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RNAi表达载体对avUCP基因表达的抑制作用
1
作者 仲明 张宏福 +3 位作者 董枫岚 王润平 刘燕 杨琳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期352-355,共4页
研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)表达载体对UCP基因的抑制作用。针对鸡解耦联蛋白(avianuncoupling protein,av UCP)基因,构建4种RNAi质粒表达载体(分别称为A、B、C和D号载体)。再经过脂质体法转染成肌纤维细胞,应用荧光定量PCR及... 研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)表达载体对UCP基因的抑制作用。针对鸡解耦联蛋白(avianuncoupling protein,av UCP)基因,构建4种RNAi质粒表达载体(分别称为A、B、C和D号载体)。再经过脂质体法转染成肌纤维细胞,应用荧光定量PCR及流式细胞术检测其对av UCP mRNA及蛋白表达的影响。构建的4种表达载体均抑制了av UCP的mRNA及蛋白的表达,其中转染C号载体的成肌纤维细胞av UCPmRNA表达相当于空白对照组的14.6%,蛋白抑制率达93.7%。RNAi表达载体可以有效的抑制avUCP基因的表达。 展开更多
关键词 RNA干扰 avucp 表达载体 FQ-PCR 成肌纤维
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avUCP基因与日粮能量水平对鸡骨骼肌ATP含量的影响
2
作者 王润平 张宏福 +2 位作者 仲明 唐湘方 瞿红侠 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期610-616,共7页
探讨鸡在不同日粮能量水平下,鸡解耦联蛋白(avian uncoupling protein,avUCP)基因对骨骼肌组织中ATP含量的影响。试验采用2×3×3三因子完全随机试验设计,即avUCP转基因鸡与非avUCP转基因鸡、3种日粮(高能日粮、高脂日粮和标准... 探讨鸡在不同日粮能量水平下,鸡解耦联蛋白(avian uncoupling protein,avUCP)基因对骨骼肌组织中ATP含量的影响。试验采用2×3×3三因子完全随机试验设计,即avUCP转基因鸡与非avUCP转基因鸡、3种日粮(高能日粮、高脂日粮和标准日粮)和日粮饲喂时间(20、40和60 d),共18个处理组。试验期60 d,试验结束时,屠宰试鸡取骨胳肌组织,生物发光法测定骨骼肌ATP含量,荧光定量PCR检测avUCP mRNA的表达水平。结果表明,avUCP基因、日粮营养结构和日粮饲喂时间均显著影响鸡骨骼肌的ATP含量(P<0.01),且ATP含量与avUCP mRNA的表达水平显著负相关(P<0.05),相关系数为0.45,avUCP基因和日粮营养结构、日粮营养结构和日粮饲喂时间之间均存在显著的互作效应(P<0.05)。avUCP转基因鸡骨骼肌ATP含量明显高于非avUCP转基因鸡,其中高能日粮组间差异极显著(P<0.01),高脂日粮组间和标准日粮组间差异显著(P<0.05)。3种日粮处理显著影响骨骼肌ATP含量(P<0.01),其中avUCP转基因组的差异比非转基因组大。高能日粮组和高脂日粮组饲喂前期骨骼肌ATP含量逐渐增加,40 d时达到最高,其后呈降低趋势(P<0.05)。通过日粮营养和转基因技术调节avUCP mRNA的表达可以促进骨骼肌ATP的储备,在细胞和分子水平上节省鸡的能量消耗。 展开更多
关键词 avucp转基因鸡 骨骼肌 三磷酸腺苷 生物发光
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鸽avUCP基因克隆、原核表达与多抗制备 被引量：1
3
作者 李晨星 潘广伟 +3 位作者 宋思进 李双 唐赛仙 赵雪娇 《安徽农学通报》 2020年第23期11-16,共6页
