位作者 朱晓雨 徐小洁 李玲 叶棋浓 刘丹 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第12期1101-1104,共4页
目的构建人BRE1B基因真核表达载体,并初步探讨该基因对眼B16黑色素瘤细胞生长的影响。方法将传代培养的眼B16黑色素瘤细胞随机分为实验组(转染p CMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒)和对照组(转染p CMV质粒)。以乳腺癌文库为模板应用PCR技术扩增... 目的构建人BRE1B基因真核表达载体,并初步探讨该基因对眼B16黑色素瘤细胞生长的影响。方法将传代培养的眼B16黑色素瘤细胞随机分为实验组(转染p CMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒)和对照组(转染p CMV质粒)。以乳腺癌文库为模板应用PCR技术扩增出人BRE1B基因的CDS编码区序列,构建p CMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒,将p CMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒和p CMV质粒瞬时转染眼B16黑色素瘤细胞后,应用Western blot法检测BRE1B蛋白的表达,应用CCK8法和克隆形成法检测该重组质粒对眼B16黑色素瘤细胞生长的影响。结果 PCR技术扩增出人BRE1B基因CDS编码区序列,且条带与预期大小一致;与对照组相比,菌液PCR鉴定结果为阳性,双酶切的条带长度分别为大约4000 bp和3050 bp,测序鉴定人BRE1B基因的编码序列与插入的DNA序列完全一致;Western blot结果表明p CMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒在实验组眼B16黑色素瘤细胞成功表达,对照组则未检测到特异条带;CCK8法和克隆形成法结果表明p CMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒能够抑制眼B16黑色素瘤细胞的生长。结论本研究成功构建了带有p CMV-Tag-2B标签的人BRE1B基因真核表达载体,并发现该基因抑制眼B16黑色素瘤细胞的生长。 展开更多
关键词 bre1B基因 克隆 真核表达 眼B16黑色素瘤细胞
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BRE咨询香港的公寓情况
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作者 方义弼 《结构工程师》 1989年第3期45-45,共1页
应香港住房司的要求,BRE(BuildingResearch Establishment)的结构鉴定部派出一个组对香港的六幢公寓大楼(见文中照片前景)进行了全面的评定。他们接受委托调查预制大板体系建筑的状况、耐久性和结构整体性,并预测其未来的使用性能,以便... 应香港住房司的要求,BRE(BuildingResearch Establishment)的结构鉴定部派出一个组对香港的六幢公寓大楼(见文中照片前景)进行了全面的评定。他们接受委托调查预制大板体系建筑的状况、耐久性和结构整体性,并预测其未来的使用性能,以便为拟订维修和改进工作的措施提供依据。其中的五幢大楼高为16层,它们相互连接起来,长度达100m;另一幢是7层的L形大楼。这些大楼都建于20年前,详细的图纸已无从查找。 展开更多
关键词 委托调查 bre 使用性能 结构整体性 文中 混凝土芯样 工作计划 连接节点 目测检查 配筋
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Bre1与Rad6形成的复合物的表达、纯化和结晶
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作者 赵佳奇 石萌 向嵩 《天津医科大学学报》 2023年第1期83-87,共5页
目的:建立Bre1及Rad6的表达和纯化方法,构建Bre1-Rad6的复合物,寻找复合物的结晶条件,为使用X射线晶体学的方法解析复合物的结构奠定基础。方法:使用大肠杆菌表达系统表达蛋白质;使用共纯化的方法组装复合物;使用气象扩散的方法结晶复... 目的:建立Bre1及Rad6的表达和纯化方法,构建Bre1-Rad6的复合物,寻找复合物的结晶条件,为使用X射线晶体学的方法解析复合物的结构奠定基础。方法:使用大肠杆菌表达系统表达蛋白质;使用共纯化的方法组装复合物;使用气象扩散的方法结晶复合物。结果:建立了来源于Lodderomyces elongisporus的Bre1(LeBre1)氮端与Rad6相互作用的结构域(RBD)和Rad6(LeRad6)在大肠杆菌中大量表达的方法;通过使用共纯化的方法,成功组装了LeBre1 RBD-Rad6复合物,并进一步通过两步凝胶过滤层析纯化的方法精细纯化,获得了纯度超过95%的蛋白复合物;使用气象扩散的方法结晶复合物,在18℃通过对1 000多个结晶条件的筛选,确定了复合物的两种结晶条件,进一步对该条件优化,获得了质量相对较好的晶体。结论:成功的构建了LeBre1 RBD-Rad6复合物的表达、纯化和结晶的方法,为使用X射线晶体学方法解析复合物的结构奠定了基础。 展开更多
关键词 bre1 Rad6 泛素化修饰 蛋白质纯化 蛋白质结晶
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核小体泛素连接酶Bre1的eRING结构域与泛素转移酶Rad6的相互作用研究
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作者 石萌 向嵩 《天津医科大学学报》 2023年第1期31-35,共5页
目的:探究乳酸克鲁维酵母核小体泛素连接酶Bre1的eRING结构域与泛素转移酶Rad6的相互作用,解析Bre1的RBD结构域对该相互作用的影响。方法:在大肠杆菌中表达乳酸克鲁维酵母的GST-Rad6、Rad6、Bre1 eRING等蛋白并将它们纯化至纯度>95%... 目的:探究乳酸克鲁维酵母核小体泛素连接酶Bre1的eRING结构域与泛素转移酶Rad6的相互作用,解析Bre1的RBD结构域对该相互作用的影响。方法:在大肠杆菌中表达乳酸克鲁维酵母的GST-Rad6、Rad6、Bre1 eRING等蛋白并将它们纯化至纯度>95%,通过GST-Rad6下拉实验,结合蛋白免疫印迹实验研究GST-Rad6和Bre1的eRING结构域的相互作用及Bre1的RBD结构域对其相互作用的影响;通过SPR实验研究Rad6与Bre1的eRING结构域之间的相互作用。结果:乳酸克鲁维酵母的GST-Rad6与Bre1的e RING结构域存在相互作用,该相互作用可以被Bre1 RBD所抑制;GST蛋白与乳酸克鲁维酵母Bre1的eRING存在相互作用,不可作为该蛋白的下拉标签使用。结论:Rad6与Bre1的eRING结构域存在相互作用,该相互作用可以被RBD所抑制,GST标签不适于乳酸克鲁维酵母的eRING相互作用研究。 展开更多
关键词 bre1 泛素 谷胱甘肽转移酶 蛋白质-蛋白质相互作用
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