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可视化LAMP法检测耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2)的初步应用 被引量:5
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作者 邹萍 鲍俊峰 +2 位作者 臧嘉 张婷 许耀辉 《检验医学》 CAS 2019年第1期56-59,共4页
目的建立可视化环介导等温扩增(LAMP)方法检测肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2),并初步评估其应用价值。方法设计3对特异性的LAMP引物,建立25μL的LAMP检测体系并进行优化,通过与聚合酶链反应(PCR)进行比较,分析其特异性和敏感性。结果... 目的建立可视化环介导等温扩增(LAMP)方法检测肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2),并初步评估其应用价值。方法设计3对特异性的LAMP引物,建立25μL的LAMP检测体系并进行优化,通过与聚合酶链反应(PCR)进行比较,分析其特异性和敏感性。结果成功建立了检测肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2)的可视化LAMP方法。63℃保温40 min可实现对bla_(KPC-2)基因的快速检测。特异性与PCR一致,敏感性比PCR高约10倍。采用新建立的可视化LAMP方法检测出25株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南其中之一耐药的肺炎克雷伯菌中有12株携带bla_(KPC-2)基因,31株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南敏感的肺炎克雷伯菌中有5株携带bla_(KPC-2)基因,二者比较差异有统计学意义(P=0.009 9)。结论建立的可视化LAMP方法可作为检测肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2)的方法,但尚不能替代体外药物敏感性试验。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 肺炎克雷伯菌 耐碳青霉烯酶 blakpc-2基因
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磷霉素、米诺环素等抗生素对bla_(KPC-2)肺炎克雷伯杆菌的体外药敏研究 被引量:2
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作者 史煜波 胡丽庆 +1 位作者 翁幸鐾 王盛 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2015年第5期574-576,580,共4页
目的研究筛选治疗产KPC-2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯杆菌的敏感性抗生素。方法用氯霉素、多西环素、磷霉素、米诺环素和替加环素对已知blaKPC-2菌株进行体外药敏试验。结果氯霉素、多西环素米诺环素、磷霉素和替加环素耐药率分别为20%、... 目的研究筛选治疗产KPC-2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯杆菌的敏感性抗生素。方法用氯霉素、多西环素、磷霉素、米诺环素和替加环素对已知blaKPC-2菌株进行体外药敏试验。结果氯霉素、多西环素米诺环素、磷霉素和替加环素耐药率分别为20%、17%、15%、6%和5%。结论本研究所选用抗生素的耐药率明显低于常规抗生素。 展开更多
关键词 blakpc-2肺炎克雷伯杆菌 磷霉素 米诺环素 氯霉素 多西环素 替加环素 药敏试验
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199株革兰阴性临床分离株的耐药及blaKPC基因携带状况的研究
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作者 程苏云 梅玲玲 +3 位作者 占利 张云怡 张俊彦 周惠芳 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第17期2985-2988,共4页
