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lncRNA FGD5-AS1调节miR-133a-3p/SPAG5轴对胃癌细胞迁移和侵袭的影响 被引量:1
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作者 陈远航 何朗 +2 位作者 谭卯 徐毅 李霞 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第5期401-406,共6页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5-AS1调节miR-133a-3p/SPAG5轴对胃癌细胞迁移和侵袭的影响。方法用实时定量PCR检测胃癌组织和邻近非肿瘤组织、正常人胃上皮细胞系GES-1及胃癌细胞系(MKN-28和NCI-N87、HGC-27、AGS)中FGD5-AS1、miR-1... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5-AS1调节miR-133a-3p/SPAG5轴对胃癌细胞迁移和侵袭的影响。方法用实时定量PCR检测胃癌组织和邻近非肿瘤组织、正常人胃上皮细胞系GES-1及胃癌细胞系(MKN-28和NCI-N87、HGC-27、AGS)中FGD5-AS1、miR-133a-3p、SPAG5 mRNA表达水平;用CCK-8法、EdU染色检测细胞增殖;用Transwell实验检测细胞侵袭;用划痕实验检测细胞迁移能力;用Western blotting检测增殖蛋白Ki-67、SPAG5、迁移侵袭增强子因子1(MIEN1)、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达水平;用双萤光素酶实验验证miR-133a-3p与FGD5-AS1、SPAG5的关系。结果在胃癌组织及胃癌细胞系中,FGD5-AS1、SPAG5 mRNA表达水平明显升高,miR-133a-3p则明显降低(P<0.05)。干扰FGD5-AS1可上调miR-133a-3p表达,下调SPAG5表达,抑制MKN-28细胞恶性行为;抑制miR-133a-3p表达逆转了干扰FGD5-AS1对MKN-28细胞恶性行为的作用。结论干扰lnc-RNA FGD5-AS1通过上调miR-133a-3p/SPAG5轴抑制胃癌细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码RNA FGD5-AS1 miR-133a-3p/SPAG5 胃癌 迁移 侵袭
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gga-miR-30a-5p的表达规律及其对鸡脂肪沉积的调控
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作者 黄华云 刘星 +6 位作者 王钱保 李瑞瑞 杨苗苗 李春苗 吴兆林 孔令琳 赵振华 《中国农业科学》 北大核心 2025年第15期3134-3144,共11页
【目的】miR-30a-5p为miR-30家族成员,其在鸡脂肪沉积中的作用尚未见报道,通过对gga-miR-30a-5p在鸡腹部脂肪及肌内脂肪沉积中的作用研究,为解析鸡腹部脂肪和肌内脂肪生成的机制研究奠定基础。【方法】以优质黄羽肉鸡(矮小型)S3系和隐... 【目的】miR-30a-5p为miR-30家族成员,其在鸡脂肪沉积中的作用尚未见报道,通过对gga-miR-30a-5p在鸡腹部脂肪及肌内脂肪沉积中的作用研究,为解析鸡腹部脂肪和肌内脂肪生成的机制研究奠定基础。【方法】以优质黄羽肉鸡(矮小型)S3系和隐性白羽鸡(RR)为试验对象,利用荧光定量PCR检测gga-miR-30a-5p在腹部脂肪、肝脏和腿肌组织0周(0W)、2、4、8、14和16W及腹部脂肪细胞和肌内脂肪细胞增殖期、分化期的表达变化;腹部脂肪细胞及肌内脂肪细胞中分别转染gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor,荧光定量PCR检测ga-miR-30a-5p的表达变化;油红O染色,异丙醇萃取脂滴,检测转染gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor后腹部脂肪和肌内脂肪细胞脂滴沉积变化;利用生物信息学分析,预测gga-miR-30a-5p的作用靶基因。【结果】gga-miR-30a-5p在不同组织(腹部脂肪、肝脏和腿肌组织)中的表达存在显著的品种差异性(P<0.05)。在腹部脂肪组织中,0周龄时gga-miR-30a-5p在隐性白羽鸡中的表达显著低于S3系鸡(P<0.05)。S3系和隐性白羽鸡0周龄时gga-miR-30a-5p表达最高,显著高于其他周龄(P<0.05),其他周龄间的表达差异不显著(P>0.05);在肝脏组织中,16周龄时gga-miR-30a-5p在RR鸡中表达显著低于S3系鸡(P<0.05)。在S3系鸡中,16周龄肝脏组织中的gga-miR-30a-5p表达水平显著高于其他周龄(P<0.05),在RR鸡中,16周龄肝脏组织中的gga-miR-30a-5p表达水平显著高于0周龄和8周龄(P<0.05);在腿肌组织中,16周龄时gga-miR-30a-5p在RR鸡中的表达显著低于S3系鸡(P<0.05)。gga-miR-30a-5p在S3系鸡14周龄时表达最低,显著低于2、8和16W(P<0.05),RR鸡腿肌组织各个周龄间的表达差异不显著(P>0.05)。在腹部脂肪细胞中,gga-miR-30a-5p在增殖期的表达显著低于分化期4 d和6 d的表达(P<0.05);肌内脂肪细胞中,增殖期与分化期1 d的表达差异不显著(P>0.05),分化期4 d和6 d的表达水平显著高于增殖期(P<0.05),并且随着分化时间的延长,其表达水平逐渐升高;gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor转染腹部脂肪细胞24 h后,gga-miR-30a-5p的表达显著升高和降低,表明gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor已成功转染至腹部脂肪细胞;转染gga-miR-30a-5p mimics 3d后,腹部脂肪细胞脂滴沉积能力显著升高;转染gga-miR-30a-5p inhibitor,腹部脂肪细胞脂滴沉积能力则显著降低(P<0.05);gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor转染肌内脂肪细胞24 h后,gga-miR-30a-5p的表达显著升高和降低,表明gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor已成功转染至肌内脂肪细胞;转染gga-miR-30a-5p mimics 3 d后,肌内脂肪细胞脂滴沉积能力显著升高;转染gga-miR-30a-5p inhibitor后,脂滴沉积能力则显著降低(P<0.05)。靶基因GO、Pathway及蛋白互作分析表明,UBE2I、UBE3C、CUL2、SOSC3和RUNX1可能是gga-miR-30a-5p调控脂肪沉积的预测靶基因。【结论】gga-miR-30a-5p在不同组织中的表达存在显著的品种差异性;gga-miR-30a-5p具有促进腹部脂肪和肌内脂肪沉积的作用,UBE2I、UBE3C、CUL2、SOSC3和RUNX1是重要的候选靶基因。 展开更多
关键词 gga-miR-30a-5p 腹部脂肪 肌内脂肪
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Circ_0022382/let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞增殖和迁移 被引量:1
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作者 刘伟 张俊 +6 位作者 张佳雯 叶雨 诸健琴 虞绮雯 李涛 孙晓春 陈华标 《江苏大学学报(医学版)》 2025年第2期145-153,共9页
