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BMSCs来源细胞外基质支架对微骨折骨髓刺激术后血凝块体外软骨化分化的作用研究 被引量:9
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作者 魏波 金成哲 +3 位作者 徐燕 唐成 胡文浩 王黎明 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期464-474,共11页
目的探讨BMSCs来源细胞外基质(extracellular matrix,ECM)支架结合微骨折骨髓刺激术后血凝块在体外软骨化分化的可行性及有效性。方法选用5~6月龄新西兰大白兔40只,随机取20只兔骨髓分离、培养BMSCs并行多向分化鉴定;利用冻干技术制备B... 目的探讨BMSCs来源细胞外基质(extracellular matrix,ECM)支架结合微骨折骨髓刺激术后血凝块在体外软骨化分化的可行性及有效性。方法选用5~6月龄新西兰大白兔40只,随机取20只兔骨髓分离、培养BMSCs并行多向分化鉴定;利用冻干技术制备BMSCs来源的ECM支架,通过扫描电镜观察其微结构。于兔股骨滑车处作直径6 mm软骨缺损,垂直缺损面作5个直径1 mm、深3 mm的微骨折孔洞。将未穿刺的20只动物随机分为2组(n=10):A组取微骨折术后渗出的血凝块直接体外培养;B组在A组基础上用TGF-β3诱导其成软骨分化。将抽取骨髓的20只动物随机分为2组(n=10):C组用制备的ECM支架植入软骨缺损处,待ECM支架与渗出的骨髓血充分融合后取出体外直接培养;D组在C组基础上给于TGF-β3诱导其成软骨分化。体外培养1、2、4、8周时分别行大体、组织学、免疫组织化学及生化成分分析观察,检测其分化效果。结果分离、培养的细胞经多向分化鉴定,呈成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞的表型特征。扫描电镜观察示ECM支架呈三维多孔状结构。在培养过程中,A组组织块逐渐降解消失;C组组织块逐渐形成质地柔软的疏松样结构;B、D组组织块逐渐形成表面平滑的新生软骨样组织。体外培养4、8周,C、D组组织块面积均大于B组,差异有统计学意义(P<0.05);D组大于C组,差异亦有统计学意义(P<0.05)。A、C组HE、番红O及免疫组织化学染色示组织内仅有少量细胞分布,未见糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)及Ⅱ型胶原的积累;B、D组可见组织内出现许多软骨陷窝样结构,且GAG及Ⅱ型胶原分布逐渐增多。生化成分分析示,培养过程中,B、D组GAG及总胶原含量逐渐增加,其中D组增加更明显,培养至4、8周,D组与B组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BMSCs来源的ECM支架结合微骨折骨髓刺激术后血凝块在体外给予TGF-β3诱导培养时具有良好的软骨化分化潜能。 展开更多
关键词 BMSCS 细胞外基质 支架 微骨折骨髓刺激术 血凝块 软骨化分化
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经转染人骨形态发生蛋白7基因后骨髓间充质干细胞mRNA的表达 被引量:7
2
作者 金丹 曾位森 +4 位作者 裴国献 齐凤菊 魏宽海 王珂 陈滨 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期222-225,共4页
目的构建人骨形态发生蛋白7(humanbonemorphogeneticprotein7,hBMP-7)逆转录病毒载体并检测经逆转录病毒介导基因转染的兔骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSCs)mRNA的表达。方法构建hBMP-7逆转录病毒载体后利... 目的构建人骨形态发生蛋白7(humanbonemorphogeneticprotein7,hBMP-7)逆转录病毒载体并检测经逆转录病毒介导基因转染的兔骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSCs)mRNA的表达。方法构建hBMP-7逆转录病毒载体后利用脂质体介导的基因转移技术转染包装细胞PT67,制备含目的基因的重组逆转录病毒液并感染兔骨髓间充质干细胞,采用原位杂交、RT-PCR检测hBMP-7mRNA在MSCs中的表达。结果成功构建了hBMP-7逆转录病毒载体,经hBMP-7基因转染的MSCs可表达外源性BMP-7mRNA。结论采用逆转录病毒介导的方法可以将hBMP-7转染至MSCs中并表达外源性基因。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白 骨髓间充质干细胞 基因表达 组织工程 mRNA HBMP-7 基因转染
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青娥丸对去卵巢大鼠骨质疏松骨微循环的作用机制研究 被引量:12
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作者 王晓燕 常时新 +4 位作者 李冠武 何静 王乐 宋彦颖 缪宇 《环球中医药》 CAS 2017年第7期802-807,共6页
