【背景】植物病原真菌丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号途径参与病菌有性生殖、细胞壁完整、菌丝侵染、致病力、胁迫响应等过程,灰葡萄孢MAPK信号途径参与病菌生长发育、致病力以及胁迫响应,但MAPK信号...【背景】植物病原真菌丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号途径参与病菌有性生殖、细胞壁完整、菌丝侵染、致病力、胁迫响应等过程,灰葡萄孢MAPK信号途径参与病菌生长发育、致病力以及胁迫响应,但MAPK信号途径基因在灰葡萄孢中的功能尚未完全阐明,该信号途径对灰葡萄孢的生长发育和致病力的调控机制尚不明确。【目的】明确灰葡萄孢MAPK编码基因bmp1、bmp3在病菌生长发育、致病力以及氧化胁迫响应过程的功能,为进一步阐明MAPK信号途径调控灰葡萄孢生长发育和致病力的分子机制奠定基础。【方法】利用RNAi技术构建灰葡萄孢MAPK编码基因bmp1和bmp3的RNAi突变体,并以野生型BC22菌株为对照,对bmp1和bmp3基因的RNAi突变体的表型、致病力以及对氧化胁迫的敏感性进行分析。【结果】灰葡萄孢bmp1和bmp3基因的RNAi突变体其菌落形态、菌丝形态均与野生型BC22菌株没有明显差别;bmp1基因的RNAi突变体生长速率明显减慢,分生孢子产量明显降低;bmp3基因的RNAi突变体的生长速率与野生型BC22菌株没有明显差别,不能产生分生孢子。bmp1和bmp3基因的RNAi突变体在番茄果实的表面均不能产生明显的致病症状,而且不能穿透玻璃纸。bmp1基因的RNAi突变体在含有H_2O_2的培养基上受抑制的程度显著低于野生型,而在含甲萘醌的培养基上受抑制的程度显著高于野生型;bmp3基因的RNAi突变体在含有H_2O_2和甲萘醌的培养基受抑制的程度均显著高于野生型。【结论】灰葡萄孢bmp1基因正调控病菌生长、分生孢子形成、致病力和穿透能力,参与调控病菌对氧化胁迫的响应;灰葡萄孢bmp3基因正调控病菌分生孢子形成、致病力、穿透能力以及对氧化胁迫的响应。展开更多
目的基于大鼠骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP2)/Smad家族成员1(smad family member 1,Smad1)通路,探究重组人转化生长因子-β1(recombinant human transforming growth factor-β1,rhTGF-β1)对正畸牙移动(orthodonti...目的基于大鼠骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP2)/Smad家族成员1(smad family member 1,Smad1)通路,探究重组人转化生长因子-β1(recombinant human transforming growth factor-β1,rhTGF-β1)对正畸牙移动(orthodontic tooth movement,OMT)大鼠破骨细胞形成的影响。方法构建大鼠OTM模型,采用显微CT(Micro-CT)分析测定OTM的距离;通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色评估压力侧破骨细胞活性;苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色评估压力侧组织形态学特征,免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色和蛋白质印迹(Western blot)测定相关蛋白表达水平。结果与正常组相比,Model组大鼠OTM距离增加(P<0.01),牙周间隙明显变窄并出现吸收陷窝,压力侧的基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)增加(P<0.01)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达降低(P<0.01),BMP2/Smad1信号通路被激活(P<0.01)。经BMP2抑制剂Noggin处理后,与Model组相比,BMP2、p-Smad1表达显著降低(P<0.01),OTM距离显著降低(P<0.01),且压力侧的TRAP、MMP-9及RANKL表达均显著降低(P<0.01),OPG升高(P<0.01)。