目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测... 目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测差异表达的circRNA所结合的miRNA,最后通过韦恩图对circRNA结合的miRNA和GEO数据库预测的miRNA取交集,得到交集的miRNA及其对应的circRNA。②分别予以收敛引物和发散引物对乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的互补DNA(cDNA)和基因组DNA(gDNA)进行PCR,并通过琼脂糖凝胶电泳实验对PCR产物进行分离以验证circ_0022382的环形结构。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7及正常乳腺上皮细胞MCF-10A,乳腺癌组织和癌旁组织中circ_0022382表达水平。④在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染si-NC、si-circ_0022382,采用qRT-PCR检测转染效率,分别采用克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移;qRT-PCR检测let-7a-5p的表达水平;在si-circ_0022382组中分别转染let-7a-5p inhibitor NC、let-7a-5p inhibitor,克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移。⑤通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析let-7a-5p的下游信号通路;在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染let-7a-5p NC、let-7a-5p mimic,蛋白质印迹法和细胞荧光免疫法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达,蛋白质印迹法检测let-7a-5p inhibitor和si-circ_0022382共转染后乳腺癌细胞p-AKT表达。结果:①GSE165884差异分析得到37个高表达的circRNA,GSE45498差异分析得到6个低表达的miRNA,37个高表达的circRNA中,circ_0022382对应的miRNA和6个低表达的miRNA有交集基因let-7。②乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的cDNA既可以通过发散引物又可以通过收敛引物来扩增,而gDNA只能通过收敛引物来扩增。③与MCF-10A细胞相比,circ_0022382在乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中均显著高表达(P均<0.001);乳腺癌组织中circ_0022382表达亦明显高于癌旁组织(P<0.05)。④下调circ_0022382表达后,MDA-MB-231和MCF-7细胞的增殖和迁移能力均显著下降(P均<0.001),let-7a-5p的表达水平均显著升高(P<0.01和P<0.05);在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖和迁移能力的下降(P<0.01和P<0.001)。⑤KEGG信号通路富集分析结果显示,PI3K-AKT和mTOR信号通路显著富集;与let-7a-5p NC组相比,let-7a-5p mimic组的p-AKT、p-PI3K和mTOR的蛋白水平显著下降;在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞中p-AKT表达水平的降低。结论:circ_0022382在乳腺癌中高表达,通过靶向let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,其有可能作为乳腺癌治疗和诊断的潜在靶点。 展开更多
关键词 circ_0022382 let-7a-5p PI3K/AKT/mTOR信号通路 增殖 迁移
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LncRNA FGD5-AS1通过miR-103a-3p/RNF38轴影响结肠癌细胞的恶性生物学行为 被引量:1
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作者 石沛 庞雪莹 +4 位作者 邓升华 祝金华 赵士梅 马秀岩 马静 《河北医学》 2025年第1期15-21,共7页
目的:探讨长链非编码RNA FGD5反义RNA1(LncRNA FGD5-AS1)靶向调控miR-103a-3p/环指蛋白38(RNF38)轴对结肠癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:使用荧光定量PCR检测LncRNA FGD5-AS1、miR-103a-3p在人结肠黏膜上皮细胞和人结肠癌细胞SW480... 目的:探讨长链非编码RNA FGD5反义RNA1(LncRNA FGD5-AS1)靶向调控miR-103a-3p/环指蛋白38(RNF38)轴对结肠癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:使用荧光定量PCR检测LncRNA FGD5-AS1、miR-103a-3p在人结肠黏膜上皮细胞和人结肠癌细胞SW480中的表达水平;通过StarBase和TargetScan数据库分析LncRNA FGD5-AS1、miR-103a-3p、RNF38之间的结合位点,使用双荧光酶报告基因检测进一步验证;将SW480细胞随机分为对照(Control)组、pcDNA-NC组、pcDNA-FGD5-AS1组、si-NC组、si-FGD5-AS1组、si-FGD5-AS1+inhibitor NC组、si-FGD5-AS1+miR-103a-3p inhibitor组,通过CCK-8、流式细胞术、Transwell试验、荧光定量PCR及Western blot法检测细胞增殖、凋亡、侵袭、FGD5-AS1、miR-103a-3p水平及RNF3蛋白表达水平。结果:与人结肠黏膜上皮细胞相比,SW480细胞中LncRNA FGD5-AS1表达水平显著降低(1.00±0.00比0.48±0.10,t=12.737,P<0.05),miR-103a-3p表达水平显著升高(1.00±0.00比1.61±0.18,t=8.301,P<0.05);LncRNA FGD5-AS1可靶向负调控miR-103a-3p表达(P<0.05);miR-103a-3p可靶向正调控RNF38表达(P<0.05);与pcDNA-NC组相比,pcDNA-FGD5-AS1组SW480细胞中FGD5-AS1水平升高(0.98±0.10比2.34±0.45,t=7.227,P<0.05),细胞凋亡率增加(8.64±1.32比16.21±2.75,t=6.079,P<0.05),而miR-103a-3p表达水平(1.01±0.12比0.42±0.07,t=10.403,P<0.05)、RNF38蛋白表达水平(0.59±0.09比0.32±0.17,t=3.438,P=0.006)、细胞增殖活性(0.63±0.09比0.34±0.06,t=6.567,P<0.05)、细胞侵袭能力(112.63±14.94比43.82±5.67,t=10.548,P<0.05)降低。si-FGD5-AS1组细胞变化趋势与pcDNA-FGD5-AS1组相反,且miR-103a-3p inhibitor可逆转si-FGD5-AS1组的变化(P<0.05)。结论:干扰LncRNA FGD5-AS1可能通过靶向上调miR-103a-3p,促进RNF38蛋白表达,从而提高结肠癌细胞增殖和侵袭能力,降低结肠癌细胞凋亡率,而上调LncRNA FGD5-AS1可抑制结肠癌细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 结肠癌细胞 长链非编码RNA FGD5反义RNA1 微小RNa-103a-3p 环指蛋白38
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血清miR-597-5p miR-181a-2-3p对骨髓增生异常综合征患者病情及预后的预测价值 被引量:1
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作者 刘艳杰 魏慧茹 李红伟 《安徽医学》 2025年第2期226-231,共6页
目的探究血清微小RNA-597-5p(miR-597-5p)、miR-181a-2-3p与骨髓增生异常综合征(MDS)患者病情及预后的相关性。方法前瞻性纳入2021年1月至2023年6月于郑州大学第一附属医院就医的138例MDS患者作为研究组,根据病情严重程度将其分为高危组... 目的探究血清微小RNA-597-5p(miR-597-5p)、miR-181a-2-3p与骨髓增生异常综合征(MDS)患者病情及预后的相关性。方法前瞻性纳入2021年1月至2023年6月于郑州大学第一附属医院就医的138例MDS患者作为研究组,根据病情严重程度将其分为高危组(n=29)、中危组(n=46)和低危组(n=63),根据预后情况分为预后良好组(n=111)和预后不良组(n=27);同时选择同期入院体检的健康人群138名作为对照组。收集患者的临床资料;采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-q PCR)检测MDS患者的血清miR-597-5p、miR-181a-2-3p水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-597-5p、miR-181a-2-3p诊断MDS的临床价值。结果观察组血清miR-597-5p表达水平高于对照组,miR-181a-2-3p表达水平低于对照组(P均<0.05);低、中、高危组患者血清miR-597-5p表达水平依次升高(P<0.05),miR-181a-2-3p水平依次降低(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组血清miR-597-5p、红细胞分布宽度升高(P<0.05),而血清miR-181a-2-3p水平以及血红蛋白、白细胞计数、血小板计数水平大幅度降低(P<0.05);miR-597-5p、miR-181a-2-3p为MDS患者预后不良的影响因素(P<0.05);血清miR-597-5p、miR-181a-2-3p预测MDS患者发生预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.892、0.889,截断值分别是1.69、0.60,二者联合预测MDS患者预后的AUC为0.952,灵敏度为81.48%,特异度为92.79%,二者联合优于血清miR-597-5p、miR-181a-2-3p各自单独预测(Z_(二者联合-mi R-597-5p)=2.039、Z_(二者联合-mi R-181a-2-3p)=2.016,P=0.044、0.041)。结论血清miR-597-5p水平升高,miR-181a-2-3p水平下降均会导致MDS患者病情加重,二者联合对MDS的预后预测效能更高。 展开更多