目的通过观察青娥丸对卵巢切除骨质疏松大鼠骨髓灌注及血管内皮生长因子的影响,探讨经典方剂青娥丸对绝经后骨质疏松骨微循环的作用机制。方法将6月龄SD雌性大鼠60只随机分为4组,即假手术组(SHAM组)、去势对照组(OVX组)、青娥丸组(QEW组... 目的通过观察青娥丸对卵巢切除骨质疏松大鼠骨髓灌注及血管内皮生长因子的影响,探讨经典方剂青娥丸对绝经后骨质疏松骨微循环的作用机制。方法将6月龄SD雌性大鼠60只随机分为4组,即假手术组(SHAM组)、去势对照组(OVX组)、青娥丸组(QEW组)和雌激素组(E_2组)。建模8周后,分别进行药物干预3个月,检测各组大鼠股骨远端、中端、近端的骨髓灌注参数以及血管内皮标志物血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)、血管内皮生长因子(vascular endothelium growth factor,VEGF)表达情况。结果骨髓灌注参数:(1)股骨远端:治疗后OVX组容积转移常量(Ktrans)、速率常数(Kep)、渗漏空间(Ve)水平较治疗前均有明显降低(P<0.01),E_2组和QEW组Ktrans、Kep、Ve水平较治疗前均有明显增加(P<0.05);与OVX组比较,治疗后E_2组和QEW组Ktrans、Kep、Ve水平均显著增加(P<0.01);而QEW组Ktrans水平显著低于E_2组(P<0.01)、两组Kep、Ve水平无明显统计学差异。(2)股骨中端:治疗后,OVX组Ktrans(P<0.01)及Ve(P<0.05)水平较治疗前显著降低,E_2组Ktrans、Kep及Ve水平均明显增加(P<0.05);与OVX组比较,E_2组Ktrans、Kep(P<0.05)及Ve(P<0.01)水平均显著增加,QWE组Ktrans(P<0.05)、Ve(P<0.01)水平显著增加。(3)股骨近端:E_2组Ktrans(P<0.01)及Ve(P<0.05)水平较OVX组均显著增加,而QEW组Ktrans水平无明显差异。血管内皮标志物CD31、VEGF表达情况:E_2组和QEW组CD31及VEGF蛋白表达及相对表达量较OVX组均显著上调(P<0.05、P<0.01)。结论青娥丸治疗绝经后大鼠骨质疏松症,可能与提高骨髓灌注、改善骨髓微循环等作用机制相关。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松症 青娥丸 骨髓灌注 骨髓微循环
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骨髓动员外周血干细胞移植治疗严重肢体缺血的临床应用 被引量:4
4
作者 张鸿坤 李鸣 +4 位作者 封华 金炜 赵海格 陈旭东 田路 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第4期360-363,共4页
目的:探讨外周血干细胞移植改善严重缺血肢体的作用。方法:15例下肢严重缺血的患者,经骨髓动员后,CS-3000Plus机器采集外周血干细胞,直接移植入缺血肢体中,共移植17人次。结果:采用骨髓动员外周血干细胞分离并移植治疗临床上严重肢体缺... 目的:探讨外周血干细胞移植改善严重缺血肢体的作用。方法:15例下肢严重缺血的患者,经骨髓动员后,CS-3000Plus机器采集外周血干细胞,直接移植入缺血肢体中,共移植17人次。结果:采用骨髓动员外周血干细胞分离并移植治疗临床上严重肢体缺血的患者,术后一年,疼痛指数由术前5.0降到术后0,踝肱指数(ABI)由术前0.30提高到术后0.46;6例溃疡5例愈合;无痛行走距离由术前0.15 km提高到术后0.72 km;最大行走距离由术前0.96 km提高到术后2.13 km。结论:骨髓动员外周血干细胞移植能促进缺血肢体新生血管形成,有效改善缺血肢体的疼痛和步行距离,并促进溃疡愈合。 展开更多
关键词 干细胞 缺血 四肢/血液供给 干细胞移植 骨髓细胞
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心血瘀阻证模型大鼠心肌微环境p38信号通路的变化及在骨髓间充质干细胞移植中的作用 被引量:6
5
作者 郑景辉 袁肇凯 +7 位作者 莫云秋 陈建军 简维雄 刘华盛 吴发胜 李勇华 王丽萍 何晶 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2014年第10期875-878,共4页
目的探讨急性心肌梗死心血瘀阻证模型大鼠心肌微环境p38信号转导通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的影响。方法 48只SD大鼠随机分为健康对照组、假手术组(急性心肌梗死模型)、模型组(急性心肌梗死心血瘀阻证模型)、注射1组(急性心肌... 目的探讨急性心肌梗死心血瘀阻证模型大鼠心肌微环境p38信号转导通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的影响。方法 48只SD大鼠随机分为健康对照组、假手术组(急性心肌梗死模型)、模型组(急性心肌梗死心血瘀阻证模型)、注射1组(急性心肌梗死心血瘀阻证模型大鼠于梗死区边缘心肌组织的3个位点注入共100μl的BMSCs细胞悬液)、注射2组(急性心肌梗死模型大鼠注射同注射1组)、注射3组(正常健康大鼠于相同注射部位注射同注射1组),每组各8只。检测磷酸化p38(p-p38)信号转导蛋白、心肌结蛋白Desmin、肌球蛋白重链MHC和心脏转录因子GATA-4 mRNA的表达。结果模型组和注射1组p-p38蛋白明显高于假手术组和健康对照组(P<0.05);注射1组p-p38蛋白高于模型组、注射2组和注射3组(P<0.05)。Desmin-Brdu和MHC-Brdu双染细胞在注射1组中可见,注射2组和注射3组未见表达。注射3组大鼠GATA-4 mRNA心肌组织中未检出表达,注射1组大鼠心肌组织中GATA-4 mRNA高于注射2组(P<0.05)。注射1组大鼠p-p38与GATA-4 mRNA含量表达呈正相关(P<0.05),而与DesminBrdu、MHC-Brdu无明显相关性。结论急性心肌梗死心血瘀阻证模型大鼠p38信号转导通路激活,可促进移植的BMSCs向心肌细胞方向分化。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 心血瘀阻证 细胞信号转导通路 骨髓间充质干细胞 细胞分化
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新型多孔磷酸钙支架对骨髓间充质干细胞生物学行为的影响 被引量:4
6
作者 王淑红 张雄 +1 位作者 张劲娥 黄远亮 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期544-548,共5页