目的了解革兰阴性临床分离株的耐药情况及其产碳青霉烯酶携带状况。方法采用VITEK-2 Compact全自动细菌药敏鉴定分析系统进行鉴定菌株和耐药性检测;用纸片扩散法进行碳青霉烯酶初步筛选试验,改良Hodge试验作为表型确认试验;荧光定量PCR... 目的了解革兰阴性临床分离株的耐药情况及其产碳青霉烯酶携带状况。方法采用VITEK-2 Compact全自动细菌药敏鉴定分析系统进行鉴定菌株和耐药性检测;用纸片扩散法进行碳青霉烯酶初步筛选试验,改良Hodge试验作为表型确认试验;荧光定量PCR法检测bla KPC基因。结果 199株革兰阴性临床分离株中铜绿假单胞菌占19.10%,鲍曼不动杆菌占17.09%,肺炎克雷伯菌占16.58%,大肠埃希菌占15.08%;4种主要革兰阴性临床分离株对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢呋辛酯耐药率为80%以上。对头孢曲松和呋喃妥英的耐药率分别为77.0%和71.7%;5重及以上的耐药菌株占83.0%,其中铜绿假单胞菌的多重耐药率为100.0%,鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌对10类抗生素均耐药的菌株分别占52.9%和21.2%;碳青霉烯酶阳性率为30.2%(60/199),碳青霉烯酶阳性菌bla KPC基因携带率为71.7%(43/60)。结论革兰阴性临床分离株的耐药性状况不容乐观,其中产碳青霉烯酶比例已逐渐增高,应加强对其的检测和控制。 展开更多
关键词 革兰阴性临床分离株 耐药性 碳青霉烯酶 bla kpc基因
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携带blaKPC-2基因耐药菌在我院流行传播现状及耐药分析
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作者 文江雄 颜兴艳 +5 位作者 向天新 刘洋 朱滢 胡大利 余涛 邬小萍 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2018年第4期67-71,共5页
目的研究携带blaKPC-2基因的耐碳青霉烯类抗生素耐药菌在南昌大学第一附属医院流行传播现状,对其作流行病学分析,为遏制该类耐药菌株在南昌大学第一附属医院流行传播提供相关研究依据。方法收集南昌大学第一附属医院2016年1—12月对碳... 目的研究携带blaKPC-2基因的耐碳青霉烯类抗生素耐药菌在南昌大学第一附属医院流行传播现状,对其作流行病学分析,为遏制该类耐药菌株在南昌大学第一附属医院流行传播提供相关研究依据。方法收集南昌大学第一附属医院2016年1—12月对碳青霉烯类抗生素不敏感菌株,采用Vitek2compact全自动微生物鉴定仪对菌株进行菌株鉴定,提取菌株的DNA,采用PCR特异性扩增blaKPC-2基因,对阳性扩增产物作基因测序,将鉴定为blaKPC-2阳性的菌株作体外药物敏感性试验;采用改良碳青霉烯酶灭活实验(modified carbapenem inactivation method,mCIM)对blaKPC-2阳性的菌株作碳青霉烯酶表型筛查;收集blaKPC-2阳性菌株相关临床资料,分析其在南昌大学第一附属医院的流行传播现状。结果收集的568株对碳青霉烯类抗生素不敏感菌株中筛选出blaKPC-2阳性耐药菌株63株,总阳性率为11.09%;其中98株肺炎克雷伯杆菌检测出blaKPC-2阳性菌株59株,阳性率为60.20%;186株鲍曼不动杆菌中blaKPC-2阳性菌株2株,阳性率为1.08%;72株大肠埃希菌中blaKPC-2阳性菌株2株,阳性率为2.78%;125株阴沟肠杆菌和87株铜绿假单胞菌未筛到blaKPC-2阳性菌株;所有blaKPC-2阳性的菌株mCIM实验均阳性;通过查询blaKPC-2阳性菌株标本的临床资料发现,南昌大学第一附属医院18个临床科室均有blaKPC-2阳性耐药菌株流行分布,其中ICU科室是该类耐药菌株重点流行科室;药物敏感性试验显示该类耐药菌株对碳青霉烯类中亚胺培南、美罗培南,喹诺酮类抗生素中的左氧氟沙星、环丙沙星,氨基糖苷类抗生素中的阿米卡星、庆大霉素及妥布霉素表现高水平耐药,其他临床常用抗生素多为中等水平耐药。结论南昌大学第一附属医院携带blaKPC-2基因的耐药菌株在肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌均有分布,其中主要分布在肺炎克雷伯菌中;药物敏感性试验显示其对碳青霉烯类、喹诺酮类、氨基糖苷类等抗生素高度耐药,该类耐药菌株在南昌大学第一附属医院广泛分布,ICU科室是其流行传播的重点区域,应当引起重视,做好防控措施。 展开更多
关键词 blakpc-2基因 碳青霉烯酶 耐药菌 南昌大学第一附属医院
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阿拉丘沙门菌的遗传特征及耐药基因初步研究