关键词 微小RNa-597-5p 微小RNa-181a-2-3p 骨髓增生异常综合征 病情 预后
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芍药内酯苷通过调控miR-219a-5p减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤
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作者 李霞 王成 +2 位作者 侯永兰 王建美 金卫东 《中草药》 北大核心 2025年第12期4327-4335,共9页
目的探讨芍药内酯苷改善缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的作用机制。方法H/R诱导大鼠H9c2心肌细胞建立心肌缺血再灌注损伤模型,给予芍药内酯苷干预,检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平及超氧化物歧化酶(supe... 目的探讨芍药内酯苷改善缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的作用机制。方法H/R诱导大鼠H9c2心肌细胞建立心肌缺血再灌注损伤模型,给予芍药内酯苷干预,检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;流式细胞术测定细胞凋亡率;Western blotting检测凋亡相关蛋白表达;qRT-PCR检测miR-219a-5p表达。转染miR-219a-5p mimics或anti-miR-219a-5p,考察下调miR-219a-5p对芍药内酯苷改善H/R诱导的心肌细胞损伤作用的影响。体内建立缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)小鼠模型,给予芍药内酯苷干预,检测血清中肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CKMB)活性和心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,c TnT)水平;检测心肌组织MDA水平及SOD、GSH-Px活性;采用苏木素-伊红(HE)染色考察心肌组织病理变化;采用TTC染色检测心肌组织梗死情况。结果与对照组比较,模型组H9c2细胞MDA水平、细胞凋亡率及剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved cystein-asparate protease-3,cleaved Caspase-3)、cleaved Caspase-9蛋白表达水平显著上升(P<0.05),而miR-219a-5p表达、SOD、GSH-Px活性显著下降(P<0.05);给予芍药内酯苷干预后,MDA水平、细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达显著降低(P<0.05),miR-219a-5p表达、SOD、GSH-Px活性显著升高(P<0.05),且呈剂量相关性;下调miR-219a-5p表达后,显著逆转了芍药内酯苷对H/R诱导的心肌细胞损伤的抑制作用(P<0.05)。体内结果与体外结果一致,芍药内酯苷显著缓解了I/R引发的小鼠心肌组织损伤和凋亡。结论芍药内酯苷通过调控miR-219a-5p表达而抑制心肌细胞氧化应激及凋亡,从而减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 芍药内酯苷 miR-219a-5p 缺氧/复氧 心肌细胞 细胞凋亡 氧化应激
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塞络通调控miR-199a-5p/Cav1信号轴改善缺血性脑卒中的作用机制
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作者 范晓迪 张业昊 +2 位作者 王光蕊 李澎 刘建勋 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第4期1655-1660,共6页
目的:探讨塞络通(SLT)在缺血性脑卒中发展过程中的作用机制。方法:脑立体定位注射腺相关病毒AAV-miR-199a-5p-inhibition试剂21 d后,构建线栓阻断大脑中动脉大鼠脑缺血模型,分为假手术组、模型组、miR-199a-5p敲低组和SLT组。通过神经... 目的:探讨塞络通(SLT)在缺血性脑卒中发展过程中的作用机制。方法:脑立体定位注射腺相关病毒AAV-miR-199a-5p-inhibition试剂21 d后,构建线栓阻断大脑中动脉大鼠脑缺血模型,分为假手术组、模型组、miR-199a-5p敲低组和SLT组。通过神经功能评分、小动物核磁共振及苏木精-伊红(HE)染色法观察SLT对大鼠脑组织病理结构、脑梗死面积及表观扩散系数(ADC)值的影响;采用荧光定量PCR检测及免疫组织化学实验测定miR-199a-5p、Cav1、MMP9 mRNA和蛋白的表达水平;QBPlex流式高通量多因子检测TNF-α、IL-17A、MIP-1α的含量。采用双荧光素酶报告基因系统验证miR-199a-5p和Cav1的靶向调控关系。结果:与模型组比较,miR-199a-5p敲低组和SLT组脑组织病理改变减轻,脑梗死面积减少,ADC值增加,miR-199a-5p表达降低,Cav1表达升高,MMP9及炎症因子显著减少(P<0.01,P<0.05)。双荧光素酶报告结果显示,miR-199a-5p与野生型Cav1 3’-UTR具有靶向调控关系。结论:SLT通过调控miR-199a-5p/Cav1表达,降低脑梗死大鼠MMP9及炎症因子的水平,改善神经功能。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 塞络通 微小RNA199a-5p 小窝蛋白1 基质金属蛋白酶9 神经炎症因子
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circCSPP1通过调控miR-642a-5p表达对人视网膜母细胞瘤Y-79细胞增殖、迁移、侵袭的影响
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作者 王瑜瑾 王媛 宁丞君 《眼科新进展》 北大核心 2025年第6期452-456,462,共6页
目的分析其环状RNA CSPP1(circCSPP1)与微小RNA-642a-5p(miR-642a-5p)对视网膜母细胞瘤Y-79细胞生物学行为的影响。方法选取2019年6月至2022年10月郑州市中心医院收治的视网膜母细胞瘤患者47例47眼为研究对象,术中切除患者视网膜母细胞... 目的分析其环状RNA CSPP1(circCSPP1)与微小RNA-642a-5p(miR-642a-5p)对视网膜母细胞瘤Y-79细胞生物学行为的影响。方法选取2019年6月至2022年10月郑州市中心医院收治的视网膜母细胞瘤患者47例47眼为研究对象,术中切除患者视网膜母细胞瘤组织、瘤旁组织。体外培养人视网膜母细胞瘤细胞株Y-79,依据转染物不同分为Con组(正常培养的Y-79细胞)、sh-NC组(转染sh-NC)、sh-circCSPP1组(转染sh-circCSPP1)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-642a-5p组(转染miR-642a-5p mimics)、sh-circCSPP1+anti-miR-NC组(共转染sh-circCSPP1与anti-miR-NC)以及sh-circCSPP1+anti-miR-642a-5p组(共转染sh-circCSPP1与anti-miR-642a-5p)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测视网膜母细胞瘤组织、瘤旁组织、Y-79细胞中的circCSPP1与miR-642a-5p表达水平;采用CCK-8、细胞划痕实验、Transwell小室实验分别检测Y-79细胞增殖、迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测circCSPP1与miR-642a-5p靶向关系;Western blot实验检测Y-79细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)与神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达量。