目的评价新型多孔磷酸钙(CPC)作为骨组织工程支架对Beagle犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附、增殖及成骨分化等生物学行为的影响。方法将Beagle犬BMSCs接种于新型多孔CPC三维支架表面,以磷酸三钙(TCP)和聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)为... 目的评价新型多孔磷酸钙(CPC)作为骨组织工程支架对Beagle犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附、增殖及成骨分化等生物学行为的影响。方法将Beagle犬BMSCs接种于新型多孔CPC三维支架表面,以磷酸三钙(TCP)和聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)为对照组,通过观察细胞形态、绘制细胞生长曲线、测定碱性磷酸酶(ALP)活性、进行茜素红染色并半定量测定骨钙素等方法,检测BMSCs在支架材料上的黏附、增殖及成骨分化情况。结果细胞形态和生长曲线结果显示BMSCs在新型多孔CPC三维支架材料表面分布均匀,生长及增殖活跃。ALP活性半定量结果表明,CPC、TCP组ALP表达强度明显高于PLGA组(P<0.05),CPC组与TCP组间的差异无统计学意义(P>0.05)。骨钙素染色与半定量检测结果均显示:各观察点PLGA组钙盐沉积量明显少于CPC和TCP组(P<0.05),而TCP和CPC组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验所用多孔CPC材料具有与TCP类似但优于PLGA的良好生物相容性,利于BMSCs的黏附、增殖及成骨分化,可作为支架材料与BMSCs共同培养,构建具有成骨能力的组织工程化骨。 展开更多
关键词 多孔磷酸钙 骨髓间充质干细胞 黏附 增殖 分化
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清热化瘀方联合缺氧预处理MSCs移植对脑缺血再灌注损伤大鼠eNOS表达的影响 被引量:5
7
作者 胡跃强 甘业贤 +2 位作者 梁妮 陈炜 唐农 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期633-637,共5页
目的探讨清热化瘀方联合缺氧预处理骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA及其蛋白表达的影响。方法将216只雄性SD大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、MSCs移植对照组(N-MSCs组)、经缺氧预处... 目的探讨清热化瘀方联合缺氧预处理骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA及其蛋白表达的影响。方法将216只雄性SD大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、MSCs移植对照组(N-MSCs组)、经缺氧预处理后的MSCs移植组(HP-MSCs组)、MSCs移植联合清热化瘀方组(MSCs+QRHY组)、HP-MSCs移植联合清热化瘀方组(HP-MSCs+QRHY组),每组36只。按移植后取材时间点(7,14,28 d)各组又分3个亚组,每组12只。用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注损伤动物模型,给予清热化瘀颗粒灌胃及颈内动脉移植BMSCs。分别于术后7,14,28 d对各组大鼠进行神经功能缺损评分(NSS)。RT-PCR及Western blot检测大鼠缺血半暗带区eNOS mRNA及其蛋白表达变化。结果与模型组比较,各时间点N-MSCs组神经功能评分明显减少(P<0.05),各移植组中以HP+QRHY组神经功能改善最为显著(P<0.05)。假手术组eNOS mRNA及其蛋白呈现低水平表达,模型组及移植组其表达较假手术组明显增加(P<0.05);各组eNOS mRNA及其蛋白的表达均于7 d达到高峰,14,28 d表达逐渐下降;同一时间点组间比较,HP-MSCs组、MSCs+QRHY组及HP-MSCs+QRHY组的表达均明显高于N-MSCs组(P<0.05),而以HP-MSCs+QRHY组增高最为明显(P<0.05)。结论 HP-MSCs移植能够显著提高脑缺血再灌注损伤大鼠eNOS的表达,清热化瘀方能够进一步上调其表达及改善脑缺血大鼠的神经功能,发挥其神经保护作用。 展开更多
关键词 清热化瘀方 脑缺血再灌注 缺氧预处理 骨髓间充质干细胞 内皮型一氧化氮合酶
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神经肽YY1受体拮抗剂促进大鼠BMSCs成骨分化和股骨缺损修复 被引量:5
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作者 刘松 吴建群 +5 位作者 胡稷杰 王簕 王钊 孟欢 卓灵剑 郑健雄 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期669-676,共8页
