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单克隆抗体ELISA检测犊牛粪便中冠状病毒抗原 被引量：1
1
作者 陈焕春 金梅林 +2 位作者 何国庆 苏雄 陈毓川 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1995年第1期8-11,共4页
用两株单克隆抗体混合后包破ＥＩＩＳＡ微孔板，加中过状病毒抗原，加经白陶土处理过的兔抗牛冠状病毒高免血清，再加上辣根过氧化物酶际记的羊抗兔ＩｇＧ抗体，加底物显色间接ＥｌｔＩＳＡ检测牛冠状病毒抗原获得成功。用此方法检测细... 用两株单克隆抗体混合后包破ＥＩＩＳＡ微孔板，加中过状病毒抗原，加经白陶土处理过的兔抗牛冠状病毒高免血清，再加上辣根过氧化物酶际记的羊抗兔ＩｇＧ抗体，加底物显色间接ＥｌｔＩＳＡ检测牛冠状病毒抗原获得成功。用此方法检测细胞培养的牛冠状病毒上清液，其敏感度高出血凝试验（ＨＡ）８倍。从武汉市附近３个奶牛场采集犊牛腹泻粪便１０５份，用单抗ＥｌＩＳＡ检测牛冠状病毒抗原，共检出阳性３６份。并与血凝及血凝抑制试验；电镜等方法比较，证明其简便；快速；敏感度高；特异性强。克服了单独使用多价抗体出现非特异性反应和单独使用单克隆抗体ＯＤ值太低的困难． 展开更多
关键词 冠状病毒 单克隆抗体 酶联免疫吸附 抗原 牛病
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单链抗体2F5和4E10的原核表达、纯化和鉴定 被引量：1
2
作者 刘秀侠 杨雄 陈红英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期177-183,共7页
为深入研究2F5和4E10抗体,构建了特异性识别HIV-1病毒MPER区域的2F5和4E10单链抗体的重组质粒,进行了融合蛋白的表达、纯化及鉴定。利用重叠PCR扩增及基因重组技术,获得2F5-scFv和4E10-scFv基因,将其插入原核表达载体pET-28a(+)上,获得... 为深入研究2F5和4E10抗体,构建了特异性识别HIV-1病毒MPER区域的2F5和4E10单链抗体的重组质粒,进行了融合蛋白的表达、纯化及鉴定。利用重叠PCR扩增及基因重组技术,获得2F5-scFv和4E10-scFv基因,将其插入原核表达载体pET-28a(+)上,获得表达质粒。转入大肠杆菌BL21(DE3)及Rosetta-gami2(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测发现,2F5-scFv和4E10-scFv在两种表达菌中均以包涵体形式存在,重组蛋白分子量分别约为27 kD、29 kD。变性条件下,利用镍离子螯合层析方法对包涵体蛋白进行纯化,经复性后获得可溶性单链抗体。ELISA检测表明,制备的单链抗体与原核和真核表达的MPER抗原都有特异性结合活性。 展开更多
关键词 HIV-1 GP41 MPER 2F5 4E10 单链抗体
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左旋咪唑对鸡新城疫抗体滴度的影响 被引量：1
3
作者 宋修春 许秋菊 王春玲 《家禽科学》 2007年第5期10-10,34,共2页
本试验将试验用鸡分为两A、B两组,A组用左旋咪唑和新城疫Lasota疫苗处理,B组只用新城LaSota疫苗处理,并按常规在7日龄和28日龄分别进行两次免疫,于处理后第14、21、35、42天用HA和HI实验检测抗体滴度,试验结果表明:第一次免疫后,14、21... 本试验将试验用鸡分为两A、B两组,A组用左旋咪唑和新城疫Lasota疫苗处理,B组只用新城LaSota疫苗处理,并按常规在7日龄和28日龄分别进行两次免疫,于处理后第14、21、35、42天用HA和HI实验检测抗体滴度,试验结果表明:第一次免疫后,14、21日龄A、B组的平均抗体滴度分别为26.1、25.6、60.5、61.0,统计处理表明,A组抗体滴度比B组抗体滴度差异不显著(t<0.796,0.794)。第二次免疫后35、42日龄A、B组的抗体滴度分别为221.6、221.2、267.3、266.3,统计处理表明,A组抗体滴度比B组抗体滴度差异不显著(t<0.864,0.714) 展开更多
关键词 新城疫抗体滴度 左旋咪唑 免疫
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抗人疱疹病毒6型中国分离株单克隆抗体的制备与鉴定
4
作者 吕华 沐桂藩 +1 位作者 程效东 范宏宇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期16-18,共3页