结果与瘤旁组织比较,视网膜母细胞瘤组织中circCSPP1表达水平升高,miR-642a-5p表达水平降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与Con组及sh-NC组比较,sh-circCSPP1组细胞划痕愈合率均降低,侵袭细胞数均减少,E-cadherin蛋白相对表达水平均升高,N-cadherin蛋白相对表达水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与Con组及miR-NC组比较,miR-642a-5p组细胞划痕愈合率均降低,侵袭细胞数均减少,E-cadherin蛋白水平均升高,N-cadherin蛋白水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。双荧光素酶报告实验检测证明,circCSPP1可负向调控miR-642a-5p的表达水平。与sh-circCSPP1+anti-miR-NC组比较,sh-circCSPP1+anti-miR-642a-5p组细胞划痕愈合率升高,侵袭细胞数增多,E-cadherin蛋白水平降低,N-cadherin蛋白水平升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论沉默circCSPP1可通过上调miR-642a-5p表达抑制Y-79细胞增殖、迁移及侵袭,circCSPP1可能成为视网膜母细胞瘤靶向治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 环状RNA CSPP1 微小RNa-642a-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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上皮性卵巢癌患者血清LncRNA SNHG20、miR-193a-5p水平变化及临床意义
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作者 张桂萍 侯俊然 +2 位作者 郭晓娟 张欣萍 彭丽 《中国妇产科临床杂志》 北大核心 2025年第5期413-416,共4页
目的探讨上皮性卵巢癌(EOC)患者血清长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因20(lnc RNA SNHG20)、微小核糖核酸(mi R)-193a-5p水平变化及临床意义。方法选取2020年9月至2022年9月南阳市第一人民医院收治的EOC患者89例(作为EOC组),根据预后情况... 目的探讨上皮性卵巢癌(EOC)患者血清长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因20(lnc RNA SNHG20)、微小核糖核酸(mi R)-193a-5p水平变化及临床意义。方法选取2020年9月至2022年9月南阳市第一人民医院收治的EOC患者89例(作为EOC组),根据预后情况分为预后良好和不良组;选取同期本院良性卵巢肿瘤患者89例(作为良性组),另选同期健康体检者女性89例(作为对照组)。q RT-PCR法检测Lnc RNA SNHG20、mi R-193a-5p水平;采用Pearson法分析相关性;采用COX回归分析影响因素。结果对照组、良性组和EOC组Lnc RNA SNHG20水平依次升高(P<0.05),mi R-193a-5p水平依次降低(P<0.05)。Pearson相关性EOC组血清Lnc RNA SNHG20与mi R-193a-5p呈负相关(r=-0.418,P<0.05)。EOC组Lnc RNA SNHG20、mi R-193a-5p与FIGO分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。与预后良好组比,预后不良组Lnc RNA SNHG20水平明显升高,mi R-193a-5p水平明显降低(P<0.05)。COX分析Lnc RNA SNHG20、mi R-193a-5p、临床病理特征为危险因素(P<0.05)。结论EOC患者血清Lnc RNA SNHG20、mi R-193a-5p异常表达,二者与患者病理特征及预后有关。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因20 微小核糖核酸-193a-5p 病理特征 预后
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代谢相关脂肪性肝病中hsa-miR-30a-5p调控SLC7A11促进铁死亡
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作者 柯月 梁灿灿 +1 位作者 纪文静 姚萍 《中国肝脏病杂志(电子版)》 2025年第2期42-48,共7页
目的探讨代谢相关脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)中微小RNA(microRNA,miRNA)对铁死亡的调控。方法在GSE135251数据集中进行差异表达分析及基因集变异分析(gene set variation analysis,GSVA)。在GSE11492... 目的探讨代谢相关脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)中微小RNA(microRNA,miRNA)对铁死亡的调控。方法在GSE135251数据集中进行差异表达分析及基因集变异分析(gene set variation analysis,GSVA)。在GSE114923数据集中进行差异分析,并识别靶向调控铁死亡相关基因的miRNA。以2022年3月1日至2023年4月30日于新疆医科大学第一附属医院经腹部超声确诊为MAFLD的10例患者作为MAFLD组,以同期性别和年龄匹配的10例健康志愿者作为健康对照组,采集外周血样本。通过反转录定量聚合酶链式反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blot检测miRNA及铁死亡相关蛋白[溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HMOX1)]的表达。通过酶联免疫吸附试验检测谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和炎症因子[白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)]水平。结果GSE135251和GSE114923数据集分析表明,与健康对照组相比,MAFLD患者中细胞坏死(t=3.229,P=0.022)和铁死亡(t=2.008,P=0.006)通路显著激活,差异分析结果表明MAFLD和对照组间有8687个有差异表达的基因,其中有31个为铁死亡相关基因。在31个差异表达的miRNA中鉴定了7个靶向调控铁死亡的miRNA,hsa-miR-192-5p(4.628±1.234比3.171±0.456;t=2.217,P=0.068)、hsa-miR-122-5p(13.532±0.946比10.536±1.444;t=3.472,P=0.013)、hsa-miR-30a-5p(6.081±0.770比4.106±0.269;t=4.841,P=0.003)、hsa-miR-100-5p(5.888±0.933比3.888±0.721;t=3.395,P=0.015)在MAFLD患者中表达上调,hsa-miR-10b-5p(5.077±0.876比6.439±1.076;t=1.963,P=0.097)、hsa-miR-223-5(0.626±0.723比2.790±1.912;t=2.111,P=0.079)、hsa-miR-215-5p(0.595±0.771比2.738±0.885,t=3.652,P=0.011)表达下调,其中hsa-miR-30a-5p上调水平最显著。RT-qPCR结果表明,与对照组比较,MAFLD患者中hsa-miR-30a-5p表达水平显著升高(1.591±0.229比1.012±0.031;t=9.676,P<0.001),SLC7A11 mRNA(0.598±0.108比0.997±0.034;t=13.64,P<0.001)、GPX4 mRNA(0.724±0.064比1.003±0.029,t=15.34;P<0.001)和HMOX1 mRNA(0.688±0.078比0.993±0.034;t=13.92,P<0.001)表达水平显著降低。Western blot结果显示,与对照组相比,SLC7A11蛋白(0.712±0.074比1.000±0.053;t=10.01,P<0.001)、GPX4蛋白(0.810±0.034比1.000±0.019;t=15.25,P<0.001)和HMOX1蛋白(0.673±0.026比1.000±0.029;t=26.75,P<0.001)在MAFLD患者中表达显著下调。与健康对照组相比,MAFLD患者GSH[(163.684±15.857)U/g比(197.728±11.009)U/g;t=6.109,P<0.001]水平显著降低,MDA[(2.494±0.253)μmol/g比(1.0612±.205)μmol/g;t=7.602,P=0.002]、IL-6[(55.219±0.743)ng/L比(46.456±1.831)ng/L;t=14.48,P<0.001]和TNF-α[(22.883±2.893)μg/L比(13.885±0.169)μg/L;t=10.78,P<0.001]水平显著升高。结论hsa-miR-30a-5p可能通过靶向SLC7A11促进铁死亡,在MAFLD中发挥促炎和促氧化作用。 展开更多
关键词 代谢相关脂肪性肝病 hsa-miR-30a-5p 铁死亡 炎症