目的探索神经肽Y Y1受体拮抗剂(PD160170)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化以及骨缺损修复的影响。方法第三代大鼠BMSCs成骨分化诱导培养,随机分为4组,对照组(等体积PBS),终浓度分别为10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)mol/L Y1受体拮抗... 目的探索神经肽Y Y1受体拮抗剂(PD160170)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化以及骨缺损修复的影响。方法第三代大鼠BMSCs成骨分化诱导培养,随机分为4组,对照组(等体积PBS),终浓度分别为10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)mol/L Y1受体拮抗剂三浓度梯度组,在干预7、14 d时,分别进行碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色;在干预7、21 d时,采用q-PCR和Westen blot检测I型胶原(COLI)、骨钙素(OCN)和Runt相关转录因子2(Runx2)基因和蛋白的表达。采用300±20 g雄性SD大鼠构建股骨髁上骨缺损模型,直径为2.5 mm,随机分为3组,每组6只,分别每日局部注射0.2 m L溶液等体积PBS(对照组)、10^(-6)mol/L和10^(-8)mol/L Y1受体拮抗剂溶液,28 d后处死,Micro-CT检测观察骨缺损修复情况。结果 ALP和茜素红染色发现,Y1受体拮抗剂组细胞胞浆内棕色颗粒、细胞外周基质矿化结节均高于对照组,且具有浓度特异性,以10^(-8)mol/L最为明显;q-PCR及Westem blot检测发现,在成骨分化诱导第7天,10^(-8)mol/L Y1受体拮抗剂组COLI m RNA和蛋白表达水平均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);在第21天,10^(-8)mol/L Y1受体拮抗剂组OCN、Runx2 m RNA和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。通过micro-CT分析发现,在局部注射10^(-6)Y1受体拮抗剂28 d后,骨缺损BV/TV、骨密度、骨小梁数量高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);而骨小梁厚度(P=0.07)、骨体积(P=0.35)在各组之间差异无统计学意义。结论神经肽Y Y1受体拮抗剂可促进BMSCs成骨分化以及骨缺损的修复,提示阻断Y1受体信号传导具有预防或治疗骨折、骨质疏松症等潜力,为临床药物研究提供一定的实验依据。 展开更多
关键词 神经肽Y Y1受体拮抗剂 骨髓间充质干细胞 成骨分化 骨缺损
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全骨髓贴壁法培养兔骨髓间充质干细胞体外定向成骨诱导分化及鉴定 被引量:13
9
作者 肖仕辉 韦庆军 +3 位作者 赵劲民 薄占东 韦积华 李伟岸 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第6期1069-1074,共6页
背景:流式细胞仪分离法和免疫磁珠分离法对细胞活性影响较大,密度梯度离心法虽然能够获得纯度高的单核细胞,但由于多次离心可造成细胞的大量流失且对细胞活性有一定的影响使其应用值得商榷。目的:采用全骨髓贴壁法分离兔骨髓间充质干细... 背景:流式细胞仪分离法和免疫磁珠分离法对细胞活性影响较大,密度梯度离心法虽然能够获得纯度高的单核细胞,但由于多次离心可造成细胞的大量流失且对细胞活性有一定的影响使其应用值得商榷。目的:采用全骨髓贴壁法分离兔骨髓间充质干细胞进行成骨诱导分化及鉴定。方法:采用全骨髓贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学特征。在成骨诱导剂作用下,通过碱性磷酸酶染色试剂盒行碱性磷酸酶染色,Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色,VonKossa法及茜素红进行矿化结节染色以及电镜下检测兔骨髓间充质干细胞成骨诱导后的形态结构。结果与结论:经诱导后细胞出现与成骨细胞相似的形态学特征,碱性磷酸酶染色阳性,Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色,Von-Kossa法及茜素红矿化结节染色阳性。表明经成骨诱导剂诱导后全骨髓贴壁法体外分离纯化培养的兔骨髓间充质干细胞能向成骨细胞方向分化增殖。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞培养与分化 全骨髓贴壁法分离法 骨髓间充质干细胞 细胞培养 成骨分化 组织工 程骨 省级基金 干细胞图片文章
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免疫磁珠法纯化小鼠CD34^+造血干细胞 被引量:3
10
作者 林芸 孟凡义 杨艺 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第12期908-909,共2页
目的探讨免疫磁珠法(MiniMACS)能否用于纯化小鼠骨髓CD34+造血干细胞。方法应用免疫磁珠纯化小鼠骨髓CD34+细胞,流式细胞仪(FACS)评估纯化效率,检测纯化后的细胞活力。结果纯化后CD34+细胞纯度81.5%(范围76.80%~85.38%),回收率47.54%(范... 目的探讨免疫磁珠法(MiniMACS)能否用于纯化小鼠骨髓CD34+造血干细胞。方法应用免疫磁珠纯化小鼠骨髓CD34+细胞,流式细胞仪(FACS)评估纯化效率,检测纯化后的细胞活力。结果纯化后CD34+细胞纯度81.5%(范围76.80%~85.38%),回收率47.54%(范围40.50%~54.31%),纯化前后细胞活力不受影响(P=0.169)。结论应用MiniMACS纯化小鼠骨髓可获得高纯度CD34+细胞,并不影响细胞活力。 展开更多
关键词 CD34^+ 免疫磁珠法 纯化 骨髓 造血干细胞 移植物抗宿主病
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同种异体脱蛋白骨复合纤维蛋白胶体内构建组织工程骨 被引量:2
11
作者 缪旭东 裴国献 +2 位作者 闫乔生 贾晶 许有 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第16期2869-2873,共5页
