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穿破石总黄酮通过VEGF/VEGFR2和PI3K/Akt/HIF-1α通路抑制血管瘤内皮细胞增殖、迁移和血管生成
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作者 谈发明 赵志伟 +9 位作者 张颖 刘杰 石孟琼 孟子元 杨文雁 李浩然 谈燕清 许杰 张继红 潘朝旺 《中草药》 北大核心 2025年第24期9027-9043,共17页
目的 探讨穿破石总黄酮(total flavonoids from Maclura cochinchinensis,TFMC)对血管瘤内皮细胞(hemangioma endothelial cells,Hem ECs)增殖、迁移及血管生成的影响及作用机制。方法 设置对照组、TFMC(40μg/mL)组、磷脂酰肌醇3-激酶(... 目的 探讨穿破石总黄酮(total flavonoids from Maclura cochinchinensis,TFMC)对血管瘤内皮细胞(hemangioma endothelial cells,Hem ECs)增殖、迁移及血管生成的影响及作用机制。方法 设置对照组、TFMC(40μg/mL)组、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)抑制剂LY294002(20μmol/L)组、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)抑制剂LW6(30μmol/L)组、TFMC+LY294002组、TFMC+LW6组、PI3K激动剂740Y-P(15μmol/L)组、HIF-1α激动剂DMOG(0.5μmol/L)、TFMC+740Y-P组和TFMC+DMOG组。HemECs给予药物干预24 h后,收集上清液和细胞。采用MTT法检测细胞增殖能力;克隆形成实验检测克隆形成能力;划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡;PI染色检测细胞周期;免疫荧光法检测细胞线粒体膜电位和细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;比色法和ELISA法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor2,VEGFR2)、纤连蛋白(fibronectin,FN)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及MMP-9含量;血管生成实验检测细胞成管能力;qRT-PCR和Western blotting测定迁移、侵袭、VEGF/VEGFR2和PI3K/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/HIF-1α信号通路相关基因和蛋白表达。结果 与对照组比较,TFMC、LY294002和LW6可显著抑制HemECs增殖、迁移、侵袭和成管能力,促进细胞凋亡、LDH释放和G0/G1期阻滞,升高细胞内ROS水平,降低线粒体膜电位和细胞中VEGF、VEGFR2、FN、MMP-2及MMP-9含量,下调迁移、侵袭、VEGF/VEGFR2和PI3K/Akt/HIF-1α信号通路相关基因和蛋白表达(P<0.01)。与TFMC组比较,TFMC与LY294002或LW6联用可进一步加重这种改变(P<0.01)。相反,740Y-P和DMOG则可以恶化上述变化;TFMC与740Y-P或DMOG联用可逆转这种改变(P<0.01)。结论 TFMC可抑制HemECs增殖、迁移、侵袭及血管生成,其作用机制与抑制VEGF/VEGFR2和PI3K/Akt/HIF-1α通路激活密切相关。 展开更多
关键词 穿破石总黄酮 血管瘤内皮细胞 增殖 迁移 血管生成 VEGF/VEGFR2信号通路 PI3K/Akt/HIF-1α信号通路 花旗松素 柑桔素 桂木生黄素 异胡椒酮B 山柰酚 槲皮素
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