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超声造影定量技术联合miR-374a-5p预测宫颈癌术后下肢深静脉血栓效能
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作者 吴迪 刘逸群 +1 位作者 韩莹 曹丽艳 《影像科学与光化学》 2025年第5期117-123,共7页
目的:探讨超声造影定量技术联合miR-374a-5p预测宫颈癌术后下肢深静脉血栓(LEDVT)效能。方法:选取2022年2月至2024年2月秦皇岛市第一医院收治的189例宫颈癌患者,均行宫颈癌根治术,根据术后2周内是否出现LEDVT分为LEDVT组(n=35)和N-LEDVT... 目的:探讨超声造影定量技术联合miR-374a-5p预测宫颈癌术后下肢深静脉血栓(LEDVT)效能。方法:选取2022年2月至2024年2月秦皇岛市第一医院收治的189例宫颈癌患者,均行宫颈癌根治术,根据术后2周内是否出现LEDVT分为LEDVT组(n=35)和N-LEDVT组(n=154)。统计两组一般资料、超声造影定量参数(dValue、TTP、K)、miR-374a-5p表达,Pearson分析超声造影定量参数与miR-374a-5p相关性,偏相关性分析超声造影定量参数、miR-374a-5p与LEDVT相关性,并通过受试者操作特征(ROC)曲线、净重分类改善指数(NRI)和综合判别改善指数(IDI)评估预测效能。结果:与N-LEDVT组相比,LEDVT组患者的活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、miR-374a-5p表达水平及超声造影定量参数均显著升高(P<0.05);宫颈癌术后LEDVT患者dValue、TTP、K与miR-374a-5p呈正相关(P<0.05);miR-374a-5p、dValue、TTP、K与宫颈癌术后LEDVT发生呈正相关(P<0.05);联合miR-374a-5p与超声造影定量参数(dValue、TTP、K)的预测效能与凝血四项(APTT、PT、FIB、TT)相近,且优于单一指标的预测效能。结论:宫颈癌术后LEDVT患者miR-374a-5p表达升高,超声造影定量参数dValue、TTP、K也呈现高值,四者间呈显著正相关,联合检测有助于提高LEDVT预测效能,协助临床诊治。 展开更多
关键词 宫颈癌 下肢深静脉血栓 超声造影定量技术 miR-374a-5p
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LINC00319通过靶向miR-199a-5p促进瘢痕疙瘩发生发展
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作者 陆海涛 赵运华 +2 位作者 师绍敏 冀雅聪 刘亚玲 《河北医科大学学报》 2025年第7期826-832,共7页
目的探讨长链非编码RNA LINC00319在瘢痕疙瘩发生发展中的作用及其潜在分子机制。方法纳入2024年2月—2025年2月承德医学院附属医院收治的经临床明确诊断的瘢痕疙瘩患者18例,分别采集瘢痕疙瘩组织及相邻正常皮肤组织,分离原代成纤维细胞... 目的探讨长链非编码RNA LINC00319在瘢痕疙瘩发生发展中的作用及其潜在分子机制。方法纳入2024年2月—2025年2月承德医学院附属医院收治的经临床明确诊断的瘢痕疙瘩患者18例,分别采集瘢痕疙瘩组织及相邻正常皮肤组织,分离原代成纤维细胞,获得瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts,KFs)与正常皮肤成纤维细胞(normal dermal fibroblasts,NFs)。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测组织和细胞中LINC00319与miR-199a-5p的相对表达水平。通过小干扰RNA技术沉默KFs中LINC00319的表达,并通过qRT-PCR验证沉默效率。应用CCK-8实验评估LINC00319沉默对KFs增殖能力的影响,流式细胞术测定细胞凋亡情况。通过双荧光素酶报告基因检测明确LINC00319与miR-199a-5p之间的靶向结合关系,进一步通过qRT-PCR检测LINC00319敲降对miR-199a-5p表达的调控作用。将si-LINC00319与miR-199a-5p inhibitor联合转染KFs,以评估其对细胞增殖能力的影响。结果与正常皮肤组织(0.76±0.31)及NFs(0.84±0.14)比较,LINC00319在瘢痕疙瘩组织(6.29±4.07)及KFs(4.90±0.37)中表达水平显著升高(P<0.001)。LINC00319表达水平与温哥华瘢痕评定量表评分呈正相关(r=0.794,P<0.001)。敲降LINC00319后,KFs在24 h、48 h、72 h的光密度值(0.34±0.01、0.50±0.01、0.59±0.01)显著低于对照组(0.49±0.01、0.68±0.01、0.80±0.01),组间、时点间、组间·时点间交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。si-LINC00319组的凋亡率(30.58±2.48)%显著高于对照组(9.69±1.22)%(P<0.001)。双荧光素酶报告实验结果表明,LINC00319可与miR-199a-5p直接结合。在KFs中,miR-199a-5p的表达水平(0.68±0.02)显著低于对照组(1.09±0.07)(P<0.001),而沉默LINC00319后,其表达水平(1.81±0.05)显著高于对照组(0.94±0.06,P<0.001)。功能回复实验显示,si-LINC00319处理显著抑制KFs的增殖能力,然而在同时转染miR-199a-5pinhibitor的条件下,KFs于24 h、48 h、72 h的光密度值(0.43±0.01、0.68±0.02、0.79±0.02)较si-LINC00319组(0.34±0.01、0.49±0.01、0.59±0.01)显著升高,组间、时点间、组间·时点间交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。结论LINC00319通过负向调控miR-199a-5p的表达,促进瘢痕疙瘩的发生与发展。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 LINC00319 miR-199a-5p
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外泌体负载的miR-520a-5p对胎鼠宫内生长受限妊娠结局的改善作用及其机制
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作者 相萌 徐冰 +2 位作者 王培莎 刘思旗 张少华 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期1230-1239,共10页
目的:探讨外泌体(Exos)负载的微小RNA-520a-5p(miR-520a-5p)对胎鼠宫内生长受限(FGR)妊娠结局的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养小鼠胎盘间充质干细胞(MSCs),并利用miR-520a-5p腺病毒载体(Ad-miR-520a-5p)转染获得高负载miR-520a... 目的:探讨外泌体(Exos)负载的微小RNA-520a-5p(miR-520a-5p)对胎鼠宫内生长受限(FGR)妊娠结局的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养小鼠胎盘间充质干细胞(MSCs),并利用miR-520a-5p腺病毒载体(Ad-miR-520a-5p)转染获得高负载miR-520a-5p的Exos(miR-520a-5p-MSCs-Exos)并进行鉴定。C57BL/6小鼠按照雌雄2∶1的比例合笼交配成功妊娠,将40只怀孕小鼠分为对照组、FGR组、NC-MSCs-Exos组和miR-520a-5p-MSCs-Exos组,每组10只。除对照组外,其余组小鼠采用孕期过度暴露地塞米松(DEX)诱发妊娠期母体小鼠的FGR模型。检测胎鼠出生体质量和生后1、2、3及4周体质量,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p、DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠胎盘组织中DNMT3b和VEGF蛋白表达水平,甲基化特异性PCR(MSP)分析各组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率,双荧光素酶报告基因实验验证miR-520a-5p与DNMT3b之间的靶向关系。结果:透射电子显微镜(TEM)和纳米粒子追踪分析(NTA)分析,Exos呈球形,粒径集中在100 nm附近;Western blotting法,Exos表面生物标志物CD63和CD81均呈阳性表达;RT-qPCR法,与NC-MSCs-Exos和Ad-NC-MSCs-Exos比较,Ad-miR-520a-5p-MSCs-Exos中miR-520a-5p表达水平升高(P<0.001)。4组子代小鼠出生体质量和生后1、2及3周体质量比较差异均有统计学意义(F=36.084,F=19.851,F=77.755,F=103.223;P<0.001)。