背景:已有实验证明复合纤维蛋白胶的异体骨在体外培养中更适合种子细胞生长和增殖。目的:观察复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨与单纯脱蛋白骨作为骨髓间充质干细胞支架材料的差异。方法:将28只新西兰大白兔随机分为3组,实验组在兔背部植入复... 背景:已有实验证明复合纤维蛋白胶的异体骨在体外培养中更适合种子细胞生长和增殖。目的:观察复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨与单纯脱蛋白骨作为骨髓间充质干细胞支架材料的差异。方法:将28只新西兰大白兔随机分为3组,实验组在兔背部植入复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨与自体骨髓间充质干细胞,对照组在兔背部植入单纯脱蛋白骨与自体骨髓间充质干细胞,空白组在兔背部植入单纯脱蛋白骨。结果与结论:随着植入时间的延长,各组植入物碱性磷酸酶活性逐渐增强,但实验组强于对照组与空白组(P<0.01)。实验组与对照组术后4,8周均有新骨形成,且实验组成骨量高于对照组(P<0.01),空白组未见新骨形成。表明复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨新骨形成能力优于单纯脱蛋白骨,可作为骨髓间充质干细胞的复合型载体构建于组织工程骨。 展开更多
关键词 生物材料 组织工程骨材料 同种异体 脱蛋白骨 纤维蛋白胶 骨髓间充质干细胞 骨组织工程
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人参总皂甙对小鼠骨髓基质细胞RNA表达及其细胞因子诱生的影响 被引量:2
12
作者 杨世成 王树和 +1 位作者 张东吉 杨贵贞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期40-43,共4页
采用胶片法(细胞贴壁胶片生长法)及放射自显影等技术,较系统地观察了人参总甙(TGS)对小鼠骨髓基质细胞RNA表达的时相特点及对细胞因子IL-3、11-6诱生的影响。结果表明.TGS在体外对小鼠骨髓基质细胞RNA的代谢... 采用胶片法(细胞贴壁胶片生长法)及放射自显影等技术,较系统地观察了人参总甙(TGS)对小鼠骨髓基质细胞RNA表达的时相特点及对细胞因子IL-3、11-6诱生的影响。结果表明.TGS在体外对小鼠骨髓基质细胞RNA的代谢有明显的促进效应.并且发现骨髓基质细胞实验上清中IL-3、IL-6因子的活性显著高于正常对照组。在此基础上。又利用放射自显影技术做为胶片法可行性的佐证.取得满意结果。 展开更多
关键词 人参 皂甙 骨髓 基质细胞 小鼠
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人骨髓间质干细胞体外扩增、冻存及初步鉴定 被引量:4
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作者 余良宏 康德智 +3 位作者 林建华 张志坚 吴朝阳 傅冷西 《福建医科大学学报》 2007年第2期176-178,共3页
目的探索人骨髓间质干细胞(hMSC)的体外分离、扩增、冻存、复苏的方法。方法无菌条件下抽取骨外伤髓内钉固定手术髓腔内容物,应用Ficoll-Paque分离液分离hMSC,通过传代扩增细胞,“慢冻速融”进行细胞冻存、复苏;流式细胞仪检测hMSC的表... 目的探索人骨髓间质干细胞(hMSC)的体外分离、扩增、冻存、复苏的方法。方法无菌条件下抽取骨外伤髓内钉固定手术髓腔内容物,应用Ficoll-Paque分离液分离hMSC,通过传代扩增细胞,“慢冻速融”进行细胞冻存、复苏;流式细胞仪检测hMSC的表面标志。结果hMSC容易分离获取、体外扩增迅速、冻存复苏简便,复苏后细胞形态保持不变。流式细胞仪检测结果显示,CD34、CD45阴性,CD29及CD71、CD90阳性表达率分别为96.9%,99.1%及4.1%。结论hMSC库有望建立,为组织工程、细胞移植的研究提供种子细胞。 展开更多
关键词 骨髓细胞 质干细胞 低温保存 组织工程 细胞 培养的
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猪髓核基质成分诱导骨髓间充质干细胞分化为脊索样细胞 被引量:3
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作者 李德芳 江增鑫 +2 位作者 曾庆敏 吴靖平 谢晓诚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第33期5366-5371,共6页
背景:脊索细胞对椎间盘内严酷的内环境有良好的抵抗性,或许是治疗椎间盘退变性疾病合适的种子细胞来源。猪髓核终生含有大量脊索细胞,其基质内含有多种细胞因子可以促进骨髓间充质干细胞向脊索样细胞分化。目的:观察猪髓核基质对骨髓间... 背景:脊索细胞对椎间盘内严酷的内环境有良好的抵抗性,或许是治疗椎间盘退变性疾病合适的种子细胞来源。猪髓核终生含有大量脊索细胞,其基质内含有多种细胞因子可以促进骨髓间充质干细胞向脊索样细胞分化。目的:观察猪髓核基质对骨髓间充质干细胞分化的影响。方法:体外分离、培养、鉴定猪骨髓间充质干细胞;制备猪髓核粉末,并用配置好的DMEM完全培养基重悬粉末制备成含猪髓核组织的DMEM培养基,对骨髓间充质干细胞进行诱导3周,RT-PCR检测脊索细胞标记性基因鼠短尾突变体表型(T)、细胞角蛋白8及细胞角蛋白18的表达。该实验经复旦大学附属金山医院动物实验伦理委员会批准。结果与结论:(1)原代培养的骨髓间充质干细胞具有贴壁生长能力,在特定诱导条件下具有成骨、成脂分化能力,且能表达间充质干细胞表面标记物CD90、CD105;(2)在猪髓核基质成分诱导下骨髓间充质干细胞形态发生变化,表达鼠短尾突变体表型、细胞角蛋白8、细胞角蛋白18;(3)结果显示,猪髓核基质成分能诱导骨髓间充质干细胞分化为具有脊索细胞表型的脊索样细胞,为椎间盘退行性疾病治疗提供可靠的种子细胞。 展开更多
