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Bipolaris australiensis HD-1胆红素氧化酶纯化、鉴定及其酶学性质
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作者 黄世臣 赵敏 《安徽农业科学》 CAS 2014年第11期3228-3231,共4页
[目的]为了获得B.bipolaris HD-1胆红素氧化酶纯品,确定酶的同源性及其常规酶学性质.[方法]将B.bipolaris HD-1发酵液依次通过硫酸铵盐析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析确定蛋白的纯度、浓度和酶活力;通过基质辅助激光解析电离飞行时... [目的]为了获得B.bipolaris HD-1胆红素氧化酶纯品,确定酶的同源性及其常规酶学性质.[方法]将B.bipolaris HD-1发酵液依次通过硫酸铵盐析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析确定蛋白的纯度、浓度和酶活力;通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)法获得氨基酸序列,并利用Mascot软件在NCBI蛋白库中的比对,以确定同源蛋白来源;用SDS-PAGE方法测其表观分子量;用等电聚焦方法测定等电点;用Linwerver-Burk双倒数作图法测定米氏常数;并对该酶的酶学性质进行了常规的测定.[结果]获得具有胆红素氧化酶酶活性的电泳纯单体蛋白,酶活为46 000 U/L,比活为1.15 U/mg;MALDI-TOF共获得135个氨基酸,该蛋白与来源于Hel-minthosporium tritici-vulgaris的漆酶前体蛋白序列同源性达100%;蛋白的表观分子量为68 kDa;pI为4.1;它对ABTS和胆红素的米氏常数分别为Km(ABTS) =1.8×10-5 mol/L(pH 3.0)和Km(bilirnbin)=2.7×10-5 mol/L(pH 7.5);对胆红素的最适催化活性为36℃,酶在-40℃下可保持2年,酶活保持在90%以上,在pH 8 ~9.5下可保持相当高的催化胆红素活性,能够耐受高浓度的硝酸钠和尿素,低浓度的叠氮化钠对酶活有促进作用而高浓度则抑制,对氯化钠、溶解氧敏感.[结论]该蛋白具有典型的胆红素氧化酶特性,又存在明显的不同. 展开更多
关键词 胆红素氧化酶 BIPOLARIS australiensis 蛋白纯化 鉴定 酶学性质
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1株产胆红素氧化酶新菌株的分离与鉴定研究 被引量:2
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作者 黄世臣 赵敏 《安徽农业科学》 CAS 2014年第12期3486-3490,共5页
[目的]分离与鉴定1株产胆红素氧化酶的新菌株。[方法]利用常规的微生物分离培养技术,从玉米叶片的病斑中分离出一株产胆红素氧化酶(bilirubin oxidase,BOD)的丝状真菌。[结果]通过形态学、生理学和rDNA-ITS(登录号为JN251106)序列分析,... [目的]分离与鉴定1株产胆红素氧化酶的新菌株。[方法]利用常规的微生物分离培养技术,从玉米叶片的病斑中分离出一株产胆红素氧化酶(bilirubin oxidase,BOD)的丝状真菌。[结果]通过形态学、生理学和rDNA-ITS(登录号为JN251106)序列分析,该菌株被鉴定为Bipolaris australiensis,命名为B.australiensis HD-1,属子囊菌门格孢腔菌目格孢腔菌科平脐蠕孢属澳大利亚平脐蠕孢霉(B.australiensis),亦称澳洲双孢霉,是1株没有被报道过的具有产BOD的新产生菌;在不含任何诱导剂的发酵液中28℃,150 r/min,培养6 d,其酶活可达为1 000 U/L。[结论]该方法成功分离出1株产胆红素氧化酶的新菌株,为BOD的产生菌提供了新的微生物来源。 展开更多
关键词 胆红素氧化酶 BIPOLARIS australiensis 分离鉴定
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Donors for Resistance to Brown Planthopper Nilaparvata lugens(St?l) from Wild Rice Species 被引量:5
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作者 Preetinder S. SARAO Gurpreet K. SAHI +3 位作者 Kumari NEELAM Gurjit S. MANGAT Bhaskar C. PATRA Kuldeep SINGH 《Rice science》 SCIE CSCD 2016年第4期219-224,共6页
Out of 1 989 wild accessions sown in seed boxes for screening, only 1 003 wild accessions with good germination were screened against brown planthopper(BPH), Nilaparvata lugens(St?l) under greenhouse conditions. The c... Out of 1 989 wild accessions sown in seed boxes for screening, only 1 003 wild accessions with good germination were screened against brown planthopper(BPH), Nilaparvata lugens(St?l) under greenhouse conditions. The collection comprised of accessions from 11 wild species and African cultivated rice. The germplasm was screened for BPH following standard seed box screening technique in the greenhouse. As many as 159 accessions were identified as resistant during the year 2012 based on one year screening. A selected set of BPH resistant accessions were screened again during 2013. Based on the two years screening, seven accessions of O. nivara(AA), one accession of O. officinalis(CC), seven accessions of O. australiensis(EE), five accessions of O. punctata(BB and BBCC) and nine accessions of O. latifolia(CCDD) were confirmed to be resistant to BPH. So far no BPH resistance genes have been identified and designated from O. nivara and O. punctata, hence these may act as new sources of resistance. 展开更多
关键词 brown PLANTHOPPER O. nivara O. OFFICINALIS O. australiensis O. punctata RESISTANCE rice
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