与对照组比较,FGR组子代小鼠出生体质量和生后1、2及3周体质量均降低(P<0.05);与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较,miR-520a-5p-MSCs-Exos组子代小鼠出生体质量和生后1、2及3周体质量均升高(P<0.05)。单因素方差分析,4组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p、DNMT3b和VEGF mRNA表达水平比较差异有统计学意义(F=103.224,F=856.460,F=214.563;P<0.001);组间两两比较,与对照组比较,FGR组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p和VEGF mRNA表达水平降低(P<0.05),DNMT3b mRNA表达水平升高(P<0.05);与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较,miR-520a-5p-MSCs-Exos组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p和VEGF mRNA表达水平升高(P<0.05),DNMT3b mRNA表达水平降低(P<0.05)。单因素方差分析,4组小鼠胎盘组织中DNMT3b和VEGF蛋白表达水平比较差异有统计学意义(F=245.601,F=149.360;P<0.001);组间两两比较,与对照组比较,FGR组小鼠胎盘组织中DNMT3b蛋白水平升高(P<0.05),VEGF蛋白表达水平降低(P<0.05);与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较,miR-520a-5p-MSCs-Exos组小鼠胎盘组织中DNMT3b蛋白表达水平降低(P<0.05),VEGF蛋白表达水平升高(P<0.05)。单因素方差分析,4组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率比较差异有统计学意义(F=687.096,P<0.001);组间两两比较,与对照组比较,FGR组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率升高(P<0.05);与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较,miR-520a-5p-MSCs-Exos组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验,与miR-NC组比较,miR-520a-5p组DNMT3b-WT报告载体细胞的荧光素酶活性明显降低(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-520a-5p组DNMT3b-MUT报告载体细胞的荧光素酶活性无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高负载miR-520a-5p的MSCs来源的Exos可能通过靶向下调DNMT3b表达,抑制VEGF甲基化,促进VEGF表达,改善FGR胎鼠妊娠结局。 展开更多
关键词 胎儿宫内生长受限 外泌体 间充质干细胞 微小RNa-520a-5p DNA甲基转移酶3B 血管内皮生长因子
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LncRNA NORAD靶向调控miR-20a-5p对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞凋亡的影响
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作者 孙红梅 程欢欢 +1 位作者 孔祥龙 薛建昌 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第5期549-556,共8页
目的 探讨长链非编码RNA DNA损伤激活的非编码RNA(LncRNA NORAD)靶向调控微小RNA-20a-5p(miR-20a-5p)对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞凋亡的影响。方法 选取河北省胸科医院2022年3月至2023年4月的活动性肺结核患者、结核分枝杆菌感染无症... 目的 探讨长链非编码RNA DNA损伤激活的非编码RNA(LncRNA NORAD)靶向调控微小RNA-20a-5p(miR-20a-5p)对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞凋亡的影响。方法 选取河北省胸科医院2022年3月至2023年4月的活动性肺结核患者、结核分枝杆菌感染无症状患者、健康体检者各50例。分别采集各组研究对象空腹状态下的静脉血,离心后检测血清中LncRNA NORAD和miR-20a-5p表达水平以及炎性因子水平。将人单核细胞系THP-1诱导分化为巨噬细胞并将其分为对照组(Control组)、模型组(Model组)、转染NORAD空载体组(sh-NC组)、转染sh-NORAD载体组(sh-NORAD组)、共转染sh-NORAD和miR-20a-5p抑制剂空载体组(sh-NORAD+miR-20a-5p inhibitor NC组)、共转染sh-NORAD和miR-20a-5p抑制剂载体组(sh-NORAD+miR-20a-5p inhibitor组)、转染miR-20a-5p空载体组(miR-NC组)、转染miR-20a-5p载体组(miR-20a-5p mimics组)。检测各组细胞LncRNA NORAD和miR-20a-5p表达水平(qRT-PCR法)、细胞增殖能力(CCK-8试剂盒法)、细胞凋亡情况(流式细胞术法)、细胞炎性因子水平(ELISA法)和细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl 2)和活化的半胱天冬蛋白酶-3(cleaved caspase 3)蛋白表达量,验证LncRNA NORAD与miR-20a-5p之间的靶向关系。结果 与健康体检者比较,活动性肺结核患者和结核分枝杆菌感染无症状患者血清中炎性因子水平和LncRNA NORAD表达水平显著升高、miR-20a-5p水平显著降低。与Control组比较,Model组细胞LncRNA NORAD、细胞增殖能力、Bcl 2蛋白表达水平以及炎性因子水平显著升高,miR-20a-5p水平、细胞凋亡率以及Bax和cleaved caspase 3蛋白表达量显著下降(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-NORAD组细胞LncRNA NORAD表达水平、Bcl 2蛋白表达水平、炎性因子水平以及细胞增殖能力明显降低,miR-20a-5p水平、细胞凋亡率以及Bax和cleaved caspase 3蛋白表达量显著升高(P<0.05);与sh-NORAD+miR-20a-5p inhibitor NC组比较,sh-NORAD+miR-20a-5p inhibitor组细胞炎性因子水平、Bcl 2蛋白表达水平以及细胞增殖能力显著升高,miR-20a-5p水平、细胞凋亡率以及Bax和cleaved caspase 3蛋白表达量显著下降(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-20a-5p mimics组细胞炎性因子水平、增殖能力明显升高,细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。进一步通过实验证实LncRNA NORAD与miR-20a-5p之间的靶向关系。结论 在结核分枝杆菌诱导的巨噬细胞中LncRNA NORAD过表达,沉默LncRNA NORAD的表达可靶向下调miR-20a-5p的表达,从而抑制结核分枝杆菌诱导的巨噬细胞的炎性反应,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 长链非编码RNA DNA损伤激活的非编码RNA 微小RNa-20a-5p 结核分枝杆菌 巨噬细胞 炎症 凋亡
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miR-203a-5p靶向FABP4对慢性髓系白血病K562细胞增殖、凋亡与细胞周期的影响
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作者 齐姗姗 武纪生 +5 位作者 霍志刚 魏玉芳 王旭旭 贾震宇 杨林杰 毕俊芳 《中国细胞生物学学报》 2025年第4期812-821,共10页