关键词 椎间盘退变 骨髓间充质干细胞 髓核 脊索细胞 全骨髓培养法 鼠短尾突变体表型基因
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Biodegradable chitin conduit tubulation combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for treatment of spinal cord injury by reducing glial scar and cavity formation 被引量:7
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作者 Feng Xue Er-jun Wu +4 位作者 Pei-xun Zhang Li-ya A Yu-hui Kou Xiao-feng Yin Na Han 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期104-111,共8页
We examined the restorative effect of modified biodegradable chitin conduits in combination with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation after right spinal cord hemisection injury. Immunohistochemical staini... We examined the restorative effect of modified biodegradable chitin conduits in combination with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation after right spinal cord hemisection injury. Immunohistochemical staining revealed that biological conduit sleeve bridging reduced glial scar formation and spinal muscular atrophy after spinal cord hemisection. Bone marrow mesenchymal stem cells survived and proliferated after transplantation in vivo, and differentiated into cells double-positive for S100 (Schwann cell marker) and glial fibrillary acidic protein (glial cell marker) at 8 weeks. Retrograde tracing showed that more nerve fibers had grown through the injured spinal cord at 14 weeks after combination therapy than either treatment alone. Our findings indicate that a biological conduit combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation effectively prevented scar formation and provided a favorable local microenvi- ronment for the proliferation, migration and differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells in the spinal cord, thus promoting restoration following spinal cord hemisection injury. 展开更多
关键词 nerve regeneration spinal cord injury spinal cord hemisection biological conduit bonemarrow mesenchymal stem cells stem cells transmission electron microscope cell transplantation neurons nerve fibers NSFC grants neural regeneration
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三种血液系统肿瘤血清促红细胞生成素与红系细胞增生活性相关性分析 被引量:2
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作者 刘锦丽 王欢 +2 位作者 王婷婷 付丽 崔琳 《中国医刊》 CAS 2010年第7期40-42,共3页