从婴儿玫瑰疹病人分离的ＨＨＶ－６ＣＨ＿３病毒株制各单克隆抗体，用间接免疫荧光试验筛选获得６株能持续分泌单抗的细胞株，这６株单抗还能与ＨＨＶ－６Ｚ＿（２９）病毒株反应，以上单抗将是在我国开展ＨＨＶ－６．的研究和临床实验... 从婴儿玫瑰疹病人分离的ＨＨＶ－６ＣＨ＿３病毒株制各单克隆抗体，用间接免疫荧光试验筛选获得６株能持续分泌单抗的细胞株，这６株单抗还能与ＨＨＶ－６Ｚ＿（２９）病毒株反应，以上单抗将是在我国开展ＨＨＶ－６．的研究和临床实验诊断的良好试剂。 展开更多
关键词 人疱疹病毒6型 单克隆抗体 免疫荧光 鉴定 制备
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建立DBT细胞模型比较药物对MHV-A59病毒的抗毒作用
5
作者 付红焱 徐波 +1 位作者 王宏军 宫泽辉 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第11期1253-1256,共4页
目的:利用病毒学方法建立对小鼠肝炎病毒(MHVA59)易感的星形胶质瘤细胞(DBT)模型,在细胞水平上建立抗冠状病毒药物的筛选的实验方法。方法:通过测定细胞病变效应(CPE)的半定量法及噬斑定量法测定组织培养感染量(TCID50);以PEG沉淀法部... 目的:利用病毒学方法建立对小鼠肝炎病毒(MHVA59)易感的星形胶质瘤细胞(DBT)模型,在细胞水平上建立抗冠状病毒药物的筛选的实验方法。方法:通过测定细胞病变效应(CPE)的半定量法及噬斑定量法测定组织培养感染量(TCID50);以PEG沉淀法部分纯化病毒,利用免疫学方法免疫动物制备抗MHVA59的多克隆抗体;以血清学方法进行中和实验及酶联免疫方法定量测定病毒抗体的滴度及特异性;以100倍的TCID50病毒量感染细胞同时加不同稀释度的药物,在同一条件下,动态观察不同时间的细胞的CPE变化。以能保护CPE<50%为阳性。并比较药物的最低抗毒浓度。结果:制备的抗体对MHV病毒具有特异性的翻转作用;合成新药Cinanserin和Pkumdlcvs1003对MHV所致的细胞感染具有不同程度的保护作用。结论:建立的MHVA59敏感的DBT细胞模型可以用于抗冠状病毒药物的筛选。 展开更多
关键词 肝炎病毒 星形胶质瘤细胞 组织培养感染量 酶联免疫 抗体
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抗HER-2加抗CD3双特异抗体抑制胃癌细胞生长的实验研究
6
作者 任辉 房学东 +1 位作者 张研 曹宏 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2007年第3期181-183,共3页
目的 探讨基因工程抗HER-2＋抗CD3双特异抗体（bispecificantibody，BsAb）对表达人表皮生长因子受体2（HER-2／neu）的人胃癌细胞体外及体内生长的影响。方法 用MTT方法测定Herceptin、抗CD3和BsAb抗体对胃癌细胞系SGC-7901的抑制率；... 目的 探讨基因工程抗HER-2＋抗CD3双特异抗体（bispecificantibody，BsAb）对表达人表皮生长因子受体2（HER-2／neu）的人胃癌细胞体外及体内生长的影响。方法 用MTT方法测定Herceptin、抗CD3和BsAb抗体对胃癌细胞系SGC-7901的抑制率；免疫细胞化学法检测SGC-7901细胞的HER-2表达水平；建立裸鼠模型，将HER-2＋CD3BsAb与效应细胞（正常人外周血淋巴细胞）联合应用，观测各组荷瘤动物的肿瘤生长状况。结果 正常对照组、抗CD3单克隆抗体联合效应细胞、Herceptin联合效应细胞及HER2＋CD3 BsAb联合效应细胞肿瘤细胞的生长抑制率分别为0、（24．3±1．2）％、（56．2±2．6）％、（91．33±4．1）％各组荷瘤裸鼠与对照组的肿瘤体积为（0．86±0．02）cm^3、（0．52±0．04）cm^3、（0．20±0．06）cm^3、（0．11±0．02）cm^3，与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05），其中HER-2＋CD3BsAb联合效应细胞的抑制作用更为显著，与抗CD3McAb联合效应细胞、Herceptin联合效应细胞组相比差异也有统计学意义（P〈0．05）。结论 HER-2／neu是胃癌免疫治疗的有效靶点，基因工程抗HER-2＋抗CD3BsAb在体外及体内均具有有效的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 胃肿瘤 双特异性抗体 肿瘤抑制基因 基因工程
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