该研究探讨miR-203a-5p靶向FABP4对慢性髓系白血病K562细胞增殖、凋亡与细胞周期的影响。将K562细胞分为control组、miR-NC组、miR-203a-5p mimic组、miR-203a-5p mimic+pc-NC组、miR-203a-5p mimic+pc-FABP4组。qRT-PCR检测细胞中miR-2... 该研究探讨miR-203a-5p靶向FABP4对慢性髓系白血病K562细胞增殖、凋亡与细胞周期的影响。将K562细胞分为control组、miR-NC组、miR-203a-5p mimic组、miR-203a-5p mimic+pc-NC组、miR-203a-5p mimic+pc-FABP4组。qRT-PCR检测细胞中miR-203a-5p、FABP4mRNA表达水平;MTT法和Edu染色检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、PCNA、FABP4蛋白表达水平;荧光素酶活性实验验证miR-203a-5p和FABP4的关系;裸鼠移植瘤实验检测上调miR-203a-5p表达对肿瘤生长的影响。与control组和miR-NC组比较,miR-203a-5p mimic组K562细胞miR-203a-5p表达水平、细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞比例、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,FABP4 mRNA表达水平,D_(490)值(24、48 h),细胞增殖率,S期和G_(2)/M期细胞比例,Bcl-2、PCNA和FABP4蛋白表达水平降低(P<0.05);与miR-203a-5p mimic+pc-NC组比较,miR-203a-5p mimic+pc-FABP4组K562细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞比例、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,FABP4 mRNA表达水平,D_(490)值(24、48 h),细胞增殖率,S期和G_(2)/M期细胞比例,Bcl-2、PCNA和FABP4蛋白表达水平升高(P<0.05);miR-203a-5p和FABP4存在靶向关系;上调miR-203a-5p表达可抑制裸鼠肿瘤生长,降低FABP4和PCNA表达水平(P<0.05)。该研究得出上调miR-203a-5p表达可抑制FABP4表达,进而抑制K562细胞增殖,阻滞细胞周期,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-203a-5p FABP4 慢性髓系白血病 K562细胞 增殖 凋亡 细胞周期
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Rg1通过调控miR-34a-5p/DDX17轴改善非酒精性脂肪性肝病分子机制的研究
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作者 姜华 陈徐佳 +7 位作者 高建鹏 易春艳 张志波 杨明慧 丁蕊 钱丽柏 胡阳 王辉 《胃肠病学和肝病学杂志》 2025年第7期1023-1031,共9页
目的研究人参皂苷Rg1对TGF-β1诱导的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs-T6)活力、增殖能力、炎性因子含量和纤维化水平的改善作用及其分子机制。方法使用TGF-β1诱导HSCs-T6细胞构建肝纤维化细胞模型后,用不同浓度Rg1处理细胞,通... 目的研究人参皂苷Rg1对TGF-β1诱导的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs-T6)活力、增殖能力、炎性因子含量和纤维化水平的改善作用及其分子机制。方法使用TGF-β1诱导HSCs-T6细胞构建肝纤维化细胞模型后,用不同浓度Rg1处理细胞,通过CCK-8检测筛选出最佳作用浓度和时间。采用质粒转染用来干预HSCs-T6细胞中DDX17、miR-34a-5p的表达水平,分别用CCK-8和EdU试剂盒检测HSCs-T6细胞活力和增殖能力,ELISA检测炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-10)的含量,qRT-PCR实验检测纤维化相关蛋白(α-SMA、COL1、TIMP-1)基因的mRNA表达水平,Western blotting检测纤维化相关蛋白(α-SMA、COL1、TIMP-1)的表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验和RIP实验验证miR-34a-5p和DDX17的靶向结合关系。结果Rg1(2.5μg/mL)处理HSCs-T6细胞24 h显著降低TNF-α和IL-6的水平,增加了抗炎的IL-10的水平,显著降低α-SMA、COL1、TIMP-1基因的mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。与TGF-β组相比,过表达DDX17能够改善TGF-β1诱导的HSCs-T6细胞活力、增殖能力、炎症因子和α-SMA、COL1、TIMP-1基因mRNA和蛋白的表达(P<0.05),而沉默DDX17则产生相反作用(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-34a-5p mimic降低DDX17-WT的荧光素酶活性(P<0.05)。与TGF-β1组相比,过表达miR-34a-5p促进HSCs-T6细胞活力、增殖能力、促炎因子、纤维化相关基因mRNA和蛋白的表达;干扰miR-34a-5p则产生相反作用。在回复实验中,与TGF-β1/Rg1相比,过表达miR-34a-5p可显著降低HSCs-T6细胞活力和增殖能力、促炎因子、α-SMA、COL1、TIMP-1基因mRNA和蛋白的表达,而同时过表达miR-34a-5p和DDX17则逆转了miR-34a-5p的上述作用。结论人参皂苷Rg1通过调节miR-34a-5p/DDX17轴改善非酒精性脂肪性肝病的肝纤维化。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 人参皂苷RG1 miR-34a-5p DDX17 肝纤维化
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miR-371a-5p靶向调控LZTS2促进三阴性乳腺癌细胞的增殖迁移侵袭和上皮间充质转化
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作者 张洁 耿翠芝 +2 位作者 韩朋 李蔚 王艳玲 《河北医学》 2025年第10期1600-1606,共7页
目的:探讨miR-371a-5p和亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2(LZTS2)在三阴性乳腺癌(TNBC)中的关联和功能作用。方法:收集2021年10月至2023年10月在本院接受根治性手术的60名患者的TNBC组织和邻近的非肿瘤组织。qRT-PCR分析TNBC组织和细胞中LZTS2 m... 目的:探讨miR-371a-5p和亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2(LZTS2)在三阴性乳腺癌(TNBC)中的关联和功能作用。方法:收集2021年10月至2023年10月在本院接受根治性手术的60名患者的TNBC组织和邻近的非肿瘤组织。qRT-PCR分析TNBC组织和细胞中LZTS2 mRNA相对表达水平。CCK-8、划痕愈合实验和Transwell评估细胞增殖、迁移和侵袭。蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中LZTS2及上皮间充质转化(EMT)相关蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验用于确认TNBC细胞中miR-371a-5p和LZTS2之间的关系。异种移植肿瘤实验用于检测体内miR-371a-5p对LZTS2表达和肿瘤生长的影响。结果:LZTS2 mRNA在TNBC组织和细胞中表达下降(t=98.590,F=178.41,P<0.05);LZTS2过表达可抑制TNBC细胞侵袭、迁移、增殖和EMT(P<0.05);LZTS2是miR-371a-5p的靶基因(t=26.778,P<0.05);此外,过表达LZTS2削弱了过表达miR-371a-5p对TNBC细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的促进作用(P<0.05)。体内实验证实,miR-371a-5p调控LZTS2 mRNA抑制肿瘤生长(P<0.05)。结论:miR-371a-5p可能通过靶向调控LZTS2加速TNBC细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,为TNBC提供了新的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2 miR-371a-5p 上皮间充质转化
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LncRNA DLEU2调节miR-30a-5p/SOX4信号通路对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 齐丽宁 王琪 +4 位作者 朱继红 耿艳红 葛新苗 魏旭静 刘彩辉 《中国细胞生物学学报》 2025年第1期28-37,共10页