目的分析急性白血病(AL)、多发性骨髓瘤(MM)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者血清促红细胞生成素(sEPO)、可溶性转铁蛋白受体(sTfR)、血液血红蛋白(Hb)及骨髓有核红细胞百分数(Eb)4种指标的相关性,并探讨联合检测的临床意义。方法纳入68例AL... 目的分析急性白血病(AL)、多发性骨髓瘤(MM)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者血清促红细胞生成素(sEPO)、可溶性转铁蛋白受体(sTfR)、血液血红蛋白(Hb)及骨髓有核红细胞百分数(Eb)4种指标的相关性,并探讨联合检测的临床意义。方法纳入68例AL、41例MM、33例NHL患者作为研究对象,采用ELISA法测定sEPO、sTfR,使用全自动血液细胞分析仪测定Hb,穿刺采集骨髓进行骨髓细胞学检查,计数Eb。使用SPSS软件对检测结果进行统计分析。结果三种血液肿瘤患者的sEPO均较对照组不同程度的增高,贫血患者的增幅较无贫血患者更大。AL、MM贫血患者的sTfR分别为2.24±0.89mg/L和2.6±0.9mg/L,均低于对照组;AL、MM无贫血患者的sTfR分别为4.50±1.22 mg/L和3.72±1.09 mg/L,均高于对照组;NHL贫血患者与无贫血患者的sTfR分别为2.93±0.48 mg/L和3.28±0.68mg/L,与对照组无差异。AL、MM贫血患者的sEPO与Hb、sTfR及Eb均呈负相关;NHL贫血患者的EPO与Hb、Eb均呈负相关。结论 AL、MM、NHL贫血患者的血清EPO明显增高,主要是因贫血导致的低氧血症引起的反应性增高;AL、MM、NHL血清EPO增高还存在贫血以外的其他机制;sEPO、sTfR、Hb及Eb的联合检测分析将有助于客观全面评价AL、MM、NHL贫血患者内源性EPO的有效含量和促红细胞生成活性。 展开更多
关键词 血液系统肿瘤 血清促红细胞生成素 可溶性转铁蛋白受体 血红蛋白 骨髓有核红细胞 贫血
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兔骨髓源血管内皮祖细胞的体外培养与鉴定 被引量:2
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作者 程铖 韩莲花 +3 位作者 吕海涛 李红霞 周亚峰 杨向军 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期815-817,F0003,共4页
目的体外分离、培养、扩增血管内皮祖细胞(EPCs),观察EPCs生长分化过程并对其生物学特性进行鉴定。方法采用密度梯度离心法从兔骨髓中提取单个核细胞,贴壁筛选法分离EPCs,于添加了Singlequotes的EBM-2培养液中扩增培养,对培养10d的细... 目的体外分离、培养、扩增血管内皮祖细胞(EPCs),观察EPCs生长分化过程并对其生物学特性进行鉴定。方法采用密度梯度离心法从兔骨髓中提取单个核细胞,贴壁筛选法分离EPCs,于添加了Singlequotes的EBM-2培养液中扩增培养,对培养10d的细胞进行免疫荧光及免疫组织化学分析。结果培养4d,光电显微镜可见细胞集落形成,梭形贴壁细胞从集落中央以放射状向外周生长;培养7-10d,细胞集落相互连接,呈典型的“鹅卵石”样外观;2周左右可见细胞排列成条索状结构。贴壁细胞呈DIL-ac-LDL及FITC-UEA-1双荧光阳性,阳性率为(65.0±4.0)%;贴壁细胞表达vWF,VEGFR-2和VE-cadherin的阳性率分别为(90.0±2.1)%,(77.0±4.1)%和(78.1±8.2)%。结论骨髓中富含EPCs,成功建立了一整套骨髓源EPCs的分离、体外扩增培养的方法,且操作简便具有较好的可重复性。 展开更多
关键词 骨髓 血管内皮祖细胞
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静态心肌灌注-代谢显像评价心肌梗死后经冠状动脉介入骨髓干细胞移植治疗的价值 被引量:3
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作者 川玲 赵文锐 +5 位作者 方庭正 王升 王新强 梁英魁 高连如 朱智明 《心肺血管病杂志》 CAS 2009年第1期1-3,共3页
目的:应用心肌灌注-代谢显像评价心肌梗死(AMI)后经冠状动脉介入移植治疗的疗效。方法:应用单光子发射型断层扫描(SPECT)静态心肌灌注代谢显像对比观察经冠状动脉成形术(PCI)+支架(stent)+心肌骨髓干细胞移植(MBMC)前后的心肌梗死区心... 目的:应用心肌灌注-代谢显像评价心肌梗死(AMI)后经冠状动脉介入移植治疗的疗效。方法:应用单光子发射型断层扫描(SPECT)静态心肌灌注代谢显像对比观察经冠状动脉成形术(PCI)+支架(stent)+心肌骨髓干细胞移植(MBMC)前后的心肌梗死区心肌血流灌注和代谢变化。结果:介入移植治疗前灌注缺损106节段,代谢缺损80节段;介入治疗后灌注缺损84节段,代谢缺损66节段,治疗前后灌注代谢差异无统计学意义(χ2=0.033,P>0.05);介入移植治疗前后人均灌注缺损分别是(3.13±1.14)节段和(2.54±1.30)节段,2组差异有统计学意义(P=0.0005);介入移植治疗前后人均代谢缺损分别是(2.42±1.28)节段和(2±1.28)节段,2组差异有统计学意义(P=0.004)。介入移植治疗后定量分析靶心图灌注显像的总记分(SPS)、代谢显像的总记分(SMS)以及严重度记分(SSS)较治疗前均有下降,但无统计学意义(P=0.184,P=0.608,P=0.166)。结论:静态心肌灌注-代谢显像是观察经冠状动脉介入移植治疗AMI疗效的一种方法。 展开更多
关键词 静态心肌灌注-代谢显像 心肌梗死 干细胞移植
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血必净注射液对2Gy照射小鼠造血系统的保护作用 被引量:2
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作者 李德冠 王营营 +5 位作者 王月英 吴红英 王小春 路璐 樊飞跃 孟爱民 《陕西医学杂志》 CAS 2013年第9期1107-1108,1203,共3页