经rhTGF-β1处理的大鼠中,较Model组OTM距离显著增加(P<0.01),TRAP阳性多核细胞数量升高(P<0.01),压力侧的MMP-9及RANKL表达均显著升高(P<0.05)、OPG表达显著降低(P<0.01),且BMP2、p-Smad1表达上调(P<0.01)。此外,rhTGF-β1+Noggin组部分逆转了rhTGF-β1组大鼠的破骨细胞数量的增加效应(P<0.01)。结论正畸力可促进破骨细胞形成,且rhTGF-β1可通过BMP2/Smad1信号通路增强OTM过程中破骨细胞的形成。展开更多
目的:本研究主要探讨糖肾平对糖尿病肾病(DKD)KK-Ay小鼠肾脏保护作用及其对TGF-β_1/Samd6/BMP7信号通路的影响。方法:10只雌性C57BL/6J小鼠作为对照组。雌性10周龄KK-Ay小鼠60只,KK鼠料诱导10周后建立糖尿病肾病动物模型。模型小鼠按...目的:本研究主要探讨糖肾平对糖尿病肾病(DKD)KK-Ay小鼠肾脏保护作用及其对TGF-β_1/Samd6/BMP7信号通路的影响。方法:10只雌性C57BL/6J小鼠作为对照组。雌性10周龄KK-Ay小鼠60只,KK鼠料诱导10周后建立糖尿病肾病动物模型。模型小鼠按体质量和血糖区组分层随机法分为模型组、厄贝沙坦组与糖肾平小、中、大剂量组。厄贝沙坦组,糖肾平小、中、大剂量组均灌胃给药,正常组、模型组用等体积去离子水灌胃。每4周称体质量和测24 h尿蛋白定量。实验第26周,眼球取血并处死小鼠,称肾脏质量、测血糖,分离血清测BUN、Scr、TG、MDA、NO和SOD;HE染色和Mallory染色观察肾组织病理形态;原位杂交、免疫组化、Western blot检测肾组织TGF-β_1、Samd6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin m RNA及蛋白表达。结果:与模型组比较,各治疗组体质量、肾质量/体质量、尿蛋白降低,其中糖肾平中、大剂量组有显著性差异(P<0.01);肾脏病理损害明显减轻,FBG、血清BUN、Scr、TG和MDA含量明显降低(P<0.01),NO、SOD含量明显增加(P<0.01),Samd6、BMP7和E-Cadherin m RNA及蛋白的表达量增加,TGF-β_1和α-SMA m RNA及蛋白的表达量减少,其中糖肾平大剂量组有显著性差异(P<0.01),糖肾平的治疗效果呈剂量依赖关系。结论:糖肾平对DKD KK-Ay小鼠肾脏保护及逆转肾小管上皮细胞转分化的作用,可能与下调氧化应激水平及调节TGF-β_1/Samd6/BMP7信号通路有关,这为DKD"肾痿"学说提供了新的实验依据。展开更多
文摘【背景】植物病原真菌丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号途径参与病菌有性生殖、细胞壁完整、菌丝侵染、致病力、胁迫响应等过程,灰葡萄孢MAPK信号途径参与病菌生长发育、致病力以及胁迫响应,但MAPK信号途径基因在灰葡萄孢中的功能尚未完全阐明,该信号途径对灰葡萄孢的生长发育和致病力的调控机制尚不明确。【目的】明确灰葡萄孢MAPK编码基因bmp1、bmp3在病菌生长发育、致病力以及氧化胁迫响应过程的功能,为进一步阐明MAPK信号途径调控灰葡萄孢生长发育和致病力的分子机制奠定基础。【方法】利用RNAi技术构建灰葡萄孢MAPK编码基因bmp1和bmp3的RNAi突变体,并以野生型BC22菌株为对照,对bmp1和bmp3基因的RNAi突变体的表型、致病力以及对氧化胁迫的敏感性进行分析。【结果】灰葡萄孢bmp1和bmp3基因的RNAi突变体其菌落形态、菌丝形态均与野生型BC22菌株没有明显差别;bmp1基因的RNAi突变体生长速率明显减慢,分生孢子产量明显降低;bmp3基因的RNAi突变体的生长速率与野生型BC22菌株没有明显差别,不能产生分生孢子。bmp1和bmp3基因的RNAi突变体在番茄果实的表面均不能产生明显的致病症状,而且不能穿透玻璃纸。bmp1基因的RNAi突变体在含有H_2O_2的培养基上受抑制的程度显著低于野生型,而在含甲萘醌的培养基上受抑制的程度显著高于野生型;bmp3基因的RNAi突变体在含有H_2O_2和甲萘醌的培养基受抑制的程度均显著高于野生型。【结论】灰葡萄孢bmp1基因正调控病菌生长、分生孢子形成、致病力和穿透能力,参与调控病菌对氧化胁迫的响应;灰葡萄孢bmp3基因正调控病菌分生孢子形成、致病力、穿透能力以及对氧化胁迫的响应。