该研究旨在探讨LncRNA DLEU2调节miR-30a-5p/SOX4信号通路对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响。对卵巢癌细胞(SK-OV-3、OVCAR-8、A2780、OV90)进行表型筛选,选择SK-OV-3并将其分为control组、si-NC组、si-DLEU2组、mimic NC组、miR-30a-5... 该研究旨在探讨LncRNA DLEU2调节miR-30a-5p/SOX4信号通路对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响。对卵巢癌细胞(SK-OV-3、OVCAR-8、A2780、OV90)进行表型筛选,选择SK-OV-3并将其分为control组、si-NC组、si-DLEU2组、mimic NC组、miR-30a-5p mimic组、si-DLEU2+inhibitorNC组、si-DLEU2+miR-30a-5pinhibitor组。qRT-PCR检测LncRNADLEU2、miR-30a-5p、SOX4mRNA表达水平;CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移情况;Transwell检测细胞侵袭情况;Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况;Westernblot法检测SOX4蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA DLEU2与miR-30a-5p、miR-30a-5p与SOX4的相互作用。结果显示,SK-OV-3与人正常卵巢细胞相比,miR-30a-5p表达水平降低,LncRNA DLEU2、SOX4 mRNA表达水平升高(P<0.05);与control组以及si-NC组比较,si-DLEU2组LncRNA DLEU2表达水平、SOX4表达水平及细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,miR-30a-5p表达水平和细胞凋亡率升高(P<0.05)。转染miR-30a-5p mimic对SK-OV-3细胞的影响与转染si-DLEU2相同;与si-DLEU2+inhibitor NC组比较,si-DLEU2+miR-30a-5p inhibitor组细胞SOX4表达水平升高,增殖、迁移和侵袭能力提高,miR-30a-5p水平、细胞凋亡率降低(P<0.05);双荧光素酶活性检测表明,LncRNA DLEU2与miR-30a-5p之间、miR-30a-5p与SOX4之间存在靶向关系。总结得出,干扰LncRNA DLEU2可能通过上调miR-30a-5p表达,抑制SOX4表达,抑制卵巢癌细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 LncRNA DLEU2 miR-30a-5p SOX4 卵巢癌细胞 恶性生物学行为
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miR-145a-5p调控慢性间歇性低氧诱导脂肪细胞炎症和凋亡的机制
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作者 徐漫欢 任锡凯 +3 位作者 周娈 赵伊敏 余珏珂 苏苗赏 《温州医科大学学报》 2025年第3期173-178,共6页
目的:探究miR-145a-5p基因表达对慢性间歇性低氧(CIH)诱导脂肪细胞炎症和凋亡的影响及分子调控机制,并探索其可能的靶向结合基因通路。方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,经7 d诱导分化后分为对照组和CIH组,并予相应处理。油红O染色观察细... 目的:探究miR-145a-5p基因表达对慢性间歇性低氧(CIH)诱导脂肪细胞炎症和凋亡的影响及分子调控机制,并探索其可能的靶向结合基因通路。方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,经7 d诱导分化后分为对照组和CIH组,并予相应处理。油红O染色观察细胞形态与脂滴情况;q-PCR法检测miR-145a-5p基因表达;构建miR-145a-5p-mimic转染细胞后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β和IL-10水平;Western blot法检测p-AMPK、成纤维细胞生长因子4(FGF4)及凋亡相关蛋白表达情况。双荧光素酶实验检测miR-145a-5p与FGF4的靶向关系。结果:与对照组相比,CIH组细胞的miR-145a-5p基因表达下降(P<0.05),IL-1β和IL-10水平上升(P<0.05),p-AMPK、FGF4、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);转染后,转染组与CIH组相比,细胞凋亡率升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达、Bax/Bcl-2比值及FGF4蛋白表达升高(P<0.05),IL-1β水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告FGF4-WT+miR-145a-5p与FGF4-WT相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-145a-5p在脂肪细胞的表达受CIH影响,且对脂肪细胞炎症及凋亡有调节作用,该作用可能通过与FGF4靶向结合而实现。 展开更多
关键词 慢性间歇性低氧 脂肪细胞 炎症反应 凋亡 miR-145a-5p
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血清lncRNASNHG7与miR-34a-5p水平表达在血流感染诊断及预后评估中的价值
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作者 龚晓波 彭翠翠 +2 位作者 莫滨榕 林勇清 于晓钧 《现代检验医学杂志》 2025年第5期67-72,共6页
目的探究血清长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7(lncRNA SNHG7)与微小RNA(miR)-34a-5p表达在血流感染(BSI)诊断及预后评估中的价值。方法选取广西梧州市红十字会医院2022年3月~2023年3月急诊科收治的193例疑似BSI患者为研究对象,经诊断后... 目的探究血清长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7(lncRNA SNHG7)与微小RNA(miR)-34a-5p表达在血流感染(BSI)诊断及预后评估中的价值。方法选取广西梧州市红十字会医院2022年3月~2023年3月急诊科收治的193例疑似BSI患者为研究对象,经诊断后将BSI患者作为感染组(n=100),非BSI患者作为非感染组(n=93);BSI患者治疗28天后根据预后情况,分为死亡组(n=32)和生存组(n=68)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p表达水平;Target Scan Human网站预测miR-34a-5p与lncRNA SNHG7的靶向关系。Pearson法分析血清lncRNA SNHG7水平与miR-34a-5p水平的相关性;多因素Logistic回归分析BSI患者预后的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p对预后的评估价值。结果感染组血清lncRNA SNHG7(1.47±0.35)水平显著高于非感染组(1.03±0.15),miR-34a-5p水平(0.85±0.21)显著低于非感染组(1.02±0.13),差异具有统计学意义(t=11.203,6.703,均P<0.05)。与生存组比较,死亡组血清lncRNASNHG(1.68±0.21 vs 1.37±0.19)、C反应蛋白(CRP)(85.74±9.16mg/Lvs 63.18±7.68mg/L)、降钙素原(PCT)水平(56.37±8.72ng/ml vs 34.69±5.54ng/ml)、白蛋白(92.51±10.18g/L vs 65.27±7.24g/L)、急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分(28.15±5.12分vs 16.35±4.31分)升高,血清miR-34a-5p水平(0.67±0.14 vs 0.93±0.16)降低,差异具有统计学意义(t=7.357~15.340,均P<0.05)。lncRNA SNHG7与miR-34a-5p有靶向结合位点,且lncRNA SNHG7与miR-34a-5p呈负相关(r=-0.568,P<0.05)。血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p为BSI患者预后的影响因素(均P<0.05)。血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p二者联合评估BSI患者预后的曲线下面积(AUC)优于血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p各自单独检测(Z=2.001,2.304,均P<0.05),其灵敏度和特异度分别为78.12%,97.06%。结论BSI患者血清lncRNA SNHG7水平明显升高,而血清miR-34a-5p水平明显降低,二者与BSI患者预后密切相关,且二者联合对BSI患者预后有较好的评估价值。 展开更多
关键词 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7 微小RNa-34a-5p 血流感染
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