目的:探讨血必净注射液对辐射诱导小鼠造血系统损伤的影响。方法:将ICR小鼠分为对照组、照射组、血必净组。对照组接受假照射,对其余两组进行2Gy全身照射。血必净组小鼠0.4ml/kg腹腔注射,照射前3d开始给药,持续给药8d。血必净末次给药24... 目的:探讨血必净注射液对辐射诱导小鼠造血系统损伤的影响。方法:将ICR小鼠分为对照组、照射组、血必净组。对照组接受假照射,对其余两组进行2Gy全身照射。血必净组小鼠0.4ml/kg腹腔注射,照射前3d开始给药,持续给药8d。血必净末次给药24h后处死小鼠,取外周血和单侧股骨细胞进行计数,取胸腺和脾脏计算脏器指数,检测骨髓细胞CFU-GM。结果:与对照组比较,照射组小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞计数、胸腺和脾脏指数、CFU-GM均明显下降(P<0.05),而血必净组小鼠除胸腺指数外也均显著下降(P<0.05)。与照射组相比,血必净组小鼠外周血白细胞、胸腺指数及CFU-GM有显著提高(P<0.05)。结论:血必净注射液对辐射引起的造血系统损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 造血系统 辐射效应 造血系统 药物作用 骨髓细胞 细胞计数 动物 实验 小鼠
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Are bone marrow regenerative cells ideal seed cells for the treatment of cerebral ischemia? 被引量:5
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作者 Yi Li Xuming Hua +3 位作者 Fang Hua Wenwei Mao Liang Wan Shiting Li 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第13期1201-1209,共9页
Bone marrow cells for the treatment of ischemic brain injury may depend on the secretion of a large number of neurotrophic factors. Bone marrow regenerative cells are capable of increasing the secretion of neurotrophi... Bone marrow cells for the treatment of ischemic brain injury may depend on the secretion of a large number of neurotrophic factors. Bone marrow regenerative cells are capable of increasing the secretion of neurotrophic factors. In this study, after tail vein injection of 5-fluorouracil for 7 days, bone marrow cells and bone marrow regenerative cells were isolated from the tibias and femurs of rats, and then administered intravenously via the tail vein after focal cerebral ischemia. Immunohistological staining and reverse transcription-PCR detection showed that transplanted bone marrow cells and bone marrow regenerative cells could migrate and survive in the ischemic regions, such as the cortical and striatal infarction zone. These cells promote vascular endothelial cell growth factor mRNA expression in the ischemic marginal zone surrounding the ischemic penumbra of the cortical and striatal infarction zone, and have great advantages in promoting the recovery of neurological function, reducing infarct size and promoting angiogenesis. Bone marrow regenerative cells exhibited stronger neuroprotective effects than bone marrow cells. Our experimental findings indicate that bone marrow regenerative cells are preferable over bone marrow cells for cell therapy for neural regeneration after cerebral ischemia. Their neuroprotective effect is largely due to their ability to induce the secretion of factors that promote vascular regeneration, such as vascular endothelial growth factor. 展开更多
关键词 neural regeneration brain injury cerebral ischemia seed cells bone marrow transplantation bonemarrow cells bone marrow regenerative cells vascular regeneration factor brain NEUROREGENERATION
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