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沉默Nanog联合SNX-2112对人食管癌干细胞样细胞的抑制作用 被引量:2
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作者 徐单单 王霞 +1 位作者 黄慧清 陈素红 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第23期4021-4027,共7页
目的:通过沉默Nanog探讨其对Hsp90抑制剂SNX-2112诱导食管癌干细胞样细胞的裸鼠移植瘤抑制效果。方法:CCK-8分析细胞受到药物作用活性,Ki-67检测细胞增殖情况,Western blotting检测凋亡蛋白Bcl2、Bax、Bcl-xL表达情况。建立BALB/c裸鼠... 目的:通过沉默Nanog探讨其对Hsp90抑制剂SNX-2112诱导食管癌干细胞样细胞的裸鼠移植瘤抑制效果。方法:CCK-8分析细胞受到药物作用活性,Ki-67检测细胞增殖情况,Western blotting检测凋亡蛋白Bcl2、Bax、Bcl-xL表达情况。建立BALB/c裸鼠移植瘤模型,裸鼠分为四组,包括DMSO组、shNanog组、SNX-2112组、shNanog与SNX-2112联合用药组,每组3只。隔天给药,总共给药7次,脱颈处死小鼠,测量小鼠体重,瘤组织经HE染色,免疫组化分析Caspase3的表达情况与Hsp90客户蛋白pErk表达情况。结果:联合用药组细胞活性显著受到抑制(P<0.05),Ki-67实验显示联合用药组细胞增殖受到抑制(P<0.05),Bcl2与Bcl-xL蛋白表达下调(P<0.05),Bax表达水平上调(P<0.05)。联合用药组小鼠瘤重明显低于SNX-2112组以及shNanog组(P<0.05),HE染色结果显示沉默Nanog与SNX-2112联合用药显著性诱导肿瘤细胞凋亡,免疫组化研究显示Caspase3在两者联合用药组表达水平较高(P<0.05),Hsp90客户蛋白pErk表达有下调的趋势(P<0.05)。结论:沉默Nanog有助于提高SNX-2112诱导食管癌干细胞样细胞的裸鼠移植瘤细胞凋亡作用。 展开更多
关键词 沉默Nanog HSP90 SNX-2112 食管癌干细胞样细胞 裸鼠移植瘤
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N anog蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及发酵优化 被引量:4
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作者 李正杰 顾正华 +3 位作者 石贵阳 李由然 辛瑜 张梁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期15-21,共7页
为高效制备可溶性人源N anog蛋白,降低N anog蛋白的使用成本。该研究通过分子克隆技术构建重组大肠杆菌(pET32a-N anog),利用IPTG诱导进行可溶性融合表达。采用镍离子柱亲和层析法纯化产物并将纯化后产物进行肠激酶酶切后得到目的蛋白,W... 为高效制备可溶性人源N anog蛋白,降低N anog蛋白的使用成本。该研究通过分子克隆技术构建重组大肠杆菌(pET32a-N anog),利用IPTG诱导进行可溶性融合表达。采用镍离子柱亲和层析法纯化产物并将纯化后产物进行肠激酶酶切后得到目的蛋白,Western blot鉴定该蛋白抗体结合的特异性并进一步优化发酵条件。结果表明,原核表达载体pET32a-N anog构建成功,可在大肠杆菌中与硫氧还蛋白融合表达,融合蛋白经肠激酶酶切后得到相对分子质量约为38 kDa的蛋白,Western blot鉴定该蛋白可与N anog抗体特异性结合。在摇瓶培养条件下,得到最优发酵条件是诱导温度37℃、IPTG浓度0.2 mmol/L、甘油为补料碳源;15 L发酵罐上进一步优化溶氧条件及温度控制方式,最终在溶氧设置在30%条件下,37℃(诱导期间30℃维持30 min)发酵12 h后得到最高N anog产量1386.4 mg/L,经蛋白纯化后纯度达到90%,为后续N anog多克隆抗体的制备和基础医学实验研究奠定了基础。 展开更多
关键词 N anog 原核表达 蛋白质纯化 发酵优化
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检测未知攻击的数据预处理算法研究 被引量:1
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作者 靳燕 《山西师范大学学报(自然科学版)》 2013年第4期23-26,共4页
本文提出数据预处理AnoG算法,对训练数据集进行稀疏拓展,产生出未知攻击实例,并冠以类标anomaly.过滤实验表明AnoG算法拓展出的未知攻击实例与原实例造成数据冲突的可能性非常小.将拓展出的训练实例作为训练数据集,采用RIPPER算法训练... 本文提出数据预处理AnoG算法,对训练数据集进行稀疏拓展,产生出未知攻击实例,并冠以类标anomaly.过滤实验表明AnoG算法拓展出的未知攻击实例与原实例造成数据冲突的可能性非常小.将拓展出的训练实例作为训练数据集,采用RIPPER算法训练分类模型,实验结果表明分类模型对未知攻击具有良好的检测率,数据预处理AnoG算法的使用明显提高了分类模型对未知攻击的检测能力. 展开更多
关键词 入侵检测 未知攻击 数据预处理 anog算法
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