解偶联蛋白(uncoupling proteins,UCPs)是线粒体内膜上具有调节质子跨膜转运作用的转运蛋白,在细胞的产热、氧化还原、活性氧产生等许多细胞过程中起着关键作用。鸟类解偶联蛋白(avian uncoupling pro⁃tein avUCP)通过调控脂类利用和细... 解偶联蛋白(uncoupling proteins,UCPs)是线粒体内膜上具有调节质子跨膜转运作用的转运蛋白,在细胞的产热、氧化还原、活性氧产生等许多细胞过程中起着关键作用。鸟类解偶联蛋白(avian uncoupling pro⁃tein avUCP)通过调控脂类利用和细胞代谢产热参与机体的脂肪代谢和能量平衡,多种环境和激素因子调控其转录和翻译水平。为了更好地理解avUCP参与鸟类代谢产热的分子机理,该研究以鸟类模式生物之一鸽为实验材料,克隆了鸽avUCP基因的部分保守序列,基于原核表达系统,构建了pET32a-avUCP原核表达载体,成功表达了鸽avUCP重组融合蛋白,经Ni2+亲和层析法纯化重组蛋白,SDS-PAGE结果显示,所得到的目标蛋白分子量与预测值一致,表明纯化得到了高纯度目标蛋白。以目标蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,5免后制备抗血清,ELISA检测结果显示效价为1∶51200。Western blot检测结果表明,该抗体不仅可以免疫结合重组avUCP蛋白,而且与鸽(Columba)、画眉(Garrulax canorus)和灰背椋鸟(Sturnus sinensis)骨骼肌中的avUCP抗原蛋白同样具有良好的特异性免疫反应,说明制备的抗体具有较好的特异性和保守性。该研究将为分子水平研究鸟类能量代谢的规律和调控机理提供必要的抗体基础。 展开更多
关键词 鸽 avucp 基因克隆 原核表达 多克隆抗体
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AMPK和avUCP介导了鸡Ghrelin的抑采食效应
4
作者 陈胜锋 付强 +3 位作者 束刚 朱晓彤 王松波 江青艳 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第S1期185-185,共1页
Ghrelin是胃粘膜分泌的一种含28个氨基酸残基的多肽,具有促进生长激素释放、促进哺乳动物的采食、调节机体糖脂代谢与能量平衡等多种生物学作用。以往的研究表明,中枢或外周注射Ghrelin均强烈促进哺乳动物采食;而中枢注射Ghrelin则显著... Ghrelin是胃粘膜分泌的一种含28个氨基酸残基的多肽,具有促进生长激素释放、促进哺乳动物的采食、调节机体糖脂代谢与能量平衡等多种生物学作用。以往的研究表明,中枢或外周注射Ghrelin均强烈促进哺乳动物采食;而中枢注射Ghrelin则显著抑制鸡的采食,产生上述差异的原因目前尚不清楚。本试验观察了脑室注射cGhrelin。 展开更多
关键词 GHRELIN AMPK avucp 糖脂代谢 激动剂 脑室注射 能量平衡 氨基酸残基 激素释放 信号通路
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鸡解耦联蛋白基因的研究进展 被引量：1
5
作者 杨艳 刘华贵 赵兴波 《江西农业学报》 CAS 2010年第10期133-134,共2页
鸡解耦联蛋白(UCPs)是对机体能量平衡涉及的增重、静止代谢率和能量转化效率等性状起显著影响的基因家族,禽类解耦联蛋白(avUCP)是近年来在禽类发现的新UCP基因家族成员,被认为在禽类能量代谢中起着重要的作用。综述了近年来avUCP在家... 鸡解耦联蛋白(UCPs)是对机体能量平衡涉及的增重、静止代谢率和能量转化效率等性状起显著影响的基因家族,禽类解耦联蛋白(avUCP)是近年来在禽类发现的新UCP基因家族成员,被认为在禽类能量代谢中起着重要的作用。综述了近年来avUCP在家禽方面的研究现状。 展开更多
关键词 解耦联蛋白基因 研究进展 基因家族 禽类 能量转化效率 静止代谢率 研究现状 能量平衡 能量代谢 家族成员 增重 性状 家禽 机体 UCPs
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