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作者 刘玥 许学斌 +4 位作者 胡屹 顾其芳 刘诚 袁政安 陈敏 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第2期164-170,共7页
目的 基于阿拉丘沙门菌分离株的全基因组分析,初步探讨其遗传特征及耐药基因分布。方法 收集并鉴定5株来自不同来源(人源与非人源)的阿拉丘沙门菌,对其进行表型和血清型验证、抗菌药物敏感性测定以及全基因组测序分析。利用全球公开数... 目的 基于阿拉丘沙门菌分离株的全基因组分析,初步探讨其遗传特征及耐药基因分布。方法 收集并鉴定5株来自不同来源(人源与非人源)的阿拉丘沙门菌,对其进行表型和血清型验证、抗菌药物敏感性测定以及全基因组测序分析。利用全球公开数据库的阿拉丘沙门菌基因组数据,对这些菌株的毒力基因、耐药基因和质粒复制子进行预测,并构建系统发育树以探讨其遗传背景。结果 我国阿拉丘沙门菌的首例报告出现于2015年的上海,临床特征主要为腹泻,菌株主要集中在东部和南部沿海地区。本次研究的5株菌株中,4株归属于序列型ST2061,1株归属于ST1298。所有菌株对大多数临床常用抗菌药物敏感。全基因组分析结果显示,2株ST2061菌株携带bla KPC-2基因,1株ST1298菌株携带fosA7基因。在全球阿拉丘沙门菌群体的5个遗传进化群(C1~C5)中,本研究的ST2061克隆位于C1群,与英国菌株高度同源;而ST1298克隆位于C4群,为携带磷霉素耐药基因fosA7的全球流行克隆。结论 本研究初步呈现我国阿拉丘沙门菌分离株的遗传和耐药特征,提示存在携带bla_(KPC-2)和fosA7基因的菌株出现。为后续在更大范围内开展的分子流行病学监测与溯源分析提供参考,并强调加强阿拉丘沙门菌耐药性监测的重要性。 展开更多
关键词 阿拉丘沙门菌 bla kpc-2 fosA7 系统发育进化
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肠杆菌科细菌耐药危险因素及碳青霉烯酶blaNDM和blaKPC基因变化趋势分析
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作者 刘向芹 刘建晓 +2 位作者 白现英 蔺晓娟 张凯 《微生物与感染》 2025年第4期208-216,共9页
本研究旨在研究肠杆菌科细菌耐药的危险因素及碳青霉烯酶blaNDM和blaKPC基因的变化趋势。选取2017年1月—2023年12月700例肠杆菌科细菌血流感染患者为研究对象,筛选其中肠杆菌科细菌耐药感染患者350例作为研究组,非肠杆菌科细菌耐药感... 本研究旨在研究肠杆菌科细菌耐药的危险因素及碳青霉烯酶blaNDM和blaKPC基因的变化趋势。选取2017年1月—2023年12月700例肠杆菌科细菌血流感染患者为研究对象,筛选其中肠杆菌科细菌耐药感染患者350例作为研究组,非肠杆菌科细菌耐药感染患者350例作为对照组。通过单因素与多因素分析,研究肠杆菌科细菌耐药的危险因素,并进一步分析肠杆菌科细菌耐药表型及耐药基因的分布特征。结果显示,合并高血压、糖尿病、高脂血症、慢性阻塞性肺病、使用抗生素种类、气管插管、留置尿管、应用糖皮质激素和白蛋白、住院时间长、较高的APACHEⅡ评分和机械通气时间均为患者肠杆菌科细菌耐药感染的危险因素。药敏分析显示,肠杆菌科细菌主要对亚胺培南、美洛培南、厄他培南、左氧氟沙星、哌拉西林、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率较高,耐药基因分型以blaNDM(56.86%)以及blaKPC(10.57%)为主。本研究提示针对肠杆菌科细菌耐药基因的多态性,建议患者入院后及时进行基因分型,在此基础上科学使用敏感性较高的抗生素。 展开更多
关键词 肠杆菌科细菌耐药 基因分型 blakpc blaNDM blaSME
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耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌耐药基因检测及分析 被引量:7
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作者 涂海健 陈淑娟 +1 位作者 林群英 许光辉 《分子诊断与治疗杂志》 2016年第4期246-251,共6页
目的分析耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN)耐药情况与耐药相关基因的关系,了解其耐药机制。方法采用PCR技术检测29株碳青霉烯类耐药KPN与产碳青霉烯酶、超广谱b-内酰胺酶(extended-spectrum b-lactamases,... 目的分析耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN)耐药情况与耐药相关基因的关系,了解其耐药机制。方法采用PCR技术检测29株碳青霉烯类耐药KPN与产碳青霉烯酶、超广谱b-内酰胺酶(extended-spectrum b-lactamases,b-ESBLs)、amp C酶及喹诺酮类耐药相关基因bla KPC-2、bla IMP-4、bla CTX-M、bla CTX-M-15、bla VIM-1、bla TEM、bla SHV、amp C、gyr A、par C,并对KPC-2、amp C、gyr A基因进行序列分析。结果用PCR技术证实了29株为产KPC、IMP型碳青霉烯酶的KPN,并且携带TEM、SHV型b-ESBLs,其中18株同时编码amp C基因;29株待测菌均检出喹诺酮类耐药相关gyr A、par C基因。KPC基因片段同源性分析显示,待测菌株之间核苷酸同源性为98%~100%,氨基酸同源性为97%~100%;与肺炎克雷伯氏菌Kpn-1504株之间的核苷酸同源性最高,为99%~100%。gyr A、par C基因突变率分别为58.6%、62.1%。结论产KPC-2、IMP-4型碳青霉烯酶同时携带多种b-ESBLs、amp C基因及突变的喹诺酮类耐药相关gyr A、par C基因的KPN耐药情况更加严重,同时存在克隆性流行可能。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 bla kpc 超广谱b-内酰胺酶 基因 PCR
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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者临床分布特点、耐药基因及相关危险因素分析 被引量:5
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作者 范向平 谢琪 +2 位作者 刘志云 车玉传 邓莉 《临床误诊误治》 CAS 2024年第21期39-47,共9页
目的探析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)感染患者分布特点、耐药基因以及相关危险因素,以避免抗菌药物的不合理使用。方法回顾性分析2017年1月至2021年9月确诊的619例肺炎克雷伯菌(KPN)感染患者的临床资料,对CRKP感染分布特点及耐药基... 目的探析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)感染患者分布特点、耐药基因以及相关危险因素,以避免抗菌药物的不合理使用。方法回顾性分析2017年1月至2021年9月确诊的619例肺炎克雷伯菌(KPN)感染患者的临床资料,对CRKP感染分布特点及耐药基因进行统计分析,采用单因素、多因素logistic回归分析CRKP感染发生的危险因素。结果619例中,51例(8.24%)为CRKP,568例(91.76%)为碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)。与CSKP组相比,CRKP组医院获得性感染、科室分布为神经内科以及1个月内使用过碳青霉烯类药物的占比更高,科室分布为呼吸科的占比更低,且CRKP组对多磷酸类、中效磺胺类、氨基苷类、碳青霉烯类、头孢菌素类、青霉素类、喹诺酮类抗菌药物的耐药率更高(P<0.05,P<0.01)。PCR扩增耐药基因显示,51株CRKP菌种中30株(58.9%)携带bla_(KPC-2)基因,18株(35.3%)携带bla_(NDM)基因,2株(3.9%)携带bla_(IMP)基因,1株(1.9%)携带bla_(OXA-48)基因,2株(3.9%)同时携带bla_(KPC-2)和bla_(NDM)基因。多因素logistic回归分析显示,血清白蛋白<35 g/L、急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ评分≥20分、有留置管、机械通气≥7 d、1个月内使用过碳青霉烯类药物、使用≥3种抗菌药物、住院时间≥20 d、携带多种耐药菌是CRKP感染的独立危险因素(P<0.05,P<0.01)。结论CRKP在医院获得性感染中占比较高,检测CRKP耐药情况及耐药基因可指导临床合理选择抗菌药物,从而减少耐药的发生,防控CRKP感染。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 耐碳青霉烯类 多磷酸盐类:氨基苷类 bla_(kpc-2) 危险因素 血清白蛋白 急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ
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