目的 :利用 Bac- to- Bac表达系统高效表达成熟的胰岛素样生长因子 (IGF- )。方法 :首先构建含 IGF- c DNA的重组供体质粒 p Fast Bac1,然后重组 p Fast Bac1所含的转位元件 mini- Tn7,在感受态细胞 DH10 Bac内转位到粘粒上的连接位...目的 :利用 Bac- to- Bac表达系统高效表达成熟的胰岛素样生长因子 (IGF- )。方法 :首先构建含 IGF- c DNA的重组供体质粒 p Fast Bac1,然后重组 p Fast Bac1所含的转位元件 mini- Tn7,在感受态细胞 DH10 Bac内转位到粘粒上的连接位点mini- att Tn7构成重组粘粒 ,重组粘粒转染昆虫细胞 Sf9产生重组杆状病毒 ,重组杆状病毒进行感染 Sf9细胞。结果 :琼脂糖凝胶分析显示重组供体质粒 p Fast Bac1的成功构建 ;琼脂糖凝胶分析重组粘粒的 PCR产物表明已获得重组粘粒 ;十二烷基磺酸钠(SDS) - PAGE和 Western Blotting显示 7KD左右蛋白质条带的出现。结论 :利用 Bac- to- Bac表达系统成功表达具有免疫学活性的 IGF- ,可用于临床疾病的诊治。展开更多
文摘目的 :利用 Bac- to- Bac表达系统高效表达成熟的胰岛素样生长因子 (IGF- )。方法 :首先构建含 IGF- c DNA的重组供体质粒 p Fast Bac1,然后重组 p Fast Bac1所含的转位元件 mini- Tn7,在感受态细胞 DH10 Bac内转位到粘粒上的连接位点mini- att Tn7构成重组粘粒 ,重组粘粒转染昆虫细胞 Sf9产生重组杆状病毒 ,重组杆状病毒进行感染 Sf9细胞。结果 :琼脂糖凝胶分析显示重组供体质粒 p Fast Bac1的成功构建 ;琼脂糖凝胶分析重组粘粒的 PCR产物表明已获得重组粘粒 ;十二烷基磺酸钠(SDS) - PAGE和 Western Blotting显示 7KD左右蛋白质条带的出现。结论 :利用 Bac- to- Bac表达系统成功表达具有免疫学活性的 IGF- ,可用于临床疾病的诊治。