文摘目的基于大鼠骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP2)/Smad家族成员1(smad family member 1,Smad1)通路,探究重组人转化生长因子-β1(recombinant human transforming growth factor-β1,rhTGF-β1)对正畸牙移动(orthodontic tooth movement,OMT)大鼠破骨细胞形成的影响。方法构建大鼠OTM模型,采用显微CT(Micro-CT)分析测定OTM的距离;通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色评估压力侧破骨细胞活性;苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色评估压力侧组织形态学特征,免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色和蛋白质印迹(Western blot)测定相关蛋白表达水平。结果与正常组相比,Model组大鼠OTM距离增加(P<0.01),牙周间隙明显变窄并出现吸收陷窝,压力侧的基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)增加(P<0.01)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达降低(P<0.01),BMP2/Smad1信号通路被激活(P<0.01)。经BMP2抑制剂Noggin处理后,与Model组相比,BMP2、p-Smad1表达显著降低(P<0.01),OTM距离显著降低(P<0.01),且压力侧的TRAP、MMP-9及RANKL表达均显著降低(P<0.01),OPG升高(P<0.01)。经rhTGF-β1处理的大鼠中,较Model组OTM距离显著增加(P<0.01),TRAP阳性多核细胞数量升高(P<0.01),压力侧的MMP-9及RANKL表达均显著升高(P<0.05)、OPG表达显著降低(P<0.01),且BMP2、p-Smad1表达上调(P<0.01)。此外,rhTGF-β1+Noggin组部分逆转了rhTGF-β1组大鼠的破骨细胞数量的增加效应(P<0.01)。结论正畸力可促进破骨细胞形成,且rhTGF-β1可通过BMP2/Smad1信号通路增强OTM过程中破骨细胞的形成。
文摘目的:本研究主要探讨糖肾平对糖尿病肾病(DKD)KK-Ay小鼠肾脏保护作用及其对TGF-β_1/Samd6/BMP7信号通路的影响。方法:10只雌性C57BL/6J小鼠作为对照组。雌性10周龄KK-Ay小鼠60只,KK鼠料诱导10周后建立糖尿病肾病动物模型。模型小鼠按体质量和血糖区组分层随机法分为模型组、厄贝沙坦组与糖肾平小、中、大剂量组。厄贝沙坦组,糖肾平小、中、大剂量组均灌胃给药,正常组、模型组用等体积去离子水灌胃。每4周称体质量和测24 h尿蛋白定量。实验第26周,眼球取血并处死小鼠,称肾脏质量、测血糖,分离血清测BUN、Scr、TG、MDA、NO和SOD;HE染色和Mallory染色观察肾组织病理形态;原位杂交、免疫组化、Western blot检测肾组织TGF-β_1、Samd6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin m RNA及蛋白表达。结果:与模型组比较,各治疗组体质量、肾质量/体质量、尿蛋白降低,其中糖肾平中、大剂量组有显著性差异(P<0.01);肾脏病理损害明显减轻,FBG、血清BUN、Scr、TG和MDA含量明显降低(P<0.01),NO、SOD含量明显增加(P<0.01),Samd6、BMP7和E-Cadherin m RNA及蛋白的表达量增加,TGF-β_1和α-SMA m RNA及蛋白的表达量减少,其中糖肾平大剂量组有显著性差异(P<0.01),糖肾平的治疗效果呈剂量依赖关系。结论:糖肾平对DKD KK-Ay小鼠肾脏保护及逆转肾小管上皮细胞转分化的作用,可能与下调氧化应激水平及调节TGF-β_1/Samd6/BMP7信号通路有关,这为DKD"肾痿"学说提供